馮豆，蔡婷，鄧劍壕，許佳楠，蔡延渠，朱盛山

（1.廣東藥科大學(xué)中藥開發(fā)研究所，廣東廣州 510006；2.廣東藥學(xué)院，廣東廣州 510006）

小瓜蟲病及其防治方法的概述

馮豆1，蔡婷2，鄧劍壕1，許佳楠1，蔡延渠1，朱盛山1

（1.廣東藥科大學(xué)中藥開發(fā)研究所，廣東廣州 510006；2.廣東藥學(xué)院，廣東廣州 510006）

小瓜蟲是一種世界性分布的淡水魚類專性寄生蟲，患小瓜蟲病的魚病死率很高，所以小瓜蟲病又被稱為魚類的“癌癥”。小瓜蟲隸屬原生動物門，小瓜蟲屬，寄生在鯉魚、草魚、鯽魚、金魚、大口鯰等魚類身上，并導(dǎo)致大量苗種甚至成魚死亡[1-4]，是漁業(yè)生產(chǎn)中最常見的魚病之一。Fouquet[5]最早對小瓜蟲進(jìn)行了描述，將小瓜蟲病的病原定名為多子小瓜蟲，其生活史包括成蟲期、包囊期和幼蟲期三個階段。小瓜蟲病常在養(yǎng)殖場內(nèi)暴發(fā)流行，給養(yǎng)殖業(yè)造成經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重時曾造成年均20萬～30萬t魚死亡，年均損失達(dá)20億～30億元[6]。近年來，小瓜蟲病引起越來越多學(xué)者的關(guān)注，成為研究的熱點(diǎn)之一。本文就小瓜蟲流行環(huán)境、病癥研究、致病死亡原因及防治方法等方面進(jìn)行綜合的概述，以供相關(guān)從業(yè)者參考。

1 流行環(huán)境

小瓜蟲完成其生活史所需的時間隨水溫的變化而不同，其生長的最適水溫是15～25℃，通常在20～25℃最易感染宿主，但在低水溫如1℃也可以感染；在30℃以上時，蟲體不能發(fā)育，一般在炎熱的夏天，通常不會發(fā)生小瓜蟲病。在24℃時，生活史為4 d；15℃時為10 d；但在10℃以下，往往需要1個月以上。

小瓜蟲病是世界性的寄生蟲病，多發(fā)生于春冬、夏秋季節(jié)交換時期，在我國各魚類養(yǎng)殖地區(qū)均有流行。在水體流動性小、水質(zhì)不良、高密度養(yǎng)殖、魚體的抵抗力弱等條件下或養(yǎng)殖魚類受到應(yīng)激造成免疫力降低時，都比較容易暴發(fā)該病[7]。

2 病癥研究

小瓜蟲寄生在魚的表皮和鰓組織中，對宿主的上皮不斷刺激，使上皮細(xì)胞不斷增生，形成肉眼可見的小白點(diǎn)，故小瓜蟲病又稱為“白點(diǎn)病”。嚴(yán)重時體表各組織充血，魚鱗脫落、鰭條裂開、鰓部出血壞死腐爛。蟲體若侵入眼角膜，引起發(fā)炎、瞎眼。病魚反應(yīng)遲鈍，漫游于水面，不時在其他物體上蹭擦，不久即成群死亡，其病死率可達(dá)60%～70%，對養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)帶來嚴(yán)重威脅。

方珍珍等[8]應(yīng)用組織病理學(xué)方法，對感染小瓜蟲草魚幼魚的腦、心臟、鰓、鰭、頭腎、中腎、上頜、皮膚肌肉及內(nèi)臟團(tuán)等組織器官進(jìn)行觀察。觀察結(jié)果表明，各組織器官均有明顯的組織病理學(xué)變化，鰓絲、上頜、胸鰭及背鰭等組織器官可見小瓜蟲寄生；腦組織淤血；心耳、心室及動脈球內(nèi)發(fā)生淤血；鰓絲淤血并有炎細(xì)胞浸潤，部分鰓小片結(jié)構(gòu)消失，呼吸上皮細(xì)胞脫落；頭腎淤血；中腎腎小管、連接小管的上皮細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)脂肪樣變及玻璃樣變，腎小球腫大導(dǎo)致腎小囊囊腔消失，腎間質(zhì)淤血；腹皮下致密層膠原纖維發(fā)生玻璃樣變，靜脈淤血；腸道黏膜層部分上皮細(xì)胞脫落，嚴(yán)重者上皮細(xì)胞溶解消失，黏膜下層可見炎細(xì)胞浸潤；肝胰臟內(nèi)肝血竇、靜脈淤血，肝臟局灶性壞死；脾臟內(nèi)靜脈淤血。

3 致病死亡原因

張其中等[9]和陳達(dá)麗[10]推測多子小瓜蟲致使鰓上皮組織的破壞后，使的鰓的滲透調(diào)節(jié)和排泄失衡，導(dǎo)致水分大量滲入組織，是造成寄主死亡的原因之一。此外多子小瓜蟲破囊泡而出時，寄生部位的傷口易造成繼發(fā)感染，充血潰爛。伍惠生[11]認(rèn)為小瓜蟲寄生在鰓絲上以鰓小片的上皮細(xì)胞、紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等為食，小瓜蟲還能鉆入鰓腔膜并穿過膜進(jìn)入到胸腺組織內(nèi)部，以胸腺淋巴細(xì)胞和上皮細(xì)胞為食，使胸腺的正常組織結(jié)構(gòu)紊亂。因此，小瓜蟲感染可能造成魚營養(yǎng)不良，免疫力下降；狂躁不安，過度消耗體能；鰓部受損，呼吸困難；寄生部位破損，繼發(fā)感染，導(dǎo)致病魚大量死亡。

4 防治方法

4.1 化學(xué)藥物

黃斌[12]等依次配制濃度為0.1、0.2、0.3、0.4 mg/L的硝酸亞汞溶液，浸泡小瓜蟲125 min，小瓜蟲死亡率分別為94%、100%、100%、100%；硝酸亞汞藥浴75 min的半致死濃度LC50為0.11 mg/L。文衍紅等[14]使用硫酸銅防治越冬大棚羅非魚小瓜蟲病，發(fā)現(xiàn)1.0 mg/L以上濃度的硫酸銅對小瓜蟲具有很好的殺滅作用。黃江峰[15]采用環(huán)烷酸銅溶液對小瓜蟲成蟲、幼蟲以及包囊進(jìn)行離體殺滅試驗，結(jié)果0.1～0.2 mg/L環(huán)烷酸銅溶液對小瓜蟲幼蟲及成蟲都有較強(qiáng)殺滅作用，0.4～0.8 mg/L環(huán)烷酸銅能控制小瓜蟲包囊分裂。彭碧林[16]用青蒿琥酯和磷酸氯喹以不同的濃度處理體外培養(yǎng)的小瓜蟲，發(fā)現(xiàn)青蒿琥酯24、48、96 h的LC50分別為1.7、1.4、1.08 mg/mL，磷酸氯喹24、48、96 h的LC50分別為0.0051、0.0035、0.0024 mg/mL。

4.2 生物藥

姚嘉赟等[6]采用不同極性溶劑回流提取鏈霉菌發(fā)酵液，制備粗提物，進(jìn)行殺滅小瓜蟲幼蟲藥效活性試驗，用藥4 h后發(fā)現(xiàn)石油醚提取物在20.0～100.0 mg/L濃度范圍內(nèi)對小瓜蟲幼蟲的殺滅率均小于50%；60 mg/L的乙酸乙酯提取物對幼蟲的殺滅率為90%，其對幼蟲的半數(shù)致死濃度為48.2 mg/ L；30.0 mg/L的正丁醇提取物對幼蟲的殺滅率為100%，其對幼蟲的半數(shù)致死濃度為15.5 mg/L.

閆春梅等[17]構(gòu)建大量重組質(zhì)粒制備抑動蛋白基因核酸疫苗，肌肉注射免疫魚體，注射劑量為125 μg/尾，同時設(shè)立空載體對照組及空白對照組，發(fā)現(xiàn)14 d內(nèi)核酸疫苗免疫組存活率達(dá)到90%以上，而空載體組存活率為20%～40%，空白對照組全部死亡。

4.3 中草藥

鉏超[18]等選用檳榔、貫眾、大黃等20種不同中草藥，觀察其同濃度的水提物對小瓜蟲成蟲、包囊和幼蟲的離體殺滅實驗效果，0.1 g/L檳榔和烏梅對各個階段的蟲體均有殺滅效果，0.1 g/L大黃和黃芩水提物1 h內(nèi)對幼蟲有殺滅效果，1.0 g/L濃度能殺滅成蟲和包囊，貫眾、烏藥、枳殼等13種中藥濃度達(dá)到10、50、100 g/L才具有一定殺蟲作用。梁靖涵等[19]從肉桂中分離純化出化合物肉桂醛，將其配成不同濃度的藥液測試其對離體小瓜蟲的殺滅活性：100%殺滅成蟲和幼蟲的劑量分別為50和8 mg/L，半數(shù)有效濃度分別為13.9和1.8 mg/L；使用劑量在50 mg/L時可完全抑制小瓜蟲包囊孵化。

姚嘉赟[20]追蹤丁香提取分離物丁香酚殺滅小瓜蟲幼蟲和包囊的藥效活性，對幼蟲4 h 100%殺滅的濃度為3.5 mg/L，對包囊6 h 100%殺滅的濃度為3.5 mg/L。Ekanem等[21]研究了黧豆葉的甲醇提取物和番木瓜種子的石油醚提取物對小瓜蟲的殺滅作用，患病魚分別在200 mg/L的2種提取液中浸泡72和96 h，結(jié)果發(fā)現(xiàn)小瓜蟲數(shù)量減少90%，離體試驗發(fā)現(xiàn)2種提取液濃度分別為150和200 mg/L時，6 h內(nèi)對小瓜蟲的滅殺率達(dá)100%。

5 小結(jié)

小瓜蟲病暴發(fā)快，發(fā)病病死率高，對魚類危害大，給養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)帶來嚴(yán)重威脅。對于小瓜蟲病的防治仍以化學(xué)藥物為主，以前主要有硝酸亞汞、孔雀石綠、硫酸銅等，但由于對水體環(huán)境和人體健康危害較大，已禁止在水產(chǎn)養(yǎng)殖中使用。在生物藥方面，目前所用的疫苗可分為活蟲疫苗、滅活疫苗和遺傳工程合成疫苗三種，由于缺乏有效的小瓜蟲體外培養(yǎng)技術(shù)，不能提供足量的抑動抗原用以進(jìn)行大量的免疫工作，小瓜蟲病免疫的研究仍處于實驗室階段[22]。

小瓜蟲生活史包括成蟲期、包囊期、幼蟲期三個階段，防治方法中大部分藥物僅僅作用于離體的小瓜蟲，直接對寄生在魚類身上的小瓜蟲進(jìn)行的實驗探究較少。成蟲期的小瓜蟲外面包被一層較厚的宿主保護(hù)層，藥物難以滲透。脫離宿主的蟲體在2～8 h內(nèi)形成硬質(zhì)包囊，一段時間后囊壁開始增厚，對藥物相對不敏感。只有剛孵化的幼蟲和剛脫離魚體的成蟲對藥物較敏感[1，23]。中草藥肉桂的提取分離物肉桂醛100%殺滅幼蟲的劑量為8 mg/L，50 mg/L可完全抑制小瓜蟲包囊孵化；丁香提取分離物丁香酚，對幼蟲4 h 100%殺滅的濃度為3.5 mg/L，對包囊6 h 100%殺滅的濃度為3.5 mg/L。中草藥對包囊期、幼蟲期的小瓜蟲殺滅效果明顯，有效中草藥也較多，亟須積極開發(fā)能作用于寄生狀態(tài)的小瓜蟲的中草藥。中草藥作為我國古代人民智慧的結(jié)晶，很早就開始用于防治魚類疾病，宋朝文學(xué)家蘇軾所著的《物類相感志》中記載“魚瘦而生白點(diǎn)者名虱，用楓樹皮投水中則愈”[24]。中草藥在防治魚類小瓜蟲病上具有很大的應(yīng)用前景，研究開發(fā)中草藥抗小瓜蟲病藥物，可能是小瓜蟲病害防治的有效途徑。

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2017-03-10）

10.3969/j.issn.1004-2091.2017.06.014