白會(huì)新，王靚靚，單安山

（1.大慶市畜牧獸醫(yī)局，黑龍江大慶163311；2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營養(yǎng)研究所，哈爾濱150030）

飼糧中添加黃腐酸對(duì)生長肥育豬抗氧化性能的影響

白會(huì)新1，2，王靚靚1，單安山2

（1.大慶市畜牧獸醫(yī)局，黑龍江大慶163311；2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營養(yǎng)研究所，哈爾濱150030）

文章旨在研究飼糧中添加不同劑量的黃腐酸（fulvic acid,FA）對(duì)生長肥育豬抗氧化性能的影響。選取平均體重（30.0±2.5）kg的長大二元雜種生長豬180頭，隨機(jī)分為5組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6頭豬。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加0.2%、0.4%、0.6%和0.8%FA。當(dāng)試驗(yàn)豬平均體重達(dá)90 kg時(shí)結(jié)束飼養(yǎng)試驗(yàn)。結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，添加0.4%FA顯著提高豬血清中總抗氧化能力（P<0.05）；添加0.6%FA顯著提高豬血清和肝臟中谷胱甘肽過氧化物酶活性（P<0.05）；添加0.4%和0.6%FA顯著提高豬血清中超氧化物歧化酶活性（P<0.05）；添加0.2%、0.4%和0.6%FA豬血清中丙二醛含量均顯著降低（P<0.05），且添加0.4%FA顯著降低豬肌肉中丙二醛含量（P<0.05）。綜上所述，在本試驗(yàn)條件下，飼糧中添加0.4%～0.6%的FA有利于提高生長肥育豬的抗氧化性能。

黃腐酸；生長肥育豬；抗氧化性能

腐植酸是一種結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜的高分子質(zhì)量有機(jī)弱酸混合物[1]，其所含有的黃腐酸（FA）不僅分子量最小且結(jié)構(gòu)與腐植酸最為相似，可促進(jìn)動(dòng)植物生長[2]、增強(qiáng)機(jī)體免疫能力[3]、抗炎殺菌[4]、提高抗病力[5]。FA中含有的酚羥基官能團(tuán)有提高機(jī)體抗氧化的作用，參與生物體中單電子氧化還原過程，對(duì)動(dòng)植物體組織細(xì)胞脂質(zhì)過氧化作用有一定的抑制作用[6-7]。有研究報(bào)道，F(xiàn)A能夠降低小鼠、家禽組織中的丙二醛含量，提高過氧化物酶、超氧化物歧化酶以及谷胱甘肽過氧化氫轉(zhuǎn)移酶的活性[8-9]；降低鹽堿脅迫下的小麥根系活性氧的積累，增強(qiáng)過氧化物酶和超氧化物歧化酶活性[10]。然而，F(xiàn)A作為飼料添加劑對(duì)豬抗氧化能力的報(bào)道較少，本文在前人研究的基礎(chǔ)上，在飼糧中添加FA研究其對(duì)生長肥育豬抗氧化能力的影響，探討FA的抗氧化機(jī)理和作為飼料添加劑的適宜添加量。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用的天然FA由內(nèi)蒙古永業(yè)農(nóng)豐生物科技有限責(zé)任公司提供，該產(chǎn)品提取自風(fēng)化煤和褐煤，F(xiàn)A含量實(shí)測(cè)值為12.05%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼糧

采用單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選取平均體重為（30±2.5）kg的長大二元雜種生長豬180頭，隨機(jī)分為5組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6頭豬。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組飼喂在基礎(chǔ)飼糧中分別添加0.2%、0.4%、0.6%和0.8%FA的試驗(yàn)飼糧。試驗(yàn)豬平均體重達(dá)90 kg結(jié)束飼養(yǎng)試驗(yàn)。試驗(yàn)期為87 d。

采用玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，飼養(yǎng)水平參照豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 65—2004）及NRC（1998）生長肥育豬的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)分階段配制，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗(yàn)于2011年9月1日至11月26日在河南省正陽種豬場(chǎng)繁育中心進(jìn)行，豬只飼喂干粉料，自由采食和飲水。豬舍為全磚結(jié)構(gòu)、水泥地面，每個(gè)圈分內(nèi)外兩部分，內(nèi)部為采食休息場(chǎng)所，外部為運(yùn)動(dòng)場(chǎng)，且每圈各設(shè)有1個(gè)料槽和1個(gè)鴨嘴式飲水器。按照豬場(chǎng)常規(guī)管理措施進(jìn)行驅(qū)蟲、消毒和免疫。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)與方法

試驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)試驗(yàn)豬禁食12 h，以重復(fù)為單位，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1頭試驗(yàn)豬（共計(jì)30頭），用真空采血管進(jìn)行前腔靜脈采血10 mL，3 000 r/min離心10 min，分離血清，將血清分裝于EP管中并編號(hào)，-20℃保存待測(cè)。

將采血后的試驗(yàn)豬拉至屠宰場(chǎng)，屠宰后取適量的肝臟和背最長肌，研缽進(jìn)行研磨，用生理鹽水稀釋成10%組織勻漿，放于-20℃冰箱中保存待測(cè)。

試驗(yàn)室檢測(cè)在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營養(yǎng)研究所進(jìn)行。測(cè)定血清和組織勻漿中總抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）。其中血清和組織勻漿中SOD活性測(cè)定采用黃嘌呤氧化物酶法，GSH-Px活性采用NADPH法，MDA含量測(cè)定采用硫巴比妥酸法（TBA），組織勻漿蛋白質(zhì)測(cè)定采用考馬斯亮蘭法（CBB）。測(cè)定均采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒，在日本島津UV-2401 PC紫外可見分光光度計(jì)上進(jìn)行測(cè)定。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)先用Microsoft Excel（2013）進(jìn)行整理和初步計(jì)算，然后采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件的一般線性模型（GLM）程序?qū)υ囼?yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，用Duncan法對(duì)各組間平均數(shù)進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)結(jié)果采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，以P<0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 FA對(duì)生長肥育豬血清及組織中T-AOC的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，各試驗(yàn)組血清、肝臟和肌肉中的T-AOC均有提高，其中0.4%FA組血清中的T-AOC提高45.8%，達(dá)到差異顯著性水平（P<0.05）。

表2 FA對(duì)生長肥育豬血清和組織中T-AOC的影響

2.2 FA對(duì)生長肥育豬血清及組織中GSH-Px活性的影響

由表3可知，與對(duì)照組相比，各試驗(yàn)組血清、肝臟和肌肉中的GSH-Px活性均有提高，其中0.6%FA組血清和肝臟中的GSH-Px活性分別提高28.7%和138%，均達(dá)到差異顯著性水平（P＜0.05）。而0.6%FA組肌肉中GSH-Px活性雖較對(duì)照組提高34.25%，但并未表現(xiàn)出顯著性影響（P＞0.05）。

表3 FA對(duì)生長肥育豬血清和組織中GSH-Px活性的影響

2.3 FA對(duì)生長肥育豬血清及組織中SOD活性的影響

由表4可知，與對(duì)照組相比，各試驗(yàn)組血清、肝臟和肌肉中的SOD活性均有提高，其中0.4%FA和 0.6%FA組血清中的SOD活性分別提高12.7%（P＜0.05）和12.3%（P＜0.05），0.4%FA組的肝臟和肌肉中SOD活性雖均為所有處理組中最高，但與對(duì)照組相比無顯著性差異（P＞0.05）。

表4 FA對(duì)生長肥育豬血清和組織中SOD活性的影響

2.4 FA對(duì)生長肥育豬血清及組織中MDA含量的影響

由表5可知，隨著FA含量的增加，血清、肝臟和肌肉中MDA含量先降低后慢慢升高。與對(duì)照組相比，0.2%、0.4%和0.6%FA組血清中MDA含量分別降低21.1%、26.1%和24.6%，均達(dá)到差異顯著水平（P＜0.05），0.4%FA組肌肉中MDA含量降低29.9%，差異顯著（P＜0.05）。

表5 FA對(duì)生長肥育豬血清和組織中MDA含量的影響

3 討論

機(jī)體可通過酶和非酶系統(tǒng)產(chǎn)生氧自由基。氧自由基化學(xué)性質(zhì)非常活躍，能攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸，引起脂質(zhì)過氧化作用，并因此形成脂質(zhì)過氧化物，如丙二醛、酮基、氫過氧基或內(nèi)過氧基以及新的氧自由基等。丙二醛可與類脂、蛋白質(zhì)形成交聯(lián)物，使酶的結(jié)構(gòu)和功能遭到破壞，從而進(jìn)一步降低抗氧化酶的活性[11]，形成惡性循環(huán)，使機(jī)體抗氧化功能持續(xù)受損，此時(shí)體內(nèi)的抗氧化酶系統(tǒng)對(duì)機(jī)體起動(dòng)態(tài)的保護(hù)作用，平衡機(jī)體氧化反應(yīng)的發(fā)生。在機(jī)體正常的新陳代謝過程中，體內(nèi)的抗氧化酶（如SOD、GSH-Px）可協(xié)同作用，催化超氧陰離子自由基（O2-）發(fā)生歧化反應(yīng)（O2-+O2-+H+→H2O+O2），消除體內(nèi)氧自由基的派生源，減輕自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)對(duì)機(jī)體的損害[12]，通過減少脂質(zhì)過氧化物及其降解產(chǎn)物的產(chǎn)生，提高機(jī)體的抗氧化能力[13]。

SOD和GSH-Px作為動(dòng)物體內(nèi)消除自由基損傷的主要防御酶，可催化超氧陰離子自由基的歧化反應(yīng)，阻斷自由基的連鎖反應(yīng)，減少體內(nèi)脂質(zhì)氧化，是常用抗氧化功能強(qiáng)弱的指標(biāo)[14]。本研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加FA能提高血清、肝臟和肌肉中的SOD和GSH-Px活性，當(dāng)添加量分別為0.4%和0.6%FA時(shí)，SOD和GSH-Px活性分別為最高，且兩種酶活性不隨黃腐酸添加劑量的增加而提高，而是呈現(xiàn)上凸拋物線圖形變化。同時(shí)顯著性分析發(fā)現(xiàn)，添加0.6% FA組血清和肝臟中的GSH-Px活性顯著高于對(duì)照組，添加0.4%和0.6%FA組的血清中的GSH-Px活性顯著高于對(duì)照組，這與欒白等[15]和王晶等[9]試驗(yàn)結(jié)果相一致，說明黃腐酸可提高組織中的SOD和GSH-Px活性。T-AOC是衡量機(jī)體總抗氧化能力的指標(biāo)，它的高低代表機(jī)體的總抗氧化能力。試驗(yàn)中0.4%FA組血清、肝臟和肌肉T-AOC均為最高，且肥育豬血清中的T-AOC達(dá)到顯著性差異，肝臟和肌肉中提高并不顯著。綜合前人研究黃腐酸對(duì)生長肥育豬生產(chǎn)性能[16]與血液生化指標(biāo)[17]影響結(jié)果，判斷生長肥育豬飼糧中添加0.4%～0.6%FA能顯著提高機(jī)體抗氧化酶的活性。

MDA是脂質(zhì)過氧化物形成的毒性較強(qiáng)的產(chǎn)物，是由生物體內(nèi)產(chǎn)生的氧化自由基[18]。它可以攻擊生物膜中的不飽和脂肪酸，引起脂質(zhì)發(fā)生過氧化作用而產(chǎn)生的[19-20]。MDA的含量可以間接反映生物膜脂質(zhì)過氧化的大小和對(duì)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)傷害程度的指標(biāo)[21-22]。研究表明，小鼠注射腐植酸溶液可以降低小鼠肝臟、肌肉和血清中MDA的含量，降低機(jī)體的脂質(zhì)過氧化能力[6]。王晶等[9]也證實(shí)，在42日齡肉雞飼糧中添加0.4%和1%黃腐酸可顯著降低血清中MDA含量。本研究表明，添加FA的試驗(yàn)組血清、肝臟和肌肉中的MDA含量均較對(duì)照組有所降低，且0.4%和0.6% FA組豬肌肉中MDA含量顯著降低（P<0.05），說明FA能減輕自由基對(duì)機(jī)體分子結(jié)構(gòu)損傷。從試驗(yàn)結(jié)果來看，這種變化并不是隨FA添加劑量增大而提高，抗氧化性能也并非活性越大越好。然而，產(chǎn)生這種情況的具體原因及黃腐酸對(duì)其脂質(zhì)過氧化研究機(jī)理還不明確，需待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

飼糧中添加FA可增強(qiáng)生長肥育豬的抗氧化機(jī)能，其中添加0.4%～0.6%的FA可顯著提高生長肥育豬的抗氧化能力。

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（編輯：富春妮）

經(jīng)常運(yùn)動(dòng)能讓大腦年輕10歲

【美國《時(shí)代》周刊網(wǎng)站3月23日?qǐng)?bào)道】我們知道，運(yùn)動(dòng)有益于身體和大腦，但堅(jiān)持運(yùn)動(dòng)有時(shí)候并不容易。

當(dāng)不想出汗的時(shí)候，科學(xué)證據(jù)給你提供新的動(dòng)力：美國《神經(jīng)學(xué)》周刊發(fā)表的一項(xiàng)新研究稱，運(yùn)動(dòng)可以減緩大腦衰老，最多可年輕10歲。

這是給出具體數(shù)字說明運(yùn)動(dòng)對(duì)大腦有何益處的首批研究之一。研究人員詢問了1 228名不同種族和民族背景的曼哈頓男女居民各自的運(yùn)動(dòng)習(xí)慣。他們還做了包括記憶力、系統(tǒng)性、邏輯性和思考速度在內(nèi)的認(rèn)知能力的測(cè)試問卷。五年后，研究人員對(duì)大概一半的人進(jìn)行了同樣的測(cè)試。

運(yùn)動(dòng)較多的人測(cè)試得分也更高。但當(dāng)研究人員把高血壓、糖尿病和心臟病等因素考慮進(jìn)去以后，這種關(guān)聯(lián)就消失了。研究報(bào)告的資深作者、美國邁阿密大學(xué)神經(jīng)學(xué)與公共衛(wèi)生學(xué)副教授克林頓·賴特說，這類疾病可能妨礙腦部供血，從而破壞認(rèn)知功能。

接下來，賴特和同事們只關(guān)注不存在這些供血風(fēng)險(xiǎn)的人，比較他們?cè)撗芯壳昂蟮臏y(cè)試成績。他們發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動(dòng)更多的人得分也更高。此外，這種傾向在思考速度和對(duì)某段往事的記憶力這兩方面尤其突出。

（轉(zhuǎn)自參考消息[N]，2016-03-26）

Effects of Dietary Supplementation Fulvic Acid on Antioxidation in Growing-finishing Pigs

BAI Huixin1,2,WANG Jingjing1,SHAN Anshan2
(1.Daqing Bureau of Animal Husbandry and Veterinary,Daqing 163311,China; 2.Institute of Animal Nutrition,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China）

The objective of the study was to evaluate the effects of dietary supplementation with different dose of FA(fulvic acid)on antioxidation in growing-finishing pigs.A total of 180 crossbred(Landrace×Yorkshire)pigs with an average body weight(30.0±2.5)kg were randomly allotted to five treatment groups with six pens per treatment and six pigs in per pen.The pigs were given a basal maize-soybean meal diet supplemented with 0.2%,0.4%,0.6%,or 0.8%FA,respectively.When the pigs were weighted at the average weight of 90 kg,the trial was the end.The result showed as follows:compared with control group,the activities of T-AOC,GSH-Px and SOD in serum,liver and muscle tissue were high in FA diets treatments groups.When pigs were slaughter, there was significant difference(P<0.05)for activity of T-AOC in the serum,and the activity of GSH-Px of serum and liver tissue were higher(P<0.05)in pigs fed 0.6%FA diet.The activity of SOD of serum in pigs fed 0.4% and 0.6%FA diets had a significantly difference(P<0.05).Compared with control groups,inclusion of 0.2%, 0.4%and 0.6%FA groups were decreased(P<0.05)significantly in the content of MDA in serum of 90 kg pigs. In conclusion,dietary supplementation with fulvic acid can,to some extent,improve function of antioxidation in growing-finishing pigs.Overall,0.4%～0.6%FA had more beneficial effects than other doses in the growing-finishing pigs.

fulvic acid;growing-finishing pigs;antioxidation

S816.7

A

1002-1957(2016)03-0018-04

2016-03-15

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金（CARS-36）

白會(huì)新（1986-），男，黑龍江望奎人，畜牧師，碩士，主要從事豬營養(yǎng)與飼料研究工作.E-mail:neaubhx@163.com

單安山（1958-），男，遼寧東港人，教授，博士生導(dǎo)師，主要從事動(dòng)物營養(yǎng)與飼料研究工作.E-mail:asshan@neau.edu.cn