甲基苯丙胺檢測(cè)方法研究進(jìn)展

甲基苯丙胺（Methamphetamine，MA），是微有苦味的結(jié)晶體，因其外觀形似冰，俗稱“冰毒”，屬于苯丙胺類毒品，具有藥物依賴性（主要是精神依賴性）、中樞神經(jīng)興奮、致幻、食欲抑制和擬交感能效應(yīng)等藥理、毒理學(xué)特征，是聯(lián)合國精神藥品公約管制的精神活性物質(zhì)。根據(jù)《2016年中國毒品形勢(shì)報(bào)告》，冰毒已經(jīng)取代海洛因成為我國目前濫用程度最為嚴(yán)重的毒品，因此加強(qiáng)對(duì)甲基苯丙胺濫用的檢驗(yàn)對(duì)嚴(yán)厲打擊涉冰毒違法犯罪活動(dòng)具有重要的意義，本文即對(duì)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)甲基苯丙胺的方法進(jìn)行綜述。

氣相色譜（GC）法

GC具有高靈敏度、高選擇性等優(yōu)點(diǎn)，可以與多種檢測(cè)器聯(lián)用，由于MA含氮元素，因此NPD比FID對(duì)MA具有更好的選擇性和響應(yīng)，這一點(diǎn)在沈敏等人的實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí)，尿液樣本堿化后，用環(huán)己烷提取，GC/FID法對(duì)MA的檢出限為25ng/mL，而GC/NPD法對(duì)MA的檢出限為5ng/mL。

由于MA的熱穩(wěn)定性較差，通過衍生化可提升其熱穩(wěn)定性，從而改善其色譜行為。趙冰等人用環(huán)己烷提取尿液樣本中的MA后，分別用幾種?；噭┭苌?，選用ECD檢測(cè)器進(jìn)行GC/ECD分析，發(fā)現(xiàn)3，5-二硝基苯甲酰衍生化方法靈敏度最高，檢出限可達(dá)到5.8ng/mL。李雯佳等人堿化血液和尿液樣本后，用氯仿提取，三氟乙酸酐衍生化后，采用8CB熔融石英毛細(xì)管柱的GC/NPD法分析，最低可以檢測(cè)到血液中0.8ng/mL和尿液中1.6ng/mL的MA。

改變從生物檢材中提取MA的方法，可以回得較高的萃取率。孫洪鋒等人采用微波萃取法萃取血液樣品中的MA，萃取率達(dá)到81.4%，經(jīng)過GC/FID法分析，血液樣品中的MA的檢測(cè)限為220ng/mL。郭鵬等人采用固相萃取技術(shù)萃取尿液樣品中的MA，直接用AB-5毛細(xì)管柱的GC/NPD法進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)MA的質(zhì)量濃度與其峰面積在0.1～10.0μg/mL范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，尿液樣品中MA的檢出限為62 ng/mL，萃取率達(dá)到87.3%。而劉曉云等人用環(huán)己烷提取堿化的尿液樣品后直接進(jìn)樣，用DB-5MS毛細(xì)管柱的GC法分析，尿液樣品中的MA回收率達(dá)到79.82%。

在實(shí)際案件中，提取的生物檢材的種類對(duì)MA的檢驗(yàn)具有重要的作用。趙蒙等人采用固相萃取方法從血液、尿液、胃內(nèi)容物、肝、腦組織中提取MA，用HP-5石英毛細(xì)管柱進(jìn)行GC/NPD分析，從而發(fā)現(xiàn)了口服MA引起的中毒途徑情況下，胃內(nèi)容物中MA含量最高，其次是尿液、肝、腦、血液組織，證實(shí)了胃內(nèi)容物或尿液是此類中毒案件的理想檢材。

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）法

GC-MS法是將毛細(xì)管氣相色譜的高分離性與質(zhì)譜儀的高靈敏度相結(jié)合，同事參照標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)數(shù)據(jù)庫實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)樣本的定性和定量分析，具有快速、準(zhǔn)確、重復(fù)性好、多種毒物可同時(shí)分析等優(yōu)點(diǎn)，被認(rèn)為是最可靠的定性技術(shù)，從而在藥物分析與毒物分析中得到了廣泛的應(yīng)用。

王玉瑾等人將生物樣本堿化后經(jīng)乙醚提取，三氟乙酸酐衍生化后，程序升溫，色譜傳輸線溫度250℃，建立基于GC-MS儀器對(duì)MA的定性和定量的方法，測(cè)得MA在血清中的線性范圍為0.01～5.0μg/mL，檢出限為0.005μg/ mL，在尿液中的線性范圍為0.1～50.0μg/mL，回收率超過74.3%。陳朝陽等人采用同樣的方法，最低可以檢測(cè)到血漿中0.005μg/mL的MA和肝臟中0.01μg/mL的MA，但是，回收率超過92%。曹潔等人用環(huán)己烷在40℃條件下萃取尿液樣本中的MA，用七氟丁酸酐衍生化以后，將色譜傳輸線溫度升到280℃，建立基于GC-MS/MS的多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）分析方法，線性范圍為0.1～25μg/mL，檢出限能達(dá)到0.04μg/mL。

李宏森等人利用頂空固相微萃取技術(shù)直接萃取尿液中的MA，優(yōu)化萃取條件后發(fā)現(xiàn)MA在0.05～2μg/mL濃度范圍內(nèi)線性良好，檢測(cè)限為0.02 ng/mL，一步完成取樣、萃取、富集和進(jìn)樣。李學(xué)博等人用KOH/NaCl溶液處理尿液樣本后，用SPME萃取頭萃取MA，用GC-MS法檢測(cè)，其線性范圍為0.002～2μg/mL，MA的檢測(cè)限為0.5ng/mL，而且將每份樣品分析測(cè)定的總時(shí)間限定在8min以內(nèi)。同樣，朱丹等人將毛發(fā)在堿液中消解后用氯仿漩渦提取，離心后抽取有機(jī)相進(jìn)行GC-MS法檢測(cè)，MA的檢出限可達(dá)500pg/ mL。劉豐將尿液樣本堿化后，室溫下用乙酸乙酯萃取后濃縮，直接進(jìn)樣，測(cè)得MA在尿液中的線性濃度范圍為0.5～20μg/ mL，檢測(cè)限為0.05μg/mL，避免了衍生化和固相萃取，實(shí)現(xiàn)了快速定性、定量檢測(cè)尿液中的MA。

質(zhì)譜分析（MS）法

基質(zhì)輔助激光解吸飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOFMS）是一種新型的質(zhì)譜分析技術(shù)，與傳統(tǒng)的色譜分析方法相比，其除了具有高靈敏度的優(yōu)點(diǎn)外，因?yàn)闊o色譜分離過程，還具有分析速度快、適合大量樣品同時(shí)分析的特點(diǎn)。MALDI-TOF-MS法采用碳納米管作為基質(zhì)，可以克服常規(guī)基質(zhì)帶來的干擾。沈保華等人用碳納米管直接提取尿液和酸解頭發(fā)液體中的MA，應(yīng)用MALDI-TOF-MS法分析，測(cè)得尿液中MA的線性范圍為0.5～100.0μg/ mL，頭發(fā)中MA的線性范圍為0.4～60.0ng/mg，并對(duì)實(shí)際案例中的尿液和頭發(fā)樣本進(jìn)行了檢測(cè)，效果良好。

高效液相色譜（HPLC）法

高效液相色譜技術(shù)是以不同極性的單一溶劑或混合溶液作為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)泵入裝有固定相的色譜柱，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，樣品中的各組分不停地在兩相之間進(jìn)行吸附-解吸附的分配過程，從而被分離進(jìn)入檢測(cè)器。色譜柱、熒光衍生化技術(shù)和檢測(cè)器的發(fā)展，促進(jìn)了其在MA檢測(cè)領(lǐng)域的發(fā)展。Dirbashi等利用實(shí)驗(yàn)室合成的熒光衍生化試劑先后建立了尿液、毛發(fā)中MA及其代謝產(chǎn)物的HPLC分析方法。傅強(qiáng)等人利用C18反相柱和二極管陣列檢測(cè)器（DAD）檢測(cè)器建立了MA的定量方法，發(fā)現(xiàn)MA在1.4～270μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，檢出限為0.73μg/mL。常穎等人采用XR-ODS柱和SPDM20A型檢測(cè)器建立了MA的超快液相色譜（UFLC）檢測(cè)技術(shù)。UPLC技術(shù)則是利用HPLC技術(shù)和色譜柱填充物低于2mm的小顆粒技術(shù)實(shí)現(xiàn)高效分離的，研究中發(fā)現(xiàn)MA在1～5000μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，檢出限為0.68μg/mL。而張小婷等人利用UPLC同時(shí)篩選檢驗(yàn)MA等七種常見毒品，MA的檢出限可達(dá)0.2ng/mL。

如果對(duì)復(fù)雜樣品先進(jìn)行前處理，可進(jìn)一步提升HPLC法分析的靈敏度。朱波等人將尿液堿化后離心，上清用活化的分子印跡固相萃取柱凈化，洗脫液進(jìn)行HPLC分析，可檢測(cè)到5ng/mL的MA，而且在0.05～15.0μg/mL范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。然后朱波使用Oasis? MCX固相萃取小柱對(duì)血液中的MA進(jìn)行分離、富集，HPLC法可檢測(cè)到10ng/mL的MA。楊小紅等人使用Waters OASISTM HLB萃取小柱萃取血液樣品中的MA，HPLC法分析表明MA在血液中的濃度在0.036～1.438μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回收率超過96.1%。

高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC-MS）法

高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC-MS）技術(shù)是以HPLC作為分離系統(tǒng)，MS作為檢測(cè)系統(tǒng)，對(duì)揮發(fā)性差、熱穩(wěn)定差的極性化合物和大分子化合物具有較好的分析效果。

陳躍等人采用乙腈沉淀血液、尿液和唾液中的蛋白后，離心所得的上清進(jìn)行HPLC-MS/MS分析，以多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式掃描，有效降低了基質(zhì)本底的干擾，發(fā)現(xiàn)MA在1～500ng/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，MA的檢出限為0.1ng/mL。謝普等人將吸毒人員頭發(fā)樣品清洗、剪碎后，用甲醇、乙腈和甲酸銨的混合溶液提取，進(jìn)行UPLC-MS/ MS分析，通過監(jiān)測(cè)MA的定量離子對(duì)和定性離子對(duì)，能檢測(cè)到0.498 ng/mL的MA。向麗君等人以甲醇為提取液，分別提取了濾紙、A4打印紙、塑料、玻璃載體上的血痕樣品中的MA，然后進(jìn)行UPLC-MS/MS分析，可在濾紙和A4打印紙上提取的血痕樣品中檢測(cè)到0.4ng/mL的MA。

新技術(shù)在MA檢測(cè)中的應(yīng)用

拉曼光譜分析技術(shù)作為檢測(cè)物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的一種無損分析方法， 可以快速、簡單地進(jìn)行。張金萍等人對(duì)市售的可樂、脈動(dòng)、橙汁三種飲料進(jìn)行甲基苯丙胺不同加標(biāo)濃度的表面增強(qiáng)拉曼光譜檢測(cè)，比對(duì)加標(biāo)前后的拉曼光譜圖，確定991cm-1、1016cm-1、1201 cm-1特征峰可以作為鑒定此3種飲料中是否含有甲基苯丙胺的依據(jù)。王磊等人采用表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)，將自適應(yīng)平滑濾波器和結(jié)合小波變換的支持向量機(jī)分類器有機(jī)組合，建立了低信噪比拉曼光譜的模式識(shí)別方法，實(shí)現(xiàn)了尿液中MA的定性微量分析。

電泳技術(shù)分離良好，空白無干擾。龔飛君等人用Oasis HLB固相萃取小柱直接提取血液中的MA，建立了毛細(xì)管區(qū)帶電泳檢驗(yàn)方法，線性范圍為5～75μg/mL。

納米顆粒優(yōu)異的電學(xué)、光學(xué)性質(zhì)使其成為構(gòu)建分析策略的新寵。劉曉等人利用上轉(zhuǎn)換發(fā)光納米顆粒為生物示蹤物，競爭模式免疫層析作為檢測(cè)平臺(tái)，建立了對(duì)尿液中MA進(jìn)行定性、定量檢測(cè)的方法，在常規(guī)檢測(cè)條件下對(duì)MA的敏感性為100ng/mL，在10～5000 ng/mL之間可精確定量MA。蔣琳以魯米諾作為免疫探針，ITO作為基板，3-氨丙基三甲氧基硅烷作為ITO和金納米顆粒的連接劑，構(gòu)建MA的電化學(xué)發(fā)光免疫傳感器。傳感器在2～500 ng/mL有良好的線性響應(yīng)，檢測(cè)限為0.3ng/mL，具有良好的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性。

展望

甲基苯丙胺的濫用日益嚴(yán)重，與其關(guān)聯(lián)的犯罪愈加猖獗，這就使得甲基苯丙胺的檢驗(yàn)格外重要。甲基苯丙胺的檢驗(yàn)在分析化學(xué)、生物技術(shù)、儀器分析等學(xué)科的輔助下已經(jīng)日益完善，但仍然存在一些不足。甲基苯丙胺的檢驗(yàn)新技術(shù)將致力于提高特異性和靈敏度，減少假陽性，建立高機(jī)動(dòng)性的檢驗(yàn)平臺(tái)，以及提高現(xiàn)場辦案精準(zhǔn)度。

10.3969/j.issn.1001- 8972.2016.19.029