傅衛(wèi)紅　張　青　周玉寶　張琳靜　彭立靜　王永興　李超民

解放軍第四五一醫(yī)院(西安710054)

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中藥與礦物鹽微粉對(duì)急性血瘀模型大鼠血液流變性的影響

傅衛(wèi)紅張青周玉寶張琳靜彭立靜王永興李超民

解放軍第四五一醫(yī)院(西安710054)

目的：探討中藥與礦物鹽微粉對(duì)急性血瘀模型大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響。方法：采用冰水浴和皮下注射鹽酸腎上腺素致大鼠急性血瘀模型，檢測(cè)全血低切、中切及高切黏度、血漿黏度、紅細(xì)胞壓積和纖維蛋白指數(shù)等指標(biāo)，探討中藥與礦物鹽微粉對(duì)急性血瘀模型大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響。結(jié)果：血瘀模型組高、中、低切變率的全血黏度、血漿黏度、紅細(xì)胞壓積、纖維蛋白較正常對(duì)照組明顯升高(P<0.01)。中藥與礦物鹽微粉各劑量組的全血黏度均有不同程度的下降，其中大劑量組與模型組比較有顯著性差異(P<0.05)，中、小劑量組較模型組降低，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；中藥與礦物鹽微粉大、中劑量組的血漿黏度較模型組有顯著性降低(P<0.05)；各劑量組的紅細(xì)胞壓積、纖維蛋白與模型組相比有不同程度的降低，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論：中藥與礦物鹽微粉能夠改善急性血瘀模型大鼠的全血和血漿黏度，具有明顯的活血化瘀作用。

中藥與礦物鹽微粉系專(zhuān)利產(chǎn)品多功能外用熱療包的內(nèi)容物微粉混勻而成。主要成分包括沒(méi)藥、川芎、花椒、羌活、透骨草等十八味中藥和礦物鹽，具有活血、祛瘀、止痛的功效。對(duì)多種病因引起的頸肩腰腿痛有較好的療效。本研究采用腎上腺素加冰浴法復(fù)制大鼠急性血瘀模型，研究中藥與礦物鹽微粉對(duì)急性血瘀模型大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響，探討中藥組方與礦物鹽微粉的活血化瘀作用?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1材料

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)SD大鼠，雌雄各半，體重160～220g。由第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK(軍)2012-0007。飼養(yǎng)于空調(diào)恒溫室內(nèi)，室溫24±2℃，相對(duì)濕度40%～60%，過(guò)濾送風(fēng)，自動(dòng)控制晝夜各12h。滅菌全價(jià)營(yíng)養(yǎng)顆粒飼料(購(gòu)于第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)喂養(yǎng)，自由飲水。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前飼養(yǎng)觀察2周，選擇健康動(dòng)物用于實(shí)驗(yàn)。

1.2藥物和試劑多功能外用熱包批號(hào)：20130305。稱(chēng)取其內(nèi)容物適量，先粉碎成棕色粗粉，后微粉，收集微粉( 300目篩通過(guò)率≥95%)，室溫保存?zhèn)溆?。地奧心血康膠囊(成都地奧制藥集團(tuán)有限公司，批號(hào)：1211029)；鹽酸腎上腺素(西南藥業(yè)股份有限公司出品，批號(hào)：1310151)。

1.3實(shí)驗(yàn)儀器FW-177型中草藥粉碎機(jī)(天津市泰斯特儀器有限公司生產(chǎn))；BFM-6型超微粉碎機(jī)(濟(jì)南倍力粉技術(shù)工程有限公司生產(chǎn))；AF-100制冰機(jī)(美國(guó)IMI CORNELIUS.INC)；CR21F型離心機(jī)(日本HITACHI)；F280SZ全自動(dòng)血液流變學(xué)儀(重慶邁迪克科技開(kāi)發(fā)公司)； Milli-Q純水機(jī)(MilliPore Corporation, France.)；低溫冰箱(美國(guó)Nair公司)。

2方法2.1動(dòng)物分組及給藥劑量將試驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為6組，分組及給藥如下：正常對(duì)照組、血瘀模型組、地奧心血康陽(yáng)性對(duì)照組(300mg/kg)及中藥與礦物鹽微粉高劑量組(150g/kg)、中劑量組(45g/kg)、低劑量組(15g/kg)。每組 10 只。劑量設(shè)置依據(jù)臨床擬用劑量。陽(yáng)性對(duì)照組動(dòng)物給予地奧心血康300mg/kg灌胃，中藥與礦物鹽微粉低、中、高劑量組動(dòng)物頸背部包裹中藥與礦物鹽微粉治療包熱敷15min，每天2次，連續(xù)7d。第6天除正常組外其余各組大鼠參考文獻(xiàn)方法制備大鼠急性血瘀模型(具體方法見(jiàn)2.2)。第7天末次給藥30min后腹主動(dòng)脈取血檢測(cè)血液流變學(xué)指標(biāo)。

2.2血瘀模型的制作皮下注射鹽酸腎上腺素注射液0.5mg/kg，共 2 次，間隔8h，在2次之間(前后各間隔2h)，將大鼠浸于0～2℃冰水中5min，禁食不禁水過(guò)夜。第二次皮下注射鹽酸腎上腺素注射液后即成血瘀證模型。

2.3血流變學(xué)指標(biāo)的測(cè)定麻醉大鼠，腹主動(dòng)脈采血，1%肝素抗凝后，檢測(cè)血液流變學(xué)指標(biāo)：全血低、中、高切變率(200s-1、30s-1、3s-1)下的全血黏度、紅細(xì)胞壓積(Hct)、纖維蛋白原。全血以3000r/min離心15min得到血漿，進(jìn)行血漿黏度測(cè)定。

3結(jié)果

3.1對(duì)急性血瘀大鼠全血黏度的影響與正常組相比，模型組高、中、低切變率的全血黏度明顯升高(P<0.01)，中藥與礦物鹽微粉各劑量組的全血黏度有不同程度的下降，大劑量組較模型組有顯著性差異(P<0.05)，中、小劑量組有下降趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(表1)。

表1　各組大鼠不同切變率下全血黏度的比較

注：與正常組相比：△P<0.01；與模型組相比：*P<0.05，**P<0.01

3.2對(duì)急性血瘀大鼠血漿黏度、紅細(xì)胞壓積、纖維蛋白的影響與正常組相比，模型組大鼠血漿黏度、紅細(xì)胞壓積、纖維蛋白均明顯升高(P<0.05，P<0.01)，多功能外用熱包大、中劑量組的血漿黏度較血瘀模型組有較顯著降低(P<0.05)；中藥與礦物鹽微粉各劑量組對(duì)紅細(xì)胞壓積、纖維蛋白與模型組相比亦有降低的趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(表2)。

表2　各組大鼠血漿黏度、紅細(xì)胞壓積、纖維蛋白的比較

與正常組相比：△P<0.05，△△P<0.01；與模型組相比：*P<0.05

4討論血瘀癥是臨床最常見(jiàn)的證候類(lèi)型，也是許多臨床疾病的中醫(yī)學(xué)病理機(jī)制。由肝腎虧損，氣血不足，或過(guò)度勞損、外傷或風(fēng)寒濕邪，使局部氣血運(yùn)行不暢，氣血凝滯，經(jīng)絡(luò)閉阻不通，離經(jīng)之血不能及時(shí)排出或消散，瘀滯于人體某部，或血液運(yùn)行不暢，瘀積于經(jīng)脈或臟器內(nèi)所出現(xiàn)的證候[1]。血瘀證的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)成因可能與微循環(huán)障礙、血液流變學(xué)異常、血液凝固性增高或纖溶性降低、血小板聚集性增高或釋放功能亢進(jìn)、血流動(dòng)力學(xué)障礙、血管狹窄、阻塞等有關(guān)[2]。已有許多學(xué)者將血液流變學(xué)指標(biāo)的異常作為診斷血瘀證及判斷血瘀程度的重要客觀指標(biāo)[3-4]。臨床上患者紅細(xì)胞流變特異性異常、血液高黏高凝狀態(tài)和流動(dòng)性質(zhì)的改變是“不通則痛”的機(jī)制之一[5]。

專(zhuān)利產(chǎn)品外用熱療包依據(jù)祖國(guó)傳統(tǒng)中醫(yī)藥學(xué)理論，經(jīng)過(guò)大量基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)和篩選，以沒(méi)藥、川芎、花椒、羌活、透骨草等為主要成分配合礦物質(zhì)，利用濕熱敷的方法，使有效的成分通過(guò)毛孔、皮膚吸收進(jìn)入人體內(nèi)，改善病變部位的血液循環(huán)，促進(jìn)炎癥及水腫的吸收，減輕或消除關(guān)節(jié)、肌肉組織的炎性反應(yīng)，從而達(dá)到有效治療目的。我們前期的研究認(rèn)為，外用熱療包的治療作用包括熱效應(yīng)和非熱效應(yīng)的雙重作用。其熱效應(yīng)促進(jìn)血液循環(huán)，加強(qiáng)局部組織代謝，降低炎癥反應(yīng)，加快滲出物吸收，減輕水腫。非熱效應(yīng)包括中藥及礦物鹽的藥理作用，其中乳香、沒(méi)藥、延胡索相協(xié)活血祛瘀、行氣止痛；羌活、當(dāng)歸和五靈脂共奏散寒活血止痛之效[6]；透骨草、生川烏、防風(fēng)、川芎和花椒可祛留滯經(jīng)絡(luò)的風(fēng)寒濕邪，并有較強(qiáng)的止痛作用；當(dāng)歸、川芎養(yǎng)血兼活血。綜合全方，祛邪扶正，標(biāo)本兼顧，發(fā)揮活血止痛、祛濕散寒、通經(jīng)通絡(luò)的功效[7]。同時(shí)加入了礦物鹽，引藥下行，入腎軟堅(jiān)，緩和藥材辛燥之性，增進(jìn)藥材療效，并能促進(jìn)滲液吸收，達(dá)到消炎、消腫、止痛作用[8]。

本研究采用腎上腺素加冰水刺激的方法復(fù)制急性血瘀證模型，模擬應(yīng)激時(shí)機(jī)體狀態(tài)，以冰水浸泡動(dòng)物，模擬外寒侵襲，兩種因素的綜合作用復(fù)制出急性寒凝血瘀型大鼠模型[9-10]，并對(duì)專(zhuān)利產(chǎn)品多功能外用治療包內(nèi)容物的活血化瘀作用進(jìn)行了探討。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，大鼠經(jīng)給予腎上腺素和冰水處理后，造成全血黏度和血漿黏度升高、微循環(huán)障礙，造成了急性寒凝血瘀模型。中藥與礦物鹽微粉熱敷具有祛風(fēng)散寒、活血化瘀、溫通經(jīng)絡(luò)、調(diào)和氣血的功能，能夠改善急性寒凝血瘀大鼠的全血和血漿黏度，改善血液流變性的異常及微循環(huán)障礙，從而緩解血瘀的癥狀，其具體作用機(jī)制及有效成分作用尚需進(jìn)一步研究。

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(收稿2016-03-20;修回2016-04-19)

Effect of traditional Chinese medicine and mineral salts micropowder on hemorheology in rats of acute blood stasis model

The 451st Hospital of PLA(Xi’an 710032) Fu WeihongZhang QingZhou Yubaoet al

Objective: To explore the effects of external application of the Traditional Chinese medicine and mineral salts(TCM-MS)micropowder on hemorheology in acute blood stasis model of rats. Methods: Sixty SD rats were randomly divided into the normal group, the model group, the Di’ao xinxuekang capsules control group，and high dose(150g·kg-1) , middle dose (45g·kg-1) and low dose (15g·kg-1) of TCM-MS micropowder group, with 10 rats in each group. The TCM-MS micropowder groups were administered with external application of TCM-MS micropowder twice per day for 7 d separately，where as the normal and model group were orally administered with distilled water, and the control group were orally administered with the Di’ao xinxuekang capsules．The models of acute blood stasis were established by means of subcutaneous injection of adrenaline and ice water bath after treatment for 6 days. The hemorheology indexes were measured 7d after continuous administration in order to investigate the influences of TCM-MS micropowder on the acute blood stasis rat model. Results: The whole blood low shear viscosity, medium shear viscosity, high shear viscosity and plasma viscosity, hematocrit(HCT) and plasma fibrinogen (FIB) of model control group were significantly increased compared with those of the normal group (P<0.01); The whole blood viscosity were decreased in different doses of TCM-MS micropowder group, and compared with the model group, there was significant decrease in the high dose group of TCM-MS micropowder(P<0.05). The plasma viscosity index were significantly reduced in high and middle dose of TCM-MS micropowder group (P<0.05)．There were no significant difference in hematocrit (HCT) and plasma fibrinogen (FIB) between the TCM-MS micropowder group and the model group. Conclusion: The TCM-MS micropowder could significantly improve abnormal change of hemorheology on actue blood stasis model of rats．

Acute blood stasisHemorheologymicrocirculatory disturbanceAnimal,experimentationRats

*全軍保健專(zhuān)項(xiàng)課題(12BJ207)

血瘀癥血液流變學(xué)微循環(huán)障礙動(dòng)物，實(shí)驗(yàn)大鼠

R96

Adoi:10.3969/j.issn.1000-7369.2016.10.081