虧開興，楊 凱，佴文惠，和霽恬，金顯棟，王安奎，胡映開，和占星，張繼才，黃必志

（1.云南省草地動物科學研究院，昆明 650212；2.云南省肉牛工程技術(shù)研究中心，昆明 650212；3.中國科學院昆明動物研究所遺傳資源與進化國家重點實驗室，昆明 650223）

云嶺牛染色體G帶分析

虧開興1，2，楊 凱1，佴文惠3，和霽恬1，金顯棟1，王安奎1，胡映開2，和占星1，2，張繼才1，黃必志1

（1.云南省草地動物科學研究院，昆明 650212；2.云南省肉牛工程技術(shù)研究中心，昆明 650212；3.中國科學院昆明動物研究所遺傳資源與進化國家重點實驗室，昆明 650223）

通過對云嶺牛外周血及耳組織成纖維細胞培養(yǎng)制作染色體G帶標本，結(jié)果顯示，云嶺牛染色體數(shù)目為2n=60，公牛核型為60，XY；母牛核型為60，XX。其中1～29號染色體全部為端著絲粒染色體，X染色體為亞中著絲粒染色體，Y染色體為一較小的端著絲粒染色體，Y染色體為瘤牛型的Y染色體。云嶺牛染色體G帶明暗相間，與其他牛品種間的帶紋特征差異還需進一步研究。

云嶺牛；染色體；G帶

云嶺牛新品種選育始于中-澳技術(shù)合作計劃“云南牲畜和草場發(fā)展”項目（1983—1991），隨后在“八五”期間，由云南省科技廳立項攻關研究計劃，最終從11個雜交組合中篩選出BMY組合作為選育素材，其血緣構(gòu)成為1/2婆羅門牛、1/4莫累灰牛、1/4云南黃牛［1-3］。隨后，“九五”、“十五”持續(xù)由云南省攻關研究計劃立項實施熱帶亞熱帶肉牛新品種選育，旨在通過雜交育種，結(jié)合人工授精、MOET及群選群育開放式育種等技術(shù)，經(jīng)過雜交創(chuàng)新、橫交選育、自群繁育形成云嶺牛新種群，以改變云南黃牛體型較小、生長速度慢、個體產(chǎn)品率低，莫累灰牛耐熱抗蜱、耐粗飼能力差，婆羅門牛產(chǎn)肉和繁殖性能低等缺陷；同時保留并融合云南黃牛適應性強、耐粗飼、肉風味好，莫累灰牛生長快、繁殖性能高、肉質(zhì)好，婆羅門牛耐熱抗蜱易飼養(yǎng)管理等優(yōu)良特性，經(jīng)過嚴格的選種選育和擴繁，最終培育出適合我國南方熱帶亞熱帶氣候環(huán)境的專門化肉牛新品種［1-5］。前期作者等曾以BMY牛（即云嶺牛）為研究對象進行了細胞遺傳學觀察，比較分析了云嶺牛與婆羅門牛等品種的核型差異，補充和積累了云嶺牛的遺傳學基礎資料［6］。本研究對云嶺牛染色體G帶進行研究，為其細胞遺傳學研究、基因定位和疾病診斷等提供遺傳學資料。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

外周血和耳組織采自于云南省草地動物科學研究院小哨示范牧場云嶺牛核心群4頭（2、2♀）。公牛為種用公牛，母牛隨機采取。用含有肝素鈉抗凝的注射器從每頭牛頸靜脈抽取外周血2～5mL，隨冰塊低溫保存，送昆明動物研究所昆明野生動物細胞庫進行細胞培養(yǎng)。

1.2 方法

按劉瑞清等［7］、Peng等［8］和宋敏艷等［9］方法，稍作修改進行外周血淋巴細胞的培養(yǎng)、細胞收獲和染色體標本制備。對顯帶和分散最好的分裂相用Cyto Vision System （Applied Imaging）軟件進行圖像拍攝和分析，染色體G帶分析依染色體長度遞減排列染色體和編號。

2 結(jié)果與分析

2.1 云嶺牛的染色體數(shù)目

在顯微鏡下拍照、計數(shù)，選取背景清晰、長短適中的中期分裂相計數(shù)，云嶺牛染色體數(shù)目為2n=60。

2.2 云嶺牛染色體G帶觀察

按前人對牛核型染色體的排列與同源配對［10-11］，依染色體大小遞減排列，依次為1～29，性染色體不編號，排列于最后（圖1、圖2）。由圖可見，云嶺牛的染色體數(shù)目為2n=60，染色體臂數(shù)NF=62，有29對端著絲粒染色體，X染色體為亞中著絲粒染色體，Y染色體為一條較小的端著絲粒染色體，屬于瘤牛型（indicus-type）［6，10-11］，完全符合云嶺牛育種的遺傳背景，與前期結(jié)果一致［6］。云嶺牛染色體G帶明暗相間，與其他牛品種間的帶紋特征差異還需進一步研究。

圖1 云嶺牛公牛染色體G帶

圖2 云嶺牛母牛染色體G帶

3 討論

云嶺牛由婆羅門牛、莫累灰牛和云南黃牛三元雜交選育而來。育種過程中，先用莫累灰公牛與云南黃牛雜交，產(chǎn)生莫云雜，再以婆羅門牛為終端父本，最終形成含1/2婆羅門牛、1/4莫累灰牛、1/4云南黃牛血緣的專門化肉牛新品種。云嶺牛是肉牛品種中對自然生態(tài)環(huán)境適應性最強的肉牛品種之一，能夠適應熱帶亞熱帶氣候環(huán)境，且在高溫高濕條件下表現(xiàn)出較好的繁殖能力和生長速度；云嶺牛有較強的耐粗飼能力，適宜于全放牧、放牧加補飼、全舍飼等飼養(yǎng)方式，對體內(nèi)外寄生蟲等有較強的抵抗力，適應性強［1-5］。

云嶺牛繼承了其終端父本婆羅門牛的Y染色體，其核型與婆羅門牛一致，并表現(xiàn)為瘤牛型的端著絲粒染色體［6］，與以前的報道一致［10-11］。云嶺牛與普通牛、瘤牛、牦牛的染色體數(shù)目一樣（2n=60），而與東南亞叢林的大額牛、云南野牛、泰國野牛相差較大，并表現(xiàn)為1～2個羅伯遜易位的差異［6，12］。本研究為云嶺牛積累了細胞遺傳學的基礎數(shù)據(jù)，云嶺牛染色體G帶明暗相間，與其他牛品種間的帶紋特征差異還需進一步研究。

［1］文際坤.云南熱帶亞熱帶肉牛品種雜交組合及選育研究總結(jié)［J］.黃牛雜志，1996，22（增刊）：1-10.

［2］文際坤，楊國榮，趙開典，等.BMY牛的擴繁和選育研究［J］.云南畜牧獸醫(yī)，2003（3）：1-4.

［3］虧開興，趙剛，楊國榮，等.BMY牛的選育進展［J］.中國牛業(yè)科學，2007，33（3）：18-21.

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［5］楊凱，虧開興，楊世平，等.云嶺牛的生長發(fā)育及育肥性能研究［C］//第十屆中國牛業(yè)發(fā)展大會論文集.2015：441-445.

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［8］Peng K J，Wang J H，Su W T，et al.Characterization of two human lung adenocarcinoma cell lines by reciprocal chromosome painting［J］.Zoological Research，2010，31（2）：113-121.

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Analysis on the G-binding of Chromosome in Yunling Cattle

Qu Kaixing1，2，Yang Kai1，Huang Bizhi1，et al
（1.Yunnan Academy of Grassland and Animal Science，Kunming650212，China；2.Beef Cattle Engineering and Technology Research Center of Yunnan Province，Kunming650212，China）

G-banding samples were made by peripheral blood lymphocyte culture to analyze the karyotype and G-banding pattern of the chromosomes in Yunling cattle.It showed that Yunling cattle had a karyotype of2n=60，displaying bull for XY and cow for XX，of which 1～29 autosomes were telocentric chromosomes and 1 pair of sex-chromosome，and X chromosome was submetacentric chromosome，Y chromosome was a small telocentric chromosomes belonged to zebu type.The G-bindings of the chromosomes in Yunling cattle showed alternately binding patterns，which needed further comparison of the binding characters with other cattle breeds.

Yunling cattle；chromosome；G-binding

S823.2

A

2095-3887（2016）04-0008-03

10.3969/j.issn.2095-3887.2016.04.003

2016-06-06

云南省基礎研究重大項目（2013FC004）；青年基金（2014FD076）；云南省草地畜牧業(yè)創(chuàng)新團隊（2015HC001）；國家肉牛牦牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系（CARS-38）

虧 開興（1975-），男，副研究員，主要從事肉牛遺傳育種研究。

黃必志（1964-），男，研究員，主要從事肉牛育種和草產(chǎn)品開發(fā)。