魏 鳳，張文通，李 峰，沈志強(qiáng)*，，

（1.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院，山東 濱州 256600；2.山東綠都生物科技有限公司，山東 濱州 256600）

豬支原體肺炎疫苗應(yīng)用現(xiàn)狀與研究進(jìn)展

魏 鳳1，張文通2，李 峰1，沈志強(qiáng)*，1，2

（1.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院，山東 濱州 256600；2.山東綠都生物科技有限公司，山東 濱州 256600）

豬支原體肺炎是造成養(yǎng)豬業(yè)經(jīng)濟(jì)損失最大的傳染病之一，嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展。疫苗免疫防治該病極為關(guān)鍵。本文就該病在疫苗方面的應(yīng)用現(xiàn)狀與研究進(jìn)展展開(kāi)綜述，為有效防控該病提供參考。

豬支原體肺炎；疫苗；研究進(jìn)展

豬肺炎支原體（Mhp）是引起豬肺炎的一種接觸性呼吸系統(tǒng)傳染病。它主要通過(guò)感染破壞豬的上呼吸道纖毛、導(dǎo)致纖毛的脫落，進(jìn)而使得其他病原有機(jī)會(huì)侵襲肺臟而引發(fā)肺炎，從而導(dǎo)致豬體的體液免疫和細(xì)胞免疫功能的降低，產(chǎn)生免疫抑制，使其他細(xì)菌或病毒性疾病易感。該病的特點(diǎn)是可感染各年齡階段的豬群，當(dāng)豬肺炎支原體伴有其他病原混合感染或繼發(fā)感染（如豬圓環(huán)病毒2型、豬繁殖與呼吸綜合征病毒等）時(shí)，表現(xiàn)為呼吸困難、發(fā)熱、死亡；反之，未伴有其他病原體時(shí)，表現(xiàn)為干咳、生長(zhǎng)減慢。該病全世界普遍存在，能夠降低豬只平均日增重、降低飼料轉(zhuǎn)化率、增加防治藥費(fèi)、增加淘汰豬和低體重豬數(shù)量等，給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)了巨大經(jīng)濟(jì)損失[1-4]。

防治該病最關(guān)鍵措施是疫苗接種。目前國(guó)內(nèi)外用于預(yù)防豬肺炎支原體感染的商品疫苗有滅活苗、減毒活苗，這些疫苗己得到廣泛應(yīng)用。而一些新型疫苗的研究如活載體苗、以及亞單位苗和DNA苗均處于實(shí)驗(yàn)室研究階段。本文對(duì)該疫苗在國(guó)內(nèi)外主要研究進(jìn)展展開(kāi)綜述。

1 滅活疫苗

目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上出售的豬支原體肺炎滅活苗進(jìn)口的有：梅里亞有限責(zé)任公司的BQ14株，西班牙海博萊的J株，碩騰公司美國(guó)查理斯堡的P-5722-3株，美國(guó)普泰克的P株，勃林格殷格翰的J株，英特威美國(guó)分公司的J株。市場(chǎng)上出售的豬支原體肺炎滅活苗國(guó)產(chǎn)的有：哈藥集團(tuán)的P-5722-3株，中牧的DJ-166株。

豬支原體肺炎滅活苗可分為兩針免疫和一針免疫。兩針免疫用法與用量為：肌肉注射，每頭豬1頭份（2 ml）；兩次接種，間隔至少2周。建議首次接種在1周齡時(shí)進(jìn)行，3周齡時(shí)進(jìn)行第2次接種。未曾接種過(guò)的妊娠母豬，在分娩前6周和2周時(shí)各接種1次；曾經(jīng)接種過(guò)的妊娠母豬，在分娩前2周時(shí)再接種1次；公豬，每隔半年接種1次。一針免疫的免疫程序?yàn)?～3周齡或以上肌肉注射1.0～2.0 mL疫苗，免疫持續(xù)期達(dá)4～6個(gè)月。一針?lè)庖咝枰^少的人力，應(yīng)用更方便，免疫效果與兩針免疫相當(dāng)，目前應(yīng)用較多。

豬支原體肺炎滅活疫苗通過(guò)肌肉注射，臨床使用方便，免疫效果良好，在我國(guó)臨床上較經(jīng)常使用。國(guó)內(nèi)外產(chǎn)品質(zhì)量差別主要體現(xiàn)在佐劑水平上。哈藥集團(tuán)“瑞倍適”系列產(chǎn)品使用的是新型佐劑愛(ài)菲金，該佐劑含有4.5%的礦物油，油滴細(xì)小，比傳統(tǒng)油佐劑增加50%的吸附面積，具有更大的抗原結(jié)合面積，增強(qiáng)免疫應(yīng)答；英特威“安百克”保留了15種豬肺炎支原體抗原蛋白，使用Emunade水包油佐劑；輝瑞“瑞富特”采用專(zhuān)利水質(zhì)佐劑Carbopol），24 h啟動(dòng)免疫，3 d后產(chǎn)生有效保護(hù)；普泰克“喘泰克”為P株亞單位疫苗，免疫印跡證實(shí)抗原齊全、純凈，采用抗原濃縮技術(shù)，每次免疫僅需1.0 mL，使用了非油質(zhì)佐劑QS－21；勃林格“茵格發(fā)”為全球首創(chuàng)單針豬喘氣病疫苗，使用專(zhuān)用佐劑“茵培萊”，具有最佳的生物降解性，免疫后無(wú)任何不良反應(yīng)；海博萊以左旋咪唑和carbomer樹(shù)脂作為佐劑，左旋咪唑起免疫增強(qiáng)的作用，樹(shù)脂起緩慢釋放抗原作用，從而產(chǎn)生雙重效力；梅里亞公司的豬肺炎支原體滅活疫苗采用抗原性好的豬肺炎支原體BQ14株及阻斷支原體感染的菌膜蛋白抗原，雙效抗原提升了疫苗保護(hù)力，采用可快速釋放抗原的水性氫氧化鋁膠作佐劑，產(chǎn)生應(yīng)激小，對(duì)3日齡仔豬免疫注射依然安全，且能快速誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗體。

2 活疫苗

豬支原體肺炎活疫苗國(guó)外沒(méi)有市場(chǎng)化產(chǎn)品，國(guó)內(nèi)市場(chǎng)化的產(chǎn)品有兩個(gè)。這兩個(gè)產(chǎn)品分別為豬支原體肺炎活疫苗(168株)和豬肺炎支原體活疫苗(R M48株)。其中，豬支原體肺炎活疫苗(168株)所用的豬肺炎支原體168株是由江蘇省農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所于1979年在甘肅省分離，經(jīng)3次克隆化培養(yǎng)，無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)340代次，人工致弱的弱毒菌株[5]。而豬肺炎支原體活疫苗(R M48株)所用的豬肺炎支原體兔化弱毒株由中國(guó)獸藥監(jiān)察所采用濟(jì)南強(qiáng)毒株在乳兔連續(xù)傳代致弱后獲得。

豬肺炎支原體活疫苗(168株)用法與用量：用于5～15日齡仔豬，只需免疫1次、1頭份；配備專(zhuān)用稀釋液和針頭，0.5 mL或1 mL/頭份；由胸部中間位置肋間隙垂直進(jìn)針，肺內(nèi)注射；不影響豬圓環(huán)病毒病、豬藍(lán)耳病等疫苗的肌肉注射。豬肺炎支原體活疫苗(R M48株)用法與用量：1）胸腔接種。30日齡以上的健康豬，用滅菌PBS（0.01 mol/L，pH 7.2）按瓶簽注明頭份稀釋成1頭份/mL，由右側(cè)肩胛后緣約2 cm肋間隙進(jìn)針，每頭豬胸腔內(nèi)注射疫苗1 mL。2）鼻腔接種。斷奶前后健康仔豬，用滅菌PBS（0.01 mol/L，pH 7.2）按瓶簽注明頭份稀釋成1頭份/mL，在豬吸氣時(shí)將疫苗噴射入鼻腔深部，每頭豬接種疫苗2 mL。

豬肺炎支原體活疫苗優(yōu)點(diǎn)有：同時(shí)產(chǎn)生占位免疫、細(xì)胞免疫、以及體液免疫，抗體產(chǎn)生快，持續(xù)期長(zhǎng)[6-8]。該活疫苗主要缺點(diǎn)為：操作較繁瑣，胸腔、肺內(nèi)或滴鼻接種，工作量大。RM-48株活苗為兔化弱毒株，其免疫原性更好，安全性更強(qiáng)。鑒于豬肺炎支原體活疫苗接種麻煩的缺點(diǎn)，在其免疫途徑方面研究者做了一些研究：鄭鵬研究了豬支原體肺炎R(shí)M-48株活疫苗的霧化吸入免疫，研究結(jié)果顯示接種后能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生的呼吸道黏膜免疫及細(xì)胞免疫反應(yīng)；邵國(guó)青等基于傳統(tǒng)的豬肺炎弱毒活疫苗（168株弱毒活疫苗）成功地開(kāi)發(fā)出一種新型的豬支原體肺炎噴霧型疫苗，該168株疫苗噴霧免疫14 d后，能夠在免疫后豬只的鼻腔分泌液（鼻拭子）中明顯地檢測(cè)到豬肺炎支原體特異性分泌型IgA（SIgA）的存在。

3 基因工程疫苗

基因工程疫苗能利用外源載體對(duì)豬肺炎支原體免疫原性蛋白進(jìn)行大量表達(dá)，研制有效的疫苗，用于解決傳統(tǒng)抗原培養(yǎng)難問(wèn)題，具有很好的市場(chǎng)前景?；蚬こ桃呙绲难兄浦饕菑拿庖咴鞍追矫嫒胧值?，現(xiàn)在研究最多的免疫原蛋白主要是P36、P46、P97、P110等[8]。盡管?chē)?guó)內(nèi)外在豬支原體肺炎方面做了大量研究工作，然而至今無(wú)商品化的豬支原體肺炎基因工程疫苗。

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[4] 楊莉，楊茂生，吳位珩，等.豬氣喘病的研究進(jìn)展[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，2011(6)：7-9.

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2017-04-13）

山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系生豬創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目 SDAIT-08-17

魏鳳，女（1979-），河南遂平人，碩士，助理研究員，主要從事獸用生物制品研究，E-mail：hzndzwt1@163.com