賀美忠

（山西農(nóng)科院高寒區(qū)作物研究所，大同 037008）

道地中藥材半夏離體快繁技術(shù)

賀美忠

（山西農(nóng)科院高寒區(qū)作物研究所，大同 037008）

半夏是一種草本植物，是常用的藥材，具有降逆止嘔、消痞散結(jié)等作用，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于各種疾病治療中。但是，由于該藥材市場(chǎng)產(chǎn)量較低，經(jīng)常出現(xiàn)供不應(yīng)求問題。文章主要對(duì)道地中藥材半夏離體快繁技術(shù)進(jìn)行介紹，以期給同行提供借鑒。

半夏 快繁技術(shù) 研究方法

快繁技術(shù)是一種快速培養(yǎng)組織的技術(shù)，可以在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生很多優(yōu)質(zhì)的半夏，及時(shí)解決臨床應(yīng)用中存在的短缺問題。文章主要對(duì)半夏離體快繁技術(shù)進(jìn)行介紹，希望可以促進(jìn)半夏的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展。

1 材料與方法

主要以商洛地區(qū)種植的地道半夏品種為植株。操作方法：（1）選擇優(yōu)質(zhì)外植體。（2）進(jìn)行滅菌接種。及時(shí)對(duì)當(dāng)天采挖的塊莖清洗并去皮，使用清潔液進(jìn)行浸泡，保證飲用安全。然后將其裝入到三角瓶中，加入70%乙醇浸泡，保證塊莖完全消毒。再使用無菌水沖洗，并將其放置在無菌濾紙上，進(jìn)行接種。（3）培養(yǎng)基和條件：①M(fèi)S+2.4D0.5 mg/L+6-BA1.0 mg/L。② MS+NAA0.5 mg/L+6-BA1.5 mg/L。③1/2MS+NAA0.5 mg/L。④ MS+NAA0.2 mg/L+6-BA2.0 mg/L。⑤ 在200～2 000 Lx光照下，培養(yǎng)10～16 h。（4）移栽試管苗。在日光中進(jìn)行移栽，并用磚塊隔開，方便操作；基質(zhì)以腐熟藥渣、食用菌廢紙袋及蛭石等組成，并對(duì)基質(zhì)經(jīng)常處理。移栽前，必須使用微菌素處理，基質(zhì)厚度為20 cm。

2 設(shè)置實(shí)驗(yàn)

首先，對(duì)不同誘導(dǎo)途徑進(jìn)行分析，選擇最適合的生產(chǎn)防范。然后，設(shè)置培養(yǎng)條件，仔細(xì)觀察生物的生長。最后，配置各種的栽培基質(zhì)。

3 分析結(jié)果

3.1 不同誘導(dǎo)途徑

（1）愈傷組織誘導(dǎo)。在1號(hào)培養(yǎng)基上，半個(gè)月可遇見組織，組成95%為綠色、堅(jiān)硬。然后將其嫁接、分化培養(yǎng)，產(chǎn)生叢芽。一般部分疏松組織不成芽時(shí)，必須及時(shí)丟棄。（2）根據(jù)愈傷組織誘導(dǎo)不定芽。給愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上嫁接外植體，一段時(shí)間后，產(chǎn)生愈傷組織，再將其轉(zhuǎn)接到2號(hào)培養(yǎng)基上，一般20 d左右可定芽。（3）直接誘導(dǎo)生芽。直接將外植體嫁接到4號(hào)培養(yǎng)基上。（4）進(jìn)行無外源激素培養(yǎng)。在5號(hào)無外源激素上，一般經(jīng)過2周培養(yǎng)，可變?yōu)辄S白色，之后枯萎。

3.2 不同培養(yǎng)條件的比對(duì)

（1）將外植體接種到4號(hào)培養(yǎng)基上，并放在溫度24℃，強(qiáng)度為2 000 Lx的光源下進(jìn)行照射，通常半個(gè)月后可見莖根變色，體積膨脹，再經(jīng)過20 d后，就會(huì)在上部位生長出綠色的芽。接種2個(gè)月后，幼芽開始生長，長到3 cm左右會(huì)變?yōu)榈G色；葉柄在7 cm時(shí)，葉柄基部長出珠芽，并生長出氣生根。（2）將相同的培養(yǎng)物給4號(hào)培養(yǎng)基接種，放置在光照為200 Lx的溫度下照射14～16 h發(fā)現(xiàn)，根莖表層呈現(xiàn)綠色，體積增大。經(jīng)過20 d后，愈傷組織繼續(xù)膨脹，上部生長為綠色芽狀物。接種2個(gè)月后，愈傷組織幼苗枯黃，表面呈現(xiàn)黃色。（3）生根誘導(dǎo)。直接將再生芽誘導(dǎo)，產(chǎn)生的不定芽與愈傷組織誘導(dǎo)產(chǎn)生的芽轉(zhuǎn)移到3號(hào)培養(yǎng)基上，20 d可見不定根。（4）移植前給基質(zhì)澆水，并將已經(jīng)生長好的半夏用試管取出，放置在打好孔的基質(zhì)中，對(duì)其進(jìn)行機(jī)械噴水、覆膜和遮陽處理，2周后可長出新根；40 d后長勢(shì)較好。

4 討論分析

（1）愈傷組織與半夏再生誘導(dǎo)，各有優(yōu)缺。在再生誘導(dǎo)中，芽可繼續(xù)生長，不需要移植到其他培養(yǎng)基上，操作簡單，成苗期短暫，繁殖速度有限。愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中的組織長到一定程度后，必須移植到其他培養(yǎng)基，雖然操作環(huán)節(jié)復(fù)雜，但復(fù)制的半夏種苗較多。（2）半夏試管苗不能在較低溫度和黑暗下生長；半夏離體在24℃和2 000 Lx光照下，生長2個(gè)月后，長勢(shì)較好。但在溫度低下和黑暗中，幼苗將枯萎。（3）使用腐熟藥渣促進(jìn)發(fā)芽成長，且充分利用了廢舊資源，操作簡單，成本較低。

5 結(jié)語

該文主要對(duì)道地中藥材半夏離體快繁技術(shù)進(jìn)行介紹，對(duì)再生誘導(dǎo)與愈傷組織等2組方法進(jìn)行分析。實(shí)際應(yīng)用中，要有針對(duì)性選擇。

[1] 陶米林，劉清波，黃紅梅．半夏組織培養(yǎng)體系的建立．北方園藝，2013，（04）

[2] 賈永芳．半夏離體培養(yǎng)研究及遺傳轉(zhuǎn)化的初探．西南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2014，（05）