孟晶，王中霞，汪海衛(wèi)（灌南縣海洋與漁業(yè)局，江蘇　灌南　222500）

日糧脂肪水平對克氏原螯蝦的生長、體組成及脂肪酸組成的影響

孟晶，王中霞，汪海衛(wèi)
（灌南縣海洋與漁業(yè)局，江蘇灌南222500）

摘要：研究了日糧中脂肪水平對克氏原螯蝦的生長、體組成及脂肪酸組成的影響。630尾初始重為（4.76±0.42）g克氏原螯蝦隨機分為六組（1～6組），每組3個重復，每個重復35尾，用六個脂肪水平（1.82%、3.84%、5.79%、7.89%、9.91%和11.95%）飼料飼養(yǎng)60 d后測定蝦的生長指標、體組成和脂肪酸組成。結(jié)果表明，克氏原螯蝦的適宜日糧脂肪水平為7.89%～9.91%。

關(guān)鍵詞：克氏原螯蝦；生長；體組成；脂肪酸

1　前言

克氏原螯蝦（Procambarus clarkii），俗稱克氏螯蝦、紅色沼澤螯蝦、小龍蝦等，在動物分類學上隸屬甲殼綱，十足目，螯蝦科，原螯蝦屬。其肉中蛋白質(zhì)含量占鮮重的18%，脂肪0.3%，氨基酸總量占蛋白質(zhì)的77%，是一種高蛋白、低脂肪的健康食品，其外殼富含鈣、磷、鐵等營養(yǎng)元素，可加工成飼料添加劑，也可作為甲殼素、幾丁質(zhì)和甲殼糖胺等工業(yè)原料，廣泛應用于農(nóng)業(yè)、食品、醫(yī)藥、煙草、造紙、印染等領(lǐng)域［1］。由于克氏原螯蝦的養(yǎng)殖前景越來越好，人們對于其品質(zhì)和風味的要求也越來越高，因此尋求一個具有高質(zhì)量的小龍蝦專用飼料對于小龍蝦的養(yǎng)殖發(fā)展具有重要的作用，也是一個迫切的研究課題。

2　材料與實驗

2.1實驗蝦

實驗蝦購自鹽城郊區(qū)養(yǎng)殖場，經(jīng)過5%食鹽水消毒后，馴養(yǎng)備用。馴化結(jié)束后，選擇健康無傷殘的630尾蝦苗，均重（4.76±0.42）g，隨機分配到18個水泥池中，每個水泥池35尾，然后將18個水泥池隨機分為6組，每組3個重復，分別投喂不同脂肪水平的實驗飼料，飼養(yǎng)60 d。

2.2實驗飼料

以優(yōu)質(zhì)進口魚粉、豆粕、菜粕和花生粕為蛋白源，優(yōu)質(zhì)魚油為脂肪源，飼料原料均過60目篩，魚油的添加水平分別為0%、2%、4%、6%、8%和10%，飼料脂肪水平分別為1.82%、3.84%、5.79%、7.89%、9.91%和11.95%。配制成6組實驗飼料，脂肪水平為1.82%、3.84%、5.79%、7.89%、9.91%和11.95%的飼料分別標記為第1、2、3、4、5和6組，經(jīng)充分混合后加工成顆粒飼料，晾干后保存于冰箱中備用。飼料具體配方見表1、表2。

2.3飼養(yǎng)管理

實驗在18個1 m×1 m×0.8 m的水泥池中進行，每個池底鋪設35支2.5 cm×8.0 cm的PV管作為蛻殼蝦棲息避難的場所。實驗用水為曝氣后的自來水，水溫22～28℃，實驗期間不間斷充氣，每天換水20%。每天投飼兩次，時間分別為7：00和18：00，投餌率為2%～4%，投喂之前吸除殘餌、糞便和蛻殼。

表1　實驗飼料配方及營養(yǎng)成分含量

2.4生長及形體指標計算

飼養(yǎng)實驗結(jié)束后，停止投喂48 h，對每尾蝦進行稱重，解剖分離出肝胰腺和肌肉并稱重，分別計算增重率、特定生長率、肝體指數(shù)和出肉率，計算公式如下：

增重率（%）=100×（Wf-Wi）/Wi

特定生長率（%/d）=100×（lnWf-lnWi）/d

肝體指數(shù)（%）=100×（Wh/Wf）

出肉率（%）=100×（Wm/Wf）

式中：Wf和Wi分別為實驗末和實驗初蝦體的質(zhì)量（g），Wh和Wm分別為實驗末蝦肝胰腺和肌肉的質(zhì)量（g），d為飼養(yǎng)時間。

2.5相關(guān)指標的測定

將肝胰腺和肌肉在-20℃冰箱中凍結(jié)后，真空冷凍干燥48 h，分別用凱氏定氮法和索氏抽提法測定肝胰腺和肌肉中的粗蛋白及粗脂肪含量。

表2　飼料脂肪酸組成

脂肪酸的測定：脂肪提取參照Folch方法。油脂的皂化及甲酯化方法參照Christie方法略有改進。樣品皂化甲酯化后，直接上氣相色譜-質(zhì)譜儀進行分析。

檢索NIST質(zhì)譜圖庫，比較樣品質(zhì)譜圖與圖庫中標準質(zhì)譜圖，就可以確定樣品中脂肪酸種類，各脂肪酸相對含量的確定采用面積歸一化法計算。

2.6數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

原始數(shù)據(jù)經(jīng) Excel 2007初步整理后，用SPSS18.0中的單因子方差分析（One-Way ANOVA）進行Duncan法多重比較，顯著水平為（P＜0.05），極顯著水平為（P＜0.01）。數(shù)據(jù)用“平均值±標準誤（X± SE）”形式表示。

3　結(jié)果與討論

3.1結(jié)果

3.1.1飼料脂肪水平對克氏原螯蝦生長的影響不同脂肪水平飼喂的克氏原螯蝦基本生長指數(shù)如表3所示。隨著飼料脂肪水平的增加，克氏原螯蝦的增重率和特定生長率均先增加后降低；第5組蝦的增重率和特定生長率最高，第4組蝦的增重率和特定生長率與第5組蝦無統(tǒng)計學意義的差異（P＞0.05）。以上結(jié)果說明克氏原螯蝦飼料中的適宜脂肪含量在7.89%～9.91%之間。

用二次多項式的回歸模型，分析克氏原螯蝦的增重率與飼料脂肪水平之間的關(guān)系，得到的回歸方程為:Y=-0.7163X2+12.521X+197.76（圖1），當X= 8.74%時增重率最高，因此克氏原螯蝦飼料中最適宜的脂肪水平為8.74%。肝體指數(shù)隨飼料脂肪水平的增加而升高，各脂肪組間出肉率差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），其中4和5組出肉率最高，第6組的出肉率最低。

3.1.2飼料脂肪水平對克氏原螯蝦體組成的影響克氏原螯蝦肝胰腺及肌肉中粗蛋白、粗脂肪含量的測定結(jié)果見表4。在蝦的肝胰腺中，粗蛋白的含量變化規(guī)律不一致，隨著飼料脂肪水平的增加而呈先降后增再降的趨勢；粗脂肪的含量為 65.52%～80.70%，并且隨脂肪水平增加呈增高的趨勢。對比兩個組織中粗蛋白和粗脂肪的含量數(shù)據(jù)可以看出，肝胰臟中含有的粗蛋白含量比肌肉中少，而其粗脂肪的含量卻比肌肉中的多。

表3　脂肪水平對克氏原螯蝦生長的影響

圖1　克氏原螯蝦的增重率與飼料脂肪水平之間的關(guān)系

3.1.3飼料脂肪水平對克氏原螯蝦脂肪酸組成的影響克氏原螯蝦肝胰腺及肌肉中脂肪酸組成的測定結(jié)果見表4、表5?？耸显r的肝胰臟和肌肉中的脂肪酸種類主要以飽和脂肪酸（C16：0）、不飽和脂肪酸（C18：n-9）及高不飽和脂肪酸（C20：4n-3、C18：2n-6）為主，且各組分在總的脂肪酸中的比例有較大的不同。

表4　飼料脂肪水平對克氏原螯蝦體組成的影響

在肝胰腺中，第2組蝦的飽和脂肪酸（SFA）含量最低為34.93%，其他各組間SFA含量差異不具有統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；1組蝦的單不飽和脂肪酸（MUFA）含量最高，其他各組蝦的MUFA含量差異不具有統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；各組蝦的n-6系多不飽和脂肪酸（PUFA）含量和n-3/n-6系數(shù)無明顯的統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；第1組蝦的n-3系PUFA含量、DHA/EPA系數(shù)和ARA/EPA系數(shù)最低，其他各組蝦的PUEA含量、DHA/EPA系數(shù)和ARA/EPA系數(shù)無明顯的差異（P＞0.05），DHA、EPA含量與其有相似的趨勢。在肌肉中，第1組蝦的飽和脂肪酸（SFA）含量最低，其他各組間SFA含量差異不具有統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；各組蝦n-3系PUFA含量先呈上升的趨勢，到第5組時趨于平穩(wěn)，相反n-6系PUFA含量先呈下降趨勢，到第5組時趨于平穩(wěn)，相應的n-3/n-6系數(shù)和DHA的含量也表現(xiàn)出相似的變化趨勢，而對于DHA的含量變化則沒有規(guī)律，但5、6組的含量顯著高于其他組（P＜0.05）；各組蝦的EPA含量和DHA/EPA系數(shù)無顯著的變化（P＞0.05）；第1組蝦的ARA/EPA系數(shù)最高，其他各組蝦的ARA/EPA系數(shù)差異不具有統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

3.2討論

3.2.1飼料脂肪水平對克氏原螯蝦生長的影響本實驗結(jié)果表明，飼料脂肪水平對克氏原螯蝦的生長有極顯著的關(guān)系。隨著脂肪水平的增加，克氏原螯蝦的增重率、特定生長率和出肉率也隨之先增高后降低；肝體指數(shù)則隨著飼料脂肪水平的增加而升高，這是由于飼喂過高的脂肪水平飼料，使脂肪沉積在肝臟中導致的。實驗研究表明，脂肪水平在7.89%～9.91%范圍內(nèi)適合克氏原螯蝦的生長，飼料中脂肪水平過高或過低都會影響克氏原螯蝦的生長。具有類似結(jié)果的報道有：吳銳全等［3］的研究表明：羅氏沼蝦（Macrobrachium rosenberii）飼料中脂肪含量為3.12%～11.11%時，對其生長無顯著影響，并推薦羅氏沼蝦飼料中適宜的脂肪含量為5.11%～9.10%；虞冰如等［2］也認為日本沼蝦飼料的適宜脂肪含量為6%～12%，脂肪水平繼續(xù)增高時，蝦的生長率下降；蝦蟹類對脂肪需要量受到多種因素影響，但一般認為需求量范圍為3%～10%，最適的添加量為5%～9%［4］。河蟹飼料中脂肪最高含量為8.7%時，河蟹生長好，且不存在饑餓殘殺現(xiàn)象，成活率高［5］；Sheen和wu［6］對鋸緣青蟹脂類營養(yǎng)研究結(jié)果表明，飼料中脂肪含量范圍從5.3%～13.8%時可滿足鋸緣青蟹的生長。

3.2.2飼料脂肪水平對克氏原螯蝦體組成的影響

本實驗表明，在肝胰腺和肌肉中，粗脂肪的含量都隨著脂肪水平的增加而升高，但是升高到一定水平，升高的梯度就變得比較穩(wěn)定，說明飼料可消化能的增加會促使脂肪在肌肉的沉積和肝臟脂肪的生成增加，當肝臟脂肪積累到一定程度時，有可能誘發(fā)脂肪肝，從而影響克氏原螯蝦的生長。韓光明等［28］研究飼料脂肪水平對吉富羅非魚組織中脂肪含量結(jié)果表明，吉富羅非魚肌肉和肝臟的脂肪含量均隨飼料脂肪水平增加而升高，肌肉和肝臟組織中脂肪含量與飼料脂肪水平有顯著相關(guān)的影響。王朝明等［37］對于飼料脂肪水平對胭脂魚幼魚生長、體組成和抗氧化能力的影響研究的結(jié)果也表明，隨著飼料脂肪水平增加，胭脂魚肌肉和肝胰臟的脂肪含量升高后趨于穩(wěn)定。這些研究結(jié)果都支持了該實驗的結(jié)果。實驗在飼料脂肪水平為9.91%時，蝦肌肉中粗脂肪含量稍微有點降低，這可能是在實驗過程中一些外在的因素影響導致產(chǎn)生的誤差，但是對于肌肉中粗脂肪含量的整體變化趨勢沒有太大的影響。

表5　飼料脂肪水平對克氏原螯蝦肝胰腺脂肪酸組成影響

表6　飼料脂肪水平對克氏原螯蝦肌肉脂肪酸組成影響

在肝胰腺中，粗蛋白的含量隨著脂肪水平的增加呈先下降后升高再降低的趨勢，這說明在飼料脂肪水平為7.89%～9.91%時，適合飼料中蛋白質(zhì)最大限度的參與機體的合成代謝，從而使肝胰臟中的蛋白質(zhì)含量增高。而在肌肉中粗蛋白含量隨脂肪水平的增加呈先升高后下降的趨勢，但是變化趨勢不是很明顯，這是因為日糧脂肪水平在一定范圍內(nèi)增加時，脂肪作為能量釋放供給魚體活動需要，而日糧中蛋白質(zhì)則最大限度地參與機體的合成代謝，增加機體蛋白質(zhì)含量，當脂肪水平過高時，蛋白質(zhì)的含量就會降低。鄭珂珂等［7］對飼料脂肪水平對瓦氏黃顙魚生長及脂蛋白脂酶基因表達的影響的研究結(jié)果表明，瓦氏黃顙魚魚體粗蛋白隨著飼料脂肪水平的增加出現(xiàn)先升高后下降的趨勢；國外學者在虹鱒魚（Oncorhynchus mikiss）、紅姑魚（Sciaenops ocellatus）、大西洋鮭（Salmon salar）等研究表明飼料中脂肪含量增加導致試驗魚體蛋白質(zhì)下降。這些研究結(jié)果與本實驗研究結(jié)果基本相似。

3.2.3飼料脂肪水平對克氏原螯蝦脂肪酸組成的影響由對克氏原螯蝦的肝胰腺和肌肉中脂肪酸組成測定結(jié)果及飼料中脂肪酸組成測定結(jié)果（表1）可知，肝胰臟和肌肉中主要的飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸的種類與飼料中脂肪酸的種類相似，只是肝胰臟中少了C16：9和C18：n-3兩種脂肪酸，肌肉中少了C10：0脂肪酸。這與劉玉芳［8］對草魚、鯉魚、鰱、鳙、團頭魴五種淡水魚脂肪酸組成研究分析所得到的結(jié)果相似。在肌肉和肝胰臟中，n-6PUFA含量隨飼料脂肪水平的增加而顯著下降，n-3PUFA隨飼料脂肪水平的增加而顯著增高。因為魚油中含有大量的n-3PUFA，導致魚體肌肉和肝臟中的n-3 PUFA比例增加［9］；n-3/n-6系數(shù)隨著脂肪水平的增加而逐步增高，DHA/EPA和ARA/EPA系數(shù)除了第一組高以外，其他各組間沒有統(tǒng)計學意義的差異。這些變化趨勢與飼料中相應的變化趨勢相似，與之前報道的魚體組織中脂肪酸組成受飼料中脂肪酸組成的影響很大［10-11］，組織中脂肪酸比例與飼料中脂肪酸比例呈線性關(guān)系［12-13］結(jié)果相似?？耸显r的肝胰臟和肌肉中的脂肪酸組成主要以飽和脂肪酸（C16：0）、不飽和脂肪酸（C18：n-9）及高度不飽和脂肪酸（C20：4n-3、C18：2n-6）為主要的脂肪酸種類，這與郭占林等［14］、王恒等［15］分別對紅螯光殼螯蝦幼蝦和羅氏沼蝦研究得到的肌肉中脂肪酸組成相似。水產(chǎn)飼料中n-3系脂肪酸有其特殊價值，魚油中的n-3脂肪酸（EPA，DHA）是魚蝦的促生長劑及誘食劑，DHA是魚蝦幼體正常發(fā)育的營養(yǎng)因子［16］。而在肝胰臟和肌肉的脂肪酸組成中發(fā)現(xiàn)，當飼料中脂肪水平達到7.89%～9.91%時，EPA、DHA開始呈下降趨勢。綜上所述，克氏原螯蝦飼料中適宜的脂肪水平為7.89%～9.91%。

4　結(jié)論

研究表明，脂肪水平在7.89%～9.91%范圍內(nèi)適合克氏原螯蝦的生長，飼料中脂肪水平過高或過低都會影響克氏原螯蝦的生長，其中最適宜的脂肪水平為8.74%。

隨著飼料脂肪水平的增高，克氏原螯蝦肝胰臟和肌肉中粗脂肪的含量隨之增高，在肝胰腺中，粗蛋白的含量隨著脂肪水平的增加呈先下降后增高再下降的趨勢，而在肌肉中粗蛋白含量隨脂肪水平的增加呈先升高后下降的趨勢，這說明在飼料脂肪水平為7.89%～9.91%時，適合飼料中蛋白質(zhì)最大限度的參與機體的合成代謝。

肝胰臟及肌肉中的脂肪酸組成及主要的脂肪酸種類與飼料中脂肪酸組成和主要種類相似。

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中圖分類號：S962.3

文獻標志碼：A

文章編號：1004-2091（2016）07-0019-08

doi：10.3969/j.issn.1004-2091.2016.07.005

收稿日期：（2016-01-21）

作者簡介：孟晶（1989-），女，從事水產(chǎn)養(yǎng)殖研究工作.E-mai：352555181@qq.com

The effects of dietary lipid levels on the growth，body composition and fatty acid composition of Procambarus clarkii

Meng Jing，Wang Zhongxia，Wang Haiwei
（Guannan Marine and fisheries，The postcode of Guannan County，Lianyungang 222500，China）

Abstract：An experiment was conducted to investigate the effects of dietary lipid levels on growth，body composition and fatty acid composition of Procambarus clarkii.630 Procambarus clakii［average（4.76±0.42）g in initial body weight］were randomly divided into 6 groups（1～6 group）with 3 replicates per group and 35 clarkii per replicate in experiment.Offered the test diets with different lipid levels respectively（1.82%，3.84%，5.79%，7.89%，9.91%and 11.95%）and measured the growth performance，body composition and the fatty acid composition after keeping 60 days.Based on these observations，the optimal dietary lipid level could be devised to 7.89% ～9.91%for Procambarus clarkii.

Key words：Procambarus clarkii；growth；body composition；fatty acid