王爽　王喆　侯可勇　李海洋

摘要本研究設(shè)計(jì)并搭建了一套熱解析低溫等離子體電離源（TDLTP），與質(zhì)譜聯(lián)用實(shí)現(xiàn)了糯高粱中農(nóng)藥殘留的快速和高靈敏檢測(cè)。TDLTP由熱解析裝置和低溫等離子體放電源兩部分組成，農(nóng)藥殘留樣品首先在熱解析進(jìn)樣器內(nèi)汽化，再由載氣載帶進(jìn)入等離子體區(qū)域被電離。熱解析進(jìn)樣器使LTP產(chǎn)生的氣相等離子體與樣品之間的氣固或氣液相互作用轉(zhuǎn)變?yōu)闅鈿庀嗷プ饔?，大大提高了難揮發(fā)樣品（如農(nóng)藥）的電離效率； 電離源與質(zhì)譜進(jìn)樣口之間采用同軸連接，提高了離子的利用率和傳輸效率。與傳統(tǒng)的LTP電離源相比，TDLTP電離源的靈敏度提高了8倍以上，穩(wěn)定性提高了4倍。本研究對(duì)熱解析低溫等離子體電離源的各參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，并與自制的矩形離子阱質(zhì)譜相結(jié)合，研究了12種農(nóng)藥在該電離源下的特征離子。最后，將此電離源與商品化的三重四極桿質(zhì)譜儀聯(lián)用，對(duì)糯高粱樣品中的12種農(nóng)藥殘留進(jìn)行了快速篩查，結(jié)果表明， 本方法靈敏度高，可以滿(mǎn)足食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的谷物中農(nóng)藥殘留最大限量檢測(cè)要求。

關(guān)鍵詞農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)； 熱解析進(jìn)樣； 低溫等離子體電離源； 矩形離子阱質(zhì)譜； 三重四極桿質(zhì)譜

1引 言

農(nóng)藥作為一種重要的生產(chǎn)資料，一方面， 合理使用是蔬菜、水果以及糧食作物產(chǎn)量的保證； 另一方面， 過(guò)度使用造成了水、土壤和環(huán)境的污染[1]，給人類(lèi)健康造成威脅[2]。目前，公眾對(duì)于食品安全的關(guān)注度越來(lái)越高[3]，使得農(nóng)藥快速高靈敏檢測(cè)方法的發(fā)展顯得尤為迫切。傳統(tǒng)的農(nóng)藥檢測(cè)方法主要有色譜法、色譜質(zhì)譜聯(lián)用法、免疫分析法等[4～7]，這些方法雖然精度高，但樣品前處理過(guò)程非常繁瑣[8]，且操作復(fù)雜[9]，樣品分析時(shí)間也相對(duì)較長(zhǎng)[5，8]，難以滿(mǎn)足農(nóng)藥殘留樣品現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的要求。

質(zhì)譜分析技術(shù)具有分析速度快、專(zhuān)屬性強(qiáng)和靈敏度高等特點(diǎn)，已經(jīng)逐步發(fā)展為有機(jī)物分析的“金標(biāo)準(zhǔn)”。質(zhì)譜是一種基于氣相離子的質(zhì)荷比進(jìn)行分離分析的技術(shù)，質(zhì)譜電離源的作用是將目標(biāo)分析化合物轉(zhuǎn)化為氣相離子。因此，電離源的性能決定了質(zhì)譜的分析對(duì)象，離子化技術(shù)的革新一直推動(dòng)著質(zhì)譜應(yīng)用的快速發(fā)展[10]。2004年，Takats[11]等首次提出了一種常壓環(huán)境電離方法，即解吸附電噴霧技術(shù)（DESI），DESI無(wú)需樣品前處理，即可實(shí)現(xiàn)固體、液體樣品表面痕量成分的快速、高通量和實(shí)時(shí)分析[12]。DESI的出現(xiàn)吸引了眾多的研究人員相繼開(kāi)發(fā)了多種新型的常壓敞開(kāi)式離子化技術(shù)，如實(shí)時(shí)直接分析（DART）[13]， 電噴霧萃取電離（EESI）[14]、激光剝蝕電噴霧離（LAESI）[15]， 介質(zhì)阻擋放電離子化（DBDI）[16]等。

低溫等離子體（LTP）電離源是一種基于介質(zhì)阻擋放電的常壓敞開(kāi)式離子化技術(shù)[17]，已成功應(yīng)用于爆炸物[18～20]、毒品[21，22]、農(nóng)藥[23]等樣品的檢測(cè)。傳統(tǒng)的LTP電離源與質(zhì)譜之間一般采用放電等離子體與分析物表面接觸后反射進(jìn)樣的方式，因此受周?chē)h(huán)境（如溫度、濕度以及氣流）的影響較大，檢測(cè)結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）高達(dá)30%[23]。LTP電離源產(chǎn)生的是非平衡態(tài)等離子體，其表觀溫度接近或略高于室溫，LTP探針能夠?qū)崿F(xiàn)固體表面樣品直接電離，是依靠等離子體與樣品表面直接的相互作用[17]，對(duì)于飽和蒸氣壓較低的樣品（如農(nóng)藥），LTP的靈敏度較低。提高進(jìn)樣器的表面溫度，難揮發(fā)性樣品的蒸氣壓增大，因此在LTP產(chǎn)生的等離子體與樣品相互作用之前引入熱解析過(guò)程，可大大提高其電離效率，進(jìn)而提高儀器的靈敏度。本課題組[24，25]提出了一種非接觸式鹵素?zé)艏訜彷o助的LTP電離源，實(shí)現(xiàn)了爆炸物、農(nóng)藥樣品的原位、高靈敏檢測(cè)，由于電離源和質(zhì)譜之間依然采用反射式進(jìn)樣，上述電離源的檢測(cè)3種農(nóng)藥的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在11%左右，穩(wěn)定性不理想。

本研究設(shè)計(jì)并搭建了一套熱解析低溫等離子體電離源（TDLTP）。該電離源將樣品熱解析環(huán)節(jié)獨(dú)立出來(lái)，使用采樣試紙取樣，加熱板直接加熱解析提高樣品的蒸氣壓，將傳統(tǒng)LTP氣相等離子體與樣品之間的氣固或氣液相互作用轉(zhuǎn)變?yōu)闅鈿庀嗷プ饔?，電離更充分。并且，電離源與質(zhì)譜之間采用同軸連接，離子損失更少，穩(wěn)定性也更高。將此電離源分別應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室自制的離子阱質(zhì)譜平臺(tái)和商品化三重四極桿質(zhì)譜儀，實(shí)現(xiàn)了12種農(nóng)藥的快速檢測(cè)，并用于發(fā)酵釀酒的糯高粱樣品中農(nóng)藥殘留的快速篩查。

2儀器設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)

2.1TDLTP電離源的結(jié)構(gòu)及原理

如圖1所示，TDLTP電離源分為兩部分：熱解析進(jìn)樣部分和等離子體發(fā)生部分。其中熱解析進(jìn)樣器是由熱解析模塊（包括加熱和溫控）和進(jìn)樣器控制模塊構(gòu)成，熱解析溫度可在20℃～240℃之間調(diào)節(jié)。低溫等離子體發(fā)生裝置由射頻電源、三通固定頭、導(dǎo)氣管、三通玻璃管、環(huán)形電極和柱狀內(nèi)電極構(gòu)成。

液體樣品使用微量采樣針點(diǎn)于采樣試紙（聚四氟乙烯材質(zhì)的長(zhǎng)方形織物）特定位置，在室溫下使溶劑蒸發(fā)，固體樣品直接用采樣試紙?jiān)诒砻孑p輕擦拭，然后將采樣試紙插入熱解析進(jìn)樣器。樣品在進(jìn)樣器內(nèi)熱解析，產(chǎn)生的氣態(tài)樣品分子被載氣（空氣）攜帶進(jìn)入T型玻管，在環(huán)形電極前端與等離子體產(chǎn)生碰撞，發(fā)生質(zhì)子轉(zhuǎn)移、電荷轉(zhuǎn)移或者分子碎裂等過(guò)程而被電離，該電離源可同時(shí)產(chǎn)生正、負(fù)離子。

相比于統(tǒng)統(tǒng)LTP，TDLTP電離源的改進(jìn)主要體現(xiàn)在3個(gè)方面：（1）引入熱解析進(jìn)樣器，使樣品更充分的汽化，利用率更高； （2）在近放電區(qū)引入樣品，近放電區(qū)等離子體濃度更高，等離子體與樣品分子之間的相互作用更充分； （3）電離源與質(zhì)譜進(jìn)樣口同軸聯(lián)接，無(wú)需采用傳統(tǒng)LTP反射式進(jìn)樣，樣品離子損失更少。上述3個(gè)方面的改進(jìn)，提高了儀器的靈敏度，增加了電離的穩(wěn)定性。

2.2儀器與試劑

ACQUITY TQD三重四極桿質(zhì)譜儀（美國(guó)Waters公司）； WH90A漩渦混合器（上海振榮科學(xué)儀器有限公司）； SK8200LHC超聲波提取器（上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司）； 加熱棒（FM3）； 熱電偶（PT100）； AXMC500SCCMD/5M氣體流量控制器（Alicat Scientific公司）； 高純氦氣（大連大特氣體有限公司）； 甲醇（分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）； 辛硫磷、乙硫磷、二嗪磷等12種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)測(cè)試中心，天津）。

實(shí)驗(yàn)室自主搭建的矩形離子阱質(zhì)譜[24]，包括非連續(xù)大氣壓進(jìn)樣接口（DAPI），線(xiàn)性矩形離子阱為質(zhì)量分析器（x0= 5.0 mm， y0=4.0 mm， z0=43.2 mm），帶轉(zhuǎn)換打拿極的電子倍增檢測(cè)器（Detector Technology， Inc.， Palmer， MA，Model 397）和真空系統(tǒng)四個(gè)部分。質(zhì)譜的真空系統(tǒng)由15 L/min膜片泵（Pfeier Vacuum Inc.， Nashua， NH， Pfeier MVP 0152），和80 L/s分子泵（Pfeier Vacuum Inc.， Nashua， NH， Pfeier HiPace 80）提供，真空腔體的尺寸為14 cm×11.5 cm×8.5 cm。

2.3實(shí)驗(yàn)方法

2.3.1農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制及檢測(cè)農(nóng)藥樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為1000 mg/L，采用逐級(jí)稀釋法，得到0.1～10 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液。檢測(cè)時(shí)，樣品的進(jìn)樣量均為1 μL， 樣品用進(jìn)樣針點(diǎn)于采樣試紙?zhí)囟ㄎ恢?，室溫下使溶劑揮發(fā)，然后插入進(jìn)樣器進(jìn)行檢測(cè)，質(zhì)譜檢測(cè)單個(gè)樣品的時(shí)間少于2 s。

2.3.2糯高粱農(nóng)藥殘留樣品溶液及加標(biāo)樣品溶液的制備樣品溶液制備方法：稱(chēng)取糯高粱樣品25 g，不經(jīng)處理直接加入50 mL甲醇，超聲（35 Hz）5 min，通過(guò)過(guò)濾的方法將固液分離，將溶液濃縮至約1 mL， 再定容至5 mL，備用。

加標(biāo)樣品溶液制備方法：稱(chēng)取糯高粱樣品25 g，不經(jīng)處理直接加入濃度均為10 mg/L的馬拉硫磷、辛硫磷、甲拌磷等（表1）12種農(nóng)藥標(biāo)樣各1 mL，再加入甲醇38 mL，超聲（35 Hz） 5 min， 過(guò)濾， 所得溶液濃縮至約1 mL， 再定容至5 mL，備用。

2.3.3糯高粱農(nóng)藥殘留樣品的篩查方法

在進(jìn)行農(nóng)藥殘留篩查時(shí)，使用TDLTP電離源三重四極桿質(zhì)譜儀分別檢測(cè)糯高粱樣品溶液和加標(biāo)樣品溶液，若樣品溶液的質(zhì)譜圖中出現(xiàn)某一農(nóng)藥的特征離子峰，該峰的信噪比大于3，且加標(biāo)樣品溶液中該峰強(qiáng)度明顯增強(qiáng)，則判定糯高粱樣品中存在該農(nóng)藥殘留，否則判定不存在該農(nóng)藥殘留。

3結(jié)果與討論

本研究的TDLTP電離源的條件優(yōu)化和性能測(cè)試是在大連化物所快速分析與檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)通過(guò)與自行搭建的矩形離子阱質(zhì)譜聯(lián)用進(jìn)行，而TDLTP電離源的實(shí)際應(yīng)用通過(guò)與商品化的三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用進(jìn)行。

3.1TDLTP電離源的條件優(yōu)化及性能表征

3.1.1TDLTP電離源的條件優(yōu)化TDLTP電離源的性能主要由放電氣體（氦氣）流量、熱解析溫度和熱解析樣品的載氣（空氣）流量3個(gè)參數(shù)決定，采用控制單一變量法對(duì)各參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化。在實(shí)驗(yàn)室搭建的矩形離子阱質(zhì)譜平臺(tái)上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，測(cè)試樣品選擇飽和蒸氣壓較低且易于電離的季戊四醇四硝酸酯（PETN）標(biāo)準(zhǔn)溶液，樣品濃度為10 μg/mL，進(jìn)樣量為1 μL，儀器為負(fù)離子檢測(cè)模式，優(yōu)化結(jié)果如圖2所示。

當(dāng)熱解析溫度和載氣流量一定時(shí)，隨放電氣體氦氣的流量增大，PETN樣品的信號(hào)強(qiáng)度呈現(xiàn)先增大后減小的趨勢(shì)，原因是當(dāng)氦氣流量較小時(shí)，產(chǎn)生的等離子體密度較低，與樣品分子發(fā)生的相互作用較弱，產(chǎn)生的樣品離子較少，信號(hào)較弱； 當(dāng)氦氣流量較大時(shí)，等離子體密度較大，等離子體與樣品分子之間的碰撞加劇，使樣品分子碎裂程度增加，因而信號(hào)減弱。當(dāng)載氣流量一定時(shí)，如果熱解析溫度太低，樣品的解析速率降低，解析出的氣態(tài)分子不能及時(shí)到達(dá)電離區(qū)； 若熱解析溫度太高，樣品的解析速率太快甚至分解，同樣會(huì)導(dǎo)致樣品離子的損失，因此樣品的信號(hào)強(qiáng)度隨熱解析溫度的升高也呈現(xiàn)先增大后減小的趨勢(shì)，如圖2B所示。在一定的熱解析溫度下，如果載氣的流量太小，解析出的氣態(tài)樣品分子不能及時(shí)到達(dá)電離區(qū)； 如果載氣的流量太大，在DAPI打開(kāi)前，電離后的樣品離子已被載氣帶出電離區(qū)，最終都會(huì)影響樣品信號(hào)強(qiáng)度，因此樣品的信號(hào)強(qiáng)度隨載氣流量的增大出現(xiàn)先增大后減小的趨勢(shì)，如圖2C所示。最終確定的最佳電離源參數(shù)為：氦氣流量150 mL/min，熱解析溫度180℃，空氣流量100 mL/min。

3.1.2TDLTP電離源的性能表征為了對(duì)比TDLTP電離源和傳統(tǒng)LTP電離源的實(shí)際電離效果，分別將兩種電離源與實(shí)驗(yàn)室搭建的矩形離子阱質(zhì)譜平臺(tái)對(duì)接，在相同的條件下，對(duì)10 μg/mL的亞胺硫磷和毒死蜱溶液進(jìn)行測(cè)試，樣品的進(jìn)樣量均為1 μL，結(jié)果如圖3所示，TDLTP對(duì)于亞胺硫磷和毒死蜱的檢測(cè)靈敏度相比于傳統(tǒng)LTP分別提高了8倍和8.5倍。本研究對(duì)TDLTP電離源的精密度進(jìn)行了考察，重復(fù)測(cè)試6次，測(cè)得亞胺硫磷和毒死蜱兩種農(nóng)藥樣品的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）分別為8.6%和7.2%，此參數(shù)與傳統(tǒng)LTP電離源相比分別提高了約4倍和3倍。

3.2TDLTP電離源的實(shí)際應(yīng)用

3.2.1TDLTP電離源三重四極桿質(zhì)譜對(duì)于農(nóng)藥的檢出限電離源能夠進(jìn)行實(shí)際應(yīng)用的前提是靈敏度符合要求。將TDLTP電離源與三重四極桿質(zhì)譜儀聯(lián)用，在優(yōu)化的電離源條件下，測(cè)試12種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品的檢出限，結(jié)果見(jiàn)表1。與食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《GB 27632014 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》[26]中規(guī)定的谷物中農(nóng)藥殘留最大限量對(duì)比，本研究提出的熱解析低溫等離子體電離源直接質(zhì)譜法的檢出限低于或接近國(guó)標(biāo)中規(guī)定的最大農(nóng)藥殘留限量，因此本方法可以作為谷物農(nóng)藥殘留快速篩查的手段。

3.2.2糯高粱樣品農(nóng)藥殘留快速篩查按如上實(shí)驗(yàn)方法，在熱解析低溫等離子體電離源三重四極桿質(zhì)譜儀平臺(tái)上，分別采用正離子和負(fù)離子檢測(cè)模式，對(duì)糯高粱樣品溶液與高粱樣品加標(biāo)溶液進(jìn)行檢測(cè)，所得結(jié)果如圖4和圖5所示。

在正離子模式下，在加標(biāo)樣品溶液中檢測(cè)到二嗪磷和甲基嘧啶磷兩種農(nóng)藥，但樣品溶液中并未檢出，說(shuō)明熱解析LTP電離源的靈敏度能夠達(dá)到二嗪磷和甲基嘧啶磷的檢測(cè)要求，而糯高粱樣品中未檢出這兩種農(nóng)藥殘留。在負(fù)離子模式下，加標(biāo)樣品溶液中檢測(cè)到敵敵畏、辛硫磷、亞胺硫磷、馬拉硫磷、毒死蜱、七氯和艾氏劑7種農(nóng)藥殘留，而樣品溶液中的質(zhì)譜圖中則出現(xiàn)了強(qiáng)度相對(duì)較弱的敵敵畏、馬拉硫磷、毒死蜱三種農(nóng)藥質(zhì)譜峰，從S/N>3的角度考慮，可判定糯高粱樣品中存在敵敵畏殘留，此結(jié)果也與氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用標(biāo)準(zhǔn)分析法所得結(jié)果一致。以上結(jié)果均表明，TDLTP直接質(zhì)譜法能夠作為農(nóng)藥殘留的快速初步篩查的手段。

4結(jié) 論

本研究在傳統(tǒng)的低溫等離子體電離源的基礎(chǔ)上引入樣品熱解析過(guò)程，設(shè)計(jì)并搭建了一套熱解析低溫等離子體電離源，大大提高了LTP電離源的電離效率和穩(wěn)定性。該電離源可同時(shí)產(chǎn)生正負(fù)離子， 能方便地與各種質(zhì)譜對(duì)接，實(shí)現(xiàn)固體和液體樣品的定性定量分析。將該電離源應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室搭建的矩形離子阱質(zhì)譜平臺(tái)，確定了12種農(nóng)藥樣品的特征離子。將該電離源應(yīng)用于商品化的三重四極桿質(zhì)譜儀， 12種農(nóng)藥均能被高靈敏檢測(cè)。最后將該電離源應(yīng)用于糯高粱實(shí)際樣品農(nóng)藥殘留分析，無(wú)需復(fù)雜的樣品前處理過(guò)程，實(shí)現(xiàn)了對(duì)高粱實(shí)際樣品農(nóng)藥殘留的快速篩查，表明TDLTP電離源在農(nóng)藥殘留快速、高通量檢測(cè)方面具有廣闊的應(yīng)用前景。

AbstractA thermal desorption low temperature plasma （TDLTP） ionization was developed for rapid and sensitive detection of pesticides by direct mass spectrometry. The thermal desorption sampler was added in fount of the plasma generator. The sample was desorbed in the thermal desorption sampler firstly， and then the gas molecules were transported to the plasma generator by the carrier gas to be ionized. The utilization of thermal desorption sampler helps to shift the interaction of the gas phase plasma with the sample form gassolid or gasliquid to gasgas， which increases the sensitivity and stability especially for nonvolatile sample （e.g. pesticides） greatly compared with the traditional LTP ionization source. Under the optimal parameters of the thermal desorption LTP ionization source， the characteristic ions of 12 kinds of pesticides were investigated. Then the thermal desorption LTP ionization source was connected with the commercial ACQUITY TQD mass spectrometer to evaluate the pesticide residue level in broomcorn.

KeywordsRapid detection of pesticide residues； Thermal desorption sample introduction； Low temperature plasma ion source； Rectilinear ion trap； Triple quadrupole mass spectrometry