雷永革 曹巧林

免疫抑制法測(cè)定深圳地區(qū)13歲以下健康兒童CK-MB水平及分析*

雷永革 曹巧林

目的 了解免疫抑制法測(cè)定深圳地區(qū)5個(gè)月～13歲不同年齡健康兒童血清肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）的含量水平，并分析其與方法學(xué)提供的參考區(qū)間的差異性，為本地區(qū)建立健康兒童CK-MB參考區(qū)間提供依據(jù)。方法 收集2016年3～6月來醫(yī)院保健科體檢的健康兒童1 062例，依據(jù)年齡分為3組：5個(gè)月～3歲的學(xué)齡前組、4～6歲的幼兒組和7～13歲的小學(xué)組，并選擇同期健康成人390例，采用免疫抑制法檢測(cè)血清CK-MB含量，與方法學(xué)提供的參考區(qū)間比較，對(duì)含量超出范圍的標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行肌鈣蛋白I（cTnI）、肌紅蛋白（MYO）和心電圖檢測(cè)，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 1 062例健康兒童檢出CK-MB含量異常率為66.20%（703/1 062），其中學(xué)齡前組、幼兒組和小學(xué)組CK-MB含量異常率分別為81.02%（239/295）、66.23%（251/379）和54.90%（213/388），各組CK-MB含量異常率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=3.71～15.95，P＜0.01～0.05），而390例健康成人血清CK-MB含量均＜24 U/L；703例CK-MB含量異常標(biāo)本中cTnI含量均＜0.034 ng/ml，有3例標(biāo)本MYO結(jié)果稍有增高＞61.5 ng/ml，但隨后的心電圖跟蹤檢查均未見異常；學(xué)齡前組、幼兒組及小學(xué)組兒童血清CK-MB含量（U/L）分別為41.52±19.38、35.09±14.37及28.15±7.86，不同年齡段兒童血清CK-MB含量的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.60～4.13，P＜0.05）；健康兒童血清CK-MB含量為34.97±10.64 U/L，與健康成人血清CK-MB含量（16.05±7.13 U/L）的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=13.93，P＜0.01）。結(jié)論 免疫抑制法檢測(cè)深圳地區(qū)5個(gè)月～13歲健康兒童血清CK-MB含量異常率較高，臨床上不能直接引用方法學(xué)提供的參考區(qū)間，應(yīng)及時(shí)建立本地區(qū)健康兒童CK-MB免疫抑制法的正常參考區(qū)間，以便更好地為臨床服務(wù)，降低誤診和不必要的確診項(xiàng)目檢查。

免疫抑制法 兒童 肌酸肌酶MB同工酶

血清肌酸激酶MB型同工酶（CK-MB）作為一種主要存在于心肌的特異性酶，對(duì)心肌梗死、心肌炎及心肌損傷的診斷、治療及療效判斷具有重要的價(jià)值，曾被認(rèn)為是診斷心肌梗死和心肌炎的金標(biāo)準(zhǔn)[1-3]。CK-MB活性檢測(cè)常采用免疫抑制法，因其方法簡(jiǎn)單，適于自動(dòng)化，是目前國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用最多的檢測(cè)方法，但免疫抑制法試劑盒給出的CK-MB正常參考區(qū)間不區(qū)分兒童和成人，統(tǒng)一為0～24 U/L，而工作中發(fā)現(xiàn)大部分健康體檢兒童常出現(xiàn)CK-MB結(jié)果高于正常的現(xiàn)象，對(duì)兒童急性心肌梗死、心肌炎及心肌損傷的診斷、治療及療效判斷帶來一定的誤區(qū)，易造成誤診或不必要的確診項(xiàng)目檢查，導(dǎo)致兒童因確診項(xiàng)目檢查而帶來身體創(chuàng)傷，同時(shí)增加家庭經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，浪費(fèi)公共醫(yī)療資源。為此，本文就此對(duì)免疫抑制法檢測(cè)深圳地區(qū)5個(gè)月～13歲健康兒童血清CK-MB含量進(jìn)行調(diào)查，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

對(duì)象與方法

1 對(duì)象 選擇2016年3～6月來醫(yī)院保健科體檢的健康兒童1 062例，其中男性493例，女性569例，年齡5個(gè)月～13歲，平均（6.32±4.72）歲。按年齡段分為：5個(gè)月～3歲學(xué)齡前組（295例）、4～6歲幼兒組（379例）和7～13歲小學(xué)組（388例）；選擇同期來院體檢的健康成人390例，其中男性178例，女性212例，年齡20～53歲，平均（33.62±9.23）歲。經(jīng)體檢科嚴(yán)格體格檢查，發(fā)育正常，無急慢性疾病、無肝腎疾病及心臟病家族史，可排除心肌、腦部、骨骼肌及皮膚炎等疾病，亦無劇烈活動(dòng)、藥物及非疾病因素的影響，ECG、B超均正常。

2 標(biāo)本采集 所有研究對(duì)象均于凌晨空腹按標(biāo)本留取統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)方法抽取靜脈血2 ml于一次性無抗凝劑干燥管內(nèi)，及時(shí)送檢。

3 儀器與試劑 強(qiáng)生VITROS 5600全自動(dòng)生化免疫分析儀、試劑、校準(zhǔn)品及室內(nèi)質(zhì)控品均由美國(guó)強(qiáng)生公司提供；日立7600全自動(dòng)生化分析儀、校準(zhǔn)品及室內(nèi)質(zhì)控品均由日本日立公司提供，試劑盒由寧波美康生物科技股份有限公司提供。

4 方法 收到標(biāo)本于室溫靜置30 min，分離血清用免疫抑制法測(cè)定CK-MB含量，所有標(biāo)本均于2 h內(nèi)檢測(cè)完畢，對(duì)CK-MB結(jié)果異常標(biāo)本進(jìn)行cTnI和MYO檢測(cè)，并對(duì)血清CK-MB含量異常的兒童進(jìn)行心電圖檢查。標(biāo)本檢測(cè)前要對(duì)相關(guān)儀器進(jìn)行維護(hù)和保養(yǎng)、定校和室內(nèi)質(zhì)控物檢測(cè)，待室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果在控后再行標(biāo)本檢測(cè)，所有操作均嚴(yán)格按儀器和實(shí)驗(yàn)室的SOP文件進(jìn)行。

5 異常判斷標(biāo)準(zhǔn) 依據(jù)檢測(cè)CK-MB免疫抑制法試劑盒說明書提供的正常參考區(qū)間，CK-MB＞24 U/ L為異常；cTnI＞0.034 ng/ml和MYO＞61.5 ng/ml為異常。

6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用方差分析和兩兩比較的LSD法；計(jì)數(shù)資料采用百分?jǐn)?shù)（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 CK-MB含量異常情況 采用免疫抑制法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)1 062例5個(gè)月～13歲健康兒童血清CK-MB含量異常者703例，異常率66.20%，其中學(xué)齡前組、幼兒組和小學(xué)組健康兒童CK-MB含量異常率分別為81.02%（239/295）、66.23%（251/379）和54.90%（213/388），不同年齡組兒童血清CK-MB含量異常率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（r=3.71～15.95，P＜0.01～0.05），而390例健康成人血清CK-MB含量均＜24 U/L。

2 CK-MB異常標(biāo)本中cTnI和MYO異常情況 703例CK-MB含量異常標(biāo)本中cTnI含量均＜0.034 ng/ ml，有3例標(biāo)本MYO結(jié)果稍有增高＞61.5 ng/ml，但隨后的心電圖跟蹤檢查均未見異常。

3 不同年齡段健康兒童血清CK-MB含量情況 學(xué)齡前組、幼兒組及小學(xué)組健康兒童血清CK-MB含量（U/L）分別為41.52±19.38、35.09±14.37及28.15±7.86，不同年齡段健康兒童血清CK-MB含量的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.60～4.13，P＜0.05）。

4 健康兒童血清CK-MB含量與健康成人比較1062例健康兒童血清中CK-MB含量（U/L）為34.97±10.64，而390例健康成人血清中CK-MB含量為16.05±7.13，兩者結(jié)果的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=13.93，P＜0.01）。

討 論

CK-MB是心肌細(xì)胞中的一種特異性酶，當(dāng)心肌受損時(shí)，心肌細(xì)胞破壞增加，CK-MB釋放入血，血液CK-MB酶活性增高，是心肌梗死、心肌炎及心肌損傷的一個(gè)敏感性血清酶指標(biāo)。目前CK-MB活性檢測(cè)仍是診斷急性心肌損傷的首選指標(biāo)之一，其活性升高可作為心肌炎診斷的特異性指標(biāo)之一，頗受臨床醫(yī)生重視[4-6]。

CK-MB活性檢測(cè)方法很多，傳統(tǒng)測(cè)定方法為電泳及離子交換層析法，但由于其敏感性差和操作繁瑣等原因，給檢驗(yàn)和臨床工作帶來不便。20世紀(jì)90年代國(guó)外曾采用酶質(zhì)量測(cè)定法測(cè)CK-MB的酶蛋白質(zhì)濃度，效果很好，但由于試劑價(jià)格昂貴，很難普及。而免疫抑制法因其方法簡(jiǎn)單，便于自動(dòng)化，是目前國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用最多的檢測(cè)方法；其采用抗-M亞基的抗血清，標(biāo)本中的全部CK-MM活性和50%的CK-MB活性被抑制，而CK-MB和CK-BB中B亞基的活性則不受影響。成人血清中因CK-BB含量甚微可忽略不計(jì)，故將CK-B活性測(cè)定值乘以2即可大致代表CK-MB的活性[7-10]。本研究結(jié)果顯示，390例健康成人血清CK-MB含量均＜24 U/L，濃度為17.65±8.03 U/ L，均未見異常，這可能與成人血腦發(fā)育已完善、血清CK-BB含量甚微、對(duì)免疫抑制法檢測(cè)影響微小有關(guān)。

CK-BB主要存在于腦組織、胃腸道及子宮平滑肌中，腦組織中幾乎全為CK-BB。若血清中有CK-BB升高的因素，即可造成CK-MB假性升高。由于兒童，尤其是嬰幼兒、學(xué)齡前兒童的血腦屏障發(fā)育不完善，外周血中會(huì)出現(xiàn)很多CK-BB，血清CK-BB含量可高于成人[11]。吳鳳麗等[12]在CK同工酶電泳時(shí)也發(fā)現(xiàn)，兒童患者在電泳中出現(xiàn)CKBB，因此，采用免疫抑制法測(cè)得的CK-MB活性會(huì)出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。本研究結(jié)果顯示，5個(gè)月～13歲健康兒童血清CK-MB含量異常率高達(dá)66.20%，尤其是5個(gè)月～3歲兒童異常率高達(dá)81.02%，隨著兒童年齡的增長(zhǎng)，CK-MB含量異常率也逐漸下降，這與兒童血腦屏障不斷發(fā)育完善有關(guān)；但CK-MB含量異常的兒童血清中cTnI含量均未見異常，MYO只有3例兒童出現(xiàn)輕度增高，但心電圖均未見異常，這可能與MYO在骨骼肌含量豐富有關(guān)。

本研究結(jié)果顯示，免疫抑制法檢測(cè)健康兒童血清中CK-MB含量明顯高于健康成人，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），且不同年齡兒童血清CK-MB含量的差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而免疫抑制法檢測(cè)試劑盒所提供的正常參考區(qū)間未區(qū)分不同年齡段，統(tǒng)一為0～24 U/L。因此，檢測(cè)兒童血清CK-MB含量不能直接引用試劑盒所提供的參考區(qū)間。

綜上所述，健康兒童血清CK-MB含量與健康成人之間存在差異，且不同年齡兒童組間也存在差異。因此，檢測(cè)兒童血清CK-MB含量時(shí)不能直接引用試劑盒說明書上提供的正常參考區(qū)間，應(yīng)及時(shí)建立本區(qū)健康兒童不同年齡段CK-MB含量正常參考區(qū)間，為本區(qū)臨床診斷兒童急性心肌梗死、心肌炎及心肌損傷提供可靠、客觀及科學(xué)的參考依據(jù)。

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11 張秀明，李健齋，魏明鏡.現(xiàn)代臨床生化檢驗(yàn)學(xué)[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2001：142-152.

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Detect the CK-MB Level with Immune Suppression Method in 5 Months～13 Healthy Children in Shenzhen Area and Explore the Reasons

LEI Yong-ge，Cao Qiao-lin.
Clinical laboratory of Shenzhen Dapeng New District Maternity and Child care Division，Guangdong Province 518120

Objective To understand the immune suppression method test the levels of serum creatine kinase MB isoenzyme （CK - MB） in shenzhen area in 5 months ～ 13 years aged healthy children，and provide the Results 1062 cases of healthy children CK - MB storage anomaly detection rate was 66.20% （703/1062），including reference range of analysis with the methodology，the difference of the CK-MB for the region to establish healthy children provides some references for the reference range. Methods Collected March to June 2016 medical care of hospital，1 062 cases of healthy children，according to the age is divided into five months to 3 years old preschool group，4～6 years old children and 7～13 years，primary competitions and other three groups，and selected the same healthy adults 390 cases，the immune suppression method is adopted to detect the contents of serum CK-MB，compared with methodology provides the reference range，content is beyond the scope of the specimen at the same time for troponin I （cTnI），myoglobin （MYO） and electrocardiogram examination，and the results were analyzed. Results Preschool group，preschool and primary sections CK-MB content abnormal rate was 81.02% （239/295），66.23% （251/379） and 54.90% （213/388），differences between groups of CK-MB content abnormal rate was statistically significant （χ2= 3.71～15.95，P＜0.01～0.05），and 390 cases of healthy adults in serum CK - MB content ＜ 24 U/L; Specimens of 703 cases of abnormal CK - MB content of cTnI levels are ＜ 0.034 ng/ml，3 cases of specimens MYO results increased slightly＞61.5 ng/ml，but then on the electrocardiogram trace examination，abnormality was not found; Preschool group，infants and children primarycompetitions in serum CK-MB content were 41.52±19.38 U/L，35.09±14.37 U/L and 28.15±7.86 U/L，between different age children in the serum CK-MB content difference was statistically significant （t=2.596～2.596，P＜0.05）; Healthy children in serum CK - MB content was 34.97±10.64 U/L，healthy adults in serum CK - MB content was 16.05±7.13 U/L，between the two results was statistically significant difference （t=13.927，P＜0.01）. Conclusion Detection of immune suppression in shenzhen area in 5 months ～ 13 years healthy children serum CK-MB in the abnormal rate is very high，no direct reference methodology to provide clinical reference range，therefore，regional health children CK-MB in time the normal reference range of immune suppression method should be established，in order to better serve the clinical，lest cause misdiagnosis and unnecessary confirmed project inspection.

Immune suppression method Children Creatine muscle enzymes MB isoenzyme

R446.11

A

1671-2587（2017）02-0151-04

2016-12-16）

（本文編輯：王敏）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.02.017

*本課題受廣東省深圳市寶安區(qū)科技局項(xiàng)目（No.2016cx273）資助

518100 廣東省深圳市大鵬新區(qū)婦幼保健院檢驗(yàn)科（雷永革）；深圳市寶安區(qū)松崗人民醫(yī)院內(nèi)科（曹巧林）

雷永革（1975–），男，湖南人，主管技師，學(xué)士，主要從事臨床檢驗(yàn)工作，（E-mail）leiyongge1975@163.com。