李東昀，苗生虎，姚立騰

（甘肅省武威市人民醫(yī)院，甘肅 武威 733000）

淺析檢驗工作中免疫檢驗的影響因素及質(zhì)量控制方法

李東昀，苗生虎，姚立騰

（甘肅省武威市人民醫(yī)院，甘肅 武威 733000）

目的分析研討檢驗工作中免疫檢驗的影響因素及質(zhì)量控制方法。方法回顧性分析2014年4月-2016年4月期間實施臨床免疫檢驗的3600份資料，采集標(biāo)本、收集相關(guān)資料、采取免疫檢驗儀器進行免疫檢驗，對檢驗每個階段的數(shù)據(jù)進行分析，分析出現(xiàn)誤差的原因，并歸納總結(jié)檢驗的影響因素，并尋找出質(zhì)量控制對策。結(jié)果將3600份免疫檢驗結(jié)果進行對比分析，發(fā)現(xiàn)影響檢疫檢驗結(jié)果主要因素是檢驗人員技術(shù)、儀器設(shè)備、標(biāo)本。共136份資料出現(xiàn)異常，誤差率為3.78%（136/3600）。其中31份為標(biāo)本污染變異造成、38份為儀器使用不當(dāng)造成、25份為試劑失效造成、42份為操作人員操作失誤造成。為了降低免疫檢驗結(jié)果的誤差情況，需要加強對影響因素的控制，才能提高質(zhì)量控制。結(jié)論檢驗工作中免疫檢驗，會受到許多因素影響，從而造成檢驗質(zhì)量不達標(biāo)。為此臨床中應(yīng)當(dāng)做好監(jiān)督與管理，著重控制影響因素，才能提高免疫檢驗質(zhì)量。

免疫；檢驗；質(zhì)量控制；影響因素

0 引言

免疫檢驗為臨床中常見的監(jiān)測技術(shù)，對臨床診斷及治療有著重要意義，而檢驗工作中免疫檢測結(jié)果會受到許多因素影響，造成免疫檢測質(zhì)量下降[1-2]。此次將3600例免疫資料納入到研討范圍內(nèi)，其目的則在于分析其影響免疫檢測的主要因素，在此基礎(chǔ)上提出相應(yīng)的對策。具體報告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

從本院2014年4月至2016年4月期間實施臨床免疫檢驗資料中，抽取3600份資料納入到研討范圍中，作為研究對象。主要檢測項目是乙肝五項，HBSAg（乙肝表面抗原）、抗-HBS（乙肝表面抗體）、HBeAg（e抗原）、抗-HBe（e抗體）、抗-HBc（核心抗體）[3]。

1.2 方法

采集血清樣本，對樣本進行血清測試，采用全自動生化檢測儀器，進行檢測時應(yīng)全程嚴(yán)格依照規(guī)范化流程進行。對于免疫檢驗標(biāo)本必須抽取受檢者的晨起空腹靜脈血，對血液中乙肝病毒進行檢測，分辨其血清學(xué)標(biāo)志[4]。

1.3 分析影響因素

檢驗過程中，經(jīng)觀察發(fā)現(xiàn)影響免疫檢驗結(jié)果，主要因素有：

檢驗標(biāo)本。血清標(biāo)本是導(dǎo)致免疫檢查結(jié)果出現(xiàn)偏差的基本原因，對標(biāo)本進行采集和收藏時，都會受到一些不利因素影響，例如在采集時，交叉反應(yīng)物、補體等均會影響標(biāo)本，明顯增加了假陽性率，因此免疫檢驗結(jié)果也受到影響。另外，在保存和收藏標(biāo)本時，受環(huán)境、光照、濕度和溫度等因素的影響，均會造成標(biāo)本成分出現(xiàn)直接性變異，容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果，導(dǎo)致檢驗結(jié)果質(zhì)量受到影響。

儀器設(shè)備。檢驗設(shè)備會直接影響到檢測質(zhì)量，在免疫檢驗時，需要提前檢查設(shè)備，檢測試劑是否有效合理，若檢測試劑或設(shè)備的性能不好，將會帶來不利的影響，為此，需要加強對儀器設(shè)備方面的控制。

操作技術(shù)。操作人員的技術(shù)是主觀影響因素，免疫檢驗人員的個人差異會對檢驗結(jié)果造成一定影響，例如個人技術(shù)水平、標(biāo)本的標(biāo)記、操作的規(guī)范化、掌握操作技能的程度等均會影響檢驗結(jié)果。因此，需要多加培訓(xùn)操作人員，提高技術(shù)水平，才能保障檢驗工作的正常進行。

2 結(jié)果

將3600份免疫檢驗結(jié)果進行對比分析發(fā)現(xiàn)，影響檢疫檢驗結(jié)果主要因素是檢驗人員技術(shù)、儀器設(shè)備、標(biāo)本。共136份資料出現(xiàn)異常，誤差率為3.78%（136/3600），其中31份為標(biāo)本污染變異造成、38份為儀器使用不當(dāng)造成、25份為試劑失效造成、42份為操作人員操作失誤造成。為了降低免疫檢驗結(jié)果的誤差情況，需要對影響因素加以控制，才能提高質(zhì)量控制。

3 討論

免疫檢查主要包括抗原抗體反應(yīng)、放射免疫、酶免疫等，檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性[5-8]將直接影響到臨床醫(yī)師對疾病的判斷及對治療措施的選擇，甚至影響其治療效果。為此，必須確保免疫檢查的準(zhǔn)確性。免疫檢驗結(jié)果會受到各種因素的影響，主要包括對樣本的采集、收藏、轉(zhuǎn)移、保存、檢驗等均會受到各種外源性和內(nèi)源性的因素影響[8-11]，從而造成檢驗結(jié)果出現(xiàn)錯誤或誤差。為此，必須了解影響免疫檢驗結(jié)果的因素，并加強對檢驗結(jié)果的質(zhì)量控制。

對于樣本，加強采集與保存。對樣本進行采集時應(yīng)嚴(yán)格按照激素類血清樣本的標(biāo)準(zhǔn)采集方式進行，一般采集晨起靜脈血液，妥善保存標(biāo)本，防止變性[11-13]。加強對儀器和試劑的保養(yǎng)和檢查，定期維護設(shè)備，使用前需要測試。定期培訓(xùn)考核檢驗人員，使其工作技能得到提高，確保其結(jié)果的準(zhǔn)確性[14-15]。檢驗結(jié)束后，詳細記錄檢驗資料、填寫報告單、反復(fù)清洗儀器等，做好交接工作，并復(fù)查免疫檢驗結(jié)果。

此次將3600份免疫檢驗資料納入到研討范圍中，詳細分析檢驗過程中出現(xiàn)的誤差，尋找質(zhì)量控制方法，確保標(biāo)本標(biāo)準(zhǔn)化、試劑及設(shè)備的有效使用，加強檢驗人員的培訓(xùn)及技術(shù)規(guī)范化。經(jīng)分析影響這些有效的質(zhì)量控制對策因素后得知，要想有準(zhǔn)確的檢驗結(jié)果，必須在檢驗過程中應(yīng)用規(guī)范合理化的操作流程。

免疫檢驗，主要是將高靈敏度和高特異性的免疫反應(yīng)二者加以結(jié)合，從而達到免疫檢驗的良好效果。主要用于一些抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素以及藥物相關(guān)的檢測分析技術(shù)。在臨床上被廣泛接受和使用，主要是因其具有靈敏度高、特異性強、試劑穩(wěn)定且有效期長、方法穩(wěn)定快速、檢測范圍寬、操作簡單、自動化程度高等優(yōu)點。在臨床操作的工作中，免疫檢驗主要受以下三個方面的影響：

（1）標(biāo)本。要特別注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血的情況。一般來說，血紅蛋白中含有血紅素基因，其中具有類似過氧化物的活性，因此，在以HRP作為標(biāo)記酶的化學(xué)發(fā)光測定中，如果出現(xiàn)了血清的標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高的情況，就很容易在以后的檢驗過程中出現(xiàn)固相的情況，從而使得HRP的反應(yīng)值相應(yīng)偏高，造成假陽性的結(jié)果。在樣本的采集以及血清分離的工作中，一定要盡量避免遭受到細菌的污染。一方面，由于細菌的生長而分泌的一些酶有可能會對抗原體等蛋白產(chǎn)生一定的分解作用，從而影響檢驗效果。另一方面，細菌的內(nèi)部性酶，如大腸桿菌之類的，會對后續(xù)的檢驗結(jié)果發(fā)生一定的誤導(dǎo)，因為它可能會干擾以酶為標(biāo)記物的檢驗方式。因此，新鮮標(biāo)本的檢測結(jié)果更加能夠準(zhǔn)確地反映出機體的真實情況。所以，真正行之有效的免疫檢驗應(yīng)在采血后的24小時以內(nèi)完成，以此來保證檢驗的準(zhǔn)確性和有效性。尤其需要注意的一點是，在血液標(biāo)本采集以后，必須使其充分凝固以后再進行血清的分離。如果血液還未開始凝固就開始進行血清分離，容易使血清中殘留部分纖維蛋白，從而造成假陽性的結(jié)果。如果在24小時之內(nèi)不能完成檢測，那么應(yīng)該將血清分離之后，妥善保存于-20℃的冰箱里備檢，并且做好相關(guān)的原始記錄，如待檢者的姓名、日期、檢查項目等，并且反復(fù)進行凍融。

（2）試劑。免疫檢驗需要大量相關(guān)的試劑，而不同廠家生產(chǎn)的試劑靈敏度與特異性存在著一定的差別，如果使用劣質(zhì)的試劑，勢必會造成假陽性或者假陰性的結(jié)果，從而影響免疫檢驗的有效性和準(zhǔn)確性。因此，選用高質(zhì)量的試劑對于免疫檢驗成功與否具有重要意義。在進行檢驗之前，先將試劑從冰箱中取出，待其與室溫平衡1小時以后方可使用。如果試劑已開封，就應(yīng)該妥善使用和保管，每次使用后應(yīng)將其放回2-8℃的冰箱內(nèi)保存，試劑開封后盡量在一個月內(nèi)使用。不同批次和批號的試劑不能重復(fù)混用，以免引起混亂，從而造成檢驗結(jié)果錯誤。

（3）操作技術(shù)。操作技術(shù)直接與免疫檢驗的結(jié)果相關(guān)，如操作不當(dāng)將直接導(dǎo)致檢驗出錯。比如，吸量不準(zhǔn)確就容易導(dǎo)致測定的差異，從而直接影響檢測結(jié)果，因此加樣器應(yīng)該及時清洗并且定期校準(zhǔn)。應(yīng)該避免加錯樣本以及加樣過快，因為加樣過快容易造成儀器的污染，從而影響檢驗結(jié)果。加樣本以及試劑之時應(yīng)避免加在孔壁上，造成重復(fù)性差異。

（4）溫度。如果弱陽性的樣本檢測不出來，或由于溫度不夠等原因造成。應(yīng)盡量減少受熱不均等情況出現(xiàn)，并且貼密封膜，防止污染物的浸入，以免影響免疫檢驗。

（5）洗板。用來檢驗以及備用的蒸餾水一定要合格，量筒一定要保持干凈清潔。如果洗板不干凈，或者儀器的針孔堵塞，都容易造成假陽性；實驗室的室溫應(yīng)該保持在25℃左右，實驗室應(yīng)該加裝空調(diào)，以此來確保室內(nèi)溫度在不同的季節(jié)保持穩(wěn)定，使之對免疫檢驗的影響最小。

（6）發(fā)光值。在一切準(zhǔn)備就緒后，待等量的發(fā)光液混合均勻，避免漏加情況的出現(xiàn)。如果發(fā)光液變質(zhì)，可能會造成假陰性；如果發(fā)光液發(fā)光時間不足，可能會造成假陰性，從而影響免疫檢驗的結(jié)果。

總而言之，檢驗工作中的免疫檢驗會受到許多因素的影響，從而造成檢驗質(zhì)量不達標(biāo)。為此，臨床中應(yīng)當(dāng)做好監(jiān)督與管理，著重控制影響因素，才能提高免疫檢驗質(zhì)量。

[1] 姜燕.臨床免疫檢驗質(zhì)量控制相關(guān)措施探討[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新,2014,7(36):122-124.

[2] 馮廣紅,陸玲娜.臨床免疫檢驗影響因素及對策研究[J].醫(yī)學(xué)信息,2014,28(29):328-329.

[3] 洪雁.臨床免疫檢驗質(zhì)量控制的影響因素和具體措施[J].中國醫(yī)藥指南,2014,12(30):378-379.

[4] 胡軍杰.臨床免疫檢驗的質(zhì)量影響因素及相應(yīng)方法分析[J].中外醫(yī)學(xué)研究,2016,14(18):161-162.

[5] 魏秀萍.探討臨床免疫檢驗影響因素及對策分析[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘:連續(xù)型電子期刊,2016,16(35):147-155.

[6] 阿米南木·吾守.檢驗工作中免疫檢驗的影響因素及質(zhì)量控制方法[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘:連續(xù)型電子期刊,2016,16(34):157-158.

[7] 劉影.臨床免疫檢驗中免疫檢驗分析質(zhì)量控制的重要性和措施剖析[J].中國繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育,2015,7(30):31-32.

[8] 李祥慶.免疫檢驗分析質(zhì)量控制在臨床免疫檢驗中的重要性和有效措施探討[J].醫(yī)藥前沿,2014,4(31):157-158.

[9] 蔡德建,田玫玲,吳殿水,等.臨床免疫檢驗的質(zhì)量影響因素及相應(yīng)對策研究[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2015,16(13):1939-1940.

[10] 王猛.臨床免疫檢驗質(zhì)量控制的相關(guān)性措施分析[J].中國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理,2015,6(10):14-15.

[11] 何敬遠,馮靜霞,張然蓉,等.臨床免疫檢驗的質(zhì)量控制[J].中國醫(yī)藥指南,2013,11(34):373-374.

[12] 李孟一.影響臨床免疫檢驗質(zhì)量的因素分析與對策探究[J].臨床醫(yī)藥文獻電子雜志,2015,2(16):3167-3167.

[13] 梁輝.臨床免疫檢驗質(zhì)量的影響因素及控制措施研究[J].中外醫(yī)學(xué)研究,2014,12(7):145-145,146.

[14] 姜邦蓉.臨床免疫檢驗質(zhì)量控制相關(guān)措施探析[J].中國保健營養(yǎng)旬刊,2012,22(5):1141-1142.

[15] 熊勛爵.臨床免疫檢驗質(zhì)量的影響因素和解決策略分析[J].醫(yī)學(xué)信息,2015,29(42):262-262.

Analyze the Influencing Factors and Quality Control Methods of Immunoassay in the Inspection Work

LI Dong-yun,MIAO Sheng-hu,YAO Li-teng
(The People’s Hospital of Wuwei,Gansu,China)

ObjectiveTo analyze the influencing factors and quality control methods of immunoassay in the inspection work.MethodsRetrospective data of 3600 clinical immune test analysis from April 2014 to April 2016,Specimen collection,collection of relevant information,to take immune immune testing equipment inspection,inspection of each stage of the data analysis,analysis of the reasons of the errors,and analyze the influence factors of the inspection summary,and find out the quality control countermeasures.ResultsThe results of 3600 tests were compared and analyzed.It was found that the main factors that affected the results of quarantine inspection were the technical personnel,equipment and specimens.A total of 136 data were abnormal,and the error rate was 3.78(136/3600).31 of them were caused by the variation of the sample contamination,and the other one was caused by improper use of the instrument,and the 25 one was caused by the failure of the reagent,and the 42 one was caused by the misoperation of the operator.In order to reduce the error of immune test results,it is necessary to strengthen the control of the influencing factors in order to improve the quality control.ConclusionThe immune test in the inspection work will be affected by many factors,resulting in poor quality inspection. In order to improve the quality of immune test,we should do a good job of supervision and management.

Immunity;Inspection;Quality Control;Influencing Factors

10.19335/j.cnki.2096-1219.2017.05.12

李東昀，出生年月：1963年12月；性別：女；職稱：主管檢驗師；主要研究方向：從事臨床檢驗工作。