潘華祎++李程++王小平

摘要 以碗蓮為試驗(yàn)材料，研究水體環(huán)境中的不同pH值（3、5、7、9、11）對(duì)碗蓮幼葉葉綠素含量、光合特性及抗性生理的影響。結(jié)果表明：在pH值為7時(shí)，葉綠素含量、凈光合速率（Pn）、氣孔導(dǎo)度（Gs）和蒸騰速率（Tr）最高，而細(xì)胞間隙CO2濃度（Ci）最低；超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化物酶（POD）活力最高，丙二醛（MDA）含量最低。植株隨環(huán)境中酸性或堿性增大，其葉綠素含量、Pn、Gs和Tr降低，Ci升高：SOD、POD活力減弱，MDA含量增多。

關(guān)鍵詞 碗蓮；pH值；光合特征；抗性生理

中圖分類(lèi)號(hào) S682.32 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2017）01-0123-02

Effect of Water Environment pH on the Photosythetic Characteristics and Resistance Physiology of Lotus

PAN Hua-yi LI Cheng WANG Xiao-ping *

（Nanjing Xiaozhuang University，Nanjing Jiangsu 211171）

Abstract Experiment was conducted to study the influence of different pH（3，5，7，9，11） on the leaf chlorophyll content，photosythetic charact-eristics and resistance physiology of the lotus.Experimental results showed that at pH 7，chlorophyll content，net photosynthetic rate（Pn），stomatal conductance（Gs），and transpiration rate （Tr） were the highest，and the intercellular CO2 concentration（Ci） was the lowest；the activity of sup-eroxide dismutase（SOD） and peroxidase（POD） were the highest，but the content of MDA was the lowest.In the environment of the water with stronger acidity or alkalinity，the chlorophyll content，Pn，Gs and Tr appeared more and more low，and Ci showed higher；SOD and POD activity decreased，MDA content increased.

Key words lotus；pH；photosynthetic characteristics；resistance physiology

碗蓮屬睡蓮科多年生水生植物，葉呈圓形、卵圓形等，常漂浮于水面?；ㄉ诨üｍ敹?，花大如酒盅，地下莖小，可植于花盆或碗中[1]。碗蓮是荷花家族中的一支微型品系，被廣泛栽培。本文以碗蓮為試驗(yàn)材料，探究水體環(huán)境中不同pH值對(duì)其幼苗光合特性及抗性生理的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

以重瓣型品種“錦旗”為試驗(yàn)材料。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選擇大小一致、不漏水的盆作為栽培容器，并編號(hào)Ⅰ～Ⅴ，在每個(gè)盆中放入3粒種子，并放入等量潔凈石英砂，作為固定基質(zhì)。倒入適量等體積的水，置于溫暖處培養(yǎng)。經(jīng)培養(yǎng)，待幼葉直徑5 cm左右時(shí)，用1 mol/L HCl和1 mol/L KOH調(diào)節(jié)容器中的pH值，分別使編號(hào)為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ盆中水環(huán)境的pH值相應(yīng)為3、5、7、9、11，3次重復(fù)，7 d后進(jìn)行項(xiàng)目測(cè)定。

1.3 項(xiàng)目測(cè)定

葉綠素含量采用分光光度法進(jìn)行[2]。用CIRAS-2便攜式光合儀測(cè)定幼苗葉片凈光合速率（Pn）、氣孔導(dǎo)度（Gs）、細(xì)胞間隙CO2濃度（Ci）和蒸騰速率（Tr），測(cè)定時(shí)溫度為（25±2） ℃、光照強(qiáng)度為1 000 μmol/（m2·s）、相對(duì)濕度（RH）為30%～35%、CO2濃度（380±10）μmol/mol。超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定采用南京建成生物公司的SOD試劑盒測(cè)定；采用愈創(chuàng)木酚氧化法測(cè)定過(guò)氧化物酶（POD）；丙二醛（MDA）含量的測(cè)定采用硫代巴比妥酸（TBA）比色法進(jìn)行[2]。

2 結(jié)果與分析

2.1 水環(huán)境的pH值對(duì)碗蓮葉綠素含量影響

葉綠素代謝是一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡的過(guò)程，植株所處的環(huán)境對(duì)其平衡是有影響的[3]。由圖1可以看出，在pH值為7的水環(huán)境下的碗蓮幼葉葉綠素最高；與其相比，環(huán)境酸、堿性越強(qiáng)，其葉綠素含量越低，如pH值為3、11時(shí)，與pH值為7水環(huán)境下的碗蓮相比，其葉綠素含量分別是其43%、31%。葉綠素a、葉綠素b與總?cè)~綠素變化趨勢(shì)相似，在中性環(huán)境下含量最高，而在酸、堿環(huán)境下呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，且隨水環(huán)境的酸、堿性增強(qiáng)，下降的比例增大。

2.2 水環(huán)境的pH值對(duì)碗蓮幼葉光合參數(shù)的影響

碗蓮生長(zhǎng)環(huán)境中的酸堿度對(duì)凈光合速率（Pn）是有一定影響的。由圖2可以看出，當(dāng)水環(huán)境pH值為3、5、7時(shí)，植株P(guān)n逐漸增加，且在pH值為7時(shí)達(dá)最大，與此相比pH值為3時(shí)植株的Pn是其51%；而當(dāng)水環(huán)境呈堿性時(shí)，植株的Pn出現(xiàn)下降趨勢(shì)，與中性水環(huán)境生長(zhǎng)的植株相比，pH值為11時(shí)植株的Pn為其49%。此外，由圖3可以看出，碗蓮幼葉的氣孔導(dǎo)度（Gs）也受到其生長(zhǎng)環(huán)境中酸堿度的影響，當(dāng)水環(huán)境的pH值為7時(shí)，碗蓮幼葉Gs最大；植株在酸、堿環(huán)境下Gs皆下降，如pH值為3、11時(shí)與pH值為7時(shí)植株相比，分別為其58%、55%。

由圖4可以看出，不同pH值的水環(huán)境對(duì)碗蓮葉蒸騰速率（Tr）影響是不同的。Tr在pH值為7時(shí)最大，而在酸性水環(huán)境下，隨著pH值降低而減少，如當(dāng)pH值為3時(shí)是pH值為7時(shí)的64%。而在堿性環(huán)境下的植株，其葉片的Tr隨著pH值增大而降低，如pH值為11時(shí)是pH值為7時(shí)的 60%。由圖5可以看出，植株在酸或堿性環(huán)境下其葉片Ci含量比生活在中性環(huán)境下要高，且水環(huán)境酸、堿性越強(qiáng)含量越高，如pH值在3、11時(shí)，分別是pH值為7時(shí)的164%和173%。

2.3 水環(huán)境的pH值對(duì)碗蓮幼苗抗逆生理的影響

由圖6可以看出，水環(huán)境的pH值變化對(duì)碗蓮葉片內(nèi)SOD有顯著的影響。其中，pH值為7時(shí)，碗蓮葉片內(nèi)SOD的酶活性最高，偏酸、偏堿環(huán)境則降低，如pH值為3、11時(shí)分別是pH值為7時(shí)的67%、54%。POD變化規(guī)律與SOD相似，由圖7可以看出，pH值為7時(shí)活性達(dá)到最大，偏酸、偏堿環(huán)境下降低，如pH值為3、11時(shí)分別是其61%、48%。因水環(huán)境中pH值脅迫對(duì)植物的傷害會(huì)引發(fā)生物膜的結(jié)構(gòu)功能變化，MDA含量是植物傷害程度的一個(gè)主要指標(biāo)[3]。由圖8可以看出，pH值為7時(shí)，MDA含量最低，而pH值為3、11時(shí)分別是其152%和178%。

3 討論

3.1 水環(huán)境的pH值對(duì)碗蓮葉綠素含量與光合特性的影響

葉綠素是高等植物進(jìn)行光合作用的主要色素，葉綠素a是光合作用的中心色素，葉綠素b在光合作用中起到吸收和傳遞光能的作用[3]。試驗(yàn)表明，碗蓮在pH值為7的水環(huán)境下幼葉葉綠素a、葉綠素b及總?cè)~綠素含量均高；而在酸或堿的水環(huán)境下，其幼葉葉綠素含量減少，水環(huán)境酸性越強(qiáng)或堿性越強(qiáng)，則含量越低。這可能與影響葉綠素合成所需酶的活力有關(guān)，而造成的葉綠素合成受阻[4]。另外，水環(huán)境的酸堿度引發(fā)植物體內(nèi)自由基等有害物質(zhì)增多，改變鎂離子與吡咯環(huán)結(jié)合等破壞了葉綠素的結(jié)構(gòu)[5]。

Pn、Gs、Ci和Tr是光合作用的重要指標(biāo)，在植物光合過(guò)程中協(xié)同發(fā)揮作用，使得光合作用順利進(jìn)行。試驗(yàn)表明，碗蓮幼苗在中性水環(huán)境下Pn最高，而隨著水環(huán)境酸性或堿性增強(qiáng)，Pn則呈現(xiàn)下降趨勢(shì)；Gs、Tr變化與其變化趨勢(shì)相似。而Ci則在偏酸、偏堿的水環(huán)境中比中性水環(huán)境的幼葉中含量要高，這可能由于在酸或堿性水環(huán)境下幼葉氣孔導(dǎo)度的下降，阻止了CO2的供應(yīng)以及葉肉細(xì)胞光合作用能力下降，使葉肉細(xì)胞利用的能力降低，從而導(dǎo)致胞間CO2含量的升高[6]。

3.2 水環(huán)境的pH值對(duì)碗蓮抗性生理的影響

SOD是一種以氧自由基為底物，與POD等酶協(xié)同清除活性氧自由基的酶類(lèi)，但在逆境下，植物體內(nèi)活性氧自由基的產(chǎn)生速度超出了植物清除活性氧的能力，就會(huì)引起傷害；植物處于逆境時(shí)，往往引發(fā)生膜脂過(guò)氧化，MDA是其產(chǎn)物之一[3]。pH值為7時(shí)，碗蓮葉片SOD、POD活性達(dá)到最大值，MDA含量最小，表明水環(huán)境酸、堿變化引發(fā)酶活性和MDA含量的變化。從試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，由于保護(hù)酶的防御作用有限，隨著水環(huán)境酸堿度的增大，體內(nèi)酶系統(tǒng)功能紊亂，清除活性氧的能力削弱，氧自由基的累積引起細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)損傷和生理代謝紊亂[7]。

4 參考文獻(xiàn)

[1] 王其超，張行言.中國(guó)荷花品種圖志[M].北京：中國(guó)林業(yè)出版社，1989：40-59.

[2] 張志良，瞿偉菁.植物生理實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].3版.北京：高等教育出版社，2003.

[3] 潘瑞熾.植物生理學(xué)[M].5版.北京：高等教育出版社，2004.

[4] CAI Z Q，QI X，CAO K F.Response of stomatal characteristics and its plasticity to different light intensities in leaves of seven tropical woody seedlings[J].Chinese Journal of Applied Ecology，2004，15（2）：201-204.

[5] HERRMANN F，WINTERHALTER R，MOORTGATRADICAL G K.Hy-droxyl radical（·OH）yields from the ozonolysis of both double bonds for five monoterpenes[J].Atmos Environ，2010，44：3458-3464.

[6] 魯艷，李新榮，何明珠，等.不同濃度Ni、Cu處理對(duì)駱駝蓬光合作用和葉綠素?zé)晒馓匦缘挠绊慬J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2011，22（4）：936-942.

[7] 王小平，吳向華，毛善國(guó).鹽脅迫對(duì)九粒白根系活力及葉綠素含量與抗性生理的影響[J].北方園藝，2013（10）：32-34.