張婷波

【摘要】目的：研究螺旋藻對心理應(yīng)激大鼠心肌抗氧化的影響。方法：用無規(guī)律喂水/空瓶刺激法制作心理應(yīng)激大鼠模型，造模14天后采用比色法檢測心肌中超氧化物歧化酶（SOD）；還原型谷胱甘肽（GSH）；丙二醛（MDA）含量。結(jié)論：螺旋藻多糖可以提高應(yīng)激大鼠心肌抗氧化能力，同時也增加脂質(zhì)過氧化物的生成。

【關(guān)鍵詞】螺旋藻多糖；心理應(yīng)激；心??；抗氧化

應(yīng)激指機體在受到各種因素刺激時所出現(xiàn)的非特異性個身反應(yīng)，已有研究表明，長期的心理應(yīng)激會損傷心肌細胞，引起各種心血管疾病。應(yīng)激狀態(tài)下細胞發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，氧分子參與細胞反應(yīng)，產(chǎn)生高活性自由基，誘導(dǎo)膜發(fā)生脂質(zhì)過氧化。但生物體內(nèi)有一系列的防御機制包括超氧化物歧化酶（SOD），還原型谷胱甘肽（GSH），再加上其它內(nèi)源性抗氧化劑等。大量研究表明，SOD、GSH和脂質(zhì)過氧產(chǎn)物丙二醛（MDA）是氧化損傷的可靠指標(biāo)。螺旋藻多糖可提高血液中SOD的活性，降低MDA的含量。本實驗利用空瓶刺激法造成應(yīng)激動物模型，測定大鼠心肌組織SOD、GSH、MDA的含量，從而探討螺旋藻多糖對應(yīng)激大鼠心肌抗氧化的影響。

1材料

（1）動物：成年健康雄性SPF大鼠，10～15周齡，體重200g～250g，由昆明醫(yī)科大學(xué)動物中心提供。

（2）藥品和試劑：螺旋藻多糖提取于云南天然鈍頂螺旋藻，本實驗室自行提取的過程及方法參照文獻操作。SOD、GSH、MDA試劑盒購自南京建成生物試劑公司。

（3）儀器勻漿機、可見光分光光度計、電熱恒溫水浴箱、臺式離心機、顆粒制冰機、移液器

2方法

2.1分組

將大鼠分為四組，每組10只，空白對照組：一直定時喂水，即每天早、晚9點喂水，10min/次，腹腔注射生理鹽水，1次/日。后3組前7天早和晚9點喂水，10min/次，第8天給予情緒應(yīng)激刺激，按隨機數(shù)字表無規(guī)律喂水或空瓶刺激，并分別給藥，方法同空白對照組：模型組注射生理鹽水，SP-H組注射螺旋藻多糖100mg/kg、SP-L組注射螺旋藻多糖200mg/kg，持續(xù)14天。

2.2生化指標(biāo)的測定

大鼠作斷頭處死，立即稱量心臟體重，在冰浴條件下制成10%組織勻漿液待用。SOD、GSH及MDA含量可用試劑盒測定，并嚴格按照試劑盒的要求進行測定和對實驗結(jié)果進行分析。

3結(jié)果

實驗結(jié)果如表1所示。

4討論

本實驗中利用空瓶刺激法制造大鼠焦慮的心理應(yīng)激模型，使其氧自由基增多和（或）清除能力降低導(dǎo)致活性氧簇（ROS）在體內(nèi)或細胞內(nèi)蓄積而引起的氧化損傷過程。氧自由基直接或間接作用于機體心肌細胞，改變其超微結(jié)構(gòu)，使其變性、壞死。導(dǎo)致心肌收縮和舒張功能受損。SOD、GSH與正常產(chǎn)生的自由基作用，從而起保護的作用。當(dāng)存在斷鏈的抗氧化劑時，自由基引起的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)可避免或延遲，這種功能阻止細胞膜的脂質(zhì)過氧化，減少MDA的生成，保持細胞的結(jié)構(gòu)完整。

本實驗研究顯示，與對照組和模型組比較，SP-H、SP-L組GSH，MDA均明顯增高，而SOD在與對照組比較明顯升高，提示螺旋藻多糖可提高心肌的抗氧化能力。這可能與螺旋藻多糖具有清除自由基有關(guān)，且螺旋藻多糖對O2-的清除作用與螺旋藻多糖的劑量呈一定的量效關(guān)系。另外螺旋藻多糖還可以有效抑制小鼠心臟過氧化的發(fā)生且MDA的抑制率隨螺旋藻多糖濃度的增加而提高。

綜上所述，心理應(yīng)激可以使心肌細胞產(chǎn)生氧自由基，進而破壞心肌收縮、舒張功能，而螺旋藻多糖可以發(fā)揮抗氧化功能，減少心肌SOD、GSH消耗，但不能減少MDA生成。