楊敏，黎中寶，盧靜，陳強(qiáng)，李文靜，黃永春

(集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院；福建省海洋漁業(yè)資源與生態(tài)環(huán)境重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室：福建 廈門(mén) 361021)

甘露寡糖對(duì)歐洲鰻鱺(Anguilla anguilla)生長(zhǎng)、消化酶活性及非特異性免疫的影響

楊敏，黎中寶*，盧靜，陳強(qiáng)，李文靜，黃永春

(集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院；福建省海洋漁業(yè)資源與生態(tài)環(huán)境重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室：福建 廈門(mén) 361021)

為探討甘露寡糖(MOS)對(duì)歐洲鰻鱺生長(zhǎng)、體組成、消化酶活性及非特異性免疫的影響，選取540尾初重為(5.82±0.02)g幼鰻，隨機(jī)分為6組，每組3個(gè)重復(fù)，在基礎(chǔ)飼料中分別添加不同含量的甘露寡糖(0、0.10%、0.20%、0.30%、0.40%、0.50%)，連續(xù)投喂42 d。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，0.40%組和0.50%組鰻鱺增重率分別比對(duì)照組提高了28.01%、23.85%(P<0.05)，肝體指數(shù)和肥滿(mǎn)度于各組間均無(wú)顯著差異(P>0.05)。相比對(duì)照組，MOS添加組魚(yú)體水分含量顯著降低，粗蛋白和粗灰分含量顯著提高，但各組之間粗脂肪含量差異不顯著(P>0.05)。0.20%～0.50%的MOS能夠提高鰻鱺腸道胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。隨著MOS含量的增加，血清超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LZM)、堿性磷酸酶(AKP)活性均呈先增后降趨勢(shì)，0.30%～0.40%添加組歐鰻血清SOD活性顯著高于對(duì)照組且達(dá)各組最高水平(P<0.05)，0.40%組LZM和AKP活性達(dá)各組最高水平，血清TP隨MOS含量的增加不斷升高，并于0.5%組達(dá)最大值。綜上所述，飼料添加MOS有促進(jìn)鰻鱺生長(zhǎng)、增強(qiáng)腸道消化酶活性和提高鰻鱺非特異性免疫力的作用，本實(shí)驗(yàn)條件下MOS的適宜添加量為0.4%。研究結(jié)果為歐洲鰻鱺在養(yǎng)殖過(guò)程中甘露寡糖適宜添加量的確定提供理論參考。[中國(guó)漁業(yè)質(zhì)量與標(biāo)準(zhǔn)，2016,6(6):40-46]

歐洲鰻鱺；甘露寡糖；生長(zhǎng)；體組成；消化酶；非特異性免疫

水產(chǎn)養(yǎng)殖的規(guī)?；诮o人們帶來(lái)豐富食物來(lái)源的同時(shí)也帶來(lái)了藥物殘留、環(huán)境污染、抗藥性等諸多問(wèn)題，迫于來(lái)自人類(lèi)健康和環(huán)境保護(hù)的壓力，綠色抗病促長(zhǎng)添加劑的研究日益受到重視。作為新型微生態(tài)添加劑中的寡糖，由于具有純天然、性質(zhì)穩(wěn)定和效果奇異的優(yōu)點(diǎn)而成為人們所期望的焦點(diǎn)。甘露寡糖(mannan oligosaccharides，MOS)作為一種典型的功能性寡糖，已經(jīng)在哺乳動(dòng)物、畜禽等研究上表現(xiàn)出具有提高養(yǎng)殖品種生產(chǎn)性能、改善腸道微生物區(qū)系及提高免疫力等功能[1-3]。在水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物的研究上，MOS也能表現(xiàn)出改善水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)性能，提高非特異性免疫力的作用。在奧尼羅非魚(yú)(Oreochromisniloticus×O.aureus)[4]的基礎(chǔ)飼料中添加不同含量的甘露寡糖，進(jìn)行30 d的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，飼料中添加0.5%、0.75%的MOS均能顯著提高奧尼羅非魚(yú)生長(zhǎng)性能，增強(qiáng)血清非特異性免疫功能；張紅梅[5]在鯉的基礎(chǔ)飼料中添加不同含量的甘露寡糖，進(jìn)行45 d的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，飼料中添加0.4%的甘露寡糖可顯著提高鯉的增重率和降低餌料系數(shù)，顯著增強(qiáng)血清SOD活性；Zhang等[6]在凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeusvannamei)的基礎(chǔ)飼料中添加不同含量的甘露寡糖，進(jìn)行56 d的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，添加量為0.4%～0.8%的MOS組血清SOD活性顯著高于對(duì)照組，生長(zhǎng)性能也得到改善。然而，水生動(dòng)物因其特殊的生理特點(diǎn)及生活環(huán)境，到目前為止，對(duì)MOS在不同的水產(chǎn)動(dòng)物上是否具有類(lèi)似作用效果的研究報(bào)道還較少，并且研究報(bào)道的結(jié)論也存在差異[7-9]，需要更多相關(guān)方面的研究。

歐洲鰻鱺(Anguillaanguilla)，屬鰻鱺目，鰻鱺科，鰻鱺屬，肉食性魚(yú)類(lèi)，肉質(zhì)鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富是國(guó)內(nèi)外暢銷(xiāo)的一種名貴淡水魚(yú)類(lèi)。歐洲鰻鱺因其養(yǎng)殖產(chǎn)量高、經(jīng)濟(jì)價(jià)值高而成為廣州、福建等沿海地區(qū)重要的養(yǎng)殖品種[10]。然而，面對(duì)日漸匱乏的鰻鱺苗種，進(jìn)行人工育苗和營(yíng)養(yǎng)飼料的研究成為維持鰻鱺產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的必由之路。

目前國(guó)內(nèi)對(duì)歐洲鰻鱺有進(jìn)行分子生物學(xué)方面的研究[11]，也有Hg2+[12]、三唑磷[13]對(duì)歐洲鰻鱺急性毒性的研究，也有歐洲鰻鱺對(duì)極限高溫和低溫耐受性的研究[14]；但目前國(guó)內(nèi)對(duì)歐洲鰻鱺營(yíng)養(yǎng)飼料的研究極少，僅見(jiàn)多維[15]、復(fù)合酶制劑[16]在歐洲鰻鱺飼料上的應(yīng)用研究，未見(jiàn)MOS在歐洲鰻鱺飼料上的研究報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)在飼料中添加MOS投喂歐洲鰻鱺，研究MOS對(duì)歐洲鰻鱺生長(zhǎng)、體成分、腸道酶活性和血清免疫酶的影響，探討MOS的適宜添加量，從而為提高歐洲鰻鱺生長(zhǎng)性能和非特異性免疫力提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)用魚(yú)及飼養(yǎng)管理

實(shí)驗(yàn)用歐洲鰻鱺購(gòu)于福建省龍巖市養(yǎng)鰻場(chǎng)。將購(gòu)回的鰻鱺置于集美大學(xué)海水試驗(yàn)場(chǎng)循環(huán)過(guò)濾桶(1 200 L)中暫養(yǎng)15 d，暫養(yǎng)期間，每天兩次定時(shí)(8:00,18:00)投喂基礎(chǔ)飼料。

暫養(yǎng)結(jié)束后挑選無(wú)病、無(wú)傷、活力好、規(guī)格均一的幼鰻540尾[初始體重為(5.82±0.02)g]，隨機(jī)分到18個(gè)帶有過(guò)濾系統(tǒng)的玻璃水族缸中(40 cm×40 cm×80 cm)，這18個(gè)缸共分為6個(gè)處理，每個(gè)處理設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)放養(yǎng)30尾鰻。按5.0%～6.0%的日投餌率分兩次進(jìn)行投喂(8:00, 18:00)，投喂時(shí)將飼料制成小團(tuán)狀，待魚(yú)飽食20 min后，用虹吸管吸去殘餌和糞便，并根據(jù)水質(zhì)狀況換1/5左右的水。實(shí)驗(yàn)期間，水溫20.6～25.8 ℃，溶氧>7.3 mg/L，氨氮<0.21 mg/L，pH7.8～8.2。

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及實(shí)驗(yàn)飼料

甘露寡糖(mannan oligosaccharide, MOS)由酵母細(xì)胞提取，商品名為奇力素(巴西奧奇特公司研制，純度≥14%)?；A(chǔ)飼料由福建天馬飼料有限公司提供，基本營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。將甘露寡糖添加到基礎(chǔ)飼料中，按逐級(jí)擴(kuò)大法混勻，配制成甘露寡糖含量分別為：0%、0.10%、0.20%、0.30%、0.40%、0.50%的6組飼料，將制好的飼料自然晾干后，保存于-4 ℃冰箱備用。

表1 基礎(chǔ)飼料基本營(yíng)養(yǎng)成分

Tab.1 The basic nutrient composition of basal diet 干重，%

1.3 樣品采集及處理

投喂42 d后，禁食24 h，將每個(gè)缸里的魚(yú)全部撈出，用適量丁香酚進(jìn)行麻醉，稱(chēng)重并記錄尾數(shù)；另外每個(gè)缸隨機(jī)撈取6尾魚(yú)進(jìn)行稱(chēng)重和量體長(zhǎng)，隨后用1 mL注射器在魚(yú)的尾靜脈處采血；采血后的魚(yú)立即在放有冰的解剖盤(pán)上進(jìn)行解剖，分離出腸道和肝臟，并將肝臟稱(chēng)重，用凍存管收集腸道和肝臟，收集好的腸道和肝臟立即放入液氮中暫時(shí)保存，然后再置于-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。所采集的血液先? ℃冰箱中靜置8 h，然后用低溫離心機(jī)(3 000 r/min、4 ℃)離心10 min，收集分離得到的血清，并置于﹣80 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。另每缸隨機(jī)取5尾鰻鱺置于﹣20 ℃冰箱保存，用于測(cè)定魚(yú)體基本營(yíng)養(yǎng)成分。

腸道粗酶液的制備：先將從-80 ℃冰箱中拿出的腸道置于冰水浴中解凍并稱(chēng)重，按1 ∶9(m/V)的比例加入4 ℃的生理鹽水，用勻漿器冰水浴勻漿5 min制得10 %的勻漿液，將制得的勻漿液在(4 000 r/min,4 ℃，20 min)條件下離心，離心后取上清液即為粗酶液，保存于﹣80 ℃冰箱待用。

1.4 指標(biāo)測(cè)定

1.4.1 生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定

分別按以下式(1)～式(5)計(jì)算鰻鱺的增重率(WGR)、特定生長(zhǎng)率(SGR)、肝體指數(shù)(HSI)和肥滿(mǎn)度(CF)、及成活率(SR)5個(gè)生長(zhǎng)指標(biāo)。

增重率WGR(%)=(W2-W1)/W1×100

式(1)

特定生長(zhǎng)率SGR(%/d)=(lnW2-lnW1)/t×100

式(2)

肝體指數(shù)HSI(%)=(Wh/W)×100

式(3)

肥滿(mǎn)度CF(%)=W/L3×100

式(4)

成活率SR(%)=(N2/N1)×100

式(5)

其中，W1和W2分別為歐洲鰻鱺初均重和末均重(g)，t為實(shí)驗(yàn)天數(shù)(d),W為樣品魚(yú)體重(g)，Wh為肝胰臟重(g)，L為樣品魚(yú)體長(zhǎng)(cm)，N1和N2分別為放養(yǎng)尾數(shù)和收獲尾數(shù)。

鰻鱺全魚(yú)體成分和飼料基本營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定方法：粗蛋白質(zhì)含量的測(cè)定采用Foss凱氏定氮法；粗脂肪含量的測(cè)定采用索氏抽提法(抽提液為乙醚)；采用馬福爐灼燒法(550 ℃)測(cè)定粗灰分；采用105 ℃常壓烘箱干燥恒重法測(cè)定水分含量。

1.4.2 腸道消化酶活性測(cè)定

腸道消化酶活性指標(biāo)包括腸道淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶，以上酶的活性均采用試劑盒進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定步驟嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，試劑盒購(gòu)于南京建成生物工程研究所。

1.4.3 非特異性免疫力指標(biāo)測(cè)定

非特異性免疫力指標(biāo)包括血清堿性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LZM)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和血清總蛋白(TP)含量，以上指標(biāo)均采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定步驟嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.5 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析

采用SPSS16.0對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析

(One-Way ANOVA)，多重比較采用Duncan法進(jìn)行，差異顯著水平取P<0.05。所得數(shù)據(jù)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(Mean±SE)表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 甘露寡糖對(duì)歐洲鰻鱺生長(zhǎng)性能的影響

表2所示，隨著飼料中MOS含量的遞增，增重率和特定生長(zhǎng)率呈逐漸上升趨勢(shì)，0.40%組和0.50%組增重率比對(duì)照組分別提高了28.01%、23.85%，達(dá)到顯著差異(P<0.05)，特定生長(zhǎng)率與增重率變化趨勢(shì)基本一致，在0.40%組達(dá)各組最高水平(P<0.05)。各組鰻鱺肝體指數(shù)和肥滿(mǎn)度均無(wú)顯著差異(P>0.05)。飼料添加MOS能夠顯著提高鰻鱺成活率(P<0.05)，0.20%～0.50%組鰻鱺均無(wú)死亡現(xiàn)象發(fā)生。

表2 MOS對(duì)歐洲鰻鱺生長(zhǎng)性能的影響

Tab.2 Effects of MOS on the growth performance ofA.anguilla

項(xiàng)目Items添加水平/% Additivelevel00.100.200.300.400.50初均重/g5.93±0.085.77±0.065.80±0.085.85±0.125.80±0.055.78±0.12末均重/g9.12±0.19c9.08±0.20c9.28±0.21bc9.50±0.23bc10.13±0.14a9.86±0.13ab增重率/%WGR53.84±1.22c57.24±1.93c60.13±4.81bc62.58±5.40bc74.79±2.36a70.70±1.25ab特定生長(zhǎng)率/%SGR1.03±0.02c1.08±0.03c1.12±0.07bc1.15±0.08bc1.33±0.03a1.27±0.02ab肝體指數(shù)/%HSI1.87±0.10a1.82±0.09a1.76±0.08a1.78±0.05a1.78±0.09a1.85±0.10a肥滿(mǎn)度/%CF0.121±0.007a0.125±0.009a0.124±0.007a0.126±0.006a0.120±0.006a0.119±0.009a存活率/%SR94.45±2.22b97.78±1.11a100±0.00a100±0.00a100±0.00a100±0.00a

注：同行上標(biāo)小寫(xiě)字母不同者表示差異顯著(P<0.05)。下同。

2.2 甘露寡糖對(duì)歐洲鰻鱺體組成的影響

MOS對(duì)歐洲鰻鱺體組成的影響見(jiàn)表3。魚(yú)體含水量0.20%組為最低，與對(duì)照組形成顯著差異(P<0.05)，0.20%組鰻鱺粗蛋白含量顯著高于對(duì)照組及0.50%組(P<0.05)，0.40%組魚(yú)體粗灰分含量最高且與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)，各組之間魚(yú)體粗脂肪含量無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表3 MOS對(duì)歐洲鰻鱺體成分的影響

Tab.3 Effects of MOS on the whole-body composition ofA.anguilla濕重，%

2.3 甘露寡糖對(duì)歐洲鰻鱺腸道消化酶活性的影響

如表4所示，在飼料中添加0.20%～0.50%的MOS能夠同時(shí)提高鰻鱺腸道胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性，0.40%組胰蛋白酶和脂肪酶活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，0.20%～0.50%組淀粉酶活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

表4 MOS對(duì)歐洲鰻鱺消化酶活性的影響

Tab.4 Effects of MOS on the activities of digestive enzymes ofA.anguilla

添加水平/%Additivelevel胰蛋白酶/(U·mg﹣1prot)Trypsin淀粉酶/(U·g﹣1prot)Amylase脂肪酶/(U·g﹣1prot)Lipase0219.30±4.99b24.95±1.42b17.73±1.09b0.10219.43±2.98b25.72±1.00b18.71±3.04ab0.20230.93±5.47ab30.52±1.81a22.08±0.84ab0.30224.30±5.22ab31.27±1.65a21.47±1.93ab0.40236.02±2.16a34.09±1.36a24.21±1.68a0.50231.99±4.86ab31.97±1.81a19.95±1.92ab

2.4 甘露寡糖對(duì)歐洲鰻鱺非特異性免疫的影響

如表5所示，隨著飼料中MOS含量的增加，血清SOD、LZM、AKP活性均先升后降，0.30%～0.40%組鰻鱺血清SOD活性顯著高于對(duì)照組，達(dá)各組最高水平(P<0.05)，0.40%組LZM和AKP活性達(dá)各組最高水平，且0.40%組LZM活力顯著高于其他各組(P<0.05)；血清TP隨MOS含量的增加不斷升高，0.50%組TP達(dá)各組峰值(P<0.05)。

表5 MOS對(duì)歐洲鰻鱺非特異性免疫的影響

Tab.5 Effects of MOS on thenonspecific immunity response ofA.anguilla

添加水平/%AdditivelevelSOD/(U·mL﹣1)LZM/(U·mL﹣1)AKP/[金氏單位·(100mL)﹣1]TP/(mg·mL﹣1)0351.35±6.52b74.63±3.31d1.53±0.11b29.04±0.90b0.10366.52±6.24ab81.80±6.08cd2.10±0.24ab29.79±1.37ab0.20364.18±3.12ab111.61±4.50b1.96±0.10ab29.18±0.43b0.30370.02±7.16a97.13±3.18bc2.03±0.26ab30.89±1.55ab0.40373.53±2.81a127.26±2.91a2.36±0.33a32.60±0.72a0.50360.28±3.76ab83.80±7.53cd1.68±0.01ab32.94±0.70a

3 討論

3.1 甘露寡糖對(duì)歐洲鰻鱺生長(zhǎng)性能的影響

基于國(guó)內(nèi)外的研究，MOS因具有選擇性促進(jìn)有益菌增殖、阻止病原菌定植，優(yōu)化腸道微生態(tài)的保健功能而對(duì)動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生著重要影響[1]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼料添加MOS有促進(jìn)歐洲鰻鱺生長(zhǎng)，提高魚(yú)增重和特定生長(zhǎng)率作用，且呈濃度依賴(lài)關(guān)系。在建鯉(CyprinuscarpioVar.Jian)[17]上的研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加0.27%的MOS使建鯉增重率和特定生長(zhǎng)率分別提高8.77%和4.50%。鯉(CyprinuscarpioL.)[18]幼魚(yú)詞料中添加0.20%甘露寡糖可使魚(yú)體增重率提高11.6%，飼料系數(shù)降低17.6%。在本實(shí)驗(yàn)中，0.40%的MOS添加組增重率較對(duì)照組提高了28.01%，達(dá)各組最高水平。張紅梅[5]在鯉飼料中添加不同含量的MOS，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，MOS添加組生長(zhǎng)率均較對(duì)照組明顯提高，0.40%的MOS處理組生長(zhǎng)率高出對(duì)照組16.8%，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果較一致。然而，添加高劑量的MOS未能進(jìn)一步提高歐鰻增重率，這在羅非魚(yú)(Oreochromisniloticus×O.aureus)[4]的實(shí)驗(yàn)中也得到證實(shí)，0.75%較0.50%的MOS使魚(yú)增重率下降，說(shuō)明過(guò)量添加MOS可能對(duì)生長(zhǎng)產(chǎn)生不利影響，原因可能是過(guò)量的MOS使魚(yú)腸道過(guò)度發(fā)酵、食糜黏度增加，而影響飼料養(yǎng)分消化吸收[19]。

在本實(shí)驗(yàn)中，MOS有降低魚(yú)體水分含量、提高魚(yú)體粗蛋白、粗灰分含量的趨勢(shì)，然而MOS僅提高了東方鲀(Takifuguflavindus)[20]魚(yú)體粗脂肪含量，MOS對(duì)歐洲鱸(Dicentrarchuslabrax)[7]和金頭鯛(Sparusaurata)[21]的魚(yú)體成分影響均不顯著，以上研究結(jié)果存在差異的原因可能跟實(shí)驗(yàn)對(duì)象飼料營(yíng)養(yǎng)組成等有關(guān)，需進(jìn)一步研究。

3.2 甘露寡糖對(duì)歐洲鰻鱺腸道消化酶活性的影響

魚(yú)類(lèi)消化酶不但反映其消化機(jī)能，而且與飼料養(yǎng)分的吸收有著直接關(guān)系。鰻鱺消化酶的研究可為其營(yíng)養(yǎng)生化與飼料質(zhì)量評(píng)定提供重要依據(jù)。迄今為止，關(guān)于MOS對(duì)魚(yú)類(lèi)腸道消化酶的影響報(bào)道較少。但研究表明，功能性寡糖能夠作用于腸道內(nèi)源性消化酶，提高內(nèi)源酶活性從而促進(jìn)魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)[22]。于艷梅[23]研究了在黃顙魚(yú)(Pelteobagrusfulvidraco)飼料中添加不同濃度梯度的魔芋甘露寡糖，結(jié)果顯示，各添加組均提高了腸道蛋白酶活性，而腸道淀粉酶和脂肪酶活性則隨魔芋甘露寡糖添加濃度的增加呈先提高后降低的趨勢(shì)。強(qiáng)俊等[24]在奧尼羅非魚(yú)(Oreochromisniloticus×O.aureus)飼料中添加低聚木糖，0.03%組魚(yú)腸蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性均達(dá)最高，顯著高于對(duì)照組。熊沈?qū)W等[25]在異育銀鯽(Carassaisauratusgibebio)飼料中添加0.01%的低聚木糖，能夠明顯觀察到其促進(jìn)生長(zhǎng)和提高腸道消化酶活性的作用。本實(shí)驗(yàn)中，飼料添加0.20%～0.50%的MOS能夠較好提升歐洲鰻鱺腸道胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。說(shuō)明飼料中適宜濃度的甘露寡糖可以促進(jìn)歐洲鰻鱺腸道消化酶分泌，從而促進(jìn)鰻鱺生長(zhǎng)。

3.3 甘露寡糖對(duì)歐洲鰻鱺非特異性免疫的影響

有研究指出，功能性寡糖可以充當(dāng)免疫刺激因子，提高動(dòng)物機(jī)體對(duì)外來(lái)抗原或藥物的免疫應(yīng)答能力，可以通過(guò)對(duì)病原微生物的識(shí)別、黏附和排除等作用來(lái)調(diào)節(jié)動(dòng)物機(jī)體的非特異性免疫防御系統(tǒng)[26]。超氧化物歧化酶(SOD)是酶促抗氧化系統(tǒng)的重要成員，SOD可增強(qiáng)吞噬細(xì)菌侵染，發(fā)揮非特異性免疫防御作用，是生物體內(nèi)廣泛存在的天然抗菌肽[27]。Zhang等[6]研究認(rèn)為4.0～8.0 g/kg MOS使凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeusvannamei)血清SOD活性顯著高于對(duì)照組，MOS不僅能提高對(duì)蝦的生長(zhǎng)性能，而且對(duì)蝦抗氨氮脅迫能力也大大增強(qiáng)。在黃顙魚(yú)飼料中添加0.2%～0.3%魔芋甘露寡糖可以顯著增強(qiáng)其血清SOD和溶菌酶活性，增加黃顙魚(yú)免疫器官指數(shù)[23]，0.20%MOS能顯著提高歐洲鱸[7]和虹鱒(Oncorhynchusmykiss)[8]血清中LZM活性，提高魚(yú)類(lèi)免疫力。本實(shí)驗(yàn)中0.30%～0.40%添加組歐鰻血清SOD活性達(dá)各組最高水平，顯著高于對(duì)照組，0.40%MOS使血清LZM活性顯著高于其他各組，到得了與上述報(bào)道較為一致的結(jié)論。另有研究證實(shí)，血清中的其他兩種指標(biāo)堿性磷酸酶(AKP)活性和血清總蛋白含量(TP)對(duì)魚(yú)類(lèi)免疫水平的高低也具有重要參考價(jià)值[28-30]。劉愛(ài)君等[4]在飼料中添加MOS不僅能使羅非魚(yú)血清SOD、LZM活性得到顯著提高，也能使AKP活性顯著升高。徐磊等[9]也指出MOS能使魚(yú)血清AKP活性顯著升高，使魚(yú)抗氧化能力增強(qiáng)。陳希等[31]給草魚(yú)投喂添加MOS的飼料使草魚(yú)血清AKP和TP活性顯著高于對(duì)照組,這與在黃顙魚(yú)[23]實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)論相一致。本實(shí)驗(yàn)中鰻鱺血清AKP活性在MOS添加量為0.4%時(shí)達(dá)到最大值，且顯著高于對(duì)照組，鰻鱺血清TP隨MOS含量的增加不斷升高，當(dāng)含量為0.40%～0.50%時(shí)達(dá)最高水平，且顯著高于對(duì)照組。

4 結(jié)論

飼料中添加適量甘露寡糖可提高歐洲鰻鱺成活率、增重率，及促進(jìn)腸道消化酶分泌，提高飼料利用率；可降低歐洲鰻鱺魚(yú)體水分含量，提高粗蛋白含量，使鰻鱺肉質(zhì)得到改善，同時(shí)也可提高歐洲鰻鱺血清免疫酶活性，提高歐洲鰻鱺非特異性免疫力。綜合考慮生長(zhǎng)、消化及非特異性免疫力等因素，建議歐洲鰻鱺飼料中甘露寡糖的最適添加量為0.40%。

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Effect of mannan oligosaccharides on growth performance, activities ofdigestive enzymes and nonspecific immunity response in Anguilla anguilla

YANG Min, LI Zhongbao*, LU Jing, CHEN Qiang, LI Wenjing, HUANG Yongchun

(Fisheries College of Jimei University; Key Laboratory of Marine Fishery Resources and Eco-environment, Xiamen 361021, China)

The objective of this study was to determine the effects of mannan oligosaccharides (MOS) on growth performance, activities of digestive enzymes and immune response inAnguillaanguilla. Juveniles [body weight (5.82±0.02) g] were randomly divided into 6 groups (with 3 replicates each). Six experimental diets were administered (adding 0%, 0.10%, 0.20%, 0.30%, 0.40%, 0.50% MOS), respectively for 42 d. The results showed that the weight gain ratios for 0.40% and 0.50% groups were higher than those of the control group by 28.01% and 23.85%. However, no significant difference was found among all hepatosomatic indexes or condition factors. Mannan oligosaccharides decreased the body moisture, while significantly increasing the crude protein and ash content. There was no significant difference among crude lipid contents compared with the control group. The feeds added with 0.20%, 0.3%, 0.4%,0.50% mannan oligosaccharides significantly increased the activities of intestinal trypsin, amylase, lipase. The activities of serum superoxide dismutase, lysozyme and alkaline phosphatase increased and then decreased with increasing mannan oligosaccharides in diets. The activities of superoxide dismutase for additions of 0.30%, 0.40% mannan oligosaccharides were significantly higher than that for the control group; activities of lysozyme and alkaline phosphatase of 0.40% group were higher than other treatments. With the increase of added mannan oligosaccharides, the concentration of serum total protein was raised, and the highest value was found in 0.40%～0.50%MOS given in discrete fashion, and cannot be in the form of a range. In conclusion, the feed added with 0.40% multi-enzyme can promote the growth performance, digestibility and nonspecific immunity response ofAnguillaanguilla.The results provided a scientific reference for suitable addition amount of MOS inAnguillaanguilla.[Chinese Fishery Quality and Standards, 2016, 6(6):40-46]

Anguillaanguilla; mannan oligosaccharides; growth performance; whole-body composition; digestive enzymes; nonspecific immunity response

LI Zhongbao, lizhongbao@jmu.edu.cn

2016-07-06；接收日期：2016-08-08

廈門(mén)市科技項(xiàng)目(3502Z20123026)

楊敏(1991-)，男，碩士研究生，研究方向?yàn)樗a(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料，1396912602@qq.com 通信作者：黎中寶，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)榉N群遺傳學(xué)和保護(hù)生物學(xué)，lizhongbao@jmu.edu.cn

S94

A

2095-1833(2016)06-0040-07