連麗琴

摘要：目的 探討丙肝核心抗原（HCV-cAg）和丙肝抗體（HCV-Ab）聯(lián)合檢測(cè)對(duì)提高丙肝患者早期感染診斷中臨床價(jià)值。方法 對(duì)324例臨床標(biāo)本同時(shí)檢測(cè)HCV-cAg和HCV-Ab，并對(duì)HCV-cAg陽性標(biāo)本和HCV-cAg陰性且HCV-Ab陰性標(biāo)本進(jìn)一步檢測(cè)丙肝RNA（HCV-RNA）。結(jié)果 單獨(dú)檢測(cè)HCV-Ab，丙肝的檢出率為22.5%，聯(lián)合檢測(cè)HCV-cAg和HCV-Ab則丙肝的檢出率為27.8%，在73例HCV-Ab陽性的標(biāo)本中，HCV-cAg的陽性率達(dá)41.1%；在251例HCV-Ab陰性的標(biāo)本中，HCV-cAg陽性的例數(shù)為17例，丙肝的漏診率達(dá)6.8%；如果以HCV-RNA檢測(cè)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，則HCV-cAg與HCV-RNA檢測(cè)結(jié)果的符合率達(dá)93.6%，特異性達(dá)98.3%。結(jié)論 HCV-cAg和HCV-RNA具有高度的相關(guān)性，聯(lián)合檢測(cè)HCV-cAg核心抗原和HCV-Ab抗體是防范HCV廣泛傳播和診療的有效手段。

關(guān)鍵詞：丙型肝炎；丙肝核心抗原；丙肝抗體；丙肝RNA，酶聯(lián)免疫法

根據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示，目前全球丙肝的感染人數(shù)約為2億人，而我國(guó)丙肝感染率大概為3.2%[1]。約60%的丙肝感染都是無癥狀的，發(fā)病隱蔽，易轉(zhuǎn)慢性至纖維化，所以早期正確診斷病毒感染，防止病毒繼續(xù)傳播尤顯重要。丙肝篩查的常用方法是檢測(cè)丙肝抗體，其次是檢測(cè)丙肝核心抗原和丙肝RNA，HCV-RNA由于其價(jià)格昂貴限制其廣泛使用；根據(jù)國(guó)內(nèi)外近十幾年的許多研究報(bào)道顯示，HCV-cAg的靈敏度與HCV-RNA接近[2]，且價(jià)格便宜，所以其使用所以其應(yīng)用越來越受到重視。本文將對(duì)我院高危丙肝患者首次診查的血清標(biāo)本進(jìn)行HCV-cAg、HCV-Ab和HCV-RNA檢測(cè)，分析HCV-cAg和HCV-Ab的聯(lián)合檢測(cè)在提高丙肝感染診斷中的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 所有樣本來自我院2014年1月～2015年1月的消化內(nèi)科、傳染科、血透科、腫瘤科和急診科等共計(jì)324例，年齡分布：16～85歲，中位年齡：42歲，其中男性：185例，女性139例，所有患者標(biāo)本均為首次就診所采集的標(biāo)本。

1.2試劑和儀器 丙肝抗體試劑來自廈門英科新創(chuàng)公司，丙肝核心抗原試劑來自湖南景達(dá)生物公司，HCVRNA核酸擴(kuò)增PCR檢測(cè)試劑由廣州達(dá)安基因公司提供，所用內(nèi)標(biāo)質(zhì)控品購(gòu)置衛(wèi)生部臨檢中心，達(dá)安基因DA7600熒光擴(kuò)增儀PCR一臺(tái)，雅培公司I2000全自動(dòng)免疫分析儀一臺(tái)。

1.3分析檢測(cè)方法 丙肝抗體和丙肝核心抗原檢測(cè)采用標(biāo)準(zhǔn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（ELISA），按全自動(dòng)免疫分析儀SOP文書標(biāo)準(zhǔn)化操作，丙肝RNA檢測(cè)采用DA7600熒光擴(kuò)增PCR儀，所有檢測(cè)都與質(zhì)控品同步進(jìn)行確保結(jié)果準(zhǔn)確可靠。324例臨床標(biāo)本同時(shí)檢測(cè)HCV-Ab、HCV-cAg和HCV-RNA；對(duì)HCV-cAg檢測(cè)結(jié)果與HCV-RNA檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較分析。

1.4結(jié)果判定 酶免法結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)以S/CO≥1為陽性，PCR結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)為≥500IU為陽性。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18.0對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，以P>0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 324例可疑標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果分析 本文對(duì)324例可疑標(biāo)本分別進(jìn)行HCV-cAg核心抗原、HCV-Ab抗體和HCV-RNA檢測(cè)，結(jié)果顯示，HCV-Ab抗體陽性標(biāo)本73例，陽性率22.5%（73/324）；HCV-cAg核心抗原陽性47例；在HCV-cAg、HCV-Ab均為陰性的234例標(biāo)本和47例HCV-cAg核心陽性的標(biāo)本中HCV-RNA陽性占48例。

2.2丙肝核心抗原和丙肝RNA檢測(cè)結(jié)果比較抗原 在47例HCV-cAg核心陽性陽性的標(biāo)本中，丙肝RNA的陽性例數(shù)為44例，與丙肝RNA檢測(cè)結(jié)果的符合率達(dá)93.6%（44/47）；在234例丙肝核心抗原和丙肝抗體檢測(cè)均為陰性的標(biāo)本中，丙肝RNA的陽性例數(shù)為4例。

2.3 丙肝核心抗原和丙肝抗體聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果比較 在73例丙肝抗體陽性的標(biāo)本中，丙肝核心抗原陽性的例數(shù)為30例；丙肝核心抗原的陽性率達(dá)41.1%（30/73）；在251例標(biāo)本丙肝抗體陰性的標(biāo)本中，丙肝核心抗原陽性的例數(shù)為17例，如果僅檢測(cè)丙肝抗體，則將有17例丙肝漏診，漏診率達(dá)6.8%（17/251），HCV-Ab陽性73例與漏診丙肝17例之和為90例，聯(lián)合檢測(cè)HCV-cAg核心抗原和HCV-Ab抗體所得丙肝陽性率為27.8%（90/324）。兩者相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

3 討論

HCV病毒呈球形， 直徑小于80 nm，隸屬于黃病毒科，大約有9.6 Kbp，其為單股正鏈RNA病毒。 HCV病毒具有顯著異源性和高度可變性，HCV基因組各部位的變異程度不相一致；HCV-cAg核心抗原是由HCV最保守的C區(qū)編碼基因產(chǎn)生，研究顯示，HCV-cAg核心抗原檢查對(duì)HCV早期感染診斷相依性高[3-4]。目前實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)HCV-Ab抗體所包被的基因抗原是由基因工程制備的第三代抗原，主要是衣殼蛋白，NS2，NS3，NS4和NS5等，它的敏感度和特異性都較第二代抗原大幅提高，但是由于廠家基因抗原生產(chǎn)工藝的不同以及包被基因抗原比例不同，導(dǎo)致各實(shí)驗(yàn)室檢出丙肝抗體的陽性率不完全相同，這樣容易導(dǎo)致檢出丙肝抗體的漏診或誤診，因此對(duì)在實(shí)驗(yàn)室中只查HCV-Ab抗體可能與臨床表現(xiàn)不符。采用HCVRNA檢查，要求實(shí)驗(yàn)室建制嚴(yán)格且成本高，限制了在基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室使用。隨著第四代基因技術(shù)的成熟，HCV-cAg核心抗原的檢測(cè)也更加廣泛的引用于臨床。

本文研究顯示，在47例HCV-cAg核心抗原陽性標(biāo)本組中，用HCVRNA檢出陽性44例，HCV-cAg檢測(cè)率與HCVRNA檢出率相符為93.6%，這與Akihiko Kato[5]和Keslia[6]等結(jié)論相似。因?yàn)楦鶕?jù)病毒感染規(guī)律，其HCV-cAg核心抗原在HCV感染后大約14～70 d就可以在血液中檢測(cè)到[7]，它在體內(nèi)產(chǎn)生的時(shí)間相較HCVRNA出現(xiàn)約晚1 d[8]，而當(dāng)HCV-Ab抗體出現(xiàn)后，原來出現(xiàn)的HCV-cAg核心抗原等會(huì)被抗體中和消失。但也有一些免疫力缺陷患者從不產(chǎn)生HCV-Ab抗體，導(dǎo)致HCV-Ab抗體可以在患者體內(nèi)長(zhǎng)時(shí)間存在。所以HCV-cAg核心抗原檢測(cè)可以防止早期丙肝感染患者和免疫缺陷感染丙肝的漏診。

本文表2可見，單用HCV-Ab抗體對(duì)所有標(biāo)本檢測(cè)，丙肝檢出率為22.5%，共有17例HCV-cAg核心抗原陽性標(biāo)本漏檢，漏診率達(dá)6.8%，這提示只用HCV-Ab抗體檢查可能發(fā)現(xiàn)不了HCV-cAg核心抗原陽性標(biāo)本，容易造成丙肝漏診，這也與張磊[9]等曾報(bào)道的結(jié)果相同；由表2可知如果聯(lián)合檢測(cè)HCV-Ab抗體和HCV-cAg核心抗體，可以將丙肝檢出率提高到為27.8%，對(duì)比用HCV-Ab抗體檢測(cè)，差異有顯著性（P<0.05），其結(jié)論和陳開慧[10]，王燕[11]和楊靜[12]等的報(bào)道相似，進(jìn)一步證實(shí)聯(lián)合篩查HCV-cAg核心抗原和HCV-Ab抗體可以縮短窗口期，提高丙肝的檢出率，防止丙肝漏診。

綜上所述，HCV-cAg核心抗原與HCVRNA的檢測(cè)結(jié)果高度符合，且HCV-cAg核心抗原檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，價(jià)格低廉，易于在基層醫(yī)院推廣使用，聯(lián)合檢測(cè)HCV-cAg核心抗原和HCV-Ab抗體是防范HCV廣泛傳播和診療的有效手段。

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