張小雙，鄭迎春，曹玉芬，田路明，董星光，張瑩，齊丹，霍宏亮

（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所/農(nóng)業(yè)部果品質(zhì)量安全風險評估實驗室（興城），遼寧興城 125100）

‘早酥’和‘南果梨’16個部位多酚物質(zhì)組成及含量分析

張小雙，鄭迎春，曹玉芬，田路明，董星光，張瑩，齊丹，霍宏亮

（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所/農(nóng)業(yè)部果品質(zhì)量安全風險評估實驗室（興城），遼寧興城 125100）

【目的】通過對脆肉型梨品種‘早酥’和軟肉型梨品種‘南果梨’16個部位多酚物質(zhì)種類和含量的分析，揭示梨品種不同器官或組織內(nèi)多酚物質(zhì)組成及含量，以期找到提取多酚物質(zhì)的最佳部位，為梨多酚物質(zhì)的利用提供依據(jù)?！痉椒ā恳浴缢帧婧汀瞎妗癁樵嚥模捎贸咝б合嗌V法測定其16個部位多酚物質(zhì)的組成和含量。以熊果苷、沒食子酸、原兒茶酸、新綠原酸、原花青素B1、DL-兒茶素、綠原酸、隱綠原酸、咖啡酸、原花青素B2、丁香酸、表兒茶素、原花青素C1、洋蘚素、P-香豆酸、槲皮素-阿拉伯-葡糖苷、反式阿魏酸、蘆丁、槲皮素-3-半乳糖苷、槲皮素-3-葡糖苷、木犀草-7-O-葡糖苷、異綠原酸B、莰菲醇-3-O-蕓香糖苷、槲皮素-阿拉伯糖苷、異綠原酸 A、水仙苷、異鼠李素-3-O-半乳糖苷、異鼠李素-3-O-葡糖苷、根皮苷、白藜蘆醇、肉桂酸、二水槲皮素、根皮素、芹菜素和山奈黃酮醇35種多酚化合物標準品，對‘早酥’梨和‘南果梨’16個部位進行多酚的定量和定性分析。【結(jié)果】‘早酥’梨共檢測到23種多酚物質(zhì)，包括簡單酚類2種，苯甲烯類1種，咖啡?？鼘幩犷?種，黃烷醇類5種，黃酮醇類9種和二氫查耳酮類1種；‘南果梨’共檢測到21種多酚物質(zhì)，包括簡單酚類2種，酚酸類1種，苯甲烯類1種，咖啡酰奎寧酸類4種，黃烷醇類4種和黃酮醇類9種?！缢帧?6個部位以幼嫩葉片多酚含量最高，為93.82 mg·g-1，果肉多酚含量最低，為0.63 mg·g-1；熊果苷和綠原酸為各部位所共有，除果肉外，其他部位含量最高的多酚均是熊果苷，為0.08—64.86 mg·g-1；所檢測到的6大類多酚中，每類含量最高的依次為熊果苷、丁香酸、綠原酸、表兒茶素、木犀草-7-O-葡糖苷和根皮苷，分別為403.5、0.04、79.83、16.16、9.07和0.13 mg·g-1；成熟葉柄所測酚種類最多為14種，木質(zhì)部所測酚種類最少為3種?！瞎妗?6個部位以幼嫩葉片多酚含量最高，為104.04 mg·g-1，種子含量最低，為2.66 mg·g-1；熊果苷和綠原酸為各部位共有，除果肉和果心外，其他部位含量最高的多酚均為熊果苷，為0.87—51.75 mg·g-1；所檢測到的6大類多酚中，每類含量最高的依次為熊果苷、原兒茶酸、表兒茶素、丁香酸、綠原酸、表兒茶素和木犀草-7-O-葡糖苷，分別為357.29、0.01、0.08、122.15、12.89和4.87 mg·g-1；成熟葉柄和果皮所測酚種類最多，為13種；果心所測酚種類最少，為3種?！缢帧婧汀瞎妗喾雍孔罡叩牟课痪鶠橛啄廴~片，果皮所測酚比果肉所測酚的組成及含量更豐富，花柄所測酚含量高于花，韌皮部所測酚種類和含量均高于木質(zhì)部。【結(jié)論】‘早酥’梨和‘南果梨’所測酚中熊果苷和綠原酸為16個部位共有，且熊果苷是總含量最高的多酚；除根皮苷和原兒茶酸外，其他所測酚種類相同，幼嫩葉片多酚物質(zhì)組成及含量均較豐富，可作為多酚提取資源進行開發(fā)利用。

梨；多酚；組成；含量；高效液相色譜

0 引言

【研究意義】隨著科技的發(fā)展和人類對“抗衰老”、“抗輻射”、“抗炎癥”和“抗癌”食品的不斷追求，植物多酚已經(jīng)成為科學(xué)界研究的熱點。多酚有很強的抗氧化能力和清除自由基的能力，以及提高免疫力、保護神經(jīng)、抗癌、抗衰老[1-4]等功能。水果中多酚含量豐富，是人類攝取多酚的主要來源。梨是中國第3大水果，種植面積和產(chǎn)量僅次于蘋果和柑橘，深受消費者的喜愛，因此，對梨多酚的研究具有重要意義。對‘早酥’梨和‘南果梨’16個部位多酚物質(zhì)組成和含量進行研究，以明確多酚的組成特點及含量水平，揭示多酚物質(zhì)豐富的部位，為梨種質(zhì)資源多酚的利用提供依據(jù)。【前人研究進展】目前，對梨種質(zhì)資源多酚的研究主要集中在果實和葉片上[5-6]，對梨其他部位多酚的報道卻甚少。史國安等[6]研究了紅皮沙梨和褐皮沙梨果實的總酚含量。LEONTOWICZ等[7]證明果皮中的總酚含量是果肉的2倍。李麗梅等[8]研究了梨果心與果皮中多酚提取工藝。LIN和HARNLY[9]從16種梨皮中鑒定出了53種多酚類物質(zhì)。另外，近年來對其他水果多酚研究較多，例如葡萄、核桃、草莓和蘋果等[10-13]，但對梨不同部位多酚的研究較少，且對亞洲梨的研究也遠遠落后于歐洲梨[1,6,8,14-16]?！颈狙芯壳腥朦c】梨多酚的研究主要集中在提取工藝[17]和梨果實、果皮等常見部位含酚量的測定，對梨其他部位多酚含量和組成方面的研究極少?！緮M解決的關(guān)鍵問題】本研究分別在不同生長期選取‘早酥’梨和‘南果梨’16個不同的部位，對其進行超高效液相色譜（Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC）測定，揭示梨品種不同部位多酚物質(zhì)組成及含量的差異，以期找到提取多酚類物質(zhì)的最佳部位。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗在國家果樹種質(zhì)興城梨、蘋果圃進行，土壤類型為砂質(zhì)壤土。選擇‘早酥’梨和‘南果梨’為試材，砧木為杜梨，2003年定植，株行距3 m×4 m，常規(guī)栽培管理，樹勢中庸。2014—2015年，在‘早酥’梨和‘南果梨’相應(yīng)物候期采集試驗材料包括花朵、花柄、幼嫩葉片、幼嫩葉柄、成熟葉片、成熟葉柄、新梢的韌皮部、新梢的木質(zhì)部、一年生枝條的韌皮部、一年生枝條的木質(zhì)部、果皮、果肉、果心、種子、葉芽和花芽，共 16個部位，采集方法參照曹玉芬[18]。將采集的這些材料干燥至恒重后將其粉粹，并保存在-20℃冰箱中備用。

1.2 試劑

熊果苷（Arbutin）、沒食子酸（Gallic acid）、原兒茶酸（3,4-Dihydroxybenzoic acid）、新綠原酸（Neochlorogenic acid）、原花青素B1（Procyanidins B）、DL-兒茶素（DL-catechin）、綠原酸（Chlorogenic acid）、隱綠原酸（Cryptochlorogenic acid）、咖啡酸（3,4-Dihydroxycinnamic acid）、原花青素 B2（Procyanidins B2）、丁香酸（Syringic acid）、表兒茶素（Epicatechin）、原花青素C1（Pro-cyanidins C1）、洋蘚素（Cyclohexanecarboxylic acid）、P-香豆酸（P-Hydroxycinnamic acid）、槲皮素-阿拉伯-葡糖苷（Quercetin-arab-glucoside）、反式阿魏酸（Rans-4-hydroxy-3-methoxycinnamic acid）、蘆?。≧utin）、槲皮素-3-半乳糖苷（Quercetin-3-galactoside）、槲皮素-3-葡糖苷（Quercetin-3-glucoside）、木犀草-7-O-葡糖苷（Luteolin-7-O-glucoside）、異綠原酸 B（Isochlorogenic acid B）、莰菲醇-3-O-蕓香糖苷（Kaempferol-3-O-rutinoside）、槲皮素-阿拉伯糖苷（Avicularin）、異綠原酸A（Isochlorogenic acid A）、水仙苷（Isorhamnetin-3-rutinoside）、異鼠李素-3-O-半乳糖苷（Isorhamnetin-3-O-galactoside）、異鼠李素-3-O-葡糖苷（Isorhamnetin-3-O-glucoside）、根皮苷（Phlorizin dihydrate）、白藜蘆醇（Resveratrol）、肉桂酸（cinnamic acid）、二水槲皮素（Qutercetin dihydrate）、根皮素（Phloretin）、芹菜素（Apigenin）和山奈黃酮醇（Kaemferol），純度均≥98%，購自Sigma公司；甲醇、乙醇、乙腈和甲酸等均為色譜純。

1.3 儀器

Acquity UPLC H-class超高效液相色譜儀（美國Waters公司）；Oasis HBL 6CC（200 mg）固相萃取小柱（美國Waters公司）；R-210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（瑞士BUCHI公司）；Mill-Q Direct8水純化系統(tǒng)（美國Millipore公司）；0.22 μm濾膜（天津津騰實驗設(shè)備有限公司）；Acquity UPLC HSS T3色譜柱（2.1 mm ×100 mm，1.8 μm）（美國Waters公司）；DFT-50手提式中藥粉碎機（溫嶺市林大機械有限公司）；CF16RXII立式大容量高速離心機（日本日立公司）；SK-12TC超聲波清洗器（上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司）。

1.4 提取工藝流程

參照鄭迎春等[19]的方法并加以改進（下同），稱取試樣1.0000 g加液氮冷凍研磨（重復(fù)3次），加入23 mL 70%的甲醇，室溫下進行超聲波（超聲功率為500 W）提取30 min，10 000 r/min離心5 min，取上清液并加23 mL 70%甲醇，超聲波提取并離心（同上），加入棕色瓶定容至50 mL（為粗提液），取5 mL粗提液于35℃旋蒸近干，樣品過已用甲醇和水活化好的固相萃取小柱，于5 mL水洗固相萃取小柱2次（除去葉綠素、糖和強極性化合物[20]），5 mL甲醇洗固相萃取小柱2次收集溶液，將收集液于35℃旋蒸近干，用70%甲醇定容至5 mL，樣品過0.22 μm濾膜，待進行UPLC測定。

1.5 標樣的配制、色譜條件和方法驗證

參照鄭迎春等[19]的方法并加以改進。

1.6 梨16個部位多酚類物質(zhì)的UPLC檢測

按照以上條件處理樣品，對‘早酥’梨、‘南果梨’的花（不含柄）、花柄、幼葉、幼葉葉柄、葉片、葉柄、新梢韌皮部、新梢木質(zhì)部、一年生枝韌皮部、一年生枝木質(zhì)部、果皮、果肉、果心、種子、葉芽、花芽共 16個部位進行多酚物質(zhì)組成和含量的 UPLC檢測。

1.7 數(shù)據(jù)處理及分析

利用Excel和SAS 9.2軟件對梨16個部位多酚物質(zhì)的數(shù)據(jù)進行分析。

2 結(jié)果

2.1 ‘早酥’梨多酚物質(zhì)組成及含量

‘早酥’梨16個部位共檢測到23種多酚類物質(zhì)，各部位所檢測到的多酚種類和含量見表 1，各部位總酚含量為0.63—93.82 mg·g-1，其中簡單酚2種，苯甲烯1種，咖啡酰奎寧酸5種，黃烷醇5種，黃酮醇9種，二氫查耳酮1種。

2.1.1 ‘早酥’梨 16個部位多酚含量 幼嫩葉片和幼嫩葉柄含量最高，分別為 93.82 mg·g-1和 80.10 mg·g-1，其次是新梢韌皮部、花柄、一年生枝條的韌皮部和成熟葉，為62.97—68.93 mg·g-1；再次是成熟葉柄、花、新梢的木質(zhì)部、一年生枝條的木質(zhì)部、花芽和葉芽，為9.13—52.03 mg·g-1；其余均在9 mg·g-1以下，分別為果皮、種子、果心和果肉，為0.63—6.06 mg·g-1（表1）。各部位所檢測的多酚物質(zhì)種類和含量差異顯著，表現(xiàn)出豐富的多樣性（表2）。

果肉含量最高和最低的多酚為綠原酸和異綠原酸A，含量分別為0.19 mg·g-1和0.01 mg·g-1。果心、一年生枝條韌皮部和果皮含量最高的多酚均為熊果苷，分別為1.42、4.16和3.59 mg·g-1；含量最低的多酚均為異綠原酸 A，分別為 0.01、0.14和 0.01 mg·g-1。新梢木質(zhì)部和一年生枝條木質(zhì)部含量最高的多酚均為熊果苷，分別為7.43 mg·g-1和6.11 mg·g-1；含量最低的多酚均為新綠原酸，分別為0.07 mg·g-1和0.04 mg·g-1。幼嫩葉、新梢韌皮部、花和葉芽含量最高的多酚均為熊果苷，分別為 52.01、57.91、18.83和5.33 mg·g-1；含量最低的均為隱綠原酸，分別為1.14、0.13、0.06和0.04 mg·g-1。幼嫩葉柄、成熟葉柄、花柄、種子和花芽含量最高的多酚均為熊果苷，分別為64.86、44.92、47.31、0.31和6.04 mg·g-1；含量最低的多酚分別為表兒茶素、洋蘚素、槲皮素-3-半乳糖苷、槲皮素-3-葡糖苷和丁香酸，分別為0.25、0.13、0.05、0.01和0.02 mg·g-1。除果肉外，其他部位含量最高的多酚均為熊果苷，為 0.08—64.86 mg·g-1。

2.1.2 簡單酚 ‘早酥’梨檢測到的簡單酚包括熊果苷和白藜蘆醇，其中熊果苷是16個部位所共有，含量為0.08—64.86 mg·g-1；白藜蘆醇在幼葉、幼葉葉柄、葉芽和花芽中均被檢測到，含量為0.02—1.63 mg·g-1。熊果苷的含量遠高于白藜蘆醇，為主要的簡單酚類（表1）。簡單酚總含量在16個部位差異顯著，幼嫩葉柄含量最高，果肉含量最低，呈現(xiàn)出明顯的多樣性（表2）。

2.1.3 咖啡?？鼘幩?‘早酥’梨共檢測到5種咖啡酰奎寧酸，分別是新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、洋蘚素和異綠原酸A。成熟葉柄檢測到5種，總含量為4.45 mg·g-1；幼嫩葉、成熟葉、新梢韌皮部、一年生枝條韌皮部、葉芽、花芽和花檢測到除洋蘚素以外的其他4種，含量為1.37—32.58 mg·g-1；果心、幼嫩葉柄和花柄檢測到除隱綠原酸和洋蘚素以外的其他3種咖啡?？鼘幩幔繛?.05—14.40 mg·g-1；果皮檢測到綠原酸、洋蘚素和異綠原酸 A，總量為 0.61 mg·g-1；果肉、新梢木質(zhì)部和一年生枝條木質(zhì)部分別檢測到2種咖啡?？鼘幩?，果肉檢測到綠原酸和異綠原酸A，含量為0.2 mg·g-1，后兩者檢測到新綠原酸和綠原酸，含量為0.20—0.26 mg·g-1；種子只檢測到綠原酸，含量為0.24 mg·g-1（表1）。不同部位檢測到的咖啡?？鼘幩岱N類不同，且不同部位咖啡?？鼘幩岬暮坎町愶@著（表2）。

2.1.4 黃烷醇 ‘早酥’梨檢測到5種黃烷醇，分別是原花青素B1、原花青素B2、原花青素C1、DL-兒茶素和表兒茶素，總含量為0.16—16.8 mg·g-1。種子、新梢韌皮部、一年生枝條韌皮部、葉芽和花芽檢測到4種，種子檢測到除 DL-兒茶素外的其他黃烷醇，總含量為1.95 mg·g-1，后四者含有原花青素B2、原花青素C1、DL-兒茶素和表兒茶素，總含量為2.32—16.8 mg·g-1；果肉和果皮分別檢測到 2種黃烷醇，前者為原花青素B2和表兒茶素，總量為0.35 mg·g-1，后者為DL-兒茶素和表兒茶素，含量為1.30 mg·g-1；幼嫩葉、成熟葉、幼嫩葉柄、成熟葉柄、花柄和花只檢測到表兒茶素，總含量為 0.16—0.54 mg·g-1；其他部位均未檢測到黃烷醇類多酚物質(zhì)。其中表兒茶素含量最高，16個部位總含量為16.16 mg·g-1，是其他黃烷醇含量的3—500倍（表1）。

2.1.5 黃酮醇 ‘早酥’梨共檢測到9種黃酮醇，總含量為 0.09—7.44 mg·g-1。成熟葉柄和果皮分別檢測到 7種，其中蘆丁、槲皮素-3-半乳糖苷、槲皮素-3-葡糖苷、木犀草-7-O-葡糖苷、水仙苷和異鼠李素-3-O-半乳糖苷為兩者共有，另外，成熟葉片含有扁蓄苷，果皮含有異鼠李素-3-O-葡糖苷，兩部分的總酚含量分別為2.16 mg·g-1和0.56 mg·g-1?；z測到6種黃酮醇，分別為蘆丁、槲皮素-3-半乳糖苷、槲皮素-3-葡糖苷、木犀草-7-O-葡糖苷、莰菲醇-3-O-蕓香糖苷和水仙苷，總含量為4.28 mg·g-1。成熟葉和花柄分別檢測到5種，其中蘆丁、槲皮素-3-半乳糖苷、槲皮素-3-葡糖苷和木犀草-7-O-葡糖苷為共有。成熟葉檢測到扁蓄苷，花柄檢測到水仙苷，兩個部位的總含量分別為5.14 mg·g-1和1.35 mg·g-1。幼嫩葉檢

測到蘆丁、槲皮素-3-半乳糖苷、槲皮素-3-葡糖苷和木犀草-7-O-葡糖苷 4種黃酮醇，總含量為7.44 mg·g-1。一年生枝條韌皮部、種子和花芽只檢測到 1種黃酮醇，分別為異鼠李素-3-O-葡糖苷、槲皮素-3-葡糖苷和水仙苷，含量分別為0.46、0.01和0.09 mg·g-1（表1）。經(jīng)SAS分析，幼嫩葉、成熟葉、成熟葉柄、花柄和花的含量差異性不顯著，其他部位均表現(xiàn)出顯著的多樣性（表2）。

2.1.6 丁香酸和二氫查耳酮 ‘早酥’梨只在葉芽和花芽檢測到這2類多酚，分別為丁香酸和根皮苷。其中丁香酸16個部位總含量為0.04 mg·g-1，葉芽和花芽含量均為0.02 mg·g-1。根皮苷總含量0.13 mg·g-1，葉芽含量為0.07 mg·g-1，花芽含量為0.06 mg·g-1，表明其不是主要的多酚類物質(zhì)。

2.2 ‘南果梨’多酚物質(zhì)組成及含量

‘南果梨’共檢測到21種多酚物質(zhì)，各部位檢測到的多酚種類和含量見表3，包括簡單酚類2種，酚酸類1種，苯甲烯類1種，咖啡?？鼘幩犷?種，黃烷醇類 4種和黃酮醇類 9種，含量為 2.66—104.04 mg·g-1。

2.2.1 ‘南果梨’16個部位多酚含量 ‘南果梨’幼嫩葉和幼嫩葉柄含量最高，分別是 104.44 mg·g-1和103.00 mg·g-1，其次是成熟葉、新梢韌皮部、一年生枝條韌皮部、成熟葉柄、花柄和花，為 36.26—62.02 mg·g-1；再次是新梢木質(zhì)部、一年生枝條木質(zhì)部、果皮、葉芽和花芽，含量為6.36—13.61 mg·g-1；其余均在6 mg·g-1以下，分別是果肉、果心和種子，含量為2.66—3.53 mg·g-1。南果梨不同部位多酚種類和含量差異顯著（表4）。

表2 ‘早酥’梨所測酚在16個部位的分布情況Table 2 The distribution of measured phenols in 16 parts of ‘Zaosu’ pear

果肉和果心含量最高的多酚均為綠原酸，分別為1.44 mg·g-1和2.31 mg·g-1；含量最低的多酚分別為表兒茶素和異綠原酸A，均為0.10 mg·g-1。新梢木質(zhì)部和一年生枝條木質(zhì)部含量最高和最低的多酚均分別為熊果苷和異綠原酸 A，為 4.69、5.41 mg·g-1和0.04、0.05 mg·g-1。幼嫩葉片、成熟葉片、新梢韌皮部和花含量最高的多酚均為熊果苷，分別為51.75、23.37、39.08和14.02 mg·g-1；含量最低的均為隱綠原酸，分別為0.08、0.39、0.08和0.08 mg·g-1。新梢韌皮部含量最高和最低的多酚分別為熊果苷和異綠原酸A，含量分別為36.70 mg·g-1和0.35 mg·g-1。幼嫩葉柄、成熟葉柄、花柄、種子、果皮、葉芽和花芽含量最高的多酚均為熊果苷，分別為79.74、47.52、32.30、0.87、6.63、5.06和7.86 mg.g-1；含量最低的分別為新綠原酸、盧丁、原花青素C1、木犀草-7-O-葡糖苷、原兒茶酸和丁香酸，為0.36、0.40、0.09、0.30、0.01、0.01和0.04 mg·g-1。除果肉和果心外，其他部位含量最高的多酚均為熊果苷，為 0.87—51.75 mg·g-1。

2.2.2 簡單酚、酚酸和苯甲烯 ‘南果梨’的16個部位檢測到2種簡單酚類、1種酚酸和1種苯甲烯，分別為熊果苷、白藜蘆醇、原兒茶酸和丁香酸。熊果苷為16個部位所共有的，含量為0.87—79.74 mg·g-1，其中幼嫩葉柄含量最高，種子含量最低；白藜蘆醇只在幼嫩葉、幼嫩葉柄、成熟葉柄、葉芽和花芽中存在，含量為0.03—0.72 mg·g-1；原兒茶酸只存在于葉芽中，含量為0.01 mg·g-1；丁香酸存在于葉芽和花芽，含量均為0.04 mg·g-1（表3）。

表4 ‘南果梨’所測酚在16個部位的分布情況Table 4 The distribution of measured polyphenols in 16 parts of ‘Nanguoli’

2.2.3 咖啡?？鼘幩?‘南果梨’共檢測到4種咖啡?？鼘幩幔謩e是新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸和異綠原酸A，16個部位總含量為0.44—45.62 mg·g-1。除了果肉、果心、新梢木質(zhì)部、花柄、種子和果皮，其他10個部位均檢測到4種咖啡?？鼘幩?，其中幼嫩葉含量最高，為45.62 mg·g-1，一年生枝條木質(zhì)部含量最低，為0.96 mg·g-1；新梢木質(zhì)部和花柄檢測到除隱綠原酸外的其他3種咖啡?？鼘幩?，含量為1.57—19.25 mg·g-1；果心檢測到2種，分別是綠原酸和異綠原酸A，總含量為2.31 mg·g-1；果肉、種子和果皮只檢測到綠原酸，含量分別為1.44、0.44和1.49 mg·g-1（表3）。‘南果梨’所含的咖啡?？鼘幩釤o論在含量、種類和分布位置都具有很大的差異性，多樣性豐富（表4）。

2.2.4 黃烷醇 ‘南果梨’檢測到4種黃烷醇，分別是原花青素B2、原花青素C1、DL-兒茶素和表兒茶素，16個部位總含量為0.00—9.25 mg·g-1，其中新梢韌皮部含量最高。新梢韌皮部和一年生枝條韌皮部檢測到4種，總含量分別為9.82 mg·g-1和8.57 mg·g-1；種子、果皮、葉芽和花芽檢測到除 DL-兒茶素之外的其他3種黃烷醇，總含量為1.35—3.28 mg·g-1；新梢木質(zhì)部、果肉和成熟葉柄分別檢測到2種黃烷醇，其中新梢木質(zhì)部檢測到原花青素B2和表兒茶素，總含量為0.29 mg·g-1；果肉和成熟葉柄檢測到原花青素C1和表兒茶素，總含量分別為0.22 mg·g-1和3.04 mg·g-1；幼嫩葉和成熟葉只檢測到表兒茶素，含量為 0.09 mg·g-1和0.73 mg·g-1；其他部位均未檢測到黃烷醇類多酚物質(zhì)（表 3）。除了果心、一年生枝條木質(zhì)部、幼嫩葉柄和花柄外，其他部位的黃烷醇含量都表現(xiàn)出顯著的差異性（表4）。

2.2.5 黃酮醇 ‘南果梨’共檢測到9中黃酮醇，分別為蘆丁、槲皮素-3-半乳糖苷、槲皮素-3-葡糖苷、木犀草-7-O-葡糖苷、莰菲醇-3-O-蕓香糖苷、扁蓄苷、水仙苷、異鼠李素-3-O-半乳糖苷和異鼠李素-3-O-葡糖苷，16個部位總含量為0.89—6.81 mg·g-1，其中成熟葉含量最高，果皮含量最低；果皮檢測到除莰菲醇-3-O-蕓香糖苷外的其他 9種黃酮醇，總含量為 0.89 mg·g-1；幼嫩葉柄、成熟葉柄、花柄和花均檢測到 5種黃酮醇，蘆丁、槲皮素-3-半乳糖苷、槲皮素-3-葡糖苷、木犀草-7-O-葡糖苷為4個部位所共有。另外，前三者還含有水仙苷，僅在花中檢測到莰菲醇-3-O-蕓香糖苷，總含量為 2.42—6.27 mg·g-1；幼嫩葉和成熟葉檢測到4種黃酮醇，分別為蘆丁、槲皮素-3-半乳糖苷、槲皮素-3-葡糖苷和木犀草-7-O-葡糖苷，總含量為5.86—6.80 mg·g-1；其他部位均未檢測到黃酮醇類多酚（表3）；各部位黃酮醇含量差異顯著（表4）。

3 討論

3.1 ‘早酥’梨和‘南果梨’16個部位多酚物質(zhì)組成和含量的異同點

‘早酥’梨是由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所1956年以‘蘋果梨’為母本，‘身不知’為父本雜交育成[21]，肉質(zhì)細脆，汁液極多，味甜，在遼寧、河北、江蘇、甘肅、陜西等地廣泛栽培，為脆肉型梨品種的典型代表；‘南果梨’原產(chǎn)于遼寧省鞍山市，在鞍山、海城栽培最多，肉質(zhì)軟溶、汁液多，甜酸味濃，為中國獨有的軟肉型梨品種[22]。本研究中‘早酥’梨 16個部位所測酚總含量為567.61 mg·g-1，‘南果梨’16個部位所測酚總含量為567.57 mg·g-1，所測酚總含量基本相同。‘早酥’梨和‘南果梨’均檢測到簡單酚，且均包括熊果苷和白藜蘆醇，熊果苷為16個部位共有，白藜蘆醇在幼嫩葉片、幼嫩葉柄、葉芽和花芽中被檢測到，‘南果梨’的成熟葉柄也被檢測到含有白藜蘆醇，簡單酚是兩種梨最主要的多酚大類?！缢帧婧汀瞎妗鶛z測到咖啡酰奎寧酸、黃烷醇和黃酮醇，這3大類多酚中，‘早酥’梨比‘南果梨’多含有2種，分別為洋蘚素（咖啡酰奎寧酸）和原花青素B1（黃烷醇），其他種類均相同?！缢帧鎲为毢懈ぼ?，只在葉芽和花芽中存在，含量為0.04 mg·g-1，‘南果梨’單獨含有原兒茶酸（酚酸），只存在于葉芽中，含量為0.01 mg·g-1。‘早酥’梨與‘南果梨’的總多酚種類和含量基本相同，差異不明顯。

3.2 多酚物質(zhì)在‘早酥’梨和‘南果梨’16個部位分布情況

‘早酥’梨和‘南果梨’所檢測到的多酚物質(zhì)在16個部位的含量和分布均差異顯著，表現(xiàn)出明顯的多樣性。其中，熊果苷和綠原酸在各部位均被檢測到，根皮苷僅在‘早酥’梨的葉芽和花芽中被檢測到。GORNAS等[23]在對蘋果果實不同部位多酚的研究中，證明綠原酸和熊果苷在莖、種子、果肉、果皮、果心均被檢測到，且是果肉最主要的多酚物質(zhì)，但僅在種子里檢測到根皮苷?！缢帧婧汀瞎妗喾雍孔罡叩牟课痪鶠橛啄廴~片和幼嫩葉柄，多酚含量較低的部位均為果肉、果心和種子，兩個品種成熟葉片中所測酚含量均不如幼嫩葉片高，但含量均在 49 mg·g-1以上，與 RENARD 等[24]證明的蘋果葉中和OLIVEIRA[25]等證明的海棠葉中多酚物質(zhì)最豐富相符，且OLIVEIRA等[25]認為海棠葉中的多酚物質(zhì)高于果實、果皮和種子，與筆者的研究結(jié)果一致，說明葉片的多酚提取應(yīng)獲得更大的關(guān)注。果皮中所測酚含量和種類均比果肉多且豐富，與以往油梨與蘋果的研究結(jié)果相同[26-27]，CUI等[28]和SALTA等[29]也證明了梨果皮比梨果肉檢測到的多酚物質(zhì)更加豐富?！缢帧婧汀瞎妗幕ㄖ卸喾涌偤烤?2 mg·g-1以上，花柄中多酚含量均在53 mg·g-1以上，可作為有價值的潛在功能食品的多酚來源[30]。GORNAS等[23]對蘋果莖中多酚進行了研究，但未涉及木質(zhì)部和韌皮部，本研究顯示新梢木質(zhì)部和一年生枝條木質(zhì)部多酚含量均在8 mg·g-1以下，不建議作為多酚提取的重要部分，新梢韌皮部和一年生枝條的韌皮部多酚含量均在53 mg·g-1以上，可考慮作為多酚提取有效部位。

4 結(jié)論

脆肉型‘早酥’梨和軟肉型‘南果梨’總含量最高的多酚均為熊果苷。16個部位中幼嫩葉片多酚含量最高，成熟葉柄中種類最為豐富。熊果苷和綠原酸在16個部位均被檢測到；根皮苷為‘早酥’梨特有，原兒茶酸為‘南果梨’特有，兩者均不是主要的多酚物質(zhì)。果皮中所測酚含量和種類均比果肉豐富；花中多酚含量較花柄低；韌皮部多酚含量較木質(zhì)部高。‘早酥’梨和‘南果梨’各部位均可作為多酚提取的材料來源，其中幼嫩葉可作為主要的多酚提取部位。

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（責任編輯 趙伶俐）

The Composition and Content of Polyphenols in 16 Parts of ‘Zaosu’ and ‘Nanguoli’

ZHANG XiaoShuang, ZHENG YingChun, CAO YuFen, TIAN LuMing, DONG XingGuang, ZHANG Ying, QI Dan, HUO HongLiang
(Research Institute of Pomology, Chinese Academy of Agricultural Sciences/Laboratory of Quality and Safety Risk Assessment for Fruit (Xingcheng), Ministry of Agriculture, Xingcheng 125100, Liaoning)

pear; polyphenol; composition; content; UPLC

2016-06-06；接受日期：2016-09-01

國家現(xiàn)代梨產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項（CARS-29-01）、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程（CAAS-ASTIP-2016-RIP）

聯(lián)系方式：張小雙，Tel：18811773275；E-mail：xiaoshuangzhang@163.com。鄭迎春，Tel：15733521806；E-mail：zhengyingchunaiyy@163.com。張小雙和鄭迎春為同等貢獻作者。通信作者曹玉芬，Tel：0429-3598125；E-mail：yfcaas@263.net

Abstract:【Objective】 In order to find out the best parts for polyphenol extraction and also provide the basic information for further utilization of pear germplasm, the composition and contents of polyphenols in 16 different tissues of two pear cultivars (crisp-fleshed cultivar, ‘Zaosu’, and soft-fleshed cultivar, ‘Nanguoli’) were analyzed. 【Method】 UPLC method was applied to determine the composition and contents of polyphenols in 16 parts of ‘Zaosu’ and ‘Nanguoli’, and 35 standard phenolic compounds were used for the detection. Namely, arbutin, gallic acid, 3,4-dihydroxybenzoic acid, neochlorogenic acid, procyanidins B1, DL-catechin, chlorogenic acid, cryptochlorogenic acid, 3,4-dihydroxycinnamic acid, procyanidins B2, syringic acid, epicatechin, pro-cyanidins C1, cyclohexanecarboxylic acid, P-hydroxycinnamic acid, quercetin-arab-glucoside, rans-4-hydroxy-3-met-hoxycinnamic acid, rutin, quercetin-3-galactoside, quercetin-3-glucoside, luteolin-7-O-glucoside, isochlorogenic acid B, kaempferol-3-O-rutinoside, avicularin, isochlorogenic acid A, isorhamnetin-3-rutinoside, isorhamnetin-3-O-galactoside, isorhamnetin-3-O-glucoside, phlorizin dihydrate, resveratrol, cinnamic acid, qutercetin dihydrate, phloretin, apigenin and kaemferol.【Result】Twenty-three polyphenols, including two simple polyphenols, one benylidene, five kinds of caffeoylquinic acid, five flavanols, nine flavonols and one dihydrochalcone were detected in ‘Zaosu’. Twenty-one polyphenols, including two simple polyphenols, one phenolic acid, two kinds of benylidene, four kinds of caffeoylquinic acid, four flavanols and nine flavonols were detected in ‘Nanguoli’. For ‘Zaosu’, young leaves had the highest contents of polyphenols (93.82 mg·g-1), while flesh had the least (0.63 mg·g-1). Arbutin and chlorogenic acid were observed in all tested tissues, and the former was analyzed to be the most important polyphenol in all detected tissues except the flesh, with the contents ranging from 0.08 mg·g-1to 64.86 mg·g-1. Arbutin, syringic acid, chlorogenic acid, epicatechin, luteolin-7-O-glucoside and phlorizin dihydrate were the primary polyphenols in the six categories of detected polyphenols, with the contents of 403.5, 0.04, 79.83, 16.16, 9.07 and 0.13 mg·g-1, respectively. Different varieties of polyphenols were also detected in each tissue, 14 kinds of polyphenols were detected in mature leaf stalk and three kinds in xylem. For ‘Nanguoli’, young leaves had the highest contents of polyphenols (104.04 mg·g-1), while seeds had the least (2.66 mg·g-1). Arbutin and chlorogenic acid existed in all tested tissues, and the former was analyzed to be the most important polyphenol in all detected tissues except flesh and core, with the contents ranging from 0.87 mg·g-1to 51.75 mg·g-1. Arbutin, 3, 4-dihydroxybenzoic acid, chlorogenic acid, epicatechin, luteolin-7-O-glucoside and phlorizin dehydrate were the primary polyphenols in the six categories of detected polyphenols, with the contents of 357.29, 0.01, 0.08, 122.15, 12.89 and 4.87 mg·g-1, respectively. Up to 13 different polyphenols were detected in mature leaf stalk and skin and at least three in the core. Among the 16 detected tissues, young leaves contained the highest contents of polyphenols in both ‘Zaosu’ and ‘Nanguoli’. Fruit skin showed higher contents and more diversity of polyphenols than fruit core, flower stalk had higher contents of polyphenols than flower and phloem showed higher contents and more diversity of polyphenols than xylem. 【Conclusion】 Arbutin and chlorogenic acid were detected in all parts of ‘Zaosu’ and ‘Nanguoli’, and arbutin was the polyphenol with the highest content. The kinds of polyphenols detected in this research were unanimous except phlorizin and protocatechuic acid. Young leaves were relatively abundant in the composition and contents of polyphenols and therefore could be used as extraction resources for further development and utilization.