譚 輝

（遼陽市中醫(yī)醫(yī)院，遼寧 遼陽 111000）

中藥透骨草的化學(xué)成分及藥理活性探究

譚 輝

（遼陽市中醫(yī)醫(yī)院，遼寧 遼陽 111000）

目的研究分析中藥透骨草的化學(xué)成分以及藥理活性，為其臨床應(yīng)用提供依據(jù)。方法篩選最優(yōu)溶劑提取條件，并采用萃取法（石油醚、乙酸乙酯和正丁醇等溶液）萃取透骨草全草提取物，對石油醚層揮發(fā)油成分采用GC-MS法分析，采用毛細(xì)管色譜柱進(jìn)行分析，鑒定其化學(xué)成分。結(jié)果鑒定出化合物52種，鑒定出的化合物當(dāng)中棕櫚酸與棕櫚酸乙酯的含量最高，共計占到28.97%；乙酸乙酯層、正丁醇層的提取物采用硅膠柱反復(fù)層析分離，獲得單體化合物4個，對化合物進(jìn)行核磁光譜數(shù)據(jù)、質(zhì)譜數(shù)據(jù)與理化數(shù)據(jù)等解析，該4個單體化合物鑒定證實為熊果酸、豆甾醇、芹菜素-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷、透骨草靈。結(jié)論透骨草在臨床上有著廣泛地應(yīng)用，了解其化學(xué)成分、藥理活性具有顯著的價值，為擴(kuò)大本藥物的應(yīng)用以及新藥的開發(fā)提供參考。

透骨草；化學(xué)成分；藥理活性

透骨草又被稱為接生草或者老婆子針線，為透骨草科透骨草屬的一種多年生的草本植物，分布廣泛，在山坡、草地與林下等地方均可見。透骨草全草都可藥用，具有活血消腫、清熱利濕等效果?，F(xiàn)階段國內(nèi)外關(guān)于透骨草的化學(xué)成分與藥理作用的研究并不不多，并且研究的年份較早，而藥典中也未收錄透骨草相關(guān)記載[1]?；诖耍狙芯窟M(jìn)一步對中藥透骨草的化學(xué)成分以及藥理活性進(jìn)行了研究分析，旨在為擴(kuò)大透骨草的應(yīng)用范圍提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料來源：中藥透骨草來自本市新鮮采摘的全草，經(jīng)鑒定為透骨草科植物透骨草全草。

1.2 試劑與設(shè)備：柱層析硅膠、薄層層析硅膠G、石油醚、乙酸乙酯、薄層層析預(yù)制板、正丁醇、氯仿、甲醇、超純水、濃硫酸與95%乙醇。實驗設(shè)備主要有101-2A型數(shù)顯電熱鼓風(fēng)干燥箱、電子天平、玻璃儀器氣流烘干器、恒溫水浴鍋、紫外分析儀、BSZ-100自動部分收集器、ESI-MS質(zhì)譜儀、核磁共振儀。

1.3 研究方法

1.3.1 乙醇濃度確定：準(zhǔn)確地稱取透骨草樣品1.0 g，6份，分別置于50 mL的錐形瓶中，分別加入水、20%、40%、60%、80%和95%乙醇各30 mL，用超聲提取30 min，搖勻后過濾（重負(fù)1次），并于容量瓶定容到50 mL，搖勻后經(jīng)TLC檢測，10%乙醇顯色，結(jié)果在60%乙醇可獲得最理想的提取效果，因此確定乙醇提取濃度為60%。

1.3.2 確定提取方法：準(zhǔn)確地稱取透骨草樣品1.0 g，3份，分別置于

100 mL的錐形瓶，分別加入40 mL 60%乙醇溶液，稱重并浸泡，回流1 h，超聲30 min，于冷浸24 h后提取，過濾后定容至容量瓶（50 mL），搖勻后經(jīng)TLC檢測，超聲提取30 min有效部位含量最高，依次大于回流法、冷浸法。因此采用超聲法。

1.3.3 組分提?。簩?.1 kg透骨草干燥粗粉加入60%十倍量乙醇溶液浸泡并使用超聲提取，30 min后對濾液減壓回收直到無醇味，然后8倍、6倍量60%乙醇，提取2次，將濃縮液合并，并放置在冰箱中（6 ℃）沉淀48 h，抽濾取出色素，然后采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇對濃縮液進(jìn)行萃取，3次（每次4 h）。各萃取部分回收至稠膏狀并烘干，各層得到的提取物依次為5 g、14 g、45 g，水層提取物92 g。

1.3.4 化學(xué)成分分離：①正丁醇層提取物分離，獲得單體化合物1和單體化合物2；②乙酸乙酯層提取物分離，獲得單體化合物3和單體化合物4。

1.3.5 制備樣品：取透骨草提取物在石油醚萃取后獲得石油醚層提取物，置入圓底燒瓶（1000 mL）中，加入水浸泡30 min，加入20粒玻璃珠后連接揮發(fā)油接收器，加熱提取，沸騰后持續(xù)提取5 h，對獲得的揮發(fā)油用無水硫酸鈉干燥并溶解于石油醚中，微孔濾過后備用。

1.3.6 GC-MS分析：色譜柱為毛細(xì)管柱Agilent19091J-416，0.25 μm，60 mm×0.32 mm；柱溫自50 ℃起（持續(xù)3 min），然后每分鐘以5 ℃升高到300 ℃（持續(xù)10 min）；分流比為50∶1；進(jìn)樣10 μL；載高純度氦氣，流量為每分鐘1.0 mL。

2 結(jié) 果

2.1 中藥透骨草揮發(fā)油相對含量超過10%的成分包括棕櫚酸乙酯、棕櫚酸，共計含量為28.97%?；衔锵鄬浚?%的成分包括5，6，7，7A-圓氫-2（4H）-苯呋喃酮和1-甲氧基丁烷；化合物相對含量＞2%的成分包括十六酸甲酯、苯二甲酸二丁酯、6，10，14-三甲基-2-十五酮。另外的45種化合物含量分布在0.05%至2.0%。

2.2 透骨草揮發(fā)油中共分離鑒定化合物52種，其中以酯類化合物的含量最高，占揮發(fā)油總量比例24.53%；其次為酸類化合物，比例為19.82%；另外還有烷烴、烯烴、醛類和酮類化合物。酯類化合物為主要成分，在根、莖、葉、花和果實中均有分布，具有一定生理活性，包括鎮(zhèn)痛、止咳、祛痰、發(fā)汗和驅(qū)風(fēng)等。十六酸也被稱為棕櫚酸，在透骨草揮發(fā)油中的相對含量為17.74%，無色、無味，是一種飽和高級脂肪酸。

3 討 論

3.1 中藥透骨草的化學(xué)成分：相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，重要透骨草的化學(xué)成分主要有生物堿、有機(jī)酸、甾醇、嘧啶類化合物，黃體酮、揮發(fā)油類化合物[3-4]。范云柏等研究發(fā)現(xiàn)，從地構(gòu)葉的地上部分分離鑒定出9個化合物，鑒定證實為三十烷醇、軟脂酸、對香豆酸、阿魏酸、胸腺嘧啶與尿嘧啶等。其中阿魏酸與香草酸具有比較好的抗氧化活性[4]。經(jīng)研究證實從透骨草當(dāng)中測得的總黃酮含量占1.42%。高海翔等人通過對干燥透骨草全草粉碎后提取、萃取，獲得含量較多的脂肪酸類化合物，所占總揮發(fā)油含量的27.56%，同時含有萜類化合物。侯冬巖、回瑞華等通過對透骨草的蒸餾萃取獲得揮發(fā)性物質(zhì)，其中透骨草揮發(fā)油含量為1.06%，并從揮發(fā)油成分中鑒定出萜類、醇類、醛類、同類、酚類、酸類、含氧化合物和其他化合物[5]。

3.2 透骨草的藥理作用：《中藥志》中記錄，透骨草歸肺經(jīng)、肝經(jīng)，具有除濕、祛風(fēng)、舒筋、止痛、活血等功效。《綱目》中記錄透骨草可惡用于治療寒濕腳氣、一切風(fēng)濕疼痛攣縮。

3.2.1 用于風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎治療：《周益生家寶方》中記載，透骨草配伍穿山甲、防風(fēng)、白蒺藜、當(dāng)歸、白芍、稀薟、海風(fēng)藤、生地、廣皮、甘草，煉蜜為丸梧桐子大，可治療風(fēng)氣疼痛、風(fēng)濕痹痛、骨質(zhì)增生與跌打損傷?！蛾兏蕦幥嘀胁菟庍x》記載透骨草配伍制川烏、制草烏、伸筋草可治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[6]。

3.2.2 抗炎、鎮(zhèn)痛：相關(guān)研究以小鼠為研究對象，探討了5種透骨草藥材的抗炎鎮(zhèn)痛作用，結(jié)果顯示5種透骨草的毒性非常的小，毒性最小的為地構(gòu)葉與角蒿，其中兩種透骨草對疼痛模型有鎮(zhèn)痛作用，可對醋酸誘發(fā)的小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加氣道顯著的對抗作用。

3.2.3 治療代指：代指指的是以十指腫痛為主要癥狀的疾病，是因經(jīng)脈血熱凝結(jié)生成的，在指甲內(nèi)出現(xiàn)腫、疼、熱，將透骨草煎湯浸洗可治療。在《楊誠經(jīng)驗方》中也記載透骨草配伍防風(fēng)、漏蘆、地榆等可用于早期的腫毒病證。

3.2.4 用于脂溢性脫發(fā)治療：脂溢性脫發(fā)是一種發(fā)蛀性脫發(fā)病，是因過度食用辛辣食物、油膩食物造成的濕熱內(nèi)生、血運(yùn)補(bǔ)償，頭發(fā)由于缺失濡養(yǎng)而導(dǎo)致脫發(fā)。研究報道指出，透骨草有除濕活血的功效，用于患處外洗，可讓藥力直接在病灶部位產(chǎn)生作用，效果明顯。經(jīng)驗方為透骨草45 g，水煎，每天1劑，先熏，然后水洗頭。

3.2.5 用于肝硬化、肝腹水的治療：李自忠的專利號CN02110312.7，以透骨草配伍麻黃、松蘿茶、大棗、索索葡萄，通過對病癥根源的分析，徹底的辯證，以養(yǎng)護(hù)五臟、解表征為根本，用于治療肝硬化與肝腹水有著確切地療效。

3.2.6 其他作用：研究還發(fā)現(xiàn)透骨草在治療足跟痛、瘢痕疙瘩、急性濕疹、頑固性偏頭痛、手癬、頸椎病、肩周炎等疾病中也有廣泛的應(yīng)用。

透骨草有多個品種，并且在民間歷來也有藥用歷史，當(dāng)前我國針對透骨草化學(xué)成分與藥理活性的研究并不深入，對二者之間的關(guān)系研究也甚少，加強(qiáng)對透骨草新的活性成分的研究，對于藥物的臨床應(yīng)用、新藥的開發(fā)有著重要的價值。

[1] 陳秀梅.鳳仙透骨草化學(xué)成分研究[J].襄陽職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報,2011,10(2):33-34.

[2] 徐波.兩種常用透骨草的形態(tài)學(xué)與功能的區(qū)別[J].海峽藥學(xué),2013,25(4):27-28.

[3] 成冬海.透骨草同科屬藥物的研究[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2012,31(23):122-124.

[4] 趙衛(wèi)星,姜紅波,王艷,等.透骨草化學(xué)成分的研究進(jìn)展[J].應(yīng)用化工,2011,40(4):696-697.

[5] 朱玲英,錢士輝,沈紅,等.鳳仙透骨草藥材高效液相指紋圖譜研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2011,22(6):1444-1446.

[6] 賈曉斌,朱靜,黃洋,等.HPLC法同時測定透骨靈橡膠膏中槲皮素、原兒茶酸和烏頭堿[J].中成藥,2011,33(11):1927-1930.

R282

B

1671-8194（2017）25-0029-02