李 通 陳士更 魏玉蓮 蘇秀榮 丁方軍，5*

(1 中國(guó)科學(xué)院沈陽(yáng)應(yīng)用生態(tài)研究所 沈陽(yáng) 110016

2 中國(guó)科學(xué)院大學(xué) 北京 100049

3 山東農(nóng)大肥業(yè)科技有限公司 泰安 271000

4 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)化學(xué)與材料學(xué)學(xué)院 泰安 271018

5 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院 泰安 271018)

含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)土壤-蔬菜系統(tǒng)重金屬鎘污染修復(fù)效果研究

李 通1，2陳士更3魏玉蓮1蘇秀榮4丁方軍3，5*

(1 中國(guó)科學(xué)院沈陽(yáng)應(yīng)用生態(tài)研究所 沈陽(yáng) 110016

2 中國(guó)科學(xué)院大學(xué) 北京 100049

3 山東農(nóng)大肥業(yè)科技有限公司 泰安 271000

4 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)化學(xué)與材料學(xué)學(xué)院 泰安 271018

5 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院 泰安 271018)

為了探索含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)土壤-蔬菜系統(tǒng)重金屬鎘(Cd)的修復(fù)效果，采用盆栽試驗(yàn)，研究不同濃度活化的和未活化的含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)Cd脅迫下土壤pH、Cd形態(tài)及分布、小白菜生物量及小白菜體內(nèi)全Cd含量的影響。結(jié)果表明：活化的含腐植酸風(fēng)化煤比未活化的含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)土壤重金屬Cd鈍化作用顯著；從小白菜體內(nèi)全Cd含量分析看，3 mg/kg Cd脅迫下的2HA1+3Cd處理較2HA2+3Cd處理小白菜體內(nèi)全Cd含量降低17.22%，表明活化的含腐植酸風(fēng)化煤能有效降低小白菜對(duì)Cd的吸收；從小白菜生物量看，4HA1+3Cd處理較CK1+3Cd處理小白菜生物量增加最多，為62.3%，4HA1+10Cd處理較CK2+10Cd處理小白菜生物量增加最多，為32.7%，表明4 g/kg活化的含腐植酸風(fēng)化煤能有效提高小白菜生物量。

腐植酸 風(fēng)化煤 小白菜 重金屬鎘 鈍化

土壤重金屬鎘(C d)污染已經(jīng)引起社會(huì)各界的高度關(guān)注。歐共體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)局(European Communities Bureau of Reference)認(rèn)為，土壤重金屬元素形態(tài)主要有4種：可交換及碳酸鹽結(jié)合態(tài)(酸溶態(tài))、鐵(Fe)/錳(Mn)氧化物結(jié)合態(tài)(可還原態(tài))、有機(jī)物及硫化物結(jié)合態(tài)(可氧化態(tài))以及殘?jiān)鼞B(tài)[1]。其中，酸溶態(tài)可直接毒害土壤微生物和植物，破壞土壤生態(tài)結(jié)構(gòu)，還可通過(guò)食物鏈遷移轉(zhuǎn)化，危害人體健康[2]。研究表明，含腐植酸風(fēng)化煤可以抑制重金屬在植株體內(nèi)的遷移富集，增強(qiáng)植物抗逆性[3]，同時(shí)具有改良土壤、保護(hù)土壤環(huán)境、促進(jìn)植物生長(zhǎng)發(fā)育等功能[4]。本研究采用小白菜盆栽試驗(yàn)，探討了不同濃度Cd污染條件下活化和未活化的含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)土壤－小白菜系統(tǒng)中Cd遷移及生態(tài)效應(yīng)的影響，以期為含腐植酸風(fēng)化煤在無(wú)公害蔬菜生產(chǎn)應(yīng)用上提供參考借鑒。

1 材料和方法

1.1 供試土壤

供試土壤為棕壤，采自山東省肥城市農(nóng)業(yè)科技試驗(yàn)田，取0～20 cm表層土壤，去除動(dòng)植物殘?bào)w、礫石后自然風(fēng)干，過(guò)2 mm篩，置于聚乙烯袋中，干燥陰暗處保存。供試土壤基本理化性質(zhì)見(jiàn)表1。

表1 供試土壤基本理化性質(zhì)Tab.1 The basic physical and chemical properties of tested soil

1.2 供試含腐植酸風(fēng)化煤

HA1為對(duì)未經(jīng)活化的含腐植酸風(fēng)化煤進(jìn)行人工處理，即采用氫氧化鉀和熔融尿素的活化及絡(luò)合工藝，對(duì)風(fēng)化煤中的惰性腐植酸進(jìn)行脲堿雙效活化；HA2為未經(jīng)活化的含腐植酸風(fēng)化煤(由新疆雙龍腐植酸有限公司提供)。二者基本理化性質(zhì)見(jiàn)表2。

表2 供試含腐植酸風(fēng)化煤基本理化性質(zhì)Tab.2 The basic physical and chemical properties of tested weathered coal including humic acid

1.3 供試作物

供試作物為白菜，品種為“四季小白菜”。

1.4 試驗(yàn)方案

于2015年4月在山東農(nóng)大肥業(yè)科技有限公司試驗(yàn)田大環(huán)境中(接近于大田的自然生長(zhǎng)狀態(tài))進(jìn)行盆栽小白菜人工模擬外源施加Cd污染土壤試驗(yàn)。選擇直徑12 cm，高20 cm的塑料花盆，按含腐植酸風(fēng)化煤不同添加量分別與2.5 kg人工制備Cd污染土壤摻混均勻，將前期用育苗缽培育的小白菜幼苗移栽在盆中央，不再外源施加任何肥料。每盆移栽2棵幼苗，用16 g左右土加以覆蓋。生長(zhǎng)周期為35～37天，整個(gè)周期以自來(lái)水澆灌，保持田間持水量為75%左右[7]。整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程遇降雨共計(jì)4次，降雨量約為32～35 mm；澆水共計(jì)7次，每次澆水量為150毫升/次，澆水量合計(jì)1050毫升/盆。

試驗(yàn)采用裂區(qū)設(shè)計(jì)，設(shè)外源性Cd污染為主處理。Cd污染土壤制備：以3CdSO4·8H2O作為外源Cd，參考任學(xué)軍等[8]的研究，設(shè)置3、10 mg/kg兩個(gè)濃度水平，向每盆供試土壤澆入200 mL含Cd水溶液，自然淋溶混合，自然條件下放置15天，老化后備用。設(shè)置施用活化和未活化的含腐植酸風(fēng)化煤兩類(lèi)處理，每類(lèi)各設(shè)2、4 g/kg兩個(gè)添加量水平，共設(shè)10個(gè)處理：(1) CK1+3Cd：3 mg/kg Cd污染土壤，不施加任何含腐植酸風(fēng)化煤；(2) 2HA1+3Cd：3 mg/kg Cd污染土壤，施入2 g/kg活化含腐植酸風(fēng)化煤；(3) 4HA1+3Cd：3 mg/kg Cd污染土壤，施入4 g/kg活化含腐植酸風(fēng)化煤；(4) 2HA2+3Cd：3 mg/kg Cd污染土壤，施入2 g/kg未活化含腐植酸風(fēng)化煤；(5) 4HA2+3Cd：3 mg/kg Cd污染土壤，施入4 g/kg未活化含腐植酸風(fēng)化煤；(6) CK2+10Cd：10 mg/kg Cd污染土壤，不施加任何含腐植酸風(fēng)化煤；(7) 2HA1+10Cd：10 mg/kg Cd污染土壤，施入2 g/kg活化含腐植酸風(fēng)化煤；(8) 4HA1+10Cd：10 mg/kg Cd污染土壤，施入4 g/kg活化含腐植酸風(fēng)化煤；(9) 2HA2+10Cd：10 mg/kg Cd污染土壤，施入2 g/kg未活化含腐植酸風(fēng)化煤；(10) 4HA2+10Cd：10 mg/kg Cd污染土壤，施入4 g/kg未活化含腐植酸風(fēng)化煤。每個(gè)處理4次重復(fù)，共計(jì)40個(gè)處理。

1.5 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.5.1 植物樣品采集與測(cè)定

于小白菜收獲(生長(zhǎng)37天)時(shí)，采集地上部和地下部，用自來(lái)水和去離子水清洗干凈葉片和根部后，稱(chēng)量鮮重，獲得其生物量。采用王水-高氯酸消化(GB/T 17140-1997[9])，使用原子吸收分光光度計(jì)(日本島津AA-7000F)測(cè)定小白菜體內(nèi)全Cd含量。

1.5.2 土壤樣品采集與測(cè)定

根據(jù)小白菜的生長(zhǎng)周期，分別于試驗(yàn)第0、17、37天采集盆中0～10 cm的土壤，相同處理的土壤樣品混合后，作為1個(gè)土壤樣品，風(fēng)干，研磨，分別過(guò)1 mm和0.15 mm篩，備用(測(cè)土壤pH、土壤中重金屬Cd的形態(tài)及含量[10])。土壤中重金屬Cd的形態(tài)及含量測(cè)定采用改進(jìn)后的BCR連續(xù)提取法[11]，將其分為酸溶態(tài)、可還原態(tài)、可氧化態(tài)、殘?jiān)鼞B(tài)4種形態(tài)，用原子吸收分光光度計(jì)(日本島津AA-7000F)測(cè)定。

1.5.3 數(shù)據(jù)處理分析

采用Spss 19.0中文版和Excel 2003進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)Cd脅迫下土壤性質(zhì)的影響

2.1.1 含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)土壤pH值影響

3 mg/kg和10 mg/kg Cd脅迫下，不同處理對(duì)土壤pH值影響見(jiàn)圖1、圖2。在3 mg/kg Cd脅迫下，CK1+3Cd處理土壤pH值呈現(xiàn)緩慢上升趨勢(shì)；2HA1+3Cd、4HA1+3Cd處理土壤pH值在0～17天上升速度較快，17～37天上升平行放緩，且在0～37天成比例增加；2HA2+3Cd、4HA2+3Cd處理土壤pH值在0～17天緩慢上升，17～37天緩慢下降，第37天時(shí)明顯低于供試土壤pH值(6.54)。在10 mg/kg Cd脅迫下，土壤pH值變化規(guī)律與3 mg/kg Cd脅迫處理基本一致。3 mg/kg和10 mg/kg Cd脅迫下，2HA1和4HA1處理土壤pH值均向弱堿性方向發(fā)展，2HA2和4HA2處理土壤pH值均向酸性方向發(fā)展。

2.1.2 含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)土壤Cd形態(tài)分布影響

不同處理對(duì)小白菜生長(zhǎng)第17天、第37天土壤中Cd各形態(tài)影響見(jiàn)圖3、圖4。由圖可知，第37天各處理土壤中重金屬Cd各形態(tài)含量與第17天相比較，含腐植酸風(fēng)化煤處理下的土壤酸溶態(tài)Cd含量均顯著下降，殘?jiān)鼞B(tài)Cd含量均顯著增加，可還原態(tài)和可氧化態(tài)Cd含量均變化不大。其中，2HA1+3Cd、4HA1+3Cd、2HA2+3Cd、4HA2+3Cd處理酸溶態(tài)C d含量分別下降16.3%、21.3%、7.75%、13.05%；2HA1+10Cd、4HA1+10Cd、2HA2+10Cd、4HA2+10Cd處理酸溶態(tài)Cd含量分別下降7.2%、13.2%、9.15%、21.05%。

從圖中還可以看出，含腐植酸風(fēng)化煤各處理可以不同程度促進(jìn)殘?jiān)鼞B(tài)Cd含量增加、酸溶態(tài)Cd含量減少。在3 mg/kg Cd脅迫下，2HA1+3Cd、4HA1+3Cd、2HA2+3Cd、4HA2+3Cd處理分別較CK1+3Cd處理殘?jiān)鼞B(tài)Cd含量增加4.73%、7.66%、4.57%、6.05%，酸溶態(tài)Cd含量減少10.08%、17.05%、8.92%、13.2%。在10 mg/kg Cd脅迫下，2HA1+10Cd、4HA1+10Cd、2HA2+10Cd、4HA2+10Cd處理分別較CK2+10Cd處理殘?jiān)鼞B(tài)Cd含量增加2.04%、3.51%、3.09%、4.75%，酸溶態(tài)Cd含量減少5.7%、12.1%、4.68%、9.24%。兩個(gè)濃度Cd脅迫下，分別以4HA1+3Cd和4HA1+10Cd處理下殘?jiān)鼞B(tài)Cd含量增加比例較高、酸溶態(tài)Cd含量減少比例最多，說(shuō)明4 mg/kg活化含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)土壤的修復(fù)效果較好。

2.2 含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)Cd脅迫下小白菜生物量和體內(nèi)全Cd含量的影響

2.2.1 含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)小白菜生物量的影響

不同處理對(duì)小白菜生物量的影響見(jiàn)圖5。從圖中可知，施加含腐植酸風(fēng)化煤處理與不添加含腐植酸風(fēng)化煤處理相比，對(duì)小白菜生長(zhǎng)均具有不同程度的促進(jìn)作用。在3 mg/kg Cd脅迫下，4HA1+3Cd處理與4HA2+3Cd處理差異不顯著，與CK1+3Cd、2HA1+3Cd、2HA2+3Cd處理比較差異均顯著，兩個(gè)處理小白菜生物量較CK1+3Cd處理分別增加了74%和62.3%。在10 mg/kg Cd脅迫下，4HA1+10Cd處理與CK2+10Cd、2HA2+10Cd處理比較差異顯著，與2HA1+10Cd、4HA2+10Cd處理比較差異不顯著，4HA1+10Cd處理小白菜生物量最高，比CK2+10Cd處理增加了32.7%。綜上結(jié)果表明，4 g/kg活化的含腐植酸風(fēng)化煤能有效提高小白菜的生物量。

2.2.2 含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)小白菜體內(nèi)全Cd含量影響

不同處理對(duì)小白菜體內(nèi)全C d含量影響見(jiàn)圖6。從圖中可知，在3 mg/kg Cd脅迫下，2HA1+3Cd、4HA1+3Cd、4HA2+3Cd處理與CK1+3Cd處理相比，均能顯著降低小白菜體內(nèi)全Cd含量，但三者之間差異不顯著；2HA2+3Cd處理與CK1+3Cd處理相比，對(duì)小白菜體內(nèi)全Cd含量影響則不明顯；在10 mg/kg Cd脅迫下，2HA1+10Cd、2HA2+10Cd、4HA2+10Cd處理與CK2+10Cd處理相比，均能顯著降低小白菜體內(nèi)全Cd含量，但三者之間差異不顯著；4HA1+10Cd處理與CK2+10Cd處理相比，對(duì)小白菜體內(nèi)全Cd含量影響則不明顯。

在3 mg/kg Cd脅迫下，2HA1+3Cd處理較2HA2+3Cd處理小白菜體內(nèi)全Cd含量降低17.22%，4HA1+3Cd處理較4HA2+3Cd處理小白菜體內(nèi)全Cd含量降低1.47%，兩者差異不顯著；在10 mg/kg Cd脅迫下，2HA1+10Cd處理較2HA2+10Cd處理小白菜體內(nèi)全Cd含量降低0.84%，兩者差異不顯著；4HA2+10Cd處理較4HA1+10Cd處理小白菜體內(nèi)全Cd含量降低2.09%。綜上結(jié)果表明，活化含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)低含量(3 mg/kg)Cd脅迫下小白菜體內(nèi)全Cd的遷移轉(zhuǎn)化效果好，未活化含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)高含量(10 mg/kg)Cd脅迫下小白菜體內(nèi)全Cd的遷移轉(zhuǎn)化[12]效果好。

3 結(jié)論

(1) 施用含腐植酸風(fēng)化煤處理，隨著小白菜生長(zhǎng)周期的延長(zhǎng)，土壤酸溶態(tài)Cd含量均顯著下降，殘?jiān)鼞B(tài)Cd含量均顯著增加，可還原態(tài)和可氧化態(tài)Cd含量均變化不大。4HA1+3Cd和4HA1+10Cd處理土壤殘?jiān)鼞B(tài)Cd含量增加比例較高，酸溶態(tài)Cd含量減少比例最多，說(shuō)明4 mg/kg活化含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)土壤的修復(fù)效果較好。

(2) 10 mg/kg和3 mg/kg Cd脅迫對(duì)小白菜生物量有明顯的抑制作用，而且10 mg/kg Cd脅迫較3 mg/kg Cd脅迫對(duì)小白菜的生長(zhǎng)抑制作用更明顯。施加活化或未活化的含腐植酸風(fēng)化煤處理對(duì)小白菜生物量均有所提高，其中施用4 g/kg活化的含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)提高小白菜生物量效果最明顯。

(3) 從小白菜體內(nèi)全Cd含量分析來(lái)看，含腐植酸風(fēng)化煤能有效降低小白菜對(duì)全Cd的吸收。在3 mg/kg Cd脅迫下，活化含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)小白菜體內(nèi)全Cd的遷移轉(zhuǎn)化效果好；在10 mg/kg Cd脅迫下，未活化含腐植酸風(fēng)化煤對(duì)小白菜體內(nèi)全Cd的遷移轉(zhuǎn)化效果好。

[ 1 ]Ure A. M., Quevauvillier P., Muntau H., et al.. Speciation of heavy metals in soils and sediments. An account of the improvement and harmonization of extraction techniques undertaken under the auspices of the BCR of the commission of the European Communities[J]. International Journal of Environmental Analytical Chemistry, 1993, 51: 135～151

[ 2 ]袁瑞江，姚銀娟，王麗喬，等. 生物腐植酸(黃腐酸)及其在農(nóng)業(yè)中的應(yīng)用[J]. 河北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，13(7)：36～38

[ 3 ]韓文質(zhì). 腐植酸類(lèi)肥料對(duì)土壤的改良作用及施用方法[J]. 甘肅農(nóng)業(yè)科技，1997，(6)：32～33

[ 4 ]陳溫福，張偉明，孟軍，等. 農(nóng)用生物炭研究進(jìn)展與前景[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，46(16)：3324～3333

[ 5 ]鮑士旦. 土壤農(nóng)化分析[M]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2000：25～40

[ 6 ]GB/T 11957-2001，煤中風(fēng)化煤腐植酸測(cè)定方法[S].

[ 7 ]黃興學(xué)，周?chē)?guó)林，楊文剛，等. 不同噴灌灌水上限對(duì)小白菜生長(zhǎng)品質(zhì)的影響[J]. 長(zhǎng)江蔬菜，2014(10)：32～33

[ 8 ]任學(xué)軍，杜彬，任艷軍，等. 腐植酸鈉對(duì)鎘脅迫小麥幼苗的生物效應(yīng)[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，42(10)：233～237

[ 9 ]GB/T 17140-1997，土壤質(zhì)量鉛、鎘的測(cè)定 KI-MIBK萃取火焰原子吸收分光光度法[S].

[ 10 ]文娜，楊波濤. 腐植酸肥料對(duì)土壤的改良作用及其測(cè)定方法[J]. 新疆化工，2007，26(4)：18～19

[ 11 ]徐圣友，葉琳琳，朱燕，等. 巢湖沉積物中重金屬的BCR形態(tài)分析[J]. 環(huán)境科學(xué)與技術(shù)，2008，31(9)：20～23

[ 12 ]Wang L., Xu Y. M., Sun Y. B., et al.. Identifi cation of pakchoi cultivars with low cadmium accumulation and soil factors that affect their cadmium uptake and translocation. Frontiers of Environmental Science and Engineering, 2014, 8(5): 745～755

Recovery Effect Study on Weathered Coal Including Humic Acid under the Pollution of Heavy Metal Cadmum in Soil-vegetable System

Li Tong1,2, Chen Shigeng3, Wei Yulian1, Su Xiurong4, Ding Fangjun3,5*
(1 Institute of Applied Ecology, Chinese Academy of Sciences, Shenyang, 110016 2 University of Chinese Academy of Sciences, Beijing, 100049 3 Shandong Agricultural University Fertilizer Science Technology Co. Ltd., Taian, 271000 4 College of Chemistry and Material Science, Shandong Agricultural University, Taian, 271018 5 College of Resources and Environment, Shandong Agricultural University, Taian, 271018)

In order to explore the recovery effects of the weathered coal including humic acid on soil heavy metal cadmium (Cd) in soil-vegetable system. A pot experiment was conducted to investigate the effects of different concentration of activated weathered coal including humic acid and non-activated weathered coal including humic acid on soil pH, cadmium form and its distribution, Chinese cabbage biomass and Cd total content in the body of Chinese cabbage under the stress of Cd. The results showed that the activated weathered coal including humic acid had more signifi cant effect on soil heavy metal Cd passivation than the non-activated weathered coal including humic acid. From the analysis of total Cd content in the body of Chinese cabbage, under 3 mg/kg Cd stress, the total Cd content in the body of Chinese cabbage for 2HA1+3Cd treatment decreased by 17.22% compared with 2HA2+3Cd treatment, whichshowed that the activated weathered coal including humic acid could decrease the Cd uptake by Chinese cabbage effectively. From Chinese cabbage biomass, the largest increase of Chinese cabbage biomass were 4HA1+3Cd treatment (62.3%) and CK2+10Cd treatment (32.7%) compared with CK1+3Cd treatment and CK2+10Cd separately. The results indicated that 4 g/kg activated weathered coal including humic acid could effectively improve Chinese cabbage biomass.

humic acid; weathered coal; Chinese cabbage; heavy metal Cadmum; passivation

TQ314.1

A

1671-9212(2016)06-0016-07

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào)31370514)；山東省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃“新型土壤調(diào)理劑關(guān)鍵技術(shù)研發(fā)與應(yīng)用”(項(xiàng)目編號(hào)2015GGH310001)；山東省自主創(chuàng)新專(zhuān)項(xiàng)“新型多功能微生物肥料研制”(項(xiàng)目編號(hào)2014ZZCX07302)。

2016-06-13

李通，男，1992年生，在讀碩士研究生，主要從事生物多樣性研究。*通訊作者：丁方軍，男，教授，E-mail：dfj403@163.com。