張建濱
(山東省濱州市濱城區(qū)畜牧局,山東濱州 256600)
我國(guó)羊痘的防治
張建濱
(山東省濱州市濱城區(qū)畜牧局,山東濱州 256600)
羊痘是一種急性、熱性、高度接觸性的傳染病。本文介紹了近年來(lái)我國(guó)羊痘的流行情況,闡述了羊痘的實(shí)驗(yàn)室診斷與免疫現(xiàn)狀,分析了羊痘防控工作面臨的挑戰(zhàn),如羊養(yǎng)殖方式落后、羊痘的基礎(chǔ)免疫和調(diào)運(yùn)監(jiān)管難度大、企業(yè)與科研機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室生物安全監(jiān)管難度大等,以期為我國(guó)羊痘的防治工作提供參考。
羊痘;流行特點(diǎn);實(shí)驗(yàn)室診斷;防控建議
羊痘,又叫羊“天花”,按照被感染動(dòng)物綿羊與山羊上的病原基因序列差別,將該病分為綿羊痘與山羊痘[1]。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將綿羊痘和山羊痘列為須通報(bào)動(dòng)物疫病,我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病[2]。該病是一種急性、熱性、高度接觸性傳染病,發(fā)病率高,發(fā)病急,嚴(yán)重影響羊毛、羊絨和肉制品的質(zhì)量及產(chǎn)量,給世界各國(guó)養(yǎng)羊業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失[3-4]。當(dāng)前世界各國(guó)的科研機(jī)構(gòu)針對(duì)羊痘抗體診斷技術(shù)的研究較多,我國(guó)也有一些研究機(jī)構(gòu)生產(chǎn)出相應(yīng)的抗體檢測(cè)試劑盒,但是產(chǎn)品的靈敏度與特異性在臨床血清樣品檢測(cè)中并不盡如人意,導(dǎo)致我國(guó)在綿羊痘和山羊痘的檢疫診斷、凈化措施與防控對(duì)策方面仍存在諸多問(wèn)題[5]。本文就羊痘在我國(guó)的流行情況、實(shí)驗(yàn)室診斷現(xiàn)狀與羊痘的防控方面進(jìn)行了綜述
羊痘雖然在我國(guó)大部分省份內(nèi)均有發(fā)生,但其發(fā)生與流行具有較明顯的地域性[5]。據(jù)農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)公報(bào)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),2009—2016年除西藏、河南、上海、北京、遼寧沒(méi)有通報(bào)疫情外,其他大部分省均有疫情發(fā)生,如寧夏、甘肅、青海、內(nèi)蒙、湖南的疫情在80起以上,云南、福建、浙江、江蘇、陜西、安徽、新疆、陜西、貴州的疫情在25起以上[5]。其中,甘肅、青海、寧夏等我國(guó)西北地區(qū)省份羊痘通報(bào)疫情數(shù)量最多,且流行也最為嚴(yán)重。究其原因有以下幾個(gè)方面:一是我國(guó)西北地區(qū)羊養(yǎng)殖量龐大,但羊痘免疫的比例不高;二是引種防疫不夠,容易引入疾病;三是該病毒具有很強(qiáng)的耐干燥性,在干燥的痂皮內(nèi)能成活數(shù)月至數(shù)年,西北地區(qū)的干燥氣候給羊痘病毒的傳播提供了便利條件。
在我國(guó)西北地區(qū),鑒于特殊的地理氣候特點(diǎn),羊痘的發(fā)生雖無(wú)明顯季節(jié)性,但在天氣變冷的冬春時(shí)節(jié)更易發(fā)病,1—5月、11—12月的發(fā)病率要高于其他月份[6]。羊痘的發(fā)病率和死亡率變化范圍較大,懷孕羊易流產(chǎn),羔羊和老齡羊最為敏感,病死率高,同時(shí)羊痘與其他病毒或細(xì)菌混合感染會(huì)引起大規(guī)模死亡,病死率可達(dá)100%[7]。羊痘主要通過(guò)呼吸道傳播,也可經(jīng)損傷的皮膚、黏膜侵入機(jī)體,且經(jīng)常由于感染動(dòng)物與易感動(dòng)物直接的、親密的接觸而發(fā)病[8]。當(dāng)前我國(guó)對(duì)綿羊、山羊痘分子流行病學(xué)的研究近乎為零,獸醫(yī)部門(mén)對(duì)其病原分布及流行范圍、流行毒株及毒株特點(diǎn)、流行態(tài)勢(shì)與傳播規(guī)律等尚不清楚,養(yǎng)殖戶對(duì)該病防治的知識(shí)也了解甚少。羊痘還經(jīng)常和羊口瘡、山羊傳染性胸膜肺炎等傳染病混合感染,這大大增加了羊痘防控的難度。
當(dāng)前檢測(cè)羊痘的方法主要為血清學(xué)抗體檢測(cè)法,例如ELISA方法、瓊脂糖凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、病毒中和試驗(yàn)等,其中病毒中和試驗(yàn)是檢測(cè)抗羊痘病毒抗體的標(biāo)準(zhǔn)方法[9]。該方法是檢測(cè)羊痘病毒抗體最有效的方法,但也存在很多缺點(diǎn),主要是羊痘病毒培養(yǎng)困難。中和試驗(yàn)周期一般為7~14 d,既費(fèi)時(shí)費(fèi)力,又需要進(jìn)行活病毒試驗(yàn)。而在無(wú)羊痘流行的國(guó)家和地區(qū)是禁止活病毒入境的,所以該方法并不適用于基層羊痘凈化[10]。同時(shí),國(guó)內(nèi)外針對(duì)羊痘抗體診斷技術(shù)也做過(guò)許多嘗試,生產(chǎn)出相應(yīng)的抗體檢測(cè)試劑盒,但產(chǎn)品的靈敏度與特異性在臨床樣品檢測(cè)中效果并不理想。檢疫研究方面,研究者主要針對(duì)羊痘病毒的P32蛋白展開(kāi)研究[11]。羊痘病毒主要抗原蛋白P32蛋白是羊痘病毒屬的一種特異性蛋白。馬維民等[12]利用該蛋白建立的iELISA方法,特異性較好,與羊口瘡、牛痘感染血清無(wú)交叉反應(yīng),但敏感性較差。豐素蘭[13]利用大腸桿菌和酵母菌表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)了P32抗原,并以此為基礎(chǔ)建立ELISA方法,其背景值顯著降低,敏感性顯著提高。李慧霞等[9]在大腸桿菌中表達(dá)了一系列的山羊痘病毒的ORF。這些抗原可以鑒別診斷羊痘和羊口瘡,但檢測(cè)方法的敏感性有待于進(jìn)一步驗(yàn)證。中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所作為研究羊痘檢測(cè)方法較早的單位之一,已經(jīng)開(kāi)始使用電子顯微鏡觀察羊痘病毒和皮膚等病料中的病毒顆粒[14]。但由于痘病毒形狀相似,電鏡觀察并不能區(qū)分其他相似痘病毒,除非應(yīng)用特異性免疫學(xué)染色,否則也不能與正痘病毒屬病毒區(qū)分開(kāi)。雖然目前檢測(cè)抗羊痘病毒抗體的標(biāo)準(zhǔn)方法是病毒中和試驗(yàn),但該方法操作復(fù)雜,檢測(cè)周期長(zhǎng),而單一抗體組成的試劑盒不能很好地檢測(cè)到體內(nèi)抗體。
近幾年,我國(guó)研究者將目光轉(zhuǎn)到利用PCR方法檢測(cè)病原方面[15]。使用PCR檢測(cè)病毒主要是基于P32基因的設(shè)計(jì)引物。該方法具有快速、靈敏、特異性高的特點(diǎn),可作為實(shí)驗(yàn)室快速診斷羊痘病毒的有效方法[13]。但分子生物學(xué)方法操作相對(duì)基層實(shí)驗(yàn)室而言操作繁瑣、成本高,不易在基層檢疫部門(mén)推廣應(yīng)用。綜上所述,目前沒(méi)有一個(gè)很好的羊痘抗體檢測(cè)方法。
我國(guó)羊痘主要靠接種疫苗預(yù)防,一旦發(fā)生感染,并無(wú)特效藥物進(jìn)行治療。不同品種的綿羊與山羊?qū)σ呙绲拿庖叻磻?yīng)效果不盡一致,因此需要根據(jù)羊群的特殊情況制定合理的免疫間隔時(shí)間[16]。當(dāng)前市場(chǎng)上銷售的羊痘疫苗主要是羊痘滅活疫苗和弱毒疫苗。羊痘滅活疫苗副作用小、較為安全,但免疫效果不佳[17];弱毒活疫苗雖有較高的免疫力,但接種后會(huì)刺激痘疹反應(yīng),嚴(yán)重時(shí)還會(huì)引起已患其他疾病的動(dòng)物死亡,副作用較大[18]。在疫苗免疫方面,目前還沒(méi)有副作用小且免疫效果好的相關(guān)基因工程疫苗,所以羊痘與其他傳染病的聯(lián)合載體基因工程疫苗的會(huì)是未來(lái)的一個(gè)研發(fā)趨勢(shì)[19]。另外,目前免疫方式主要為尾根皮內(nèi)注射。該法操作復(fù)雜,免疫效果不佳,抗體效價(jià)較低,很多情況下免疫疫苗后往往檢測(cè)不到抗體的存在,而且由于免疫操作不當(dāng)容易引起孕羊流產(chǎn)[19]。針對(duì)羊痘疫苗免疫的特殊性,我國(guó)各級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制部門(mén)也反復(fù)普及免疫基礎(chǔ)知識(shí),提醒養(yǎng)殖戶注意以下幾點(diǎn)問(wèn)題:一是我國(guó)既生產(chǎn)山羊痘疫苗,也生產(chǎn)綿羊痘疫苗,一般的山羊痘疫苗可以預(yù)防山羊痘和綿羊痘,但綿羊痘疫苗不能預(yù)防山羊痘;二是羊痘疫苗可用于孕羊免疫,但應(yīng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行免疫注射,以免抗體效價(jià)過(guò)低,給孕羊注射疫苗時(shí),應(yīng)避免抓羊引起的機(jī)械性流產(chǎn);三是在有羊痘流行的羊群中,可用疫苗對(duì)未發(fā)痘的健康羊進(jìn)行緊急接種;四是稀釋后的疫苗須當(dāng)日用完,以免失效。
4.1 羊養(yǎng)殖方式落后,羊痘的基礎(chǔ)免疫難度加大
我國(guó)西北部分地區(qū)羊養(yǎng)殖方式落后,基礎(chǔ)免疫難度大。西北省份農(nóng)村羊養(yǎng)殖模式大多為一家一戶散養(yǎng),養(yǎng)殖規(guī)模小,管理粗放,且很大一部份羊沒(méi)有畜舍,棲身于住宅周?chē)蚍硼B(yǎng)于農(nóng)田,這本身給動(dòng)物免疫帶來(lái)很大難度,很容易造成羊痘疫苗漏免現(xiàn)象。
4.2 羊調(diào)運(yùn)監(jiān)管難度加大
我國(guó)的羊消費(fèi)和流通方式?jīng)]有根本改變,羊調(diào)運(yùn)監(jiān)管非常難。省際公路動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督檢查站建設(shè)仍然滯后,羊痘內(nèi)防外堵壓力非常大。農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)外的流動(dòng)攤販?zhǔn)袌?chǎng)監(jiān)管的盲點(diǎn),農(nóng)業(yè)部門(mén)與衛(wèi)生、林業(yè)、商務(wù)、城管等部門(mén)的監(jiān)管協(xié)作有待改進(jìn)。
4.3 企業(yè)與科研機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室生物安全監(jiān)管難度大
在羊痘病原的科學(xué)研究方面,獸醫(yī)專業(yè)實(shí)驗(yàn)室生物安全監(jiān)管難度大,尤其在企業(yè)、科研院所與大學(xué)進(jìn)行科研工作過(guò)程中采集病料與分離高致病性病原微生物以及安全操作方面,容易造成散毒等生物安全問(wèn)題。
[1] TULMAN E R,AFONSO C L,LU Z,et al. The genomes of sheep and goatpox viruses[J]. Journal of Virology,2002,12(76):6054-6061.
[2] 史宗勇,史新濤,袁建琴,等. 羊痘研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)畜牧獸醫(yī),2011,38(1):186-188.
[3] MOSS B. Poxviridae:the viruses and their replication[J]. Fields Virol,2001(1):2849-2883.
[4] 許樂(lè)仁,周碧君. 山羊痘的研究概況[J]. 內(nèi)蒙古畜牧科學(xué),2003,24(4):13-15.
[5] 顏新敏,吳國(guó)華,李健,等. 羊痘在中國(guó)的流行現(xiàn)狀分析[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2010,24(12):6-9.
[6] 孫瑛,麻風(fēng)麗,劉燕云,等. 綿羊痘病的診斷與治療[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘,2014,30(10):174.
[7] SAWHNEY A N,SINGH A K,MALIK B S. Goatpox: an anthropozoonosis[J]. Indian J Medical Research,1972,60:683-684.
[8] 魯榮光. 一起綿羊痘的診斷及病原分離鑒定[D]. 長(zhǎng)春:吉林大學(xué),2014.
[9] 李慧霞. 羊痘病毒ORF95和ORF103的表達(dá)及iELISA方法研究[D]. 蘭州:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院,2013.
[10] 薛玉成. 羊痘的流行病學(xué)、臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室診斷及防控措施[J]. 現(xiàn)代畜牧科技,2017(1):96.
[11] 陳伯祥,楊明,賀泂杰,等. 抗山羊痘病毒P32蛋白雜交瘤細(xì)胞的構(gòu)建及其單克隆抗體的制備[J]. 中國(guó)動(dòng)物檢疫,2015,22(12):66-68.
[12] 馬維民.羊痘病毒結(jié)構(gòu)蛋白P32基因的克隆及其在大腸埃希氏菌中的表達(dá)[D]. 蘭州:甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué),2006.
[13] 豐素蘭. 羊痘病毒P32基因的克隆、表達(dá)及PCR診斷方法建立[D]. 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué),2005.
[14] ZHU X L,YANG F,LI H X,et al. Identif i cation and phylogenetic analysis of a sheep pox virus isolated from the Ningxia Hui Autonomous Region of China[J]. Genetics and Molecular Research,2013,12(2):1670-1678.
[15] VENKATESAN G,BALAMURUGAN V,YOGISHARADHYA R,et al. Differentiation of sheeppox goatpox viruses by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism[J]. Virology Since,2012,27(6):353-359.
[16] CRAN V M. Control of capripoxvirus infection[J]. Vaccine,1993,11(3):1275-1279.
[17] 李華春,高華峰,姚俊,等. 山羊痘滅活疫苗研究[J].云南畜牧獸醫(yī),2005(3):5-6.
[18] 趙利平,魏學(xué)峰,陳九連,等. 山羊痘滅活疫苗免疫保護(hù)試驗(yàn)[J]. 中國(guó)獸藥雜志,2005,39(8):21-23.
[19] ALCAMI A,KOSZINOWSKI U H. Viral mechanisms of immune evasion[J]. Trends Microbiol,2000(8):410-418.
(責(zé)任編輯:杜憲)
Capripox Prevention in China
Zhang Jianbin
(Bincheng Animal Husbandry Bureau,Binzhou,Shandong 256600)
Capripox is an acute,febrile and highly contagious disease. The prevalence of Capripox,the laboratory diagnosis and the immunization status in recent years were introduced in this paper. The challenges of the prevention and control work were analyzed,such as the culture methods were too backward,the basic immunity and transport supervision were diff i cult,the biosafety monitoring of laboratories in enterprises and research institutions was very diff i cult,and so on,in order to provide reference for the prevention and control work in China.
Capripox;epidemic characteristics;laboratory diagnosis;prevention and control suggestions
S855.3
:B
:1005-944X(2017)07-0085-03
10.3969/j.issn.1005-944X.2017.07.024