黃布敏，胡遠(yuǎn)洲，楊 琳，左康揚，史開志

(1.貴州省開陽縣動物疫病預(yù)防控制中心，開陽 550300;2貴州省畜牧獸醫(yī)研究所，貴陽 550005)

規(guī)模羊場小反芻獸疫弱毒活疫苗免疫效果的監(jiān)測評估

黃布敏1，胡遠(yuǎn)洲1，楊 琳1，左康揚1，史開志2

(1.貴州省開陽縣動物疫病預(yù)防控制中心，開陽 550300;2貴州省畜牧獸醫(yī)研究所，貴陽 550005)

為評估規(guī)模化羊場小反芻獸疫弱毒活疫苗免疫效果，對開陽縣2個綿羊養(yǎng)殖場、1個山羊養(yǎng)殖場的羊群進(jìn)行小反芻獸疫活疫苗免疫接種，采用C－ELISA方法對3個免疫羊群免疫抗體消減進(jìn)行監(jiān)測。結(jié)果顯示，免疫后羊群無不良反應(yīng)和異常情況發(fā)生，1次免疫后30 d，3個養(yǎng)殖場免疫抗體平均陽性率為95.11%，免疫120 d后抗體陽性率為98.22%，免疫270 d后抗體陽性率為99.56%。結(jié)果表明，小反芻獸疫活疫苗免疫安全，且能誘導(dǎo)較強(qiáng)的體液免疫應(yīng)答，免疫抗體持續(xù)時間長;弱毒活疫苗免疫是預(yù)防小反芻獸疫的一種可行方法。

小反芻獸疫;規(guī)?；驁?弱毒活疫苗;免疫評估

小反芻獸疫(peste des petits ruminants，PPR)是由小反芻獸疫病毒(peste des petits ruminants virus，PPRV)引起的一種急性、烈性、接觸性傳染病，臨床上主要發(fā)生于綿羊、山羊、美國白尾鹿等小反芻動物，牛一般呈亞臨床感染不產(chǎn)生臨床癥狀，豬可被實驗感染，未發(fā)現(xiàn)人被感染的病例。病羊以體溫升高，眼鼻出現(xiàn)分泌物，口炎，肺炎和腹瀉為主要特征，急性感染病例體溫可升至41℃以上并持續(xù)3～5天，鼻腔常流膿性黏液，呼出惡臭氣體。世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為A類動物疫病，我國亦將其列為一類動物疫?。?］。

PPRV可通過直接、間接接觸或氣溶膠傳播，傳染源主要為患病動物和隱性感染動物，感染畜的分泌物和排泄物均含有病毒［2］。為降低PPR對養(yǎng)羊業(yè)的威脅，提高羊群抵御疫病風(fēng)險的能力，我們對開陽縣3個規(guī)?；驁鲞M(jìn)行PPR弱毒活疫苗免疫接種試驗，以了解該疫苗的安全性，同時從體液免疫角度評估其有效性，為PPR 的疫苗免疫防控提供參考和借鑒。

1 材料與方法

1.1 材料 小反芻獸疫弱毒活疫苗由新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn);小反芻獸疫ELISA抗體檢測試劑盒由法國ID－VET公司(ID ScreenPPR Competition)生產(chǎn);450只試驗羊由開陽縣3個規(guī)模化非免疫羊場提供，其中綿羊場2個、山羊場1個。見表1。

表1 試驗羊情況

1.2 方法

1.2.1 非免疫羊群感染情況檢測:為排除野毒感染情況，通過ELISA方法對450只試驗羊進(jìn)行野毒感染抗體檢測，判斷羊群是否感染PPR，排除可能的野毒感染對試驗的影響，所有羊抗體檢測陰性后，開始疫苗接種試驗。

1.2.2 免疫后羊群反應(yīng)觀察及安全性評估:分別對450只試驗羊進(jìn)行耳號標(biāo)記和準(zhǔn)確記錄，按照疫苗說明書要求對試驗羊進(jìn)行疫苗接種，疫苗接種后7 d，密切觀察試驗羊食欲、飲水、精神狀態(tài)、發(fā)病情況、體溫變化等指標(biāo)，評估疫苗接種的安全性。

1.2.3 免疫抗體消減監(jiān)測與基于體液免疫的免疫效果評估:疫苗免疫后30、120、270 d分別采集試驗羊血清，通過ELISA方法檢測疫苗免疫抗體，試驗操作按ID ScreenPPR Competition小反芻獸疫ELISA抗體檢測試劑盒使用說明書進(jìn)行。同時對該期間羊群的發(fā)病情況進(jìn)行跟蹤，調(diào)查小反芻獸疫的發(fā)生情況。

2 結(jié)果

2.1 試驗羊野毒感染檢測結(jié)果 通過ELISA方法，對試驗羊野毒感染情況進(jìn)行檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，450只試驗羊樣本檢測結(jié)果均為陰性，羊群未感染PPR，符合試驗要求。

2.2 免疫后羊群反應(yīng)觀察及安全性評估 對開陽縣的3個規(guī)模養(yǎng)羊場的羊群進(jìn)行小反芻獸疫疫苗接種免疫后，經(jīng)7 d密切觀察，所有免疫羊群無不良反應(yīng)和任何異常情況發(fā)生，此結(jié)果說明，該疫苗使用臨床安全。

2.3 免疫抗體消減監(jiān)測與基于體液免疫的免疫效果評估 在免疫后30、120、270 d分別采集血清樣品通過ELISA方法對試驗羊小反芻獸疫抗體進(jìn)行檢測，結(jié)果見表2。

表2 試驗羊免疫抗體水平監(jiān)測情況

從表2可見，疫苗免疫后30 d，3群試驗羊PPR免疫抗體平均陽性率達(dá)95.11%，其中2號湖羊場陽性率最高達(dá)到96%，黑山羊場最低為93%;此后120 d，3群試驗羊抗體陽性率均呈上升趨勢;直至免疫后270 d，2、3號羊場試驗羊抗體陽性率上升至100%，但1號羊場抗體陽性率下降至97.5%?？傮w來看，試驗羊群PPR抗體陽性率均處于較高水平。

整個試驗過程中，450只試驗羊均正常生長發(fā)育，未出現(xiàn)死亡，也未發(fā)生過疑似PPR病例，進(jìn)一步說明弱毒活疫苗免疫是安全的。

3 討論

3.1 對貴州省養(yǎng)羊業(yè)而言，PPR是一種新出現(xiàn)的疫病，在防疫上還缺少有效的應(yīng)對策略以供參考。通過本設(shè)計試驗，對疫苗免疫防控進(jìn)行綜合評估，結(jié)果發(fā)現(xiàn)弱毒活疫苗可誘導(dǎo)較強(qiáng)的體液免疫應(yīng)答，使用過程中試驗羊臨床健康，不論是綿羊還是山羊，均得到相似的試驗結(jié)果。

3.2 免疫抗體誘導(dǎo)是疫苗免疫效果評估的重要指標(biāo)。Vinayagamurthy Balamurugan等［3］在不同間隔時間對免疫小反芻獸疫疫苗的山羊進(jìn)行抗體滴度檢測，結(jié)果表明在接種疫苗后21天，抗體檢出率達(dá)到高峰且能穩(wěn)定持續(xù)至免疫后310 d以上，這與我們的研究結(jié)果相類似。另有報道顯示，PPR弱毒活疫苗免疫26個月后，抗體檢出率仍能保持在85%以上，表現(xiàn)為持久的保護(hù)性［4］。李彥芳等［5］對哈密市部分地區(qū)小反芻獸疫免疫抗體進(jìn)行監(jiān)測，結(jié)果顯示平均免疫合格率為83.98%，最高為93.13%，最低為67.14%。楊仕標(biāo)等［6］對西藏部分免疫區(qū)小反芻獸疫免疫抗體進(jìn)行監(jiān)測，結(jié)果顯示免疫區(qū)陽性率最高為54.70%，相對偏低。宋紅蓮等［7］對易門縣免疫PPR疫苗后抽檢60份樣品進(jìn)行免疫效果監(jiān)測，免疫抗體合格率為98.33%。從這些監(jiān)測結(jié)果結(jié)合本試驗，可說明PPR活疫苗不僅免疫誘導(dǎo)能力強(qiáng)，而且免疫持續(xù)期長，對PPR的控制是一種較為可行的選擇。

參考文獻(xiàn):

［1］信愛國，楊仕標(biāo)，向文彬.小反芻獸疫研究進(jìn)展［J］.中國預(yù)防獸醫(yī)報，2003，(25):152～155.

［2］Abubakar M，Arshed M J，Zahur A B，et al.Natural infection withpeste des petits ruminants virus:a pre and post vaccinal assessment following an outbreak scenario［J］.Virus Res，2012，167:43～47.

［3］Vinayagamurthy Balamurugan，Arnab Sen，Gnanavel Venkatesan，et al.Study on Passive Immunity:time of Vaccination in Kids Born to Goats Vaccinated Against Peste des petits ruminants［J］.VIROLOGICA SINICA，2012，27(4):228～233.

［4］薛青紅，印春生，李寧，等.小反芻獸疫活疫苗效力評價［J］.中國獸醫(yī)學(xué)報，2011，(9):1 276～1 278.

［5］李彥芳，玉蘇甫，溫倩木，等.小反芻獸疫疫苗免疫效果評價［J］.中國畜牧業(yè)，2014，(12):62～63.

［6］楊仕標(biāo)，趙文華，王金萍，等.免疫區(qū)小反芻獸疫免疫抗體監(jiān)測與分析［J］.中國動物保健，2010，(10):8～10.

［7］宋紅蓮，徐陽，孔紹國，等.易門縣小反芻獸疫免疫效果的調(diào)查［J］.中國畜牧獸醫(yī)文摘，2015，31(5):118～119.

Monitoring and Evaluation of the PPR Immune Effect with Attenuated Vaccine on Large－scale Breeding Farm

Huang Bumin1，Hu Yuanzhou1，Yang Lin1，Zuo Kangyang1，Shi Kaizhi2
(1.Kaiyang Animal Disease Prevention and Control Center，Kaiyang Guizhou 550300，China;2.Guizhou Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine，Guiyang Guizhou 550005，China)

In order to evaluate the attenuated vaccine immune effect of Peste des Petits Ruminants(PPR)，the immune antibody of one goat farm and 2 sheep farms in Kaiyang conty were detected by competitive ELISA.The results showed that all sheep and goats had no any adverse effects and exceptional conditions after immune，the PPRV average antibody positive rate in 3 farms reached 95.11%through one time immune，98.22%and 99.56%after 120 d and 270 d vaccination.All results indicated the attenuated vaccine is safe，which can induce strong immune response and have a long immune protection time，use this immune to prevent PPR is feasibel.

Peste des Petits Ruminants(PPR);Large－scale Goat/sheep Breeding Farm;Attenuated Vaccine Immune Evaluation

S858.26

A

1007－1474(2016)01－0008－03

2015－10－12

貴州省科技廳科技特派員計劃項目(黔科合體特派C［2012］4030號)

黃布敏(1985—)，女，碩士，助理獸醫(yī)師，主要從事動物疫病診斷與防控。