龐 婷 謝 臻 陳 勇 麥藍(lán)尹 鄧麗紅

廣西中醫(yī)藥大學(xué)530001南寧市明秀東路179號(hào)

·實(shí)驗(yàn)研究·

大黃配伍藥對(duì)的瀉火作用變化及其共性關(guān)系研究

龐 婷 謝 臻*陳 勇 麥藍(lán)尹 鄧麗紅

廣西中醫(yī)藥大學(xué)530001南寧市明秀東路179號(hào)

目的：研究大黃枳實(shí)、大黃黃連、大黃牡丹、大黃桃仁、大黃甘遂5個(gè)藥對(duì)配伍后大黃瀉火作用的變化及其共性關(guān)系。方法：將90只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為生理鹽水組、模型組、阿司匹林組、大黃組、大黃枳實(shí)組、大黃黃連組、大黃牡丹組、大黃桃仁組、大黃甘遂組，每組10只。大黃組及大黃藥對(duì)組（大黃生藥量為15 g／kg）按10 ml／kg的容量給藥3 d后，于第4 d尾靜脈注射內(nèi)毒素及干酵母復(fù)制大鼠發(fā)熱模型，0.5 h后分別灌胃給藥，觀察比較各大鼠給藥后7 h內(nèi)的體溫變化。結(jié)果：與模型組比較，大黃各藥對(duì)配伍后其瀉火作用均有不同程度的改變，其中大黃組、大黃黃連組對(duì)內(nèi)毒素及干酵母所致的發(fā)熱具有顯著退熱作用；且與大黃組比較，大黃黃連組對(duì)內(nèi)毒素及干酵母所致的發(fā)熱具有更顯著的退熱作用。結(jié)論：大黃藥對(duì)配伍后其瀉火作用均有不同程度的改變，其中大黃黃連組的瀉火作用最強(qiáng)，與大量文獻(xiàn)報(bào)道的大黃藥對(duì)配伍后蒽醌類(lèi)成分的變化相對(duì)應(yīng)。

大黃藥對(duì)；配伍；瀉火；變化；共性關(guān)系

大黃（Rhei Radix et Rhizoma）為臨床常用瀉下通便的中藥，常稱(chēng)“將軍”，其主要用法為瀉下、活血祛瘀、瀉火、清熱解毒及利水，臨床上通常將大黃與其他藥味配伍使用，如大黃與黃芩、黃連、肉桂等配伍使用，從而改變其化學(xué)成分，降低肝毒性或提高其中某味藥的功效或選擇不同的功效［1－3］。目前報(bào)道的大多是大黃與多味藥配伍前后化學(xué)成分含量及藥效的變化［4－6］，未能反映出大黃與單味藥配伍后其瀉下功效的改變及在不同配伍中體現(xiàn)的共性關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)從大黃的瀉火功效入手，選取大黃經(jīng)典常用組方大承氣湯、瀉心湯、大黃牡丹湯、桃核承氣湯和大陷胸湯中的藥對(duì)——大黃枳實(shí)、大黃黃連、大黃牡丹、大黃桃仁和大黃甘遂，研究以上藥對(duì)配伍后大黃瀉火功效的變化及共性關(guān)系，為進(jìn)一步系統(tǒng)地探索大黃配伍的物質(zhì)基礎(chǔ)提供依據(jù)。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器HWS12水浴鍋（上海一恒公司）；BP211D電子分析天平（德國(guó)Sartorius）；D24UV純水儀（法國(guó)Merck millipore）；WND－200萬(wàn)能粉碎機(jī)（天津太斯特儀器有限公司）；MC－246電子體溫計(jì)（歐姆龍）。

1.2 藥物與試劑中藥飲片：大黃（四川產(chǎn)，批號(hào)：160307001）；枳實(shí)（江西產(chǎn)，批號(hào)：160101771）；黃連（四川產(chǎn)，批號(hào)：151007231）；牡丹皮（安徽產(chǎn)，批號(hào)：1602188）；桃仁（河北產(chǎn)，批號(hào)：2903070）；醋甘遂（陜西產(chǎn)，批號(hào)：20140701）。生大黃、枳實(shí)、黃連及桃仁購(gòu)于廣東康美藥業(yè)有限公司，牡丹皮及醋甘遂購(gòu)于廣東康美中藥飲片有限公司。取大黃及5個(gè)藥對(duì)的中藥飲片適量，大黃5個(gè)藥對(duì)（大黃枳實(shí)、大黃黃連、大黃牡丹、大黃桃仁、大黃甘遂）分別按大承氣湯、瀉心湯、大黃牡丹湯、桃核承氣湯和大陷胸湯中的1∶1、1∶1.5、1∶0.25、1∶1、1∶0.1的藥物比例配伍，加10倍量水先浸泡30 min后加熱至微沸，控制微沸狀態(tài)繼續(xù)煎煮20 min，濾布濾過(guò)，濃縮成浸膏，用時(shí)再配成相應(yīng)濃度的藥液即可。

阿司匹林腸溶片（湖南，生產(chǎn)批號(hào)：150703）；大腸桿菌內(nèi)毒素（Lippolysaccharide from Escherichia coli 055：B5，批號(hào)：L8880，Sigma）；高活性干酵母（湖北，20150315）；凡士林、生理鹽水及實(shí)驗(yàn)用水為純化水。

1.3 動(dòng)物清潔級(jí)SD大鼠，體重180±20 g，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，生產(chǎn)許可證號(hào)：2015－0003，動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)：0001757。

2 方法

2.1 大黃及其配伍藥對(duì)對(duì)干酵母所致大鼠發(fā)熱的影響實(shí)驗(yàn)前連續(xù)3 d測(cè)量大鼠體溫，每天2次，選取基礎(chǔ)體溫36.5～38℃的SD大鼠90只，隨機(jī)分為9組：大黃組、大黃枳實(shí)組、大黃黃連組、大黃牡丹組、大黃桃仁組、大黃甘遂組、生理鹽水組、阿司匹林腸溶片組、模型組。每組10只。大黃組及大黃各藥對(duì)組分別連續(xù)灌胃大黃提取液（按大黃生藥量15g／kg計(jì)）3 d，每天2次。各組動(dòng)物于第4 d實(shí)驗(yàn)前測(cè)3次肛溫作為基礎(chǔ)體溫，除生理鹽水組外，余組動(dòng)物均尾靜脈注射（20 μg／kg）內(nèi)毒素溶液復(fù)制發(fā)熱模型［7］，0.5 h后灌胃各中藥提取液及阿司匹林腸溶片溶液（劑量為20.5 g／kg），于給藥后0.5 h、1.5 h、2 h、4 h、5 h、6 h、7 h測(cè)定各組動(dòng)物肛溫，記錄數(shù)據(jù)。

2.2 大黃及其配伍藥對(duì)對(duì)內(nèi)毒素所致大鼠發(fā)熱的影響實(shí)驗(yàn)前連續(xù)3 d測(cè)量大鼠體溫，每天2次，選取基礎(chǔ)體溫36.5～38℃的SD大鼠90只，隨機(jī)分為9組：大黃組、大黃枳實(shí)組、大黃黃連組、大黃牡丹組、大黃桃仁組、大黃甘遂組、生理鹽水組、阿司匹林腸溶片組、模型組。大黃組及大黃藥對(duì)組分別連續(xù)灌胃各大黃藥對(duì)提取液（按大黃生藥量15g／kg計(jì)）3 d，每天2次。各組動(dòng)物于第4 d實(shí)驗(yàn)前測(cè)3次肛溫作為基礎(chǔ)體溫，除生理鹽水組外，余組動(dòng)物均背部皮下注射（20 μg／kg）干酵母混懸液復(fù)制發(fā)熱模型［8］，0.5 h后灌胃各中藥提取液及阿司匹林腸溶片溶液（劑量為20.5 g／kg），于給藥后0.5 h、1.5 h、2 h、4 h、5 h、6 h、7 h測(cè)定各組動(dòng)物肛溫，記錄數(shù)據(jù)。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理使用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用方差分析后的t檢驗(yàn)及GraphPad Prisam6.0作圖。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 大黃及其配伍藥對(duì)對(duì)干酵母所致大鼠發(fā)熱的影響結(jié)果見(jiàn)表1、圖1。

表1 大黃及其配伍藥對(duì)對(duì)干酵母所致大鼠發(fā)熱的影響（x±s，n＝10）

圖1 大黃及其配伍藥對(duì)對(duì)干酵母所致大鼠發(fā)熱的影響

表1顯示，與模型組比較，除大黃桃仁組外，大黃組及大黃其他藥對(duì)組第7 h的體溫均明顯下降（P均＜0.05），表明除大黃桃仁組外大黃各藥對(duì)均有一定的瀉火作用；與模型組比較，大黃組、大黃枳實(shí)組、大黃黃連組及大黃甘遂組第2 h、5 h、6 h的體溫均明顯下降（P＜0.05）；與大黃組比較，大黃黃連組第4 h、5 h、6 h的體溫明顯下降（P均＜0.05），表明與模型組及大黃組比較，大黃黃連組對(duì)干酵母所致大鼠發(fā)熱的瀉火作用更顯著。

3.2 大黃及其配伍藥對(duì)對(duì)內(nèi)毒素所致大鼠發(fā)熱的影響結(jié)果見(jiàn)表2、圖2。

表2 大黃及其配伍藥對(duì)對(duì)內(nèi)毒素所致大鼠發(fā)熱的影響（x±s，n＝10）

圖2 大黃及其配伍藥對(duì)對(duì)內(nèi)毒素所致大鼠發(fā)熱的影響

表2顯示，與模型組比較，大黃及其配伍藥對(duì)對(duì)內(nèi)毒素所致的大鼠發(fā)熱均有不同程度的退熱作用，其中大黃組、大黃黃連組和大黃甘遂組1.5～7 h的體溫與模型組比較大多有顯著性差異（P＜0.05），與模型組比較，大黃及其配伍藥對(duì)第2 h的體溫均有顯著下降（均P＜0.05）；與大黃組比較，大黃黃連組4～6 h的體溫有顯著性差異（P＜0.05），表明大黃黃連組對(duì)內(nèi)毒素所致發(fā)熱的退熱作用更顯著。

4 討論

干酵母致熱和內(nèi)毒素致熱是經(jīng)典的研究體溫變化的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，本?shí)驗(yàn)采用此兩種發(fā)熱模型探討大黃5個(gè)藥對(duì)的瀉下功效變化及變化規(guī)律，為大黃藥對(duì)配伍的物質(zhì)基礎(chǔ)研究奠基。根據(jù)前期急毒實(shí)驗(yàn)及大黃臨床用藥，本實(shí)驗(yàn)選擇大黃的給藥劑量為15 g／kg。阿司匹林腸溶片為常用的解熱鎮(zhèn)痛藥，可避免首過(guò)效應(yīng)，用于感冒、發(fā)熱、頭痛等，價(jià)廉且療效顯著，故本實(shí)驗(yàn)選擇阿司匹林腸溶片作為陽(yáng)性對(duì)照藥。干酵母或內(nèi)毒素復(fù)制發(fā)熱模型后動(dòng)物體溫變化較明顯，且與生理鹽水組比較均有顯著性差異，故本實(shí)驗(yàn)選擇干酵母或內(nèi)毒素復(fù)制發(fā)熱0.5 h后給藥，觀察比較大黃及其配伍藥對(duì)對(duì)干酵母或內(nèi)毒素復(fù)制發(fā)熱的體溫變化。

表1、圖1及表2、圖2表明大黃及大黃配伍藥對(duì)后其瀉火作用總體上雖有一定的差別，但其變化在一定程度上對(duì)大黃的作用存在共性關(guān)系。表1、圖1表明，與模型組比較，除大黃桃仁組外，大黃及大黃其他配伍藥對(duì)組第7 h的體溫均有明顯下降（P＜0.05），顯示除大黃桃仁組外，大黃及大黃配伍藥對(duì)對(duì)干酵母所致發(fā)熱均有一定的瀉火作用；與大黃組比較，大黃黃連組第4～6 h的體溫明顯下降（P均＜0.05），表明與模型組及大黃組比較，大黃黃連組對(duì)干酵母所致大鼠發(fā)熱的瀉火作用更顯著。表2、圖2表明，與模型組比較，大黃組、大黃黃連組和大黃甘遂組的體溫在大多時(shí)間點(diǎn)上均有明顯下降（P＜0.05），表明大黃及大黃黃連、大黃甘遂藥對(duì)對(duì)內(nèi)毒素所致大鼠發(fā)熱均有明顯的退熱作用；與大黃組比較，大黃黃連組對(duì)內(nèi)毒素所致發(fā)熱的退熱作用更顯著。

有研究表明，大黃與黃連配伍后總蒽醌類(lèi)溶出降低［9］，但在特定比例內(nèi)配伍對(duì)大黃的蒽醌類(lèi)成分（除大黃酸外）的溶出具有助溶作用［10］。由本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，大黃與黃連配伍后其瀉火作用與模型組及大黃組比較均有顯著差異，表明大黃與黃連配伍后其瀉火作用增強(qiáng)，原因可能為大黃的蒽醌類(lèi)成分（除大黃酸外）溶出增加；大黃配伍甘遂對(duì)干酵母及內(nèi)毒素所致的發(fā)熱也有較好的退熱作用，這可能與甘遂在大黃蒽醌類(lèi)酸性條件下其主要成分萜類(lèi)部分水解成其他成分，蒽醌類(lèi)含量發(fā)生變化相關(guān)，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究探討；桃仁的主要成分為脂肪酸，與大黃配伍后降低甚至消除了大黃的瀉火作用，原因可能是大黃與富含脂肪酸的桃仁配伍后，脂肪酸增加了大黃酸的溶出［11］，從而影響蒽醌類(lèi)成分的比例，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究探討。

大黃與部分藥物配伍后大都會(huì)引起蒽醌類(lèi)成分含量的增加或減少，有研究報(bào)道大黃蒽醌類(lèi)成分對(duì)肝腎存在潛在毒性［12］，由此可以推測(cè)大黃配伍藥對(duì)后蒽醌類(lèi)成分含量降低，減輕了大黃的肝毒性，從而增強(qiáng)大黃的瀉火作用，但兩者的相關(guān)性有待進(jìn)一步研究驗(yàn)證。大黃與含生物堿、萜類(lèi)等化合物的藥味配伍，可使大黃蒽醌類(lèi)與之發(fā)生酸堿中和反應(yīng)或水解作用，從而降低大黃酸的含量，增強(qiáng)大黃的瀉火作用；而與富含脂肪酸等化合物的藥味配伍則可能使大黃酸的溶出增加，從而降低藥對(duì)的瀉火作用。實(shí)驗(yàn)中大黃各藥對(duì)配伍后對(duì)干酵母及內(nèi)毒素所致發(fā)熱的退熱瀉火作用變化，可能與配伍后化學(xué)成分的溶出、轉(zhuǎn)移或轉(zhuǎn)化有關(guān)，在一定程度上具有共性關(guān)系，且有一定規(guī)律可尋。

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（2016－07－11收稿/編輯陳明偉）

R285.5

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1003－0719（2016）04－0067－04

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（編號(hào)：81360524）；廣西研究生教育創(chuàng)新計(jì)劃資助項(xiàng)目（編號(hào)：JGY2013041）；廣西教育科學(xué)“十二五”規(guī)劃課題（編號(hào)：2013C038）

*通信作者，博士，研究生導(dǎo)師；E－mail：xie zhen＠126.com