羅　莉　鄭武洪　李　玲　練桂麗　謝良地

(福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院干部病房，福建　福州　350005)

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·基礎(chǔ)研究·

脂聯(lián)素基因修飾的脂肪干細(xì)胞對野百合堿誘導(dǎo)的肺動脈高壓大鼠代謝模式的影響

羅莉鄭武洪1李玲1練桂麗2謝良地

(福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院干部病房，福建福州350005)

目的探討脂聯(lián)素(APN)基因修飾的脂肪干細(xì)胞(ADSCs)移植對肺動脈高壓(PAH)大鼠代謝模式的影響。方法40只SD大鼠，隨機分為正常對照組(NC組)、PAH組、ADSCs組、導(dǎo)入空載慢病毒的脂肪干細(xì)胞治療組(ADSCs-V組)和APN基因修飾的脂肪干細(xì)胞治療組(ADSCs-APN組)。野百合堿(MCT)腹腔注射構(gòu)建大鼠PAH模型，建模成功后14 d ADSCs組、ADSCs-V組和ADSCs-APN組分別經(jīng)頸外靜脈注射1 ml濃度為1×106cells/ml的ADSCs、ADSCs-V和ADSCs-APN。其他兩組注射等量PBS。治療3 w后分別收集各組大鼠血清，采用磁共振(NMR)技術(shù)進(jìn)行血清NMR氫譜檢測分析各組代謝物濃度。采用Chenomx NMR Suite 8.0軟件對NMR數(shù)據(jù)進(jìn)行PCA、PLS-DA統(tǒng)計分析，利用排列檢測方法評價PLS-DA模型的質(zhì)量。結(jié)果PAH組較正常對照組大鼠血清代謝物中血清葡萄糖、乳酸濃度明顯升高，血清丙氨酸濃度明顯降低。ADSCs-APN移植治療能降低PAH大鼠血清葡萄糖、乳酸濃度，升高血清丙氨酸濃度。單純ADSCs移植治療不能明顯改變PAH大鼠代謝模式。結(jié)論APN基因修飾ADSCs移植治療可以改善MCT誘導(dǎo)的PAH大鼠的Warburg效應(yīng)和丙氨酸代謝異常，這是其進(jìn)一步降低肺動脈壓和改善血管重構(gòu)的重要機制。單純ADSCs移植治療對PAH大鼠的代謝模式影響不明顯。

野百合堿；肺動脈高壓；脂聯(lián)素；脂肪干細(xì)胞

肺動脈高壓(PAH)發(fā)病機制復(fù)雜，涉及多種基因突變、炎癥、血流動力學(xué)的改變、受體及其信號通路的異常等〔1〕，其發(fā)病機制至今尚未闡明。研究表明，能量代謝紊亂是PAH重要的發(fā)病機制之一〔2〕。本課題組先前曾運用基于磁共振(NMR)技術(shù)的代謝組學(xué)方法發(fā)現(xiàn)野百合堿(MCT)誘導(dǎo)的PAH大鼠出現(xiàn)明顯的代謝模式改變〔3〕，且發(fā)現(xiàn)脂聯(lián)素(APN)能有效降低肺動脈壓，而APN是脂肪細(xì)胞分泌的一種脂肪因子，它在調(diào)節(jié)代謝方面具有很強的生物學(xué)作用。本研究在先前研究的基礎(chǔ)上利用基于NMR的代謝組學(xué)技術(shù)，采用ADSCs作為APN基因的載體，將APN基因修飾的脂肪干細(xì)胞(ADSCs)移植治療PAH大鼠，觀察其對血清代謝組學(xué)變化的影響，并探討可能的機制。

1　材料與方法

1.1對象及試劑實驗動物：選取8周齡雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠80只，體重200～230 g，購自上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司，許可證號：SCXK(滬)2012。飼養(yǎng)條件：恒溫(22±2℃)、恒濕、人工光照明暗各12 h，24 h自由取食和飲水。實驗動物隨機分為正常對照組(NC組)、PAH組、ADSCs組、空載慢病毒的脂肪干細(xì)胞移植治療組(ADSCs-V組)和APN基因修飾的脂肪干細(xì)胞移植治療組(APDSCs-APN組)，每組8只。

實驗試劑：液體石蠟、松節(jié)油、梯度乙醇溶液(上海譜振生物科技有限公司，中國)；鹽酸乙醇分化液(南京森貝伽生物科技有限公司，中國)；稀氨水(濟南鑫利化工有限公司，中國)；二甲苯溶液(上海研域生物科技有限公司，中國)；重水(99.9%氘代)、25%氘代甲醇、75%氘代氯仿(Cambridge Isotopic Laboratory，英國)；磷酸氫二鈉、檸檬酸鈉、檸檬酸(上海國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，中國)；MICRO 22R Hettich 離心機(Hettich公司，德國)；安捷倫核磁共振波譜儀(安捷倫公司，美國)。

1.2實驗方法模型制備：本研究小組前期采用MCT腹腔注射方法成功構(gòu)建PAH模型〔4〕：PAH組、ADSCs組、ADSCs-V組和ADSCs-APN組均給予一次性腹腔注射野百合堿，MCT量按照40 mg/kg建立PAH模型，對照組給予同等劑量的生理鹽水腹腔注射。其中ADSCs-V組、ADSCs-APN組建模過程中分別有1、2只鼠死亡，建模成功率為93.89%。ADSCs組：MCT 注射后14 d，經(jīng)左頸外靜脈一次性注射入1 ml含有1×106cells/ml ADSCs的細(xì)胞懸液；ADSCs-V 組：MCT 注射后14 d，經(jīng)左頸外靜脈一次性注射入1 ml含有1×106個空載慢病毒ADSCs細(xì)胞懸液；ADSCs-APN組：MCT 注射后14 d，經(jīng)左頸外靜脈一次性注射入1 ml含有1×106個攜帶APN基因的ADSCs 細(xì)胞懸液。NC 組和PAH 組經(jīng)左頸外靜脈一次性給予相同體積的細(xì)胞培養(yǎng)基。各組分別于細(xì)胞移植后3 w檢測血清代謝物指標(biāo)。

樣本準(zhǔn)備與磁共振譜采集：經(jīng)大鼠腹主動脈采集各組大鼠的血清樣本，靜置離心后吸取上清，-80℃儲存?zhèn)溆?；將備用血清?℃、13 000 r/min再次離心30 s，去除殘留少量血細(xì)胞、細(xì)胞碎片，取上層血清樣本置于超濾膜中，置于離心機中于4℃，13 000 r/min離心過濾30 min；從每個離心過濾后的樣本中取濾液450 μl置于各自編號的離心管中，每個離心管中再各加入50 μl DSS，混勻、離心后加到核磁管中，上機采集各組磁共振圖譜。

1.3NMR譜處理與模式識別分析各血清采集參數(shù)及其具體數(shù)據(jù)設(shè)置：Temperature(K)：298.15；Magnet Frequency(MHz)：599.83；Transients/Scans：64；Frequency Domain Size：65 536；Spectral Width：7 225.434；Time Domain Size：28 902；Pulse Sequence：metnoesy。

數(shù)據(jù)處理：為確定NMR譜中所有代謝物的信息，將1H NMR自由感應(yīng)衰減(FID)信號導(dǎo)入到Chenomx NMR suit(version 8.0，Chenomx,Edmonton，Canada)軟件中〔5〕，經(jīng)傅立葉轉(zhuǎn)換，調(diào)整相位及校正基線。以DSS-d6峰(0.0 ppm)作為全部NMR譜圖化學(xué)位移的標(biāo)準(zhǔn)，并對其進(jìn)行反轉(zhuǎn)卷積操作，調(diào)整譜圖峰形(CSI)。根據(jù)1H NMR譜圖中信號的相關(guān)信息將代謝物和相應(yīng)的絕對濃度值導(dǎo)出到EXCEL表格中，得到血清樣本的變量矩陣。通過已知的 DSS 內(nèi)標(biāo)的濃度及其在磁共振譜圖上的峰面積，再結(jié)合不同代謝物在核磁譜圖上的峰面積，經(jīng)由公式換算得到代謝物的絕對濃度。

數(shù)據(jù)分析：將變量矩陣作為源數(shù)據(jù)。首先，用主成分分析(PCA)區(qū)分不同組別的代謝模式，而后進(jìn)行偏最小二乘判別分析(PLS-DA)。PCA 和 PLS-DA 分別通過R語言中PCA methods Bioconductor 包和PLS包完成數(shù)據(jù)分析，最后通過 ggplot2 包進(jìn)行可視化作圖。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法采用Chenomx NMR Suite 8.0軟件對NMR數(shù)據(jù)進(jìn)行PCA、PLS-DA統(tǒng)計分析，利用排列檢測方法評價PLS-DA模型的質(zhì)量，P<0.001表示模型建立水平很好。用SPSS19.0軟件對所測具體代謝物濃度數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，組間比較采用單因素方差分析(One-way ANOVA)。

2　結(jié)　果

2.1代謝物歸屬譜圖所檢測大鼠動脈血清樣本的信號歸屬片段歸屬范圍示意圖。見圖1。

A:歸屬范圍0.0～3.0 ppm；B:歸屬范圍3.0～5.0 ppm；C:歸屬范圍5.0～10.0 ppm；歸屬的代謝物編號標(biāo)識：1：2-羥基丁酸；2：2-羥基異丁酸；3：羥基苯丙酮異戊酸鹽；4：羥基戊酸乙酯；5：戊鄰?fù)猁}；6：3-羥基丁酸酯；7：醋酸鹽；8：乙酰乙酸鹽；9：丙酮；10：丙氨酸；11：精氨酸；12：抗壞血酸鹽；13：天冬氨酸鹽；14：甜菜堿；15：丁酸鹽；16：肉毒堿；17：膽堿；18：檸檬酸鹽；19：瓜氨酸；20：肌酸；21：肌酐；22：胞嘧啶核苷：23：二甲胺；24：乙醇；25：甲酸鹽；26：海藻糖；27：延胡索酸鹽；28：葡萄糖；29：谷氨酸鹽；30：谷氨酸鹽；甘油；31：氨基乙酸；32：醋酸鹽硝酸胍；33：異丁酸鹽；34：異亮氨酸；35：乳酸鹽；36：亮氨酸；37：賴氨酸；38：丙二酸鹽；39：甘露糖；40：甲醇；41：蛋氨酸；42：乙基琥珀酸鹽；43：苯基丙氨酸；44：脯氨酸；45：丙二醇；46：丙酮酸鹽；47：琥珀酸鹽；48：葫蘆巴堿；49：色氨酸；50：酪氨酸；51：丙三氧基膽堿磷酸；52：尿素；53：纈氨酸；54：肌醇圖1　大鼠動脈血清樣本的信號歸屬片段

2.2APN基因修飾的ADSCs PAH大鼠代謝模式的變化PCA分析：對大鼠動脈血清樣本進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，采集 NMR 譜圖，通過 Chenomx NMR Suite 8.0對樣本進(jìn)行分析，確定了樣本中代謝物的種類和濃度。樣本的數(shù)據(jù)使用 Pareto Scaling 法進(jìn)行歸一化，通過使用 PCA 分析得到相應(yīng)的得分圖和載荷圖見圖2。PCA得分圖中不同顏色代表不同的樣本組，樣本的團(tuán)聚與離散一方面表現(xiàn)了樣本的重復(fù)性，另一方面也體現(xiàn)了樣本組間的代謝輪廓相似性，五組樣本有分開趨勢。載荷圖反映導(dǎo)致樣本在 PC 方向上分開的差異代謝物，圖中離中心點越遠(yuǎn)，對區(qū)分樣本所做的貢獻(xiàn)也越大。因此可以看出，葡萄糖(Glucose)、乳酸(Lactate)、尿素(Urea)、琥珀酸鹽(Succinate)、丙酮酸(Pyruvate)等多個代謝物對樣本間的區(qū)分做出了重要貢獻(xiàn)。

PLS-DA分析：PLS-DA得分圖中，不同顏色代表不同的樣本組。樣本的團(tuán)聚與離散一方面表現(xiàn)了樣本的重復(fù)性，另一方面也體現(xiàn)了樣本組間的代謝輪廓相似性。NC組、ADSCs-APN組樣本的代謝輪廓與PAH、ADSCs和ADSCs-V組是可以區(qū)分的，NC組與PAH、ADSCs和ADSCs-V組的代謝輪廓能夠很好地區(qū)分，與ADSCs-APN組的代謝輪廓靠近；PAH組與ADSCs和ADSCs-V組的代謝輪廓基本重疊在一起而不能區(qū)分，與ADSCs-APN組的代謝輪廓能夠很好的區(qū)分；ADSCs組與ADSCs-V組的代謝輪廓基本重疊在一起而不能區(qū)分，與ADSCs-APN組的代謝輪廓能夠很好的區(qū)分；ADSCs-V組與ADSCs-APN組的代謝輪廓能夠很好的區(qū)分。與得分圖對應(yīng)的載荷圖可以看出，Glucose、Lactate、Alanine等代謝物離中心點越遠(yuǎn)，對樣本間的區(qū)分的貢獻(xiàn)也越大。見圖3。

A：ADSCs組；B：PAH組；C：ADSCs-V組；D：NC組；E：ADSCs-APN組；下圖同圖2　ADSCs和APN基因修飾的ADSCs移植治療后PAH大鼠動脈血清樣本PCA得分圖及載荷圖

圖3　ADSCs和APN基因修飾的ADSCs移植治療后PAH大鼠動脈血清樣本PLS-DA得分圖及載荷圖

表1列出了前26位代謝物的Component 1 的 VIP(Variable Importance in Projection)值，可以看出Glucose、Lactate和Alanine在這五組標(biāo)本中有明顯差異。VIP是變量權(quán)重重要性排序，用以提供最主要的變量以及它們在各組里面的重要程度。VIP 值越大說明它們在樣本的區(qū)分中所作的貢獻(xiàn)越大，一般默認(rèn)VIP>1的變量具有顯著性差異。

表1　Component 1 的 VIP值

2.3APN基因修飾的APSCs PAH大鼠代謝模式的變化通過對第一主成分上的變量計算變量權(quán)重重要性排序值，從中篩選出VIP值>1的變量并進(jìn)行指認(rèn)，找出造成這些組間代謝模式差異的代謝物：與NC組〔(5.88±1.12)mmol/L、(3.84±0.58)mmol/L〕相比,PAH組〔(7.98±1.16)mmol/L、(5.14±1.54)mmol/L〕、ADSCs組〔(8.80±2.78)mmol/L、(4.97±1.30)mmol/L〕和ADSCs-V組〔(7.68±0.76)mmol/L、(6.02±0.74)mmol/L〕的血清葡萄糖〔(5.78±1.08)mmol/L〕和乳酸〔(3.59±0.53)mmol/L〕濃度顯著增高(P<0.05)，ADSCs-APN組血清葡萄糖和乳酸濃度變化不明顯(P>0.05)；與PAH組相比，ADSCs組和ADSCs-V組的血清葡萄糖和乳酸濃度無明顯變化(P>0.05)，ADSCs-APN組的血清葡萄糖和乳酸濃度顯著降低(P<0.05)；與ADSCs組相比，ADSCs-V組的血清葡萄糖和乳酸濃度無明顯變化(P>0.05)，ADSCs-APN組的血清葡萄糖和乳酸濃度明顯降低(P<0.05)；與ADSCs-V組相比，ADSCs-APN組的血清葡萄糖和乳酸濃度明顯降低(P<0.05)。

與NC組〔(0.42±0.09)mmol/L〕相比，PAH組〔(0.31±0.07)mmol/L〕、ADSCs組〔(0.27±0.07)mmol/L〕和ADSCs-V組〔(0.32±0.05)mmol/L〕的血清丙氨酸濃度〔(0.43±0.08)mmol/L〕顯著降低(P<0.05)，ADSCs-APN組血清丙氨酸濃度變化不明顯(P>0.05)；與PAH組相比，ADSCs組和ADSCs-V組的血清丙氨酸濃度變化不明顯(P>0.05)，ADSCs-APN組的血清丙氨酸濃度明顯升高(P<0.05)；與ADSCs組相比，ADSCs-V組血清丙氨酸變化不明顯(P>0.05)，ADSCs-APN組的血清丙氨酸濃度明顯升高(P<0.05)；與ADSCs-V組相比，ADSCs-APN組的血清丙氨酸濃度明顯升高(P<0.05)。

3　討　論

自我增殖能力和細(xì)胞能量異常是腫瘤細(xì)胞非常重要的2個特征〔6〕。研究發(fā)現(xiàn)PAH〔7〕，從細(xì)胞增殖模式及代謝表型方面均與腫瘤發(fā)生發(fā)展過程有相似之處，例如血管壁細(xì)胞過度增殖和凋亡減少〔8〕以及細(xì)胞能量代謝的異?！?〕。德國學(xué)者Warburg等〔10〕提出腫瘤細(xì)胞能量代謝特性，他指出腫瘤細(xì)胞能量代謝的方式極為特別，即使在氧充足的條件下，腫瘤細(xì)胞仍通過很不經(jīng)濟的能量供給方式(糖酵解)作為自身供能，這就是著名的“Warburg 效應(yīng)”。PAH 的血管細(xì)胞攝取能量的方式與腫瘤細(xì)胞極為類似，也主要是通過糖酵解而不是氧化磷酸化來產(chǎn)生能量的〔9〕。有研究利用氟化去氧葡萄糖正電子攝影斷層掃描技術(shù)發(fā)現(xiàn)，在 PAH 患者肺組織的葡萄糖攝取量增加，Warburg 效應(yīng)增強〔11〕。這種產(chǎn)能效率相對較低的能量代謝模式卻是細(xì)胞異常增殖所必需的,它不僅提供細(xì)胞快速增殖所必需的能量,還為它們提供了細(xì)胞合成所需的原料。因此這種與腫瘤細(xì)胞類似的增殖模式和代謝表型也被稱之為 PAH的腫瘤性。

本研究前期階段證實了MCT誘導(dǎo)的PAH大鼠存在Warburg效應(yīng)，且在用藥物改善了Warburg效應(yīng)后肺小動脈重塑也隨之改善，表明Warburg效應(yīng)可能是肺小動脈重塑的重要因素之一〔3〕。這可能是由PAH時肺動脈細(xì)胞異常增殖造成的能量高消耗高需求，而Warburg效應(yīng)能夠提供這種能量需求決定的。因此，一旦通過某種外來干預(yù)因素改善或消除Warburg效應(yīng)，異常增殖的肺動脈細(xì)胞將由此失去充足的能量供應(yīng)而導(dǎo)致增殖減緩甚至停止，從而改善肺血管重構(gòu)而達(dá)到抗肺動脈高壓的作用。機體的疾病狀態(tài)會使體內(nèi)的代謝物發(fā)生變化，代謝組學(xué)試圖通過研究比較體內(nèi)生理與疾病狀態(tài)下的代謝產(chǎn)物的變化，從而發(fā)現(xiàn)能夠反映這些疾病代謝表征的變化。本研究采用基于NMR的代謝組學(xué)方法研究，發(fā)現(xiàn)NC組和PAH組的代謝輪廓明顯不同，共涉及50多種異常的糖、脂及氨基酸代謝物，對代謝物經(jīng)過PCA和PLS-DA分析后發(fā)現(xiàn)，PAH大鼠血清葡萄糖，乳酸含量明顯升高，推測可能PAH時肺血管細(xì)胞的異常增殖狀態(tài)造成對葡萄糖的需求增加，糖酵解產(chǎn)物乳酸堆積增多，從而再次證實PAH大鼠存在Warburg效應(yīng)。

本文觀察到PAH組與ADSCs和ADSCs-V組的代謝輪廓相似，在PLS-DA得分圖第一主成分上三者基本重疊在一起而不能區(qū)分的開，提示ADSCs、ADSCs-V移植治療不能明顯改善PAH的異常代謝模式，且說明ADSCs、ADSCs-V可能是通過獨立于代謝組學(xué)的其他途徑，比如增加內(nèi)皮細(xì)胞eNOS的表達(dá)，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的修復(fù)，從而發(fā)揮保護(hù)血管的生物學(xué)效應(yīng)；另一方面，ADSCs和ADSCs-V組代謝輪廓的相似性則表明了慢病毒作為一種載體，本身不會影響宿主的代謝，說明慢病毒是一種比較安全有效的基因治療載體和研究外源基因?qū)氲目煽?、穩(wěn)定、實用的科研工具〔12〕。

在本研究中，還發(fā)現(xiàn)ADSCs-APN組與PAH、ADSCs和ADSCs-V組的代謝輪廓能夠很好地區(qū)分，而NC組的代謝輪廓則相互靠近，提示ADSCs-APN移植可能改善PAH異常的代謝譜使其朝著正常的代謝模式轉(zhuǎn)變。近年發(fā)現(xiàn)代謝紊亂狀態(tài)如代謝綜合征、胰島素抵抗等在PAH的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用，脂肪組織及其分泌的脂肪因子特別是APN、過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)γ等的相互作用能夠通過影響PAH的糖脂代謝而參與其轉(zhuǎn)歸〔13〕。本研究發(fā)現(xiàn)ADSCs-APN組的血清APN水平顯著升高。APN具有胰島素促敏、調(diào)節(jié)糖脂代謝、促進(jìn)代謝優(yōu)化等重要作用，能夠調(diào)節(jié)代謝綜合征中惡性循環(huán)相互作用的各個環(huán)節(jié)，從而起到抗糖尿病、抗炎、抗氧化應(yīng)激等心血管系統(tǒng)保護(hù)效應(yīng)。在這些效應(yīng)中，代謝調(diào)節(jié)是關(guān)鍵〔14〕。因此，血清中顯著增高的APN水平能夠調(diào)節(jié)PAH時異常的血清代謝譜使其得到明顯的改善，這可能是ADSCs-APN移植治療能夠顯著改善PAH大鼠異常血清代謝譜的重要機制。

目前，有諸多關(guān)于ADSCs對MCT誘導(dǎo)PAH大鼠代謝、功能的研究，并發(fā)現(xiàn)ADSCs因其具有多向分化潛能及分泌功能、并能分泌促血管形成物質(zhì)，有效促進(jìn)血管形成，改變肺部血流，有效降低MCT誘發(fā)的大鼠ADSCs血清IL-6、TNF-α等炎性介質(zhì)的水平，并抑制血管的重構(gòu)、減少右心肥大，而且還發(fā)現(xiàn)ADSCs降低肺動脈壓可能與鈣離子通道變化有關(guān)〔4,15〕；本研究中通過采用APN基因修飾的脂肪干細(xì)胞對MCT誘導(dǎo)APN大鼠進(jìn)行干預(yù)，因APN具有胰島素促敏、調(diào)節(jié)糖脂代謝、促進(jìn)代謝優(yōu)化等重要作用，因此，與以往研究側(cè)重于損傷后的修復(fù)機制不同，其機制在于APN基因修飾的脂肪干細(xì)胞是從基因水平上調(diào)節(jié)MCT誘導(dǎo)的代謝綜合征惡性循環(huán)的各個環(huán)節(jié)，使其代謝譜向正常模式轉(zhuǎn)變，更能有效改善PAH大鼠代謝機制。

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〔2016-02-11修回〕

(編輯袁左鳴)

Effect of adipose stem cells and APN gene-modified adipose stem cells transplantation on the metabolic profiles in MCT induced PAH rats

LUO Li,ZHENG Wu-Hong,LI Ling,et al.

Cadre Ward，the First Hospital Affiliated to Fuzhou Medical University,Fuzhou 350005,Fujian,China

ObjectiveTo observe the effect of adipose stem cells (ADSCs) and APN gene-modified ADSCs transplantation on the metabolic profiles in MCT induced PAH rats.MethodsForty SD rats were randomly divided into normal control (NC group),pulmonary hypertension group (PAH group),ADSCs therapy group (ADSCs group),empty lentiviral vector infected ADSCs group (ADSCs-V group) and APN gene modified ADSCs (ADSCs-APN group).1.0×106cells/ml suspension,including with ADSCs,empty lentiviral vector infected ADSCs or APN gene modified ADSCs,were injected into ADSCs group,ADSCs-V group or ADSCs-APN group through left jugular vein,respectively.Three weeks after cells transplantation,the serum was collected and the differences of plasma metabolites were detected by NMR-based metabonomics technology.Chenomx NMR Suite 8.0 software was used,the data of metabolites were analyzed by principal components analysis (PCA) and partial least squares-discriminate analysis (PLS-DA).The quality of PLS-DA model was evaluated by arrangement detection test (Permutation test) method.ResultsThe levels of serum glucose and serum lactate were significantly elevated,and the levels of serum alanine were significantly reduced in PAH rats.Transplantation of APN gene-modified ADSCs could significantly decrease the levels of serum glucose and serum lactate and increase the levels of serum alanine.ADSCs transplantation therapy alone did not significantly alter the metabolic profiles in PAH rats.ConclusionsThe transplantation of APN gene-modified ADSCs could improve Warburg effect and alanine metabolism in PAH rats,which is an important mechanism to further reduce pulmonary artery pressure and improve vascular remodeling.ADSCs transplantation obviously has no effect on metabolism profiles in PAH rats.

Monocrotaline;Pulmonary hypertension;Adiponectin;ADSCs

國家自然科學(xué)基金項目(81270111/H0109);國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項目(81400189);福建省衛(wèi)生系統(tǒng)中青年骨干人才培養(yǎng)項目資助計劃(No.2013-ZQN-JC-21)

謝良地(1962-)，男，教授，博士，主要從事心血管疾病研究。

羅莉(1975-)，女，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事內(nèi)分泌代謝方面的研究。

R543.2

A

1005-9202(2016)17-4137-05；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.17.001

1福建醫(yī)科大學(xué)2福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院高血壓研究所