徐艷
摘 要:為充分利用紅薯莖葉資源,避免資源的浪費,以紅薯莖葉為原料,對紅薯莖葉中黃酮類物質(zhì)的提取方法進行比較。采用堿提酸沉法、超聲波法和醇提法進行提取試驗,得出紅薯莖葉中黃酮類化合物提取的最佳工藝。
關(guān)鍵詞:紅薯;黃酮類化合物;提取方法
黃酮類化合物是以黃酮為母核的一大類化合物,廣泛存在于植物體中,目前為止已發(fā)現(xiàn)的黃酮類化合物有8000多種。紅薯莖葉是紅薯的副產(chǎn)物,就農(nóng)業(yè)生產(chǎn)而言沒有任何作用,因而大量葉梗被作為飼料或是直接棄置,造成極大浪費。紅薯莖葉含有大量的黃酮類化合物,這類化合物可以增強免疫功能、促進新陳代謝、提高機體抗病能力、延緩衰老、降血糖、抗腫瘤保肝等方面有較好的功效,具有極大的醫(yī)藥價值,若是充分開發(fā)利用可以形成比較可觀的經(jīng)濟效益。對紅薯莖葉內(nèi)黃酮類化合物提取的研究不足,是導致紅薯莖葉被棄置浪費的一個主要原因[1-4]。
一、材料與方法
1.實驗材料。取新鮮和陳腐的紅薯莖葉,洗凈后自然晾干水份。然后放入烘箱,在60攝氏度下烘15小時,至恒重。粉碎后過篩備用。
2.試劑與儀器。主要試劑: 95%乙醇、蘆丁、氫氧化鈉、濃鹽酸。
主要儀器:SHZ-3循環(huán)水多用真空泵,上海滬西分析儀器廠有限公司;751002—電子天平,上海上天精密儀器有限公司;DL—1電子萬用爐,北京市永光明醫(yī)療儀器廠。
3.實驗方法
(1)醇提取法。稱取紅薯葉粉10g,置于圓底燒杯中,選定固液比(ml/g),用不同濃度乙醇在不同溫度下回流提取,過濾,濾渣以同樣條件提取過濾,提取2次,合并濾液,然后用相同濃度乙醇定容,按標準曲線的實驗步驟測定黃酮含量。
(2)超聲波提取法。稱取紅薯葉粉10g,置于圓底燒杯中,按一定固液比(ml/g)加入不同濃度乙醇,在超聲波清洗槽中超聲一定時間后,趁熱用真空泵抽提過濾,濾渣以同樣條件提取過濾,提取一定次數(shù),合并濾液,濾液用同樣濃度乙醇溶液定容,待測。
(3)蘆丁標準曲線繪制。精密稱取蘆丁標準品100mg,置于100ml容量瓶中,加 70%乙醇溶解并定容至刻度,再取10ml此標準液于100ml容量瓶中,稀釋,搖勻,定容作為標準品溶液。分別精密吸取標準品溶液,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml于10ml容量瓶中,加人0.1mol/L氯化鋁溶液2.0ml,用70%乙醇定容至刻度并搖勻,顯色15分鐘后于波長422nm處測其吸光度,得到蘆丁質(zhì)量濃度(mg/ml)與吸光度之間的回歸方程。
根據(jù)圖1,求得回歸方程A=13.365C+0.305,R2=0.9995。其中:C為蘆丁含量(mg/mL),A為吸光度。相關(guān)系數(shù)R2為0.9995,表明在該濃度范圍內(nèi)蘆丁濃度與吸光度線性關(guān)系良好。
4.樣品提取液中黃酮含量的測定和計算。準確吸取提取液1ml置于10ml容量瓶,加入0.1mol/L氯化鋁溶液,用70%乙醇定容至刻度線并搖勻,按上述標準曲線的實驗步驟測定茶葉中總黃酮含量,即為得率。
紅薯葉總黃酮得率=提取的黃酮含量/紅薯葉粉質(zhì)量*100%
二、結(jié)果與討論
1.醇提法正交試驗結(jié)果
由表1知黃酮提取率的影響按大小次序排列分別為A(乙醇濃度)>B(提取溫度)>C(料液比)>D(提取時間),初步確定從紅薯莖葉中提取黃酮類物質(zhì)的優(yōu)化方案為:A3B3C3D3。
2.超聲波提取法正交試驗結(jié)果
由表2知黃酮提取率的影響按大小次序排列分別為A(乙醇濃度)>B(提取次數(shù))>C(液固比),初步確定從紅薯莖葉中提取黃酮類物質(zhì)的優(yōu)化方案為:A3B2C1。
三、結(jié)語
通過按實驗結(jié)果得出的超聲波提取黃酮類化合物最優(yōu)組合做驗證試驗,即乙醇體積分數(shù)為90%,固液比1:70、提取次數(shù)2次,結(jié)果紅薯葉總黃酮的得率為0.38%,高于任何一組正交實驗數(shù)據(jù),說明優(yōu)選出的工藝穩(wěn)定可行。
參考文獻:
[1] 吳立軍,高慧媛,黃健等.天然藥物化學實驗指導[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2013:179-180.
[2]李光,余霜,陳慶富.正交設(shè)計在紅薯葉黃酮提取中的應(yīng)用[J].北方園藝,2012(01):41~42.
[3] 劉金香,王水興,范青生.堿提酸沉法提取銀杏葉總黃酮[J].安徽農(nóng)業(yè)科學,2008.36(36):11386-11388.
[4] 王玫,張?zhí)┿?,熊運海.超聲波法提取紫甘薯葉總黃酮的工藝研究[J]. 廣州化學,2010,35(2):13-18.