于 璐,周光明,沈 潔,余艷麗

(發(fā)光與實(shí)時(shí)分析教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,西南大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,重慶 400715)

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離子交換色譜法測(cè)定10種熱帶水果中的葡萄糖、蔗糖和果糖

于 璐,周光明*,沈 潔,余艷麗

(發(fā)光與實(shí)時(shí)分析教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,西南大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,重慶 400715)

建立了高效陰離子交換-脈沖安培檢測(cè)(High performance anion exchange-pulsed amperometric detection,HPAE-PAD)測(cè)定火龍果、蓮霧、牛油果等10種熱帶水果中葡萄糖、蔗糖和果糖的檢測(cè)方法。熱帶水果中的多糖經(jīng)超聲萃取后,用METROSEP CARB 1(150 mm×4.0 mm)色譜柱進(jìn)行分離,以30.0 mmol/L NaOH為流動(dòng)相,等度洗脫,用安培檢測(cè)器檢測(cè),18 min可完成對(duì)樣品多糖的分離和定量分析。經(jīng)測(cè)定,葡萄糖和蔗糖的檢出限分別為0.1209 μg/mL和0.2827 μg/mL,線性范圍為1.0～70.0 μg/mL;果糖的檢出限為0.5501 μg/mL,線性范圍為5.0～80.0 μg/mL。樣品溶液連續(xù)5次進(jìn)樣,3種糖的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.67%～7.04%,平均回收率為78.70%～117.75%。該方法前處理簡(jiǎn)單、選擇性好、靈敏度高,可用于熱帶水果中可溶性糖的測(cè)定。

離子交換色譜,脈沖安培檢測(cè),熱帶水果,葡萄糖,蔗糖,果糖

近年來,我國(guó)熱帶水果進(jìn)口逐年增加,消費(fèi)需求日益加強(qiáng)[1],因此其營(yíng)養(yǎng)成分也引起了人們的關(guān)注。熱帶水果營(yíng)養(yǎng)豐富,富含糖類、有機(jī)酸、膳食纖維以及各種維生素[2-6]。其中糖類是熱帶水果中一類重要的有機(jī)化合物,主要是由葡萄糖、蔗糖和果糖組成。大量實(shí)驗(yàn)表明,葡萄糖是生物體內(nèi)新陳代謝不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和主要的熱量來源之一;蔗糖熱量高,攝取過量易導(dǎo)致蛀牙,引起人體肥胖和糖尿病;果糖的升糖指數(shù)(GI)低,故食用后引起蛀牙和糖尿病的幾率比葡萄糖或蔗糖等天然糖小,且易被機(jī)體吸收利用,適用于葡萄糖代謝及肝功能不全的患者補(bǔ)充能量[7]。因此,有必要建立測(cè)定熱帶水果中葡萄糖、蔗糖和果糖含量的方法。

有關(guān)于糖類的測(cè)定方法主要有比色法[8]、氣相色譜法[9]、高效毛細(xì)管電泳色譜法[10]以及高效液相色譜法[11-12]等。其中,比色法是一種傳統(tǒng)測(cè)糖的方法,它只能測(cè)定糖類總量,不能完成糖的分離,不具備選擇性[13]。氣相色譜法要求樣品易揮發(fā)且分析物熱穩(wěn)定性良好,高效毛細(xì)管電泳色譜法中所常用的紫外檢測(cè)器要求分析物對(duì)紫外光有較好的吸收,但大部分糖類沒有紫外吸收且不易揮發(fā),所以它們測(cè)定糖類事先均需衍生化處理,其操作繁瑣,給實(shí)際分析工作帶來較大的不便和誤差[14]。對(duì)于高效液相色譜法其常規(guī)的檢測(cè)器為紫外檢測(cè)器和示差折光檢測(cè)器,若采用示差折光檢測(cè)器雖無需衍生,但其靈敏度較低,易受溫度和流動(dòng)相的影響,僅適用于常量樣品的分析。近年來,離子交換色譜-脈沖安培檢測(cè)法已普遍用于糖類化合物的測(cè)定[15-18],該方法可直接對(duì)糖類進(jìn)行檢測(cè),無需進(jìn)行柱前衍生,且靈敏度高、檢測(cè)速度快、檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確[19-20],可用于熱帶水果中葡萄糖、蔗糖和果糖含量的測(cè)定。

目前對(duì)于北方常見水果中糖含量的測(cè)定已有很多報(bào)道,如王忠民[21]用比色法分析了葡萄中多糖的組成;呂明霞[22]等人用氣相色譜法對(duì)山楂、梨、蘋果、杏等水果中的單糖進(jìn)行了分析測(cè)定,而用離子色譜法對(duì)熱帶水果中糖的分析測(cè)定尚未見報(bào)道。所以,本文采用離子交換色譜-脈沖安培檢測(cè)法同時(shí)完成了熱帶水果中葡萄糖、蔗糖和果糖的分離和含量分析,為熱帶水果經(jīng)濟(jì)價(jià)值的評(píng)價(jià)和指導(dǎo)消費(fèi)者提供了科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料及儀器

NaOH、葡萄糖和蔗糖 分析純,重慶川東化學(xué)有限公司;D-果糖 生化試劑,成都市科龍化工試劑廠;超純水 電導(dǎo)率≥18.2 MΩ·cm;菠蘿、菠蘿蜜、火龍果、蓮霧、木瓜、芒果、牛油果、山竹、西番蓮和楊桃 均購(gòu)買于當(dāng)?shù)爻小?/p>

861 Advanced Compact IC型離子色譜儀、817型脈沖安培檢測(cè)器、METROSEP CARB 1(150 mm×4.0 mm)陰離子交換柱、化學(xué)抑制器、低脈沖串聯(lián)式雙活塞往復(fù)泵、雙通道蠕動(dòng)泵、Metrohm IC-Net 2.3色譜工作站 瑞士萬通公司(Metrohm);FA2004A型電子天平 上海精天電子儀器有限公司;CQ50超聲波清洗器 上海必能信超聲波有限公司;GM-0.33Ⅱ隔膜真空泵 天津市騰達(dá)過濾器件廠。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 色譜條件 分離柱:METROSEP CARB 1(150 mm×4.0 mm)陰離子交換柱;檢測(cè)器:四電位脈沖安培檢測(cè)器;再生液:200 mmol/L NaOH再生液;淋洗液:30 mmol/L NaOH溶液;流速:1.0 mL/min;柱溫:32 ℃;進(jìn)樣量:20 μL。

1.2.2 色譜條件的選擇 分別配制5.0、10.0、20.0、30.0、50.0 mmol/L的NaOH溶液作為淋洗液,選擇最佳濃度。分別使用20、25、32、35 ℃的柱溫檢測(cè)樣品,選擇最佳柱溫。分別考察了流速為1.5、1.2、1.0、0.8 mL/min時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)的靈敏度、標(biāo)準(zhǔn)樣品的分離度以及出峰時(shí)間的影響,選擇最佳流速。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 精確稱取葡萄糖、蔗糖和D-果糖的標(biāo)準(zhǔn)樣品各0.1000 g,加入超純水溶解于燒杯中,再分別轉(zhuǎn)移至100 mL的容量瓶中并定容至刻度,得到質(zhì)量濃度為1000 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。最后用移液管從1000 μg/mL葡萄糖,蔗糖和果糖的標(biāo)準(zhǔn)溶液中分別吸取一定量的溶液至100 mL的容量瓶中,配制得到葡萄糖和蔗糖濃度為1.0、5.0、10.0、20.0、30.0、50.0、70.0 μg/mL,果糖濃度為5.0、10.0、20.0、30.0、50.0、70.0、80.0 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,搖勻后用0.45 μm水系過濾膜過濾、待測(cè)。

1.2.4 樣品前處理 芒果洗凈去核,切碎,用陶瓷研缽研磨成均勻的漿糊狀。精確稱取0.1000 g,加入10.0 mL室溫下的超純水超聲(功率為100 W)萃取30 min。用布氏漏斗過濾,將濾液轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中定容,搖勻后用0.45 μm水系過濾膜過濾、待測(cè)。

菠蘿、菠蘿蜜、火龍果、蓮霧、木瓜、牛油果、山竹、西番蓮和楊桃的前處理方法同芒果,由于牛油果中含糖量極少,所以其中牛油果的稱取量為2.0000 g。

1.2.5 樣品中多糖提取單因素實(shí)驗(yàn) 稱取0.1000 g漿糊狀的芒果,加入一定量室溫下的超純水超聲萃取一定時(shí)間,按照1.2.3的方法處理,1.2.1中的條件測(cè)定,計(jì)算各單糖的提取率。各因素水平為:加水量0.1∶10、0.1∶20、0.1∶30、0.1∶40、0.1∶50和0.1∶60 g∶mL;萃取時(shí)間10、20、30、40、50和60 min。

提取率(%)=單糖的實(shí)驗(yàn)測(cè)定值/樣品稱取量×100

1.2.6 數(shù)據(jù)處理 本實(shí)驗(yàn)采用外標(biāo)法對(duì)其峰面積定量,通過Excel作出峰面積(Y)對(duì)其質(zhì)量濃度(X)的線性回歸方程,根據(jù)方程計(jì)算出其測(cè)定值。每種樣品重復(fù)進(jìn)樣5次,計(jì)算出各種單糖的平均測(cè)定值,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差和平均含量。采用加標(biāo)定性法對(duì)3種糖進(jìn)行定性分析,并計(jì)算其加標(biāo)回收率。

單糖的平均含量(%)=單糖的平均測(cè)定值/樣品稱取量×100

單糖的加標(biāo)回收率(%)=(加標(biāo)試樣測(cè)定值-平均測(cè)定值)/加標(biāo)量×100

2 結(jié)果與討論

2.1 樣品中多糖提取單因素實(shí)驗(yàn)

2.1.1 提取料液比的選擇 由圖1可知,料液比對(duì)葡萄糖、蔗糖和果糖的提取率的影響都很小,所以依據(jù)節(jié)約用料的原則選擇料液比為0.1∶10 g/mL。

圖1 料液比對(duì)3種糖提取率的影響Fig.1 Effect of liquid ratio on three kinds of sugar extraction rate

2.1.2 萃取時(shí)間的選擇 從圖2中可以看出,葡萄糖和蔗糖隨著萃取時(shí)間的增加,提取率變化不明顯,說明萃取時(shí)間對(duì)葡萄糖和蔗糖的影響較小。而果糖在不同萃取時(shí)間的提取率差異較大,當(dāng)萃取時(shí)間大于30 min時(shí),果糖的提取率稍有下降。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)超聲時(shí)間越長(zhǎng),溶液中的雜質(zhì)越多,過濾的時(shí)間越長(zhǎng),故最終考慮選取30 min為萃取時(shí)間。

圖2 萃取時(shí)間對(duì)3種糖提取率的影響Fig.2 Effect of extraction timeon three kinds of sugar extraction rate

2.2 色譜條件的選擇

2.2.1 淋洗液的選擇 本實(shí)驗(yàn)使用氫氧化鈉溶液作為流動(dòng)相洗脫樣品(結(jié)果見圖3),其出峰順序?yàn)槠咸烟?、蔗糖、果糖。?shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)NaOH溶液濃度與保留時(shí)間呈反比,濃度越高,保留時(shí)間越短;濃度越低,保留時(shí)間越長(zhǎng)。當(dāng)NaOH溶液濃度高于10.0 mmol/L,低于30.0 mmol/L時(shí),葡萄糖和蔗糖無法實(shí)現(xiàn)分離;而濃度高于30.0 mmol/L時(shí),發(fā)現(xiàn)果糖峰與蔗糖峰嚴(yán)重重疊,無法分離。當(dāng)NaOH溶液濃度為5.0 mmol/L和30.0 mmol/L時(shí),三種糖的分離效果理想,但在NaOH溶液濃度為5.0 mmol/L時(shí)總分析時(shí)間需要35min,而當(dāng)NaOH溶液濃度為30.0 mmol/L時(shí),三種糖可在18 min以內(nèi)完成分離,所以本實(shí)驗(yàn)最終確定淋洗液的濃度為30.0 mmol/L。

圖3 淋洗液濃度對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響Fig.3 Effect of the eluent concentration on experiment注:a. 5.0 mmol/L;b. 10.0 mmol/L;c. 20.0 mmol/L;d. 30.0 mmol/L;e. 50.0 mmol/L。

圖4 柱溫對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響Fig.4 Effect of the column temprature on experiment注:a. 35 ℃;b. 32 ℃;c. 25 ℃;d. 20 ℃。

2.2.2 色譜柱溫度和淋洗液流速的選擇 改變色譜柱溫度,觀察標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜峰發(fā)現(xiàn)(圖4):色譜柱的溫度對(duì)色譜峰的分離度的影響很大,當(dāng)溫度降低,峰底隨之變寬,柱壓逐漸升高,而溫度的升高又使得色譜峰的分離度變差,故綜合考慮選擇柱溫為32 ℃。

流速的改變對(duì)實(shí)驗(yàn)的靈敏度以及糖的分離度、出峰時(shí)間均有一定的影響(結(jié)果見圖5)。當(dāng)流速增大,分析時(shí)間縮短,但柱壓增大,造成靈敏度下降及分離度降低;當(dāng)流速減小,保留時(shí)間卻增加。因此最終選擇洗脫流速為1.0 mL/min最為適宜。

圖5 淋洗液流速對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響Fig.5 Effect of the eluent flow rate on experiment注:a. 0.8 mL/min;b. 1.0 mL/min;c. 1.2 mL/min;d. 1.5 mL/min。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制和檢出限的測(cè)定

分別測(cè)定1.2.2項(xiàng)條件下配制的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。50 μg/mL葡萄糖、50 μg/mL蔗糖和70 μg/mL果糖混合標(biāo)準(zhǔn)溶液譜圖如圖6所示。本實(shí)驗(yàn)采用外標(biāo)法對(duì)峰面積定量,以3種糖的峰面積(Y)對(duì)其質(zhì)量濃度(X)進(jìn)行線性回歸,根據(jù)S/N=3計(jì)算儀器檢出限。結(jié)果如表1所示。

圖6 標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖Fig.6 Chromatogram of three kinds of standard samples注:1.葡萄糖;2.蔗糖;3.果糖。

表1 線性方程,線性范圍與儀器檢出限

表2 重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)和加標(biāo)回收率結(jié)果

注:-表示未檢出。2.4 重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)和加標(biāo)回收率

按照1.2.3項(xiàng)中樣品處理方法處理樣品,在1.2項(xiàng)中優(yōu)化的色譜條件下連續(xù)對(duì)樣品進(jìn)行5次測(cè)定做重復(fù)性實(shí)驗(yàn),計(jì)算平均值和樣品測(cè)定值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差,測(cè)定結(jié)果如表2所示。

為了減小誤差,本實(shí)驗(yàn)采用加標(biāo)定性法對(duì)其進(jìn)行定性分析。在測(cè)出本底值后,準(zhǔn)確稱取0.1000 g菠蘿、菠蘿蜜、火龍果、蓮霧、木瓜、牛油果、山竹、西番蓮和楊桃,2.0000 g牛油果,分別向其中加入定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),采用1.2.3項(xiàng)中樣品處理方法處理樣品,進(jìn)樣測(cè)定,計(jì)算回收率如表2所示。

由表2可知,10種樣品測(cè)定值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.67%～7.04%(n=5),平均回收率為78.70%～117.75%。其中火龍果、蓮霧和木瓜中均未檢測(cè)出蔗糖,查閱文獻(xiàn)[23-25]得知,火龍果與木瓜中幾乎不含蔗糖,而蓮霧中尚未檢測(cè)到蔗糖可能是由于它本身蔗糖含量較低,在經(jīng)過前處理后其樣品含量低于檢出限。

2.5 樣品測(cè)定結(jié)果及色譜圖

將處理好的樣品按照1.2項(xiàng)中的色譜條件進(jìn)行色譜分析,其中火龍果和西番蓮的色譜圖見圖7～圖8。從譜圖中可以發(fā)現(xiàn),三種糖的分離效果好。

圖7 火龍果色譜圖Fig.7 Chromatogram of pitaya注:1.葡萄糖;3.果糖。

圖8 西番蓮色譜圖Fig.8 Chromatogram of passionflower注:1.葡萄糖;2.蔗糖;3.果糖。

表3 樣品測(cè)定結(jié)果

10種熱帶水果的測(cè)定結(jié)果如表3所示。由表3數(shù)據(jù)可知,幾種水果中牛油果總的含糖量(0.3183%)最低,菠蘿蜜總的含糖量(20.6337%)最高,山竹(14.2825%)、火龍果(10.3192%)以及芒果(13.3141%)的含糖量相對(duì)較多,其他幾種水果總糖含量差異不大,在3.2178%～7.2358%之間。其中葡萄糖含量最高的是火龍果(6.1115%),其次是菠蘿蜜(5.7832%),含量較低的是芒果(0.4993%)和牛油果(0.0752%),其含量低于1%,其他幾種水果中葡萄糖的含量在1.0676%～2.4664%之間;蔗糖含量較高的是山竹(8.2565%),菠蘿蜜(6.4321%)和芒果(5.9926%),而楊桃(0.5162%)和牛油果(0.0715%)的含量低于1%,火龍果、蓮霧和木瓜中的蔗糖含量由于低于儀器檢出限而未被檢測(cè)出;在10種熱帶水果中,除山竹和火龍果之外,果糖的含量在多糖總含量中所占的比例最高,尤其是菠蘿蜜(8.4184%)和芒果(6.8222%),其中菠蘿、蓮霧、木瓜、西番蓮以及楊桃的果糖含量在2.5336%～3.8465%之間,而果糖含量最低的是牛油果(0.1671%),但也遠(yuǎn)高于牛油果中葡萄糖和蔗糖的含量,說明果糖是熱帶水果中可溶性多糖最重要的組成部分。

由此可見,患有肥胖癥和糖尿病等的特殊人群可以選擇牛油果、火龍果、蓮霧和木瓜等蔗糖含量少的水果食用,葡萄糖代謝和肝功能不全的患者可以選擇葡萄糖含量少,但勿選擇果糖含量較多的芒果食用,這樣人們不僅可以享受水果的風(fēng)味,還不用擔(dān)心由于攝入過多而引起身體不適。

3 結(jié)論

本文采用超聲萃取10種熱帶水果中的葡萄糖、蔗糖和果糖,采用離子交換色譜-脈沖安培檢測(cè)法對(duì)葡萄糖、蔗糖和果糖的含量進(jìn)行了分離和定量分析。該方法檢測(cè)成本低、靈敏度高、準(zhǔn)確性好,為熱帶水果中葡萄糖、蔗糖和果糖的含量測(cè)定提供了一個(gè)快速、簡(jiǎn)便的方法。經(jīng)測(cè)定,葡萄糖和蔗糖的檢出限分別為0.1209 μg/mL和0.2827 μg/mL,果糖的檢出限為0.5501 μg/mL;3種糖的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.67%～7.04%,平均回收率為78.70%～117.75%。實(shí)驗(yàn)表明,在所測(cè)定的10種熱帶水果中葡萄糖(0.0752%～6.1115%)、蔗糖(0.0715%～8.2565%)和果糖(0.1671%～8.4184%)的含量豐富,且不同水果主要含糖量有所差異,為熱帶水果經(jīng)濟(jì)價(jià)值的評(píng)價(jià)和指導(dǎo)消費(fèi)者提供了一定的參考。

[1]陳新建,陳道明. 中國(guó)熱帶水果生產(chǎn)貿(mào)易現(xiàn)狀及發(fā)展對(duì)策[J]. 中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè),2010(3):14-17.

[2]陳儀新,衛(wèi)智權(quán),陸廣利,等. 芒果不同部位化學(xué)成分和藥理作用的研究近況[J]. 廣西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2015,18(2):102-105.

[3]房一明,張彥軍,谷風(fēng)林,等. 菠蘿蜜的營(yíng)養(yǎng)成分與鑒別比較研究[J]. 熱帶作物學(xué)報(bào),2014,35(10):2088-2092.

[4]魯力,葉玉屏,鄭艷燕,等. 油梨果實(shí)營(yíng)養(yǎng)成分分析[J]. 廣西熱作科技,1991(3):36-37.

[5]王曉紅. 蓮霧的營(yíng)養(yǎng)成分分析[J]. 中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng),2006,12(4):53-54.

[6]鄧博一,申鉉日,鄧用川. 海南百香果、蓮霧、青棗營(yíng)養(yǎng)成分的比較分析[J]. 食品工業(yè)科技,2013,34(12):335-338.

[7]陳潔,楊紅蕓. 果糖的研究進(jìn)展[J]. 華西藥學(xué)雜志,2000,15(2):111-112.

[8]李曉旭,李家政. 優(yōu)化蒽酮比色法測(cè)定甜玉米中可溶性糖的含量[J]. 保鮮與加工,2013,13(4):24-27.

[9]Ruiz-Aceituno L,Carrero-Carralero C,Ramos L,et al. Development of a carbohydrate silylation method in ionic liquids for their gas chromatographic analysis[J]. Analytica Chimica Acta,2013,787(1):87-92.

[10]Wang T,Yang X,Wang D,et al. Analysis of compositional carbohydrates in polysaccharides and foods by capillary zone electrophoresis[J]. Carbohydrate Polymers,2012,88(2):754-762.

[11]李靜芳,張素文,彭美純,等. 高效液相色譜法檢測(cè)乳制品中果糖、葡萄糖、蔗糖和乳糖的含量[J]. 食品工業(yè)科技,2011,32(6):391-393.

[12]Ouchemoukh S,Schweitzer P,Bey M B,et al. HPLC sugar profiles of Algerian honeys[J]. Food Chemistry,2010,121(2):561-568.

[13]Dubois M,Gilles K A,Hamilton J K,et al. Colorimetric method for determination of sugars and related substances[J]. Analytical Chemistry,2002,28(3):350-356.

[14]林慧,馮云,顏春榮,等. 糖類化合物的分析方法研究進(jìn)展[J]. 食品與藥品,2014,16(6):448-452.

[15]張磊,周光明,張麗君,等. 離子色譜法測(cè)定鮮果和干果中的三種糖[J]. 四川大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2014,51(4):791-796.

[16]許麗. 離子色譜法在沒食子酸和可溶性糖類分析中的應(yīng)用研究[D]. 重慶:西南大學(xué),2012:23-26.

[17]Cai L,Xiaojun S U,Xiong X. Analysis of sugar components of fermented rice wine by ion chromatography[J]. Agricultural Science & Technology,2013,13(10):1500-1502.

[18]Eggleston G,Borges E. Multiple applications of ion chromatography oligosaccharide fingerprint profiles to solve a variety of sugar and sugar-biofuel industry problems.[J]. Journal of Agricultural & Food Chemistry,2015,63(11):2841-2851.

[19]李仁勇,梁立娜,牟世芬. 高效陰離子交換色譜-脈沖安培檢測(cè)食品中糖的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè),2010,36(7):97-101.

[20]丁永勝,牟世芬. 高效陰離子交換色譜-脈沖電化學(xué)檢測(cè)方法和應(yīng)用[J]. 分析化學(xué),2005,33(4):557-561.

[21]王忠民,吳謀成,李小定,等. 葡萄多糖的提取及含量測(cè)定[J]. 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2002,25(2):57-58.

[22]呂明霞,李媛,張飛,等. 氣相色譜法分析北方水果中膳食纖維的單糖組成[J]. 中國(guó)食品學(xué)報(bào),2012,12(2):213-218.

[23]秦復(fù)霞. 火龍果多糖提取純化及單糖組成檢測(cè)[J]. 南方農(nóng)業(yè),2016(15):103-105.

[24]王文. 皺皮木瓜多糖的提取、分離、表征及化學(xué)修飾[D]. 鄭州:河南工業(yè)大學(xué),2011:27-28.

[25]陳靜,吳光斌,陳發(fā)河. HPLC測(cè)定采后蓮霧果實(shí)中可溶性糖含量及在貯藏期的變化[J]. 食品與機(jī)械,2012,28(6):103-105.

Determination of glucose,sucrose and fructose in 10 kinds of tropical fruits by ion chromatography

YU Lu,ZHOU Guang-ming*,SHEN Jie,YU Yan-li

(Key Laboratory on Luminescence and Real-Time Analysis,Ministry of Education,School of Chemistry and Chemical Engineering,Southwest University,Chongqing 400715,China)

A high performance anion exchange-pulsed amperometric detection chromatographic method was applied to determine glucose,sucrose and fructose in pitaya,wax apple,avocado and other 7 kinds of tropical fruits. After ultrasonic extraction,the polysaccharide in tropical fruits was separated by METROSEP CARB 1(150 mm×4.0 mm)anion exchange column and detected by pulsed amperometric detector. 30.0 mmol/L NaOH was used for isocratic elution. Analysis of the samples could be finished within 18 min. Detection limit of glucose and sucrose were 0.1209 μg/mL and 0.2827 μg/mL respectively. The linearity ranged from 1.0 μg/mL to 70.0 μg/mL. Detection limit of the fructose was 0.5501 μg/mL. The linearity range was 5.0～80.0 μg/mL. The RSDs of 3 polysaccharide contents for 5 consecutive determinations were between 0.67% and 7.04%,and the spike recoveries were between 78.70% and 117.75%. The method had the characteristics of simple pretreatment,good selectivity and high sensitivity,and it could be applied in the determination of soluble sugars in tropical fruits.

anion exchange chromatography;pulsed amperometric detection;tropical fruits;glucose;sucrose;fructose

2016-06-13

于璐(1993-)，女，碩士研究生，研究方向:離子色譜,E-mail:yulu444595301@qq.com。

*通訊作者:周光明(1964-)，男，博士，教授，研究方向：色譜及其聯(lián)用技術(shù)，E-mail:gmzhou@swu.edu.cn。

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2127710)。

TS207.7

A

1002-0306(2016)22-0094-06

10.13386/j.issn1002-0306.2016.22.010