陳巍巍劉芷含張俠黃文娟謝志遠孫慧勤

急性腦梗死及腦出血患者應(yīng)激狀態(tài)下腸黏膜屏障功能變化

陳巍巍1劉芷含2張俠1黃文娟1謝志遠3孫慧勤1

目的 研究急性腦梗死、腦出血患者發(fā)病早期腸道屏障功能隨病程進展的變化。方法 選取2013年9月～2015年12月徐州市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，并確診為急性腦梗死、腦出血的患者67例,分別于不同時間點取靜脈血（12 h內(nèi)、24 h、72 h、1周、3個月）。同時選取同期門診健康體檢者54例作為對照組，檢測其血漿D-乳酸（D-LAC）、二胺氧化酶（DAO）水平。結(jié)果 （1）與正常對照組相比，急性腦梗死、腦出血患者在發(fā)病后均出現(xiàn)腸黏膜屏障功能改變，且腦梗死、腦出血組患者在發(fā)病24h后較發(fā)病初期（12 h內(nèi)） D-LAC、DAO水平逐漸升高，72 h達到高峰,隨后1周血清D-LAC及DAO持續(xù)高水平（P＜0.05）；（2）在發(fā)病12 h內(nèi)、24 h、72 h、1周、3個月5個時間段內(nèi)腦梗死、腦出血患者兩組間的D-LAC、DAO水平對比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結(jié)論 腦梗死及腦出血患者急性期應(yīng)激狀態(tài)下均會出現(xiàn)腸黏膜屏障功能的改變，且兩者在相同發(fā)病時間段內(nèi)無顯著差異。

腦梗死；腦出血；腸黏膜屏障；DAO；D-LAC

急性腦血管疾病是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，可引起全身應(yīng)激反應(yīng)，其中腸道被認為是機體應(yīng)激的中心器官[1-2]。深入研究腦-腸關(guān)系，有利于更好地理解應(yīng)激相關(guān)性胃腸疾病的發(fā)病機制，本實驗通過檢測急性腦血管病后患者血漿二胺氧化酶（Diamine Oxidase，DAO）活性、血漿D-乳酸（D-1actic acid，D-LAC）水平，觀察患者腸道功能變化，指導相關(guān)藥物臨床治療。

1 資料與方法

1.1 一般資料

依據(jù)全國第四次腦血管病學術(shù)會議提出的診斷標準，選取2013年9月～2015年12月就診于徐州市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科并確診為發(fā)病12 h內(nèi)的急性腦血管病的患者67例，男35例，女32例。篩選發(fā)病12 h內(nèi)入院患者，經(jīng)頭CT或頭MRI檢查證實為腦梗死38例（男20例，女18例），腦出血29例（男15例，女14例）；入組患者年齡48～75歲，平均（59.6±5.8）歲。并選擇同期我院體檢中心的健康體檢者54例作為正常對照組，在體檢當日抽取靜脈血，排除標準同病例組，男29例，女25例，年齡49～73歲，平均年齡（60.7±6.5）歲。

1.2 實驗方法

選取急性腦梗死、腦出血患者，分別于12 h內(nèi)、24 h、72 h、1周、3個月5個時間段內(nèi)采集靜脈血5 ml促凝管，室溫放置20 min，2 500 r/min 離心20 min，收集上清，于-80℃冰箱儲存。應(yīng)用ELISA法檢測DAO（ELISA試劑盒，購自武漢優(yōu)爾生公司）、D-LAC（ELISA試劑盒購自南京建成）水平。

1.3 觀察指標

急性腦血管病患者發(fā)病12 h內(nèi)、24 h、72 h、1周、3個月及正常體檢患者血清DAO、D-LAC水平。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 16.0軟件對數(shù)據(jù)進行分析處理，計量資料以（均數(shù)±標準差）表示，兩組樣本比較采用t檢驗，多組樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析（One-way ANOVA），以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 比較發(fā)病后不同時間段腦梗死和腦出血患者D-LAC水平變化

腦梗死和腦出血兩組患者發(fā)病12 h，24 h，靜脈血標本D-LAC水平較正常對照組相比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；D-LAC在發(fā)病72 h出現(xiàn)高峰期，3個月D-LAC基本降至正常范圍（P＜0.05）。而兩組在相同取樣時間段內(nèi)D-LAC水平對比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）（見表1）。

表1 腦梗死及腦出血發(fā)病后不同時間段D-LAC水平的比較（±s）

表1 腦梗死及腦出血發(fā)病后不同時間段D-LAC水平的比較（±s）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05；與發(fā)病后3個月檢測值比較，#P＜0.05

組別 例數(shù)D-LAC（nmol/ml）12 h 24 h 72 h 1周 3個月腦梗死組 38 7.85±1.72 7.68±1.74 21.84±5.21*# 21.21±4.49*# 7.23±1.78腦出血組 29 7.17±1.83 8.82±1.48 22.73±4.69*# 23.78±4.01*# 8.67±3.66正常對照組 52 7.66±1.61 - - - -

表2 腦梗死及腦出血發(fā)病后不同時間段DAO水平的比較（±s）

表2 腦梗死及腦出血發(fā)病后不同時間段DAO水平的比較（±s）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05；與發(fā)病后3個月檢測值比較，#P＜0.05

組別 例數(shù)DAO（ng /ml）12 h 24 h 72 h 1周 3個月腦梗死組 38 208.86±51.87 689.46±129.06 1 059.95±198.29*# 966.81±238.20*# 304.55±65.55腦出血組 29 250.15±91.62 762.44±154.85 1 105.79±208.58*# 920.88±204.56*# 392.72±138.14正常對照組 52 173.30±55.06 - - - -

2.2 比較腦梗死和腦出血患者發(fā)病后DAO水平變化

腦梗死、腦出血兩組患者均在發(fā)病72 h DAO出現(xiàn)高峰期（P＜0.05），且高峰持續(xù)1周左右，72 h較1周 DAO水平，差異無統(tǒng)計學意義 （P＞0.05）。兩組間數(shù)值在相同時間段內(nèi)DAO水平對比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）（見表2）。

3 討論

Hans Selye于1936年首先在醫(yī)學領(lǐng)域提出了應(yīng)激概念，并把它定義為“對任何刺激引起的共同生物反應(yīng)”[3]，隨后的相關(guān)研究表明，神經(jīng)系統(tǒng)可以受到應(yīng)激狀態(tài)的干擾，通過腦-腸軸的相互作用引起免疫紊亂[4-5]，胃腸道系統(tǒng)受損[6]。

DAO被認為是腸黏膜功能的標志酶，是存在于成熟的小腸黏膜絨毛上皮細胞內(nèi)的高活性細胞內(nèi)酶，在外周血中有穩(wěn)定的活性，能準確反映腸黏膜的成熟度、完整性和損傷程度[7]。D-LAC是腸道固有細菌的代謝終產(chǎn)物，哺乳動物既不產(chǎn)生也不能代謝D-LAC。急性應(yīng)激狀態(tài)下，腸黏膜通透性增加，細菌在受損的局部大量繁殖，使血液中的D-LAC水平升高[8]。該項研究發(fā)現(xiàn)，黏膜屏障功能障礙發(fā)生在急性腦血管病發(fā)病后72 h，并且損害可以持續(xù)1周以上。且腦梗死及腦出血患者腸黏膜屏障功能在相對應(yīng)的時間點無顯著差異。

腸道的免疫調(diào)節(jié)、應(yīng)激調(diào)節(jié)作用近年逐漸被關(guān)注。腦-腸軸通過神經(jīng)系統(tǒng)、肽類物質(zhì)及一些細胞因子將神經(jīng)系統(tǒng)與消化系統(tǒng)緊密聯(lián)系在一起，正確及時的處理方式可以預防應(yīng)激狀態(tài)下引起的腸源性感染，改善急性腦血管病患者的預后。

[1] Singh V，Roth S，Llovera G，et al. Microbiota Dysbiosis Controls the Neuroinflammatory Response after Stroke[J]. J Neurosci，2016，36（28）：7428-7440.

[2] Biancheri P，Di Sabatino A，Corazza GR，et al. Proteases and the gut barrier[J]. Cell Tissue Res，2013，351（2）：269-280.

[3] Zhang Y，Gu F，Wang F，et al. Effects of early enteral nutrition on the gastrointestinal motility and intestinal mucosal barrier of patients with burn-induced invasive fungal infection[J]. Pak J Med Sci，2016，32（3）：599-603.

[4] Bhattacharyya A，Chattopadhyay R，Mitra S，et al. Oxidative stress: an essential factor in the pathogenesis of gastrointestinal mucosal diseases[J]. Physiol Rev，2014，94（2）：329-354.

[5] Filpa V，Moro E，Protasoni M，et al. Role of glutamatergic neurotransmission in the enteric nervous system and brain-gut axis in health and disease[J]. Neuropharmacology，2016（111）：14-33.

[6] Cakmaz R，Büyüka??k O，Kahramansoy N，et al. A combination of plasma DAO andcitrulline levels as a potential marker for acute mesenteric ischemia[J]. Libyan J Med，2013，26（8）：1-6.

[7] Ye-cheng Liu，Zhi-wei Qi，Shi-gong Guo，et al. Role of corticotrophin releasing hormone in cerebral infarction-related gastrointestinal barrier dysfunction[J]. World J Emerg Me，2011，2（1）：59-65.

[8] Zhou K，Jiang M，Liu Y，et al. Effect of bile pigments on the compromised gut barrier function in a rat model of bile duct ligation[J]. PLoS One，2014，9（6）：e98905.

Early Changes of Intestinal Mucosal Barrier Function in Patients With Acute Cerebral Infarction and Cerebral Hemorrhage

CHEN Weiwei1LIU Zhihan2ZHANG Xia1HUANG Wenjuan1XIE Zhiyuan3SUN Huiqin11 Department of Neurology Internal Medicine, The Central Hospital of Xuzhou, Xuzhou Jiangsu 221000, China, 2 Department of Neurology Internal Medicine, The Affiliated Hospital of Xuzhou Medical University, Xuzhou Jiangsu 221000, China, 3 Department of Gastrointestinal Surgery, The Central Hospital of Xuzhou, Xuzhou Jiangsu 221000, China

Objective To explore the changes of intestinal barrier function in patients with acute cerebral infarction and cerebral hemorrhage in the early stage. Methods 67 cases of patients with acute cerebral infarction and cerebral hemorrhage were enrolled in department of neurology from September 2013 to December 2015. Blood samples were taken from these patients at different time points(within 12 h, 24 h, 72 h, 1 week, 3 months). At the same time, D-LAC and DAO levels were measured in 54 cases of patients with outpatient physical examination during the same period as control to compare the changes of intestinal function in the patients. Results Compared with the normal control group, acute cerebral infarction, cerebral hemorrhage occurred after the change in the incidence ofintestinal mucosal barrier function, and cerebral infarction, cerebral hemorrhage group after the onset of 24 h compared with the onset of the early (12 h) D-LAC, DAO levels gradually increased, then increased gradually, reached the peak at 72 h, followed by 1 weeks of sustained high level of serum D-LAC and DAO (P ＜0.05). (2) D-LAC, DAO levels of patients with cerebral infarction and cerebral hemorrhage in different Onset time (within 12 h, 24 h, 72 h, 1 week, 3 months) had no significant difference (P ＞ 0.05). Conclusion Both of patients with cerebral infarction and cerebral hemorrhage at acute phase of stress state appear the changes of intestinal mucosal barrier function, and there was no significant difference between two groups in the same period of time.

Cerebral Infarction, Cerebral Hemorrhage, Intestinal mucosal barrier, DAO, D-LAC

R642

A

1674-9308（2016）32-0099-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.32.055

1 徐州市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，江蘇 徐州 221000；2 徐州醫(yī)學院附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，江蘇 徐州 221000；3 徐州市中心醫(yī)院胃腸外科，江蘇 徐州 221000

孫慧勤，E-mail：353001083@qq.com