馬瑋瑋，張晨麗， 張 煦

(蘭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)研究所，蘭州 730000；*通訊作者，E-mail:zhangxu64@163.com)

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mt-P53及Mcm7、Aurora-A在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及其意義

馬瑋瑋，張晨麗， 張 煦

(蘭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)研究所，蘭州 730000；*通訊作者，E-mail:zhangxu64@163.com)

目的 探討mt-P53、Mcm7及Aurora-A在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)的意義及其相互關(guān)系。 方法 采用免疫組織化學(xué)法(SP法)檢測60例結(jié)直腸癌、30例結(jié)直腸腺瘤和10例正常結(jié)直腸組織中mt-P53、Mcm7及Aurora-A的表達(dá)情況。 結(jié)果 ①mt-P53、Mcm7及Aurora-A在結(jié)直腸癌、結(jié)直腸腺瘤、正常結(jié)直腸組織中的表達(dá)均有差異性(P<0.05)。②mt-P53、Mcm7及Aurora-A在結(jié)直腸癌中的表達(dá)與性別、年齡及腫瘤大小無關(guān)(P>0.05)，但都與浸潤程度有關(guān)(P<0.05)。Mcm7與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和Dukes分期關(guān)系密切(P<0.05)，<5年生存期病例的Mcm7陽性率高于≥5年生存期病例，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；mt-P53與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和Dukes分期關(guān)系密切(P<0.05)。<5年生存期病例的Aurora-A和mt-P53表達(dá)陽性率高于≥5年生存期病例(P<0.05)。③mt-P53分別與Mcm7、Aurora-A表達(dá)存在顯著正相關(guān)(r=0.284，P<0.05；r=0.547，P<0.01)。 結(jié)論 P53的突變與Mcm7和Aurora-A蛋白的過表達(dá)在結(jié)直腸癌的發(fā)生、侵襲和轉(zhuǎn)移中可能發(fā)揮著重要作用。綜合分析mt-P53 及其結(jié)合蛋白Mcm7、Aurora-A蛋白的表達(dá)對(duì)結(jié)直腸癌的診斷和預(yù)后判斷具有重要價(jià)值。

結(jié)直腸腫瘤； P53； 微小染色體維持蛋白7； Aurora-A激酶； 免疫組織化學(xué)

結(jié)直腸癌是消化系統(tǒng)常見惡性腫瘤之一，2008年全世界約有120萬結(jié)直腸癌新發(fā)病例，其死亡率約占全部惡性腫瘤的8%[1]。近年我國的結(jié)直腸癌發(fā)病和死亡均呈上升趨勢(shì)。2006-2009年結(jié)直腸癌連續(xù)位居我國惡性腫瘤發(fā)病第3位和死亡第5位[2]。目前普遍認(rèn)為結(jié)直腸細(xì)胞癌變是一個(gè)多基因參與、多步驟發(fā)展的極為復(fù)雜的過程。雖然國內(nèi)外已有較多的臨床及實(shí)驗(yàn)研究對(duì)此進(jìn)行探討，但是其發(fā)病機(jī)制仍不明確。P53參與細(xì)胞內(nèi)多種通路的調(diào)控，包括細(xì)胞周期阻滯、DNA損傷修復(fù)、衰老、分化、凋亡等[3]，是細(xì)胞內(nèi)一種主要的腫瘤抑制因子。P53的缺失和突變(mt-P53)在結(jié)直腸癌發(fā)病機(jī)制中起重要作用。另外，有關(guān)研究表明，P53結(jié)合蛋白微小染色體維持蛋白7(minichromosome maintenance protein 7，Mcm7)[4]及中心體相關(guān)激酶Aurora-A[5]也與多種消化道惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切。但Mcm7、Aurora-A及mt-P53蛋白在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及其相關(guān)性還未見報(bào)道。我們采用免疫組化的方法檢測Mcm7、Aurora-A及mt-P53蛋白在人結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)，并探討三者在結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)抽取河西學(xué)院附屬張掖人民醫(yī)院病理科2009-01～2011-12經(jīng)手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的結(jié)直腸癌標(biāo)本60例?；颊吣挲g在35-78歲，中位年齡62歲；其中男性34例，女性26例。根據(jù)2010年WHO消化系統(tǒng)腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病理分級(jí)：高分化腺癌10例，中分化腺癌36例，低分化腺癌14例。浸潤深度：肌層14例，漿膜層46例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：未轉(zhuǎn)移35例，轉(zhuǎn)移25例；對(duì)60例結(jié)腸癌患者進(jìn)行隨訪，5年內(nèi)死亡24例，5年以上存活36例。另選取癌旁正常腸黏膜10例，腺瘤30例。所有標(biāo)本均經(jīng) 10%福爾馬林固定，石蠟包埋后4 μm 連續(xù)切片。

1.2 主要試劑

兔抗人Mcm7抗體、兔抗人Aurora-A抗體購自英國Abcam公司，鼠抗人P53單克隆抗體、DAB顯色試劑、PBS緩沖液、檸檬酸鹽抗原修復(fù)緩沖液均購自福州邁新公司。

1.3 檢測方法

采用免疫組化SP法，染色步驟按說明書提示，抗體Mcm7工作液濃度為1∶200，Aurora-A工作液濃度為1∶250，P53為即用型，三者都需要抗原修復(fù)，DAB顯色，蘇木精復(fù)染。以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照，已知陽性片作為陽性對(duì)照。

1.4 結(jié)果判定

Mcm7、Aurora-A及mt-P53陽性染色為黃色、棕黃色或棕褐色顆粒，Mcm7及P53蛋白陽性信號(hào)位于細(xì)胞核，Aurora-A則定位于細(xì)胞質(zhì)。采用二級(jí)計(jì)分法，染色強(qiáng)度分類：0分為無色；1分為黃色；2分為棕黃色；3分為棕褐色(深淺與背景色相對(duì)比)。陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)：在400倍鏡下選定10個(gè)視野觀察，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)腫瘤細(xì)胞，共計(jì)1 000個(gè)細(xì)胞，計(jì)算陽性細(xì)胞所占百分比。陽性細(xì)胞百分比=陽性細(xì)胞數(shù)/所計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)×100%。1分為陽性細(xì)胞≤10%；2分為11%-50%；3分為51%-75%；4分為>76%。兩者記分相乘后0-3分為陰性；>3分為陽性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件采用SPSS 21.0軟件包，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用Kaplan-Meier法分析mt-P53及Mcm7、Aurora-A表達(dá)與生存期的關(guān)系。

2 結(jié)果

2.1 Mcm7、Aurora-A及mt-P53蛋白在不同組織中的表達(dá)

Mcm7、Aurora-A及mt-P53在正常結(jié)直腸黏膜組織、結(jié)直腸腺瘤及結(jié)直腸癌中的表達(dá)率依次增高，三組間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0. 05，見表1)。病理免疫組化結(jié)果見圖1。

表1 Mcm7、Aurora-A和mt-P53在結(jié)直腸癌、腺瘤及正常組織中的陽性表達(dá)率

Table 1 The positive expression rateof Mcm7,Aurora-A and mt-P53 in colorectal carcinoma,adenoma and normal mucosa

例(%)

cases(%)

2.2 Mcm7、Aurora-A和mt-P53的表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關(guān)系

經(jīng)統(tǒng)計(jì)顯示，在結(jié)直腸癌組織中，Mcm7、Aurora-A和mt-P53的表達(dá)與性別、年齡及腫瘤大小無關(guān)(P>0.05)，但都與浸潤程度有關(guān)(P<0.05)，Mcm7與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和Dukes分期有關(guān)(P<0.05),mt-P53與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和Dukes分期關(guān)系密切(P<0.05),與腫瘤的分化程度無關(guān)(P>0.05)，而Aurora-A與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和Dukes分期無關(guān)(P>0.05)。<5年生存期病例的Aurora-A和mt-P53表達(dá)陽性率高于≥5年生存期病例，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Mcm7在結(jié)直腸癌中的表達(dá)<5年生存期病例的陽性率高于≥5年生存期病例，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見表2)。

2.3 Mcm7、Aurora-A和mt-P53在結(jié)直腸癌中的表達(dá)關(guān)系

將60例結(jié)直腸腺癌組織Mcm7、Aurora-A和mt-P53的表達(dá)結(jié)果相互對(duì)照，經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)分析顯示，mt-P53和Mcm7、Aurora-A在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)存在顯著正相關(guān)，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=0.279，P<0.05；r=0.547，P<0.01；見表3)；但Mcm7和Aurora-A在結(jié)直腸癌組織的表達(dá)相關(guān)性不明顯，且無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=-0.057，P>0.05)。

第一行正常結(jié)直腸黏膜組織，第二行結(jié)直腸腺瘤組織，第三行結(jié)直腸腺癌組織；A為HE染色，B為mt-P53表達(dá)，C為Mcm7表達(dá)，D為Aurora-A表達(dá)圖1 mt-P53、Mcm7及Aurora-A在正常結(jié)直腸黏膜組織、結(jié)直腸腺瘤及結(jié)直腸癌中的表達(dá) (×400)Figure 1 The expression of mt-P53, Mcm7 and Aurora-A in normal colorectal tissue, colorectal adenoma and colorectal carcinoma tissue (×400)

表2 Mcm7、Aurora-A和mt-P53表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理特征之間的關(guān)系例(%)

Table 2 Relationship between expression of Mcm7,Aurora-A and mt-P53 and clinicopathological characteristics in colorectal carcinoma cases(%)

病理學(xué)參數(shù)nMcm7Aurora-Amt-P53陽性陰性P陽性陰性P陽性陰性P性別0.8750.7140.866 男342862592410 女262151881511年齡0.4740.8900.299 <60歲22193166148 ≥60歲3830827112513腫瘤大小0.1690.7080.183 <5cm27207207207 ≥5cm3329423101914分化程度0.0010.3470.145 高分化10466455 中分化3632425112214 低分化14131122122浸潤深度0.0070.0400.047 肌層14867768 漿膜層4641536103313淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移0.0360.5290.039 無322392481715 有28262199226Duckes分期0.0270.4850.025 A+B3122921101615 C+D29272227236生存時(shí)間0.3490.0400.015 <5年24213213204 ≥5年3628822141917

表3 Mcm7、Aurora-A與mt-P53在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)的關(guān)系

Table 3 Correlation between the expression of Mcm7, Aurora-A and mt-P53 in colorectal cancer

mt-P53Mcm7Aurora-A陽性陰性rP陽性陰性rP陽性3540.2790.0313540.5470.000陰性147813

2.4 Mcm7、Aurora-A和mt-P53表達(dá)與結(jié)直腸癌預(yù)后的關(guān)系

預(yù)后分析顯示，60例結(jié)直腸癌組織中Mcm7陽性表達(dá)49例、陰性表達(dá)11例，<5年生存期病例的陽性率高于≥5年生存期病例，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。Aurora-A陽性表達(dá)43例、陰性表達(dá)17例，mt-P53陽性表達(dá)39例、陰性表達(dá)21例，<5年生存期病例的Aurora-A和mt-P53表達(dá)陽性率高于≥5年生存期病例，其陽性和陰性患者間術(shù)后5年生存期差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見圖2)。

圖2 mt-P53、Mcm7和Aurora-A的表達(dá)與結(jié)直腸癌術(shù)后生存曲線Figure 2 The mt-P53，Mcm7 and Aurora-A expression and postoperative survival curves of colorectal cancer patients

3 討論

腫瘤是一種基因病，當(dāng)細(xì)胞的原癌基因激活及抑癌基因失活，導(dǎo)致細(xì)胞生長調(diào)控和分化功能紊亂，繼而發(fā)展成腫瘤。P53蛋白是經(jīng)典的抑癌基因，被認(rèn)為是細(xì)胞生長的“監(jiān)控器”，負(fù)責(zé)監(jiān)視基因組完整性、抑制細(xì)胞周期、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡等，實(shí)現(xiàn)抑制腫瘤的作用。然而，P53亦是容易出現(xiàn)突變的基因。在惡性腫瘤中，約半數(shù)以上存在P53基因的突變。突變型的P53(mt-P53)不僅喪失野生型P53(wt-P53)的正常功能，而且拮抗wt-P53對(duì)細(xì)胞基因的監(jiān)視作用，使得正常細(xì)胞向癌細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)變。不僅如此，部分mt-P53反而獲得了癌基因的功能，促進(jìn)細(xì)胞增殖失控，增加染色體錯(cuò)配和畸變的幾率，提高了細(xì)胞癌變風(fēng)險(xiǎn)[6-7]。與wt-P53相比，mt-P53蛋白由于構(gòu)象改變，半衰期明顯延長，在細(xì)胞核內(nèi)堆積，故可用免疫組織化學(xué)方法檢測其表達(dá)水平。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，mt-P53蛋白在正常結(jié)直腸黏膜、結(jié)直腸腺瘤、結(jié)直腸腺癌中的陽性表達(dá)率呈逐漸升高的趨勢(shì)(P<0.05)，提示P53的基因突變?cè)诮Y(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展過程中可能具有一定的作用，或可作為從癌前病變發(fā)展為癌的檢測指標(biāo)。另外，mt-P53在結(jié)直腸癌細(xì)胞的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和Dukes分期也均有相關(guān)性，而且mt-P53蛋白的陽性表達(dá)率隨著腫瘤浸潤深度的增加而增高，在<5年與≥5年生存期病例中的表達(dá)差異相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明mt-P53在大腸癌的侵襲和轉(zhuǎn)移過程中也可能起著重要作用，其蛋白的過表達(dá)提示大腸癌的預(yù)后較差。P53的突變?cè)诮Y(jié)直腸腺瘤向癌的轉(zhuǎn)化過程中可能起了促進(jìn)作用，同時(shí)還可能促進(jìn)癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。

微小染色體維持蛋白(minichromosome maintenance protein，MCM)是近年來發(fā)現(xiàn)的一組反應(yīng)細(xì)胞增殖的蛋白標(biāo)志物，是一類高度保守的蛋白家族，在DNA復(fù)制許可(DNA replication license)和控制細(xì)胞周期從G1期到S期過程中起著必不可少的作用。到目前為止，已報(bào)道發(fā)現(xiàn)的有Mcm 2-9等8個(gè)蛋白家族成員。Mcm7作為Mcm蛋白家族成員之一，在維持MCM復(fù)合體的螺旋酶的活性及控制DNA復(fù)制的起始中起了關(guān)鍵作用，同時(shí)與轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞增殖和腫瘤的發(fā)生與發(fā)展密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)檢測了Mcm7蛋白在正常結(jié)直腸黏膜組織、結(jié)直腸腺瘤及結(jié)直腸癌中的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)Mcm7在結(jié)直腸癌中的表達(dá)明顯高于腺瘤組及正常組織組，并且依次降低(P<0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)Mcm7的陽性表達(dá)率越高，癌組織分化越差、癌細(xì)胞浸潤深度越深、5年生存率越低；并且存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的組織，陽性表達(dá)率也較高。證實(shí)了Mcm7蛋白與細(xì)胞增殖密切相關(guān)，其表達(dá)與細(xì)胞增殖程度呈正相關(guān)，與組織分化程度呈負(fù)相關(guān)。另外還有許多研究表明，在多種人類惡性腫瘤細(xì)胞中如結(jié)直腸癌[8]、肺癌[9]、前列腺癌[10]、霍奇金淋巴瘤[11]、乳腺癌[12]、子宮內(nèi)膜癌[13]都存在著Mcm7過表達(dá)或擴(kuò)增現(xiàn)象，提示Mcm7在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中起了重要作用，是腫瘤發(fā)生的早期事件之一，是反映細(xì)胞增殖的可靠標(biāo)志物，檢測Mcm7的表達(dá)對(duì)判斷腫瘤的惡性程度、療效評(píng)估、術(shù)后復(fù)發(fā)具有重要意義。

Aurora蛋白激酶家族是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，在細(xì)胞的有絲分裂期發(fā)揮著重要作用，目前分為3種即Aurora-A、Aurora-B、Aurora-C。Aurora-A位于細(xì)胞的中心體上，有絲分裂時(shí)Aurora-A和紡錘體兩極相連并且參與中心體重組[14]。當(dāng)Aurora-A過表達(dá)會(huì)破壞細(xì)胞周期多個(gè)檢測點(diǎn)功能，導(dǎo)致紡錘體組織異常及胞質(zhì)分離異常，最終形成非整倍體細(xì)胞，與腫瘤發(fā)生過程密切相關(guān)[15]。本研究實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，結(jié)直腸癌的Aurora-A表達(dá)明顯高于結(jié)直腸腺瘤以及正常的結(jié)直腸組織，具有顯著性差異(P<0.05)，且浸潤深度越深，Aurora-A的陽性表達(dá)率越高，提示Aurora-A表達(dá)的升高在結(jié)直腸癌的侵襲潛能中起重要作用。目前還在膀胱癌[16]、胃癌[17]、食道癌[18]、乳腺癌[19]等研究中也發(fā)現(xiàn)Aurora-A過度表達(dá)，并且Aurora-A的過表達(dá)與腫瘤的侵襲存在很大程度的相關(guān)性。另外，<5年生存期病例的Aurora-A和mt-P53表達(dá)陽性率高于≥5年生存期病例，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。因此監(jiān)測結(jié)直腸癌中Aurora-A的表達(dá)可作為臨床評(píng)價(jià)結(jié)直腸癌發(fā)展及預(yù)后的參考指標(biāo)。

對(duì)于P53和Mcm7在結(jié)直腸癌演變過程中的相互關(guān)系，有文獻(xiàn)報(bào)道[4,20]，Mcm7是一個(gè)新發(fā)現(xiàn)的P53作用蛋白，過表達(dá)的Mcm7能夠結(jié)合P53，將P53束縛在細(xì)胞質(zhì)中，P53無法進(jìn)入細(xì)胞核從事基因轉(zhuǎn)錄，從而間接地使P53失活。再者，P53是在DNA受損時(shí)通過激活下游基因從而發(fā)揮抑制腫瘤的作用，而Mcm7能夠抑制內(nèi)源的P53蛋白對(duì)其下游靶基因(如P21、PUMA)的轉(zhuǎn)錄活性，從而促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖。在某些腫瘤中，Mcm7還可調(diào)節(jié)P53的蛋白水平，降低P53蛋白的穩(wěn)定性，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長。因此，Mcm7通過妨礙抑癌因子P53功能的發(fā)揮，在DNA損傷時(shí)參與調(diào)控P53介導(dǎo)的相關(guān)功能，在細(xì)胞癌變過程中起協(xié)同促進(jìn)的重要作用。本實(shí)驗(yàn)中，Mcm7與mt-P53共同在結(jié)直腸癌中的高表達(dá)，表明其在結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展中具有協(xié)同作用，增強(qiáng)結(jié)直腸癌細(xì)胞的侵襲性及轉(zhuǎn)移特性。

P53與Aurora-A蛋白之間存在相互調(diào)節(jié)。P53通過Aurora-A N末端的Aurora-box直接與Aurora-A結(jié)合，反饋性地抑制Aurora-A的激活酶活性及其中心體擴(kuò)增；另一方面，Aurora-A高度活化能磷酸化P53的Ser315位點(diǎn)，通過泛素化途徑降解P53，同時(shí)也能磷酸化P53的Ser215位點(diǎn)，減低P53的轉(zhuǎn)錄活性，從而下調(diào)P53的抑癌功能[6，7]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，Aurora-A與mt-P53在結(jié)直腸癌中的表達(dá)顯著正相關(guān)(P<0.01)，并且隨著腫瘤細(xì)胞浸潤程度的加深，二者的表達(dá)都有所增強(qiáng)，表明在結(jié)直腸癌中，Aurora-A可能是P53的一個(gè)調(diào)控基因，Aurora-A的高表達(dá)可能使wt-P53變?yōu)閙t-P53，導(dǎo)致mt-P53蛋白在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)異常增高。而失活或突變的P53，失去了正常情況下對(duì)Aurora-A蛋白的抑制作用，造成了Aurora-A的高表達(dá)，而Aurora-A的高表達(dá)更進(jìn)一步促進(jìn)了P53功能的喪失。過表達(dá)或過度激活A(yù)urora-A打破了細(xì)胞內(nèi)的Aurora-A-P53平衡，造成細(xì)胞惡性增殖。然而，該兩項(xiàng)指標(biāo)在結(jié)直腸癌患者中也有個(gè)別表達(dá)不一致，提示Aurora-A和P53在結(jié)直腸癌進(jìn)展中并非絕對(duì)必需的，說明Aurora-A和mt-P53有相關(guān)性但又可能都是獨(dú)立的致癌因子。

研究發(fā)現(xiàn)，在結(jié)直腸癌中，Mcm7可與P53結(jié)合，降低P53的活性，促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖，Aurora-A可通過泛素化途徑降解P53，并且有可能使wt-P53變?yōu)閙t-P53，導(dǎo)致mt-P53蛋白在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)異常增高，而P53的失活或突變，又使Aurora-A失去抑制，造成Aurora-A的高表達(dá)，從而引起細(xì)胞的異常分離，形成腫瘤。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示結(jié)直腸癌組織中Mcm7蛋白和Aurora-A蛋白的表達(dá)無明顯相關(guān)，二者可能通過不同的作用機(jī)制參與結(jié)直腸癌的發(fā)生和發(fā)展。P53能抑制Aurora-A，自身又可被Mcm7結(jié)合降解，說明P53基因是聯(lián)系Mcm7與Aurora-A基因之間的關(guān)鍵基因，三者通過復(fù)雜的信號(hào)通路聯(lián)系在一起，存在相互聯(lián)系、相互制約的關(guān)系。綜上所述，單一檢測結(jié)直腸癌的癌基因不能全面反映其生物學(xué)特性，且易造成假陽性率，聯(lián)合癌基因檢測可以兼顧敏感性和特異性，既提高了靈敏度，又減少了假陽性率。

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Expression of mt-P53 and Mcm7,Aurora-A and their significance in colorectal carcinoma

MA Weiwei，ZHANG Chenli，ZHANG Xu*

(InstituteofPathology，SchoolofBasicMedicine，LanzhouUniversity，Lanzhou730000，China；*Correspondingauthor，E-mail：zhangxu64@163.com)

ObjectiveTo investigate the expression and its significance of mt-P53,Mcm7 and Aurora-A in colorectal carcinoma and their correlation.MethodsThe expression of mt-P53,Mcm7 and Aurora-A was detected by immunohistochemical SP methods in 60 cases of colorectal carcinoma tissues,30 cases of colorectal adenoma and 10 cases of normal colorectal tissues.Results①Ectopic expression of mt-P53,Mcm7 and Aurora-A was significantly different in normal colorectal mucosa, colorectal adenomas and colorectal carcinoma(P<0.05).②The expression of mt-P53,MCM7 and Aurora-A genes in colorectal carcinoma tissues was associated with the depth(P<0.05),but not correlated with the age, gender and size of tumors(P>0.05).The expression of Mcm7 was associated with the differential degree, Dukes stages and lymph node metastasis(P<0.05).Mcm7 expression in patients with survival of less than 5 years was higher than in patients with survival of more than 5 years，but there was no significant difference(P>0.05).The expression of mt-P53 was associated with the Dukes stages and lymph node metastasis(P<0.05). Mt-P53 and Aurora-A expression in patients with survival of less than 5 years was higher than in patients with survival of more than 5 years(P<0.05). ③The expression of Mcm7 and Aurora-A gene was significantly related to the expression of mt-P53(r=0.284，P<0.05；r=0.547，P<0.01).ConclusionThe mutation of P53 and the overexpression of Mcm7 and Aurora-A may play an important role in tumorigenesis, tumor invasion and metastasis of colorectal cancer. Thus, the co-detection of mt-P53 and its interacting protein Mcm7,Aurora-A should have important value in the diagnosis and prognosis of colorectal cancer.

colorectal cancer； P53； Mcm7； Aurora-A； immunohistochemistry

馬瑋瑋，女，1984-01生，本科，講師, E-mail：183214528@163.com

2016-05-11

R735.37

A

1007-6611(2016)09-0841-06

10.13753/j.issn.1007-6611.2016.09.014