孫　妍　遇文婧　王　琪　宋小雙　劉　欣

（黑龍江省森林保護(hù)研究所，哈爾濱　150040）

兩種植物粗提物對(duì)楊小舟蛾的殺蟲(chóng)活性初探

孫妍遇文婧王琪宋小雙劉欣

（黑龍江省森林保護(hù)研究所，哈爾濱150040）

通過(guò)溫浸—超聲波連用的提取法，得到走馬芹和豚草的80%乙醇提取物，稀釋后進(jìn)行了楊小舟蛾的殺蟲(chóng)活性研究，其結(jié)果表明：走馬芹和豚草的粗提液對(duì)楊小舟蛾都具有較強(qiáng)的毒殺作用，且走馬芹的殺蟲(chóng)活性高于豚草。關(guān)鍵詞：走馬芹；豚草；楊小舟蛾；殺蟲(chóng)活性

走馬芹 （Angelica dahurica）與豚草（Ambrosia artemisiifolia）均為黑龍江省常見(jiàn)的草本植物。走馬芹的主要化學(xué)成分為香豆精類化合物［1-2］，在民間作為中草藥用于清熱解毒，消腫止痛；豚草作為入侵植物，生命力極強(qiáng)，影響人類健康及農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)，其化學(xué)成分中含有豐富的倍半萜內(nèi)酯類化合物［3］。楊小舟蛾（Micromelalopha troglodyte）為鱗翅目舟蛾科，是以幼蟲(chóng)為害楊樹(shù)人工林的主要食葉害蟲(chóng)，大發(fā)生時(shí)葉片被害蟲(chóng)吃光，嚴(yán)重影響楊樹(shù)的正常生長(zhǎng)，并對(duì)其資源構(gòu)成威脅。本研究采用溫浸-超聲波提取方法對(duì)走馬芹和豚草的粗提物進(jìn)行制備，并對(duì)其殺蟲(chóng)活性進(jìn)行初探，以確定這兩種提取物對(duì)楊小舟蛾的毒力作用，為日后的生產(chǎn)與應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1　材料和方法

1.1供試植物和蟲(chóng)源

在黑龍江省采集走馬芹1～2年生整株植株和豚草當(dāng)年生整株植株；試驗(yàn)用蟲(chóng)為3齡幼蟲(chóng)，野外采集，室內(nèi)飼養(yǎng)。

1.2儀器和試劑

1.2.1儀器

DHG-9240電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、FDV高速風(fēng)選式超細(xì)粉碎機(jī)、DK-S26型電熱恒溫水浴鍋、AS20500A型超聲波清洗器、RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、SHB-IIIA循環(huán)水式多用真空泵、透明手持常量噴霧器、塑料瓶、鑷子、無(wú)紡紗布。

1.2.2試劑

1.3植物提取物母液的制備

將新鮮的植物清洗后置于通風(fēng)處陰干，在50℃干燥箱中烘干至恒重，粉碎后得到植物粉末，保存于棕色干燥容器中，備用。將10 g植物粉末和250 mL 80%乙醇裝入三角瓶中，于50℃恒溫水浴鍋內(nèi)溫浸3 h，然后放到超聲波提取器中振蕩40 min，取出后再置于50℃恒溫水浴鍋內(nèi)溫浸3 h，而后將浸好的藥液減壓抽濾，在40℃下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行減壓濃縮至原液呈現(xiàn)出濃油狀為止，用10%的聚山梨酯—80作為溶媒進(jìn)行溶解定容至50 mL（即質(zhì)量濃度為200 mg/mL），物理滅菌后放入4℃冰箱中保存?zhèn)溆茫?-5］。

1.4殺蟲(chóng)效果測(cè)定方法

葉片浸藥飼蟲(chóng)法［6］：將母液稀釋成3個(gè)不同濃度梯度，即5倍、10倍、50倍藥液，同時(shí)設(shè)清水為對(duì)照，采用常量噴霧至均勻而不下滴狀態(tài)。然后把經(jīng)過(guò)處理的和對(duì)照葉片與健康的未處理的3齡試蟲(chóng)一起放進(jìn)塑料瓶中，每個(gè)瓶中放30頭蟲(chóng)，對(duì)照每個(gè)濃度設(shè)3組，并編號(hào)，使其有足夠的空間，每天及時(shí)換新鮮樹(shù)葉，分別在陽(yáng)光充足直射24、48、72、96、120、144、168 h后調(diào)查試蟲(chóng)的死亡情況，并計(jì)算死亡率。

2　結(jié)果與分析

2.1殺蟲(chóng)效果測(cè)定結(jié)果

采用溫浸—超聲波連用提取法提取走馬芹和豚草的乙醇粗提物，其對(duì)楊小舟蛾3齡幼蟲(chóng)殺蟲(chóng)效果測(cè)定的結(jié)果（表1）顯示：隨著走馬芹和豚草粗提物濃度的升高，對(duì)楊小舟蛾3齡幼蟲(chóng)的作用效果也明顯增強(qiáng)。

表1　走馬芹和豚草粗提物殺蟲(chóng)效果測(cè)定

由不同濃度走馬芹與豚草粗提物的殺蟲(chóng)效果（圖1）可知：走馬芹與豚草的粗提物對(duì)楊小舟蛾的殺蟲(chóng)活性高峰均出現(xiàn)在施藥后48 h，而后逐漸減弱。在稀釋5倍液的處理中，每個(gè)重復(fù)的殺蟲(chóng)率都能達(dá)到80%以上，具有較高的殺蟲(chóng)活性。

圖1　不同濃度的走馬芹與豚草的粗提物的殺蟲(chóng)效果

當(dāng)走馬芹與豚草的粗提物濃度相同時(shí)，對(duì)楊小舟蛾都具較好的毒力作用，且走馬芹的毒性略高于豚草（圖2）。

圖2　相同濃度時(shí)兩種植物粗提物藥效隨時(shí)間的變化

2.2供試植物粗提物對(duì)楊小舟蛾致死中濃度LC50的測(cè)定

以走馬芹粗提物的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、楊小舟蛾的殺蟲(chóng)率為縱坐標(biāo)作圖3，由此可知不同濃度的走馬芹提取物對(duì)楊小舟蛾的殺蟲(chóng)作用呈對(duì)數(shù)增長(zhǎng)趨勢(shì)。曲線方程為：Y=7.063 5Ln（X）+9.147 5，復(fù)合系數(shù)R2（%）為99.9，相關(guān)性較好，由此可計(jì)算出LC50為324.928 μg/mL（質(zhì)量濃度）。

以豚草粗提物的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、楊小舟蛾的殺蟲(chóng)率為縱坐標(biāo)作圖4，由此可知不同濃度的豚草提取物對(duì)楊小舟蛾的殺蟲(chóng)作用呈對(duì)數(shù)增長(zhǎng)趨勢(shì)。曲線方程為：Y=7.453 4Ln（X）+1.818 4，復(fù)合系數(shù)R2（%）為99.54，相關(guān)性較好，由此可計(jì)算出LC50為641.865 μg/mL（質(zhì)量濃度）。

圖3　走馬芹粗提物對(duì)楊小舟蛾的藥效曲線

圖4　豚草粗提物對(duì)楊小舟蛾的藥效曲線

3　結(jié)　論

3.1當(dāng)稀釋5倍液和10倍液時(shí)，走馬芹和豚草的植物粗提物對(duì)楊小舟蛾3齡幼蟲(chóng)累計(jì)校正死亡率都能達(dá)到50%以上；當(dāng)稀釋5倍液時(shí)，這2種植物粗提物對(duì)楊小舟蛾3齡幼蟲(chóng)累計(jì)校正死亡率均能達(dá)到80%以上，具有較高的殺蟲(chóng)活性。相同濃度時(shí)，走馬芹對(duì)楊小舟蛾3齡幼蟲(chóng)的殺蟲(chóng)作用大于豚草。

3.2觀察藥效顯示，藥效與時(shí)間呈反比，與濃度成正比，施藥后的第2天試蟲(chóng)死亡出現(xiàn)高峰，隨后呈現(xiàn)出下降的趨勢(shì)。

3.3走馬芹和豚草粗提物對(duì)楊小舟蛾的致死中濃度分別為：324.928 μg/mL（質(zhì)量濃度）和641.865 μg/mL（質(zhì)量濃度）。該試驗(yàn)結(jié)果較為理想，可為以這兩種植物作為植物源農(nóng)藥的開(kāi)發(fā)與利用和對(duì)楊小舟蛾的防治提供一點(diǎn)理論基礎(chǔ)。

［1］聶紹荃，袁曉穎.黑龍江省植物資源志［M］.東北林業(yè)大學(xué)出版社，2003.

［2］吳壽金，李德玉，張麗，等.走馬芹中香豆素成分的研究［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，1986，21（8）:599-604.

［3］王浦海，徐軍，吳美玉.豚草化學(xué)成分的研究［J］.中國(guó)中藥雜志，1993，18（3）:164-165.

［4］孫妍，張國(guó)財(cái)，劉瑞鵬，等.走馬芹提取物對(duì)楊樹(shù)爛皮病的抑制作用研究［J］.中國(guó)林副特產(chǎn)，2010，2（105）:11-12.

［5］孫妍，趙紅盈，宋小雙，等.豚草提取物對(duì)楊樹(shù)爛皮病菌的抑制作用［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（34）:12111-12112，12192.

［6］紀(jì)淑娟.丁香抑菌成分超聲波提取工藝研究［J］.食品科學(xué)，2008，29（05）:201-204.

第1作者簡(jiǎn)介：孫妍（1981-），女，博士在讀，助理研究員，主要從事森林保護(hù)研究。

（責(zé)任編輯：李丹）

Study on the Insecticidal Active of the Crude Extracts of two Kinds of Plants to the Micromelalopha Troglodyte（Graeser）

SUNYan
（Heilongjiang Forest Protection Research Institute，Harbin150040）

In this paper，we have studied the insecticidal active of the 80%ethanol crude extracts of Angelica dahurica and Ambrosia artemisiifolia with the method of warm immersion with Ultrasonic to the Micromelalopha troglodyte（Graeser）.The results showed that the crude extracts of Angelica dahurica and Ambrosia artemisiifolia have the higher virulence to Micromelalopha troglodyte（Graeser），and Angelica dahurica was higher than Ambrosia artemisiifolia.

Angelica dahurica；Ambrosia artemisiifolia；Micromelalopha troglodyte；Insecticidal active

S763.306.4，S763.42

C

1001-9499（2016）04-0074-03

2016-06-30