李清紅，楊軍蘭，何阿玲，郭金珍，李占魁

(西北婦女兒童醫(yī)院新生兒科，陜西 西安 710061)

?

新生兒敗血癥早產(chǎn)兒與足月兒的病原學(xué)特點分析

李清紅，楊軍蘭，何阿玲，郭金珍，李占魁

(西北婦女兒童醫(yī)院新生兒科，陜西 西安 710061)

[摘要]目的探討新生兒敗血癥早產(chǎn)兒與足月兒的病原菌構(gòu)成及耐藥性狀況，為臨床合理用藥提供依據(jù)。方法回顧性分析西北婦女兒童醫(yī)院2012年1月1日至2014年12月31日經(jīng)臨床和血培養(yǎng)確診的97例早產(chǎn)兒與43例足月兒敗血癥的病原學(xué)資料，并對其進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果革蘭氏陽性球菌在足月兒組中檢出比例高于早產(chǎn)兒組(χ2=15.36，P<0.01)，真菌僅在早產(chǎn)兒組中檢出(χ2=8.57，P<0.01)。葡萄球菌和腸桿菌對常用抗菌藥物耐藥嚴(yán)重，且呈多藥耐藥。萬古霉素、利奈唑胺、亞胺培南未發(fā)現(xiàn)耐藥株。結(jié)論早產(chǎn)兒與足月兒敗血癥在病原菌方面存在一定差異，早產(chǎn)兒易發(fā)生真菌性感染。檢出的葡萄球菌和腸桿菌對常用抗菌藥物耐藥嚴(yán)重，應(yīng)引起重視。

[關(guān)鍵詞]新生兒敗血癥；足月兒；早產(chǎn)兒；病原菌；耐藥性

新生兒病房中敗血癥仍是引起死亡和嚴(yán)重并發(fā)癥的主要原因之一，尤其是早產(chǎn)兒[1]。隨著新生兒救治水平的提高及抗菌藥物的不斷研發(fā)應(yīng)用，新生兒敗血癥的病原菌特點也隨之發(fā)生變化。因此，研究新生兒敗血癥的病原菌分布特點、細(xì)菌耐藥變遷趨勢對有效控制新生兒感染，減少新生兒死亡率具有重要作用。本文回顧性分析了西北婦女兒童醫(yī)院2012年1月至2014年12月140例確診為新生兒敗血癥的病原學(xué)資料，研究早產(chǎn)兒與足月兒的病原菌及耐藥性狀況，以期為臨床診治、合理用藥提供重要依據(jù)。

1資料與方法

1.1研究對象

選擇2012年1月1日至2014年12月30日期間，在西北婦女兒童醫(yī)院住院的新生兒中，經(jīng)臨床和血培養(yǎng)確診的140例新生兒敗血癥資料進(jìn)行回顧性研究，均經(jīng)監(jiān)護(hù)人知情同意。新生兒敗血癥的診斷依據(jù)中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會新生兒學(xué)組和中華醫(yī)學(xué)會中華兒科雜志編輯委員會的《新生兒敗血癥診療方案》(2003年)。根據(jù)胎齡大小分為足月兒(≥37周)和早產(chǎn)兒(<37周)。在140例新生兒敗血癥中，男80例(57.14%)，女60例(42.86%)；早產(chǎn)兒97例(69.29%)，足月兒43例(30.71%)；早發(fā)型敗血癥43例(30.71%)，晚發(fā)型敗血癥97例(69.29%)。

1.2標(biāo)本采集

全部病例均在抗菌藥物治療前，嚴(yán)格無菌操作下，在兩個不同部位分別采血1.5～2mL注入專用血培養(yǎng)瓶中送本院細(xì)菌室進(jìn)行血培養(yǎng)及藥物敏感試驗。

1.3儀器和試劑

采用法國生物梅里埃公司的BacT/ALERT3D全自動血培養(yǎng)儀，BacT/ALERT PF血培養(yǎng)瓶。細(xì)菌的分離鑒定參照全國臨床檢驗規(guī)程進(jìn)行操作，并經(jīng)法國生物梅里埃公司VITEK 2-compact生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。葡萄球菌、腸細(xì)菌藥敏試劑盒均為法國生物梅里埃公司生產(chǎn)。

1.4質(zhì)控菌株

標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922和銅綠假單胞菌ATCC27853作為藥敏試驗質(zhì)控菌，大腸埃希菌ATCC25922和肺炎克雷伯菌ATCC700603分別作為ESBLs紙片法篩選和確證試驗的陰性和陽性質(zhì)控菌。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，計數(shù)資料用例數(shù)及百分率表示，組間比較應(yīng)用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1病原菌種類構(gòu)成比的變化情況

本次共分離出病原菌種類26株，凝固酶陰性葡萄球菌檢出率最高，共38例(27.14%)，其中以表皮葡萄球菌為主，有20例(14.29%)；腸球菌次之，共22例(15.71%)，其中以屎腸球菌為主，有19例(13.57%)；真菌第3，共17例(12.14%)；大腸埃希菌第4，共15例(10.71%)；肺炎克雷伯菌第5，共12例(8.57%)。

2012年檢出前5位病原菌分別為肺炎克雷伯菌、表皮葡萄球菌、大腸埃希菌、真菌、屎腸球菌；2013年前5位病原菌分別為屎腸球菌、真菌、大腸埃希菌、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌；2014年前5位病原菌分別為表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、屎腸球菌、沃氏葡萄球菌、大腸埃希菌，見圖1。

圖12012至2014年新生兒敗血癥病原菌檢出前5位

Fig.1The first 5 kinds of pathogens isolated in neonatal sepsis which were detected in the period of 2012 to 2014

2.2早產(chǎn)兒與足月兒敗血癥病原菌種類構(gòu)成情況

引起早產(chǎn)兒敗血癥的前5位病原菌分別為屎腸球菌19例(19.59%)、真菌17例(17.53%)、大腸埃希菌11例(11.34%)、肺炎克雷伯菌10例(10.31%)、表皮葡萄球菌8例(8.25%)；引起足月兒敗血癥的前5位病原菌分別為表皮葡萄球菌12例(27.91%)、無乳鏈球菌6例(13.95%)、金黃色葡萄球菌5例(11.63%)、大腸埃希菌4例(9.30%)、糞腸球菌3例(6.98%)，見圖2。

兩組病原菌中均以革蘭氏陽性球菌所占比例最多，其中以凝固酶陰性葡萄球菌為主。革蘭氏陽性球菌在足月兒組中檢出比例高于早產(chǎn)兒組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；真菌僅在早產(chǎn)兒組中檢出，足月兒組中未檢出(P<0.01)；革蘭氏陽性桿菌和革蘭氏陰性桿菌在兩組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)，見表1。

2.3主要檢出菌耐藥性情況

2.3.1葡萄球菌耐藥性情況

45例葡萄球菌中檢出耐藥菌株28例(62.22%)，其中早產(chǎn)兒組耐藥菌株16例(57.14%)、足月兒組耐藥菌株12例(42.86%)。兩組檢出金黃色葡萄球菌共7例，僅在足月兒組中檢出耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin resistant staphylococcus aureus，MRSA)2例，產(chǎn)酶率28.57%。兩組檢出凝固酶陰性葡萄球菌共38例，其中耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(methicillin resistant coagulase-negative staphylococci，MRCNS)26例(早產(chǎn)兒組16例，足月兒組10例)，產(chǎn)酶率68.42%。僅在早產(chǎn)兒組中檢出紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥試驗(D-試驗)陽性2例，陽性率7.69%(2/26)。早產(chǎn)兒組中左氧氟沙星耐藥率最高，達(dá)85.71%；足月兒組中頭孢唑林耐藥率最高，達(dá)75.00%；萬古霉素和利奈唑胺在兩組中均未發(fā)現(xiàn)耐藥株，見表2。

2.3.2腸桿菌耐藥性分析

36例腸桿菌中檢出產(chǎn)超廣譜 -內(nèi)酰胺酶(extended spectrum beta-lactamases，ESBLs)菌株19例，產(chǎn)酶率為52.78%。早產(chǎn)兒組腸桿菌29例，ESBLs耐藥菌株17例(58.62%)。足月兒組腸桿菌7例，ESBLs耐藥菌株2例(28.57%)。早產(chǎn)兒組發(fā)生耐藥率較足月兒組高。在所有藥敏中，不加酶頭孢菌素類耐藥率均較高，加酶后耐藥率明顯降低。亞胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦在兩組中均未發(fā)現(xiàn)耐藥株，見表3。

圖2兩組新生兒敗血癥檢出的前5位病原菌

Fig.2The first 5 kinds of pathogens isolated in preterm and full-term infants with sepsis

表1新生兒敗血癥早產(chǎn)兒與足月兒的病原菌構(gòu)成比較結(jié)果[n(%)]

Table 1 Number and percentage of pathogens isolated in preterm and full-term infants with sepsis[n(%)]

表2葡萄球菌耐藥性分析

Table 2Analysis of drug resistance to staphylococcus

抗菌藥物 早產(chǎn)兒(n=21) 足月兒(n=24) 株數(shù)(n)耐藥率(%)株數(shù)(n)耐藥率(%)青霉素1676.191354.17頭孢唑林1571.431875.00頭孢西丁942.86833.33紅霉素314.29416.67克林霉素29.52312.50阿米卡星942.86729.17利福平733.33625.00左氧氟沙星1885.711666.67萬古霉素0000替考拉寧314.2900利奈唑胺0000復(fù)方新諾明838.101458.33

表3腸桿菌耐藥性分析

Table 3Analysis of drug resistance to enteric bacilli

抗菌藥物 早產(chǎn)兒(n=29) 足月兒(n=7) 株數(shù)(n)耐藥率(%)株數(shù)(n)耐藥率(%)氨芐西林/舒巴坦724.14114.29頭孢呋辛2275.86228.57頭孢西丁310.34114.29頭孢噻肟1862.07228.57頭孢他啶1448.28114.29頭孢哌酮/舒巴坦13.4500哌拉西林/他唑巴坦0000頭孢肶肟1137.9300亞胺培南0000阿米卡星0000左氧氟沙星413.79228.57復(fù)方新諾明1448.28342.86

3討論

新生兒敗血癥是指新生兒期細(xì)菌或真菌侵入血液循環(huán)并在其中生長繁殖，產(chǎn)生毒素所造成的全身感染，是新生兒期死亡的重要原因[2]。盡早明確病原菌及合理選用抗菌藥物有利于治療、改善結(jié)局和預(yù)后。隨著新生兒診治技術(shù)的進(jìn)步及住院新生兒疾病譜的變化，新生兒敗血癥及病原菌特點也呈一定變遷，因此及時了解本地區(qū)病原菌的流行分布和耐藥情況對指導(dǎo)臨床合理使用抗生素、減少耐藥菌和院內(nèi)感染發(fā)生率具有重要意義。

3.1病原菌種類構(gòu)成分析

2010年1月至2012年5月本院新生兒敗血癥檢出前5位病原菌依次為凝固酶陰性葡萄球菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、無乳鏈球菌、產(chǎn)單核李斯特菌[3]。本研究收集了2012年1月至2014年12月本院新生兒敗血癥檢出前5位病原菌分別為凝固酶陰性葡萄球菌、腸球菌、真菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌。近5年來凝固酶陰性葡萄球菌仍是第1位檢出菌，與王健等[4]報道的102例新生兒敗血癥患兒83.3%為葡萄球菌感染相同?？祮吹?2014年)對本院2009年1月至2012年6月早產(chǎn)兒敗血癥檢出前5位病原菌依次為肺炎克

雷伯桿菌、大腸埃希菌、表皮葡萄球菌、真菌、屎腸球菌。本研究中引起早產(chǎn)兒敗血癥的前5位病原菌分別為屎腸球菌、真菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、表皮葡萄球菌；引起足月兒敗血癥的前5位病原菌分別為表皮葡萄球菌、無乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、糞腸球菌。無論是早產(chǎn)兒還是足月兒革蘭氏陽性球菌引起的敗血癥均占比例最高，足月兒敗血癥中革蘭氏陽性球菌(79.07%)的檢出比例高于早產(chǎn)兒(43.30%)。得出結(jié)論與國內(nèi)外報道基本相符，凝固酶陰性葡萄球菌是人體皮膚黏膜的正常菌群之一，可產(chǎn)生黏附素滯留在各種物體表面，消毒處理困難，與NICU中新生兒敗血癥的發(fā)病率和病死率有重要關(guān)系[5-6]，革蘭氏陽性菌仍是新生兒敗血癥的主要病原菌[7-8]。鐘巧等[7]也發(fā)現(xiàn)革蘭氏陽性球菌在足月兒組(84.1%)中檢出比例高于早產(chǎn)兒組(64.2%)。引起早產(chǎn)兒敗血癥的病原菌近5年有變遷，本研究中17例真菌性敗血癥患兒均為早產(chǎn)兒，考慮與早產(chǎn)兒住院時間長、免疫功能低下、長期使用廣譜抗生素、侵入性操作多、全腸外營養(yǎng)、機(jī)械通氣等高危因素有關(guān)。

3.2耐藥性分析

本研究顯示，45例葡萄球菌中檢出金黃色葡萄球菌7例，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌2例，產(chǎn)酶率為28.57%。凝固酶陰性葡萄球菌38例，耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌26例，產(chǎn)酶率為68.42%，其中紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥試驗(D-試驗)陽性2例。早產(chǎn)兒和足月兒葡萄球菌敗血癥對青霉素、頭孢唑林、左氧氟沙星的耐藥率均較高，萬古霉素和利奈唑胺未發(fā)現(xiàn)耐藥株。在36例腸桿菌中檢出產(chǎn)超廣譜 -內(nèi)酰胺酶細(xì)菌19例，產(chǎn)酶率為52.78%。與既往研究發(fā)現(xiàn)相同，兩種菌的耐藥率均較高[4,7]。在所有藥敏中不加酶頭孢菌素類耐藥率高，加酶后耐藥率明顯降低，含酶抑制劑的第3代頭孢菌素已成為新生兒危重感染的首選藥物。早產(chǎn)兒腸桿菌敗血癥對常用抗菌藥物耐藥率比足月兒高，考慮與早產(chǎn)兒的抗生素使用率較高有關(guān)。在本研究中亞胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦未發(fā)現(xiàn)耐藥株。但是近年來由于萬古霉素、亞胺培南、頭孢菌素等廣譜抗生素的大量使用，多重耐藥、高度耐藥問題日益嚴(yán)重，迫切需要加強(qiáng)感染防控措施、合理應(yīng)用抗生素、預(yù)防細(xì)菌耐藥、降低廣譜抗生素使用率。

[參考文獻(xiàn)]

[1]Miller A E, Morgan C, Vyankandondera J.Causes of puerperal and neonatal sepsis in resource-constrained settings and advocacy for an integrated community-based postnatal approach[J].Int J Gynaecol Obstet,2013,123(1):10-15.

[2]邵肖梅,葉鴻瑁,丘小汕.實用新生兒學(xué)[M].4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2011:340.

[3]楊軍蘭,董玲,楊俠等.新生兒血培養(yǎng)病原菌分布及其耐藥性分析[J].山西醫(yī)藥雜志(下半月版),2013,42(1):90-92.

[4]王健,劉彥慧,孫曉勉.新生兒敗血癥的臨床治療與病原菌藥敏檢測[J].中國婦幼健康研究,2011,22(2):175-176.

[5]Abd El Hafez M, Khalaf N G, El Ahmady M,etal.An outbreak of methicillin resistant Staphylococcus epidermidis among neonates in a hospital in Saudi Arabia[J].J Infect Dev Ctries,2011,5(10):692-699.

[6]Amaya E, Caceres M, Fanc H,etal.Antibiotic resistance patterns in gram-negative and gram-positive bacteria causing septicemia in newborns in León, Nicaragua:correlation with environmental samples[J].J Chemother,2010,22(1):25-29.

[7]鐘巧,李暉,高曉玲,等.NICU早產(chǎn)與足月新生兒敗血癥特點對比研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2014,24(1):211-213.

[8]Ho T S, Wang S M, Wu YH,etal.Long-term characteristics of healthcare-associated infections in a neonatal intensive care unit[J].J Microbiol Immunol Infect,2010,43(5):407-415.

[專業(yè)責(zé)任編輯：周熙慧]

[收稿日期]2016-04-18

[作者簡介]李清紅(1976-)，女，主治醫(yī)師，主要從事早產(chǎn)兒管理工作。

[通訊作者]李占魁，主任醫(yī)師。

doi:10.3969/j.issn.1673-5293.2016.07.004

[中圖分類號]R722.13+1

[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A

[文章編號]1673-5293(2016)07-0798-03

Etiological analysis of neonatal sepsis in preterm and term infants

LI Qing-hong, YANG Jun-lan, HE A-ling, GUO Jin-zhen, LI Zhan-kui

(Department of Neonatology, Northwest Women and Children Hospital, Shaanxi Xi’an 710061, China)

[Abstract]Objective To evaluate the pathogenic bacterium constitution and drug resistance of neonatal sepsis in preterm and term infants, so as to provide evidence for reasonable medication in clinics. Methods The pathogenic data of 97 preterm and 43 term cases of neonatal sepsis diagnosed in department of neonatology in Northwest Women and Children Hospital from January 1, 2012 to November 31, 2014 were retrospectively analyzed. Statistical analysis was performed. Results The detection rate of Gram-positive cocci in term infant group was higher than that in preterm infant group (χ2=15.36, P<0.01). Fungal infection was only found in preterm infant group (χ2=8.57,P<0.01). Staphylococcus and enterobacteria were highly resistant to commonly used antibiotics and demonstrated multi-drug resistance. The pathogenic bacterium resistant to vancomycin, linezolid and imipenem were not found. Conclusion Preterm and term infants with sepsis are somewhat different in pathogenic bacterium. Preterm infants are more likely to suffer fungal infection. Staphylococcus and enterobacteria are highly resistant to commonly used antibiotics, which should attract great attention.

[Key words]neonatal sepsis; preterm infant; term infant; pathogenic bacteria; drug resistance