張 競，凌云映，劉曉一，李萬莎

(清華大學第一附屬醫(yī)院檢驗科，北京 100016)

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·論 著·

1 183例泌尿生殖系統(tǒng)支原體檢測及耐藥性分析

張 競，凌云映，劉曉一，李萬莎

(清華大學第一附屬醫(yī)院檢驗科，北京 100016)

目的 了解該院泌尿生殖系統(tǒng)支原體感染及耐藥情況。方法 回顧性分析2012年1月至2015年12月1 183例患者支原體培養(yǎng)結果，并對體外藥敏結果進行分析。結果 1 183例受檢標本中有636例支原體培養(yǎng)呈陽性，陽性率為53.8%，男、女性標本的陽性率分別為26.3%和56.2%；其中解脲脲原體(Uu)感染、人型支原體(Mh)感染及兩者混合感染的感染率分別為40.4%、1.2%和12.1%；67.8%的Uu感染者菌落計數(shù)≥104cfu/mL，18.9%的Mh感染者菌落計數(shù)≥104cfu/mL；藥敏結果顯示，支原體感染患者對原始霉素、交沙霉素、強力霉素和四環(huán)素具有較高的敏感性(98.3%、97.0%、92.5%、91.0%)；對氧氟沙星和環(huán)丙沙星耐藥性較高(65.1%，81.2%)。單一Uu感染患者對紅霉素和克拉霉素具有一定的敏感性。結論 本地區(qū)支原體感染率與以往比有所下降，但依然較高。耐藥監(jiān)測與以往無明顯變化，臨床應根據(jù)支原體培養(yǎng)及藥敏結果合理用藥。

支原體； 解脲脲原體； 人型支原體； 耐藥

支原體是迄今發(fā)現(xiàn)的最小、最簡單的原核生物，其與人類的多種疾病密切相關，能引起非淋菌性尿道炎、前列腺炎、尿路結石等，同時也有可能導致婦女的宮頸炎、子宮內(nèi)膜炎、習慣性流產(chǎn)和不孕癥等。其中，解脲脲原體(Uu)和人型支原體(Mh)是導致泌尿生殖系統(tǒng)支原體感染的主要病原體。近年來由于抗菌藥物的廣泛應用及醫(yī)生的經(jīng)驗治療，導致支原體的感染率和耐藥率逐漸上升。由于泌尿生殖道的生理結構特點使得藥物較難滲透，這在一定程度上給治療帶來了困難，所以治療前進行藥物敏感試驗，選擇高效敏感藥物，實施規(guī)范、足程用藥，可以降低耐藥菌株的產(chǎn)生[1-3]。為了解本地區(qū)近年來支原體感染及耐藥情況，本研究對近4年來在本院就診的泌尿生殖系統(tǒng)感染和婦科炎癥患者的支原體培養(yǎng)和藥敏結果進行統(tǒng)計和分析，現(xiàn)將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2012年1月至2015年12月來本院就診的婦產(chǎn)科和泌尿外科的泌尿生殖系統(tǒng)感染患者，共1 183例，其中男95例，女1 088例，年齡19～69歲。

1.2 標本采集 男性患者在消毒尿道口后，將無菌棉拭子插入尿道1.5 cm左右，旋轉一周并停留20 s后取出分泌物,或采用肛門指檢按摩留取前列腺液；女性患者先用無菌棉拭子將宮頸口分泌物擦干后，用另一無菌棉拭子插入宮頸2～3 cm處，旋轉1周，停留20 s后取出分泌物。采集后置于無菌管中立即送檢。所有患者取標本前都未使用抗菌藥物。

1.3 試劑 試劑盒采用法國生物梅里埃有限公司生產(chǎn)的Mycoplasma IST2。藥敏試驗包括大環(huán)內(nèi)酯類的交沙霉素(JOS)、紅霉素(ERY)、阿奇霉素(AZI)、克拉霉素(CLA)；四環(huán)素類的強力霉素(DOT)、四環(huán)素(TET)；喹諾酮類的氧氟沙星(OFL)和環(huán)丙沙星(CIP)，以及氨基糖苷類的原始霉素(PRI) 9種藥物。

1.4 操作方法 將采集的標本與含營養(yǎng)成分的R1液混合制備菌懸液，用此菌懸液溶解肉湯干粉培養(yǎng)基R2，將溶于肉湯培養(yǎng)基中的菌懸液接種于含不同底物和抗菌藥物的反應杯中，放入35 ℃培養(yǎng)箱孵育，24 h后觀察記錄Uu計數(shù)反應杯結果，48 h后觀察記錄Mh反應杯及藥敏結果。

1.5 結果判定 有效性：R2瓶剩余菌懸液不論顏色何種變化，澄清或輕微絮狀混濁表明試驗有效，液體渾濁表明有其他微生物污染，測試結果不可信，重新采集標本。反應性判斷：測試條反應杯中的液體保持黃色判定為陰性，橙色到紅色判定為陽性。藥敏判斷：兩個藥物濃度呈陰性，判斷該抗菌藥物敏感“S”；低濃度藥物呈陽性，高濃度藥物呈陰性，判斷該抗菌藥物為中介“I”；兩個藥物濃度均呈陽性，判斷該抗菌藥物為耐藥“R”。

1.6 統(tǒng)計學處理 采用WPS 表格(10.1)軟件進行統(tǒng)計分析。

2 結 果

2.1 支原體培養(yǎng)結果 本研究1 183例患者中，支原體培養(yǎng)陽性患者636例，總陽性率為53.8%。其中，男患者陽性率為26.3%(25/95)，女患者陽性率為56.2%(611/1 088)，女患者支原體培養(yǎng)陽性率明顯高于男患者。636例陽性患者中，單一Uu感染陽性率最高(40.4%)，其次為Uu+Mh混合感染(12.2%)，單一Mh感染陽性率最低(1.2%)。見表1。

表1 1 183例支原體培養(yǎng)陽性率及構成比

2.2 支原體菌落計數(shù)結果 636例感染患者中，67.8%的Uu感染者菌落計數(shù)≥104cfu/mL，18.9%的Mh感染者菌落計數(shù)≥104cfu/mL。見表2。

表2 支原體感染菌落計數(shù)結果[n(%)]

注：Uu、Mh各菌落計數(shù)中包括Uu、Mh混合感染的各自菌落計數(shù)。

2.3 藥敏結果 636例支原體藥敏試驗結果中,所有支原體感染對原始霉素、強力霉素、四環(huán)素、交沙霉素敏感率較高,分別為98.3%、97.0%、92.5%、91.0%。對氧氟沙星和環(huán)丙沙星耐藥性較高，分別為65.1%、81.2%。單一Uu感染患者對原始霉素、交沙霉素、強力霉素和四環(huán)素的敏感度均在95%以上，對氧氟沙星和環(huán)丙沙星則耐藥較為普遍；單一Mh感染患者對交沙霉素、四環(huán)素、強力霉素和原始霉素敏感度均是100.0%，對其余5種藥物普遍耐藥；混合感染的患者對強力霉素和原始霉素的敏感度均在90.0%以上，對四環(huán)素和交沙霉素敏感度超過70.0%，對其余藥物則耐藥較為普遍。見表3。

表3 支原體感染藥物敏感性試驗結果[n(%)]

注：-表示無數(shù)據(jù)。

3 討 論

支原體大小介于病毒和細菌之間，常定植于人體生殖道黏膜上皮細胞，是泌尿生殖系統(tǒng)感染的主要病原體。支原體感染后癥狀輕微，臨床容易漏診，導致反復發(fā)作遷延不愈。支原體感染率各地區(qū)報道不一[4-8]，可能與各地環(huán)境不同，檢測試劑敏感性不同、標本采集污染雜菌有關。本研究1 183例患者中，支原體感染陽性率為53.8%，高于同期劉素玲等[4]的報道，但較本室之前的研究結果(59.4%)略有下降[3]?？赡艿脑蚴怯捎谌藗儗π詡鞑ゼ膊〉念A防意識有所提升，治療更加規(guī)范有效。本地區(qū)支原體感染主要以Uu為主(40.4%)，其次是Uu和Mh混合感染(12.1%)，較少發(fā)生Mh單獨感染(1.2%)，符合國內(nèi)文獻[6-8]的報道。較以往比，單一Uu感染率下降(以往54.75%)，混合感染率上升(以往3.70%)，體現(xiàn)本地區(qū)單一感染控制較好，混合感染趨勢增加。本研究中男性標本較少，與本院就診婦科患者居多有關，結果顯示女性支原體感染率明顯高于男性，與文獻[4-8]報道也是一致的。女性泌尿生殖道內(nèi)部環(huán)境較男性特殊，是女性泌尿生殖道發(fā)生支原體感染率高于男性的主要原因[8]。

支原體為條件致病菌，可正常定植于女性生殖道，當機體免疫力低下或黏膜受損時可發(fā)展為致病菌，臨床常見支原體培養(yǎng)陽性者并無明顯感染癥狀。本研究發(fā)現(xiàn)32.2%的Uu感染者及81.1%Mh感染者細菌菌落數(shù)<104cfu/mL，提示一部分培養(yǎng)陽性的“感染者”可能為正常人群攜帶者，臨床應根據(jù)患者癥狀表現(xiàn)和菌落數(shù)考慮是否應用抗菌藥物干預治療，從而避免過度治療產(chǎn)生耐藥菌群。

Uu和Mh沒有細胞壁，對作用于細胞壁的藥物如青霉素、頭孢類等不敏感，對干擾蛋白質和DNA合成的抗菌藥物較敏感，常用的治療藥物包括大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、喹諾酮類等。隨著抗菌藥物的不規(guī)則使用，支原體感染出現(xiàn)了不同程度的耐藥表現(xiàn)。本研究藥敏結果與文獻[4-8]報道類似，支原體感染的患者，對原始霉素、交沙霉素、強力霉素和四環(huán)素的敏感度較高(大于95%)；對氧氟沙星和環(huán)丙沙星則普遍耐藥。國外資料研究表明，Mh對于大環(huán)內(nèi)酯類藥物紅霉素、克拉霉素和阿奇霉素天然耐藥，對交沙霉素敏感，與本研究結果一致[9]。近年來，喹諾酮類藥物臨床應用廣泛，出現(xiàn)了很多不合理應用的現(xiàn)象，支原體的喹諾酮耐藥決定區(qū)域易發(fā)生點突變[10]，出現(xiàn)了耐藥，本研究中3種感染狀態(tài)均對喹諾酮類藥物普遍耐藥?？上驳氖荱u、Mh及兩者的混合感染對強力霉素和原始霉素均有較高的靈敏度，兩種支原體單獨感染對交沙霉素，四環(huán)素也具有較高的敏感性，與本室4年前的研究(敏感性強力霉素96.99%，原始霉素99.06%，交沙霉素95.29%，四環(huán)素92.47%)沒有顯著差異，說明本地區(qū)近幾年對抗菌藥物的規(guī)范使用具有一定成效，沒有更多耐藥菌的出現(xiàn)。臨床醫(yī)生應根據(jù)感染支原體對不同抗菌藥物的敏感性合理用藥，降低耐藥性的發(fā)生。

綜上所述，本院的支原體感染率較高，雖然相比于先前的研究有所下降，但依然高于其他地區(qū)報道。支原體感染者最多的是單一Uu感染，其次是Uu和Mh混合感染，單一Mh感染占少數(shù)。Uu、Mh及混合感染均對原始霉素和強力霉素敏感，Uu和Mh的單一感染對交沙霉素和四環(huán)素敏感，臨床要根據(jù)培養(yǎng)分型及藥敏結果合理用藥，必要時聯(lián)合用藥，提高治療效果，避免耐藥菌的產(chǎn)生。

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Analysis on genitourinary tract Mycoplasma detection and drug sensitivity test in 1 183 cases

ZHANGJing,LINGYunying,LIUXiaoyi，LIWansha

(DepartmentofClinicalLaboratory,FirstAffiliatedHospitalofTsinghuaUniversity,Beijing,100016,China)

Objective To understand the genitourinary tract Mycoplasma infection status and drug resistance in this hospital.Methods The Mycoplasma cultivation results and drug sensitivity test results in 1 183 patients in our hospital from January 2012 to December 2015 were retrospectively analyzed.Results Among 1 183 detected specimens,636 cases(53.8%) were positive in Mycoplasma culture,the positive rates of female and male specimens were 26.3% and 56.2% respectively;in which the infection rates of Uu,Mh and Uu plus Mh mixed infection were 40.4%,1.2% and 12.1% respectively;67.8% of Uu infectious cases′ colonies count≥104cfu/mL,18.9% of Mh infectious cases′ colonies count≥104cfu/mL;the drug sensitivity test results that the patients with Mycoplasma infection had higher sensitivity to pristinamycin(PRI),josamycin(JOS),doxycycline(DOT) and tetracycline(TET),which were 98.3%,97.0%,92.5% and 91.0% respectively;higher resistance to ofloxacin(OFL) and ciprofloxacin(CIP),which were 65.1% and 81.2% respectively.The patients with single Uu infection had some sensitivity to erythromycin(ERY) and clarithromycin(CLA).Conclusion The infection rate of Mycoplasma in this region is lower than ever before,but it is still higher.The drug resistance monitoring has no significant changes.Clinic should rationally use medication according to the drug sensitivity test results.

Mycoplasma; Uu; Mh; drug resistance

張競，女，技師，主要從事臨床生化、免疫和微生物檢驗研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.24.013

A

1673-4130(2016)24-3418-03

2016-09-01

2016-10-20)