姚福向，李 赫，宋文華 ，李敬偉 ，胡宗云 ，張 健 ，張 濤 ，富麗靜 ，肖祖國(guó) ，王興兵 ，魏洪祥 ，寇凌霄 ，劉 勇 ，楊國(guó)成 ，步海平

(1.遼寧省淡水水產(chǎn)科學(xué)研究院 遼寧省水生動(dòng)物病害防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 遼陽(yáng) 111000;2.遼陽(yáng)縣水產(chǎn)技術(shù)推廣站,遼寧 遼陽(yáng) 111000)

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【生物科學(xué)與環(huán)境工程】

三種常用水產(chǎn)藥品對(duì)拉氏鱥的急性毒性研究

姚福向1，李 赫1，宋文華1，李敬偉1，胡宗云1，張 健1，張 濤1，富麗靜1，肖祖國(guó)1，王興兵1，魏洪祥1，寇凌霄1，劉 勇1，楊國(guó)成2，步海平2

(1.遼寧省淡水水產(chǎn)科學(xué)研究院 遼寧省水生動(dòng)物病害防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 遼陽(yáng) 111000;2.遼陽(yáng)縣水產(chǎn)技術(shù)推廣站,遼寧 遼陽(yáng) 111000)

采用靜水試驗(yàn)方法，用硫酸銅、聚維酮碘、三氯異氰尿酸對(duì)體長(zhǎng)(7.21±0.88)cm，體質(zhì)量(3.95±0.41)的拉氏鱥進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)。結(jié)果表明：3種藥物對(duì)拉氏鱥24、48、96 h的半致死濃度，硫酸銅為0.623、0.505、0.389 mg/L ，聚維酮碘為76.7、74.6、65.7 mg/L，菌毒凈為3.253、2.976、2.487 mg/L。3種藥物的安全濃度依次為0.10、21.17、0.74 mg/L。

拉氏鱥；硫酸銅；聚維酮碘；三氯異氰尿酸；急性毒性；安全濃度

拉氏鱥(Phoxinuslagowskii)屬鯉形目、鯉科、雅羅魚(yú)亞科、鱥屬。別名洛氏鱥，長(zhǎng)尾鱥，俗稱“柳根子”[1]。為小型淡水魚(yú)類，在鱥屬中個(gè)體較大的種類，是北方地區(qū)的土著魚(yú)類。該魚(yú)生存和適應(yīng)能力較強(qiáng)，分布較為廣泛，在東北地區(qū)主要分布于黑龍江、圖門(mén)江、鴨綠江、遼河和內(nèi)蒙古的內(nèi)流性湖泊。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)其研究相對(duì)較少，由于沒(méi)有苗種來(lái)源，池塘養(yǎng)殖一直沒(méi)有形成規(guī)模[2]。硫酸銅、聚維酮碘、菌毒凈(三氯異氰尿酸)是目前養(yǎng)殖魚(yú)類病害防治中的常見(jiàn)水產(chǎn)藥品，但這些常用藥品對(duì)拉氏鱥的毒性試驗(yàn)尚未研究報(bào)道。試驗(yàn)通過(guò)上述三種常用水產(chǎn)藥物對(duì)拉氏鱥幼魚(yú)進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)，期望能找到相對(duì)應(yīng)的安全濃度，進(jìn)一步為其病害的防治、合理用藥提供依據(jù)，進(jìn)而對(duì)保護(hù)和開(kāi)發(fā)這一名貴土著魚(yú)類提供有益的參考作用。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

所用試驗(yàn)魚(yú)為遼寧省淡水水產(chǎn)科學(xué)研究院試驗(yàn)基地池塘培育的1齡拉氏鱥魚(yú)種，規(guī)格為(7.21±0.88)cm，體質(zhì)量(3.95±0.41)g。在室內(nèi)水族箱內(nèi)暫養(yǎng)一周，待其適應(yīng)后挑選體質(zhì)健壯，大小均勻的無(wú)病個(gè)體用于試驗(yàn)。試驗(yàn)用水為曝氣24 h的自來(lái)水，pH值為7.0～7.2，溶解氧5 mg/L以上，試驗(yàn)所用藥品及規(guī)格見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)藥品的規(guī)格和產(chǎn)地

1.2 試驗(yàn)條件

試驗(yàn)容器為58 cm×38 cm×25 cm的長(zhǎng)方形塑料箱，每箱盛40 L水，放入試驗(yàn)魚(yú)30尾，每隔12 h全部更換一次藥物，整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程不投餌，連續(xù)充氣，在室內(nèi)常溫下進(jìn)行，期間水溫17 ℃～18 ℃。

1.3 試驗(yàn)方法

根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果確定出各試驗(yàn)藥物濃度區(qū)間，然后按等對(duì)數(shù)間距設(shè)置5個(gè)濃度組[3]，配制藥物濃度見(jiàn)表2。

采用靜水式試驗(yàn)法，每個(gè)藥物濃度梯度設(shè)2個(gè)平行，另有1個(gè)不加藥物的空白組作為對(duì)照組。

表2 試驗(yàn)濃度的藥物濃度/(mg/L)

試驗(yàn)開(kāi)始前先將試驗(yàn)藥物配成母液，再按比例稀釋成所需濃度。藥物現(xiàn)配現(xiàn)用。試驗(yàn)期間觀察并詳細(xì)記錄試驗(yàn)魚(yú)的行為變化并及時(shí)清除死魚(yú)。試驗(yàn)魚(yú)死亡標(biāo)準(zhǔn)為魚(yú)鰓停止呼吸并對(duì)外界觸碰無(wú)任何反應(yīng)。

水利部2015年批復(fù)了《全國(guó)灌溉試驗(yàn)站網(wǎng)建設(shè)規(guī)劃》，但流域灌溉試驗(yàn)網(wǎng)絡(luò)體系還沒(méi)有完全建成，已建成的灌溉試驗(yàn)站沒(méi)有穩(wěn)定的運(yùn)行資金渠道，技術(shù)人才匱乏，運(yùn)行困難，一些灌溉試驗(yàn)站把工作精力主要放在課題研究之上，對(duì)節(jié)水灌溉新技術(shù)等基礎(chǔ)灌溉試驗(yàn)研究不夠，流域農(nóng)業(yè)節(jié)水灌溉技術(shù)支撐能力不足。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)結(jié)果的數(shù)據(jù)處理采用直線內(nèi)插法，分別求出3種藥物作用下拉氏鱥24、48、96 h的半致死濃度(LC50)[4]，并計(jì)算3種藥物對(duì)拉氏鱥的安全濃度(SC)[5]。

SC=0.3×48hLC50/(24hLC50/48HLC50)2

2 結(jié)果與分析

2.1 中毒癥狀

2.1.1 硫酸銅

試驗(yàn)開(kāi)始后，拉氏鱥的活動(dòng)情況與對(duì)照組基本相似，大多數(shù)集群于水體上層，很少游動(dòng)，對(duì)外界刺激很敏捷。在1.0 mg/L的藥液中，10 h開(kāi)始發(fā)現(xiàn)有死亡，24 h死亡率為13%，96 h死亡率達(dá)100%。死亡的拉氏鱥體色發(fā)白，體表有大量粘液，鰓蓋擴(kuò)張，低濃度組出現(xiàn)中毒癥狀的時(shí)間較遲，一旦中毒，癥狀相同。

2.1.2 聚維酮碘

當(dāng)聚維酮碘濃度為84.1 mg/L時(shí)，6 h后試驗(yàn)魚(yú)活動(dòng)減弱，對(duì)外界刺激不敏感，13 h后出現(xiàn)死亡，24 h的死亡率為73.3%，72 h的死亡率為100%，而低濃度組的試驗(yàn)魚(yú)中毒癥狀不明顯；當(dāng)聚維酮碘濃度為50.0 mg/L時(shí)，72 h死亡率為3.3%，96 h死亡率為6.6%。

拉氏鱥對(duì)菌毒凈反應(yīng)敏感，當(dāng)質(zhì)量濃度為5.00 mg/L時(shí)，0.5 h后試驗(yàn)魚(yú)開(kāi)始出現(xiàn)中毒癥狀，反應(yīng)遲鈍，魚(yú)體不集群，游泳緩慢，不時(shí)懸吊于水面，最后沉入水體死亡。24 h的死亡率為100%。

2.2 急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

3種藥物對(duì)拉氏鱥的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 三種藥物對(duì)拉氏鱥的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

2.3 三種藥物的半致死濃度和安全濃度

由表4可知，硫酸銅對(duì)拉氏鱥幼魚(yú)的24、48、72、96 h的半致死濃度分別為0.62、0.51、0.45、0.39 mg/L，安全濃度為0.10mg/L；聚維酮碘對(duì)拉氏鱥幼魚(yú)的24、48、72、96 h的半致死濃度分別為76.7、74.6、67.5、65.7 mg/L，安全濃度為21.17 mg/L；菌毒凈對(duì)拉氏鱥幼魚(yú)的24、48、72、96 h的半致死濃度分別為3.25、2.98、2.67、2.49 mg/L，安全濃度為0.74 mg/L。三種藥物對(duì)拉氏鱥幼魚(yú)的毒性大小依次為硫酸銅>菌毒凈>聚維酮碘。

表4 三種藥物的半致死濃度和安全濃度

3 討論

3.1 硫酸銅

硫酸銅是魚(yú)病防治中的常用藥物之一，主要?dú)缭鷦?dòng)物和低等藻類，并且對(duì)真菌和某些細(xì)菌有殺滅作用[6]，過(guò)量使用硫酸銅會(huì)在魚(yú)體內(nèi)形成殘留，影響魚(yú)類生長(zhǎng)。本試驗(yàn)中硫酸銅對(duì)拉氏鱥幼魚(yú)安全濃度為0.1 mg/L，低于生產(chǎn)上0.5～0.7 mg/L的常規(guī)用量，更低于同為雅羅魚(yú)亞科的草魚(yú)(Cteopharyngodonidellus)(2.75 mg/L)[7]。而硫酸銅濃度低于0.2 mg/L時(shí)對(duì)寄生蟲(chóng)無(wú)毒殺作用。考慮到硫酸銅的毒性會(huì)隨著水溫升高而增強(qiáng)，建議在拉氏鱥的苗種生產(chǎn)中應(yīng)慎重使用硫酸銅。

3.2 聚維酮碘

聚維酮碘是一種消毒殺菌劑，具有強(qiáng)大的殺菌機(jī)制，能夠氧化病原體原漿蛋白的活性基因，并能與蛋白質(zhì)的氨基結(jié)合使其變性，因而有效地殺死細(xì)菌、芽孢、真菌、病毒及原蟲(chóng)等病原體[8]。試驗(yàn)中聚維酮碘對(duì)拉氏鱥幼魚(yú)的安全濃度為21.17 mg/L，該濃度低于瓦氏黃顙魚(yú)(Peiteobagrusvachelli)(60.65 mg/L)[9]和泥鰍(Misgurnusanguillicaudatus)(90 mg/L)[10]?？梢栽诶削i生產(chǎn)中作為消毒劑進(jìn)行使用。

3.3 菌毒凈

菌毒凈是含三氯異氰尿酸的有機(jī)氯水產(chǎn)藥物，其有效率含量大于30%，是一種極強(qiáng)的氧化劑，對(duì)細(xì)菌、病毒、真菌等都有殺滅作用，生產(chǎn)上常以0.1～0.5 mg/L的劑量進(jìn)行全池潑灑[11]。本試驗(yàn)菌毒凈對(duì)拉氏鱥幼魚(yú)的安全濃度為0.74 mg/L，折合成有效氯約0.22 mg /L，與瓦氏黃顙魚(yú)(Peiteobagrusvachelli)0.25 mg/L安全濃度接近[9]。拉氏鱥幼魚(yú)對(duì)菌毒凈有明顯的適應(yīng)性，在生產(chǎn)中可以藥浴的方式使用。

3.4 藥物毒性安全評(píng)價(jià)

根據(jù)國(guó)家環(huán)?？偩职l(fā)布的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[12]，急性毒性96hLC50>10 mg/L為低毒，1.0～10.0 mg/L為中毒，0.1～1.0mg/L為高毒，低于0.1 mg/L為劇毒。本試驗(yàn)中硫酸銅對(duì)拉氏鱥的96 hLC50為0.39 mg/L為高毒，菌毒凈的96 hLC50為2.49 mg/L為中毒；聚維酮碘的96hLC50為65.7 mg/L屬低毒。三種藥物對(duì)拉氏鱥幼魚(yú)的毒性大小以此為硫酸銅>菌毒凈>聚維酮碘。

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(責(zé)任編輯：龍海波)

Acute toxicity of three commonly-used aquatic medications toPhoxinuslagowskii

YAO Fu-xiang1, LI He1,SONG Wen-hua1, LI Jing-wei1, HU Zong-yun1, ZHANG Jian1, ZHANG Tao1,FU Li-jing1，XIAO Zu-guo1,WANG Xing-bing1, WEI Hong-xiang1, KOU Ling-xiao1， LIU Yong1,YANG Guo-cheng2, BU Hai-ping2

(1.FreshwaterFisheriesScienceInstituteofLiaoningProvince，KeyLaboratoryforPreventionandControlofAquaticAnimalDiseasesofLiaoningProvince，Liaoyang111000，China; 2.FisheryTechniqueAdviceStationofLiaoyangCounty,Liaoyang111000,China)

The acute toxicity of copper sulfate, povidone iodine, trichloroisocyanuric acid to the body length and body mass ofPhoxinuslagowskiiwas studied with smooth water test. The results showed that the median-lethal concentration of copper sulfate at 24，48 and 96 h was 0.623, 0.505 and 0.389 mg/L, respectively; the median-lethal concentration of povidone iodine at 24, 48 and 96 h was 376.7, 74.6 and 65.7 mg/L, respectively; while the median-lethal concentration of trichloroisocyanuric acid at 24, 48 and 96 h was 3.253,2.976 and 2.487 mg/L, respectively. The safe concentrations of the three drugs were successively 0.10, 21.17 and 0.74 mg/L.

Phoxinuslagowskii; copper sulfate; povidone iodine; trichloroisocyanuric acid; acute toxicity; safe concentrations

10.14168/j.issn.1673-4939.2017.01.08

2016-09-26

遼陽(yáng)市科技項(xiàng)目(2012005)；遼寧省海洋與漁業(yè)廳項(xiàng)目(201302)；遼寧省科技廳重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目(2011006)

姚福向(1966—)，男，遼寧蓋縣人，碩士，助理研究員，研究方向：水生動(dòng)物病害防治。

宋文華(1974—)，男，遼寧蓋縣人，研究員，研究方向：水產(chǎn)動(dòng)物疾病。

S965

A

1673-4939(2017)01-0035-04