洪 毅

36例不規(guī)則抗體致新生兒溶血病分析

洪 毅

目的 對引起非ABO新生兒溶血病的不規(guī)則抗體進行分析，并探討其臨床診療意義。方法 收集2010～2015年新生兒溶血病檢測的相關(guān)實驗樣本，采用凝膠卡式抗球蛋白法篩查不規(guī)則抗體，Liss-IAT（低離子液間接抗球蛋白法）試管法鑒定不規(guī)則抗體；分析不規(guī)則抗體的種類和相關(guān)臨床資料。結(jié)果 2 311例新生兒溶血病檢測實驗樣本中，檢出不規(guī)則抗體致新生兒溶血病36例，其中28例不規(guī)則抗體為Rh血型系統(tǒng)的不規(guī)則抗體，3例為Lewis血型系統(tǒng)，4例為Kidd血型系統(tǒng)，1例為Diego血型系統(tǒng)。Rh血型系統(tǒng)的不規(guī)則抗體中，2例抗-D，占7.1%（2/28）；8例抗-E，占28.6%（8/28）；11例抗-cE，占39.3%（11/28）；2例抗-C，占7.1%（2/28）；5例抗-Ce，占17.9%（5/28）；36例新生兒溶血病例中，有26例進行了換血治療。結(jié)論 不規(guī)則抗體易致嚴(yán)重的新生兒溶血病，在檢測中應(yīng)采用敏感的方法，避免漏檢。

新生兒溶血病 不規(guī)則抗體 換血治療

新生兒溶血病主要是指母嬰紅細(xì)胞血型不合引起的新生兒同種免疫性溶血性疾病。胎兒紅細(xì)胞在母親妊娠期間可進入母體，刺激母體產(chǎn)生免疫性抗體，但研究資料顯示，妊娠早期在母體血液中即可檢出胎兒紅細(xì)胞。流產(chǎn)、羊水穿刺、分娩和死胎等情況可使胎兒紅細(xì)胞進入母體的概率大大增加。免疫刺激產(chǎn)生的抗體主要是IgG型抗體，IgG型抗體（主要是IgG1和IgG3）可穿過胎盤屏障，破壞胎兒或新生兒的紅細(xì)胞[1，2]。新生兒溶血病根據(jù)起病的血型抗體不同主要分為ABO和非ABO血型新生兒溶血?。床灰?guī)則抗體引起的新生兒溶血病，以Rh血型新生兒溶血病為主）。

盡管ABO血型新生兒溶血病最常見，但該系統(tǒng)引起的嚴(yán)重新生兒溶血病較少見，而由不規(guī)則抗體引發(fā)的新生兒溶血病往往程度較重，需要引起更多的重視。本文對2010～2015年本院診斷出的36例由不規(guī)則抗體導(dǎo)致的新生兒溶血病案例總結(jié)如下。

材料與方法

1 材料 2010～2015年臨床送檢的新生兒溶血病檢測實驗樣本，包含患兒和產(chǎn)婦的血樣。

2 儀器與試劑 Baso血庫專用離心機，Baso孵育器和Baso凝膠卡專用離心機（貝索企業(yè)（中國）銷售公司），抗球蛋白檢測凝膠卡（美國Bio-rad公司），抗體篩選細(xì)胞（Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ，上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司），抗-A、抗-B、抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e、抗-M、抗-N和抗球蛋白試劑（上海血液生物醫(yī)藥責(zé)任公司）；A、B、O標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞試劑盒（北京金豪制藥股份有限公司），2-Me（二巰基乙醇）（上海血液生物醫(yī)藥責(zé)任公司）。3 方法

3.1 血型鑒定：送檢樣本離心分離出血清和紅細(xì)胞，紅細(xì)胞洗滌后鑒定血型。

3.2 新生兒溶血病檢測：新生兒紅細(xì)胞做直接抗球蛋白實驗、游離實驗和放散實驗，以確定新生兒紅細(xì)胞表面是否結(jié)合有IgG抗體（即是否符合新生兒溶血病的實驗室指標(biāo)），實驗方法和診斷依照有關(guān)規(guī)程[3，4]；產(chǎn)婦血清不規(guī)則抗體測定采用微柱凝膠卡方法，將產(chǎn)婦血清50 μl與抗篩細(xì)胞25 μl加入抗球蛋白檢測凝膠卡中，37℃孵育15 min，1 000 r/min離心10 min，肉眼觀察結(jié)果，紅細(xì)胞均勻沉降于底部為陰性，懸浮于凝膠表面或凝膠中段為陽性。

3.3 對抗體篩選陽性的樣本，送陜西省血液中心血型室做抗體鑒定，抗體鑒定用譜紅細(xì)胞購自荷蘭Sanquin公司，采用Liss-IAT試管法。

3.4 臨床支持治療：主要包括光療、吸氧和注射白蛋白；符合新生兒換血指標(biāo)（臍帶血血紅蛋白低于120 g/L、血清膽紅素超過342 μmol/L及早期核黃疸等）的實施換血治療。

結(jié) 果

1 2010年1月～2015年8月臨床送檢的2 311例新生兒溶血病檢測實驗樣本中，檢出不規(guī)則抗體致新生兒溶血病36例。

2 36例不規(guī)則抗體特異性鑒定和相關(guān)檢測及臨床處置資料見表1。從表1中可見，檢出的36例不規(guī)則抗體中，有28例為Rh血型系統(tǒng)的不規(guī)則抗體，3例為Lewis血型系統(tǒng)，4例為Kidd血型系統(tǒng)，1例為Diego血型系統(tǒng)。Rh血型系統(tǒng)的不規(guī)則抗體中，2例為抗-D，占7.1%（2/28）；8例抗-E，占28.6%（8/28）；11例抗-cE，占39.3%（11/28）；2例抗-C，占7.1%（2/28）；5例抗-Ce，占17.9%（5/28）。36例新生兒溶血病例中，有26例進行了換血治療；28例檢出Rh血型系統(tǒng)不規(guī)則抗體的病例中，有23例進行了換血治療，提示Rh系統(tǒng)的新生兒溶血病病情往往較重，需要換血治療。

討 論

新生兒同種免疫性溶血是由于母體存在與胎兒血型不相容的血型抗體（IgG）而引起的。胎兒紅細(xì)胞進入母體循環(huán)后，若母體缺乏胎兒紅細(xì)胞所具有的抗原時，母體則產(chǎn)生相應(yīng)的血型抗體，此抗體經(jīng)胎盤進入胎兒循環(huán)，可引起胎兒紅細(xì)胞致敏、破壞而出現(xiàn)溶血，導(dǎo)致貧血、水腫、肝脾腫大、生后短時間內(nèi)出現(xiàn)進行性重度黃疸，甚至發(fā)生核黃疸而影響智力發(fā)育，并導(dǎo)致運動障礙[5]。

臨床上引起血型不合新生兒溶血病以ABO血型系統(tǒng)最多見，其次為Rh血型系統(tǒng)，其他血型系統(tǒng)血型不合引起的新生兒溶血病較少見。盡管ABO血型新生兒溶血病最常見，但由于胎兒紅細(xì)胞上的A抗原或B抗原密度較低，而血漿中存在的可溶性A或B物質(zhì)又可中和部分來自母體的IgG抗體，另外還與胎兒血液中缺乏補體有關(guān)，因此ABO血型系統(tǒng)引起的嚴(yán)重新生兒溶血病多以支持治療為主，很少進行換血治療[6]。而Rh血型抗體引起新生兒溶血病往往較嚴(yán)重，可能因為Rh蛋白在新生兒紅細(xì)胞上就能完全表達，且在溶血機制上對補體的依賴等因素，多數(shù)需要實施換血治療。28例檢出Rh血型系統(tǒng)不規(guī)則抗體的病例中，有23例進行了換血治療，提示在檢測出Rh血型抗體時，應(yīng)積極準(zhǔn)備換血，避免耽誤患兒的救治。我們注意到即使Rh血型抗體效價不高，也能引起嚴(yán)重的新生兒溶血，提示在做不規(guī)則抗體檢測時，應(yīng)采用敏感的檢測手段，避免漏檢弱抗體。

在Rh血型抗體造成的新生兒溶血病例中，只有2例由Rh陰性產(chǎn)婦產(chǎn)生的抗-D引起，其中1例源于兒童時期輸過血；有19例產(chǎn)生的抗體都對E抗原有反應(yīng)（8例抗-E和11例抗-cE），遠高于抗-D的比率，這是由于RhE 陰性率（＞50%） 遠高于RhD 陰性率（≈0.3%），免疫原性在Rh 血型系統(tǒng)中僅次于RhD，容易因輸血或妊娠等同種免疫刺激后產(chǎn)生抗-E，提示女性輸血應(yīng)盡量使Rh血型完全相合。在檢出不規(guī)則抗體的案例中，還檢出有Lewis、Kidd和Diego血型系統(tǒng)的抗體，提示在新生兒溶血病的檢測中應(yīng)注意考慮多個血型系統(tǒng)抗體，除采用敏感的檢測技術(shù)（如liss-凝膠卡法）外，選擇的抗體篩選細(xì)胞應(yīng)盡量覆蓋多個有意義的血型抗原。

1 Makarovska-Bojadzieva T，Blagoevska M，Kolevski P，et al. Optimal blood grouping and antibody screening for safe transfusion[J]. Prilozi，2009，30（1）： 119-128.

2 龔君順，沈雨青，蘇奶助，等. 孕婦檢測不規(guī)則抗體在非ABO新生兒溶血病中的臨床意義[J]. 臨床血液學(xué)雜志，2015，28（10）：870-872.

3 尚紅，王毓蘭，申子瑜. 全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第4版．北京：人民衛(wèi)生出版社，2015，139-143.

4 中國醫(yī)師協(xié)會輸血科醫(yī)師分會. 新生兒溶血?。℉DN）免疫血液學(xué)試驗推薦方案[J]. 中國輸血雜志，2012，25（2）： 95-100.

5 陳忠，張莉尼. 國內(nèi)非ABO血型新生兒溶血病病例回顧分析[J]. 中國輸血雜志，2000，13 （1）： 46-47.

6 杰夫?丹尼爾，主編，朱自嚴(yán)，主譯. 人類血型[M]. 北京：科學(xué)出版社，2007，59-61.

Analysis of 36 Cases of Neonatal Hemolytic Disease Caused by Iregular Antibodies

HONG Yi.
Department of Blood Transfusion，Xi'an High Tech Hospital，Xi'an 710075

Objective To the cause of non ABO hemolytic disease of the newborn，irregular antibodies were analysis and research，and to explore its clinical significance. Experimental sample detection method in 2010 and 2015 in hemolytic disease of the newborn，the gel cassette anti ball protein in irregular antibodies screening，Liss-IAT tube method for the identification of irregular antibody; types of irregular antibodies and related clinical data analysis. The results 2311cases of hemolytic disease of the newborn detection in experimental sample，caused by irregular antibodies hemolytic disease of the newborn （HDN） 36 cases were identified，which 28 cases of irregular antibodies for irregular antibodies of Rh blood group system，3 cases as Lewis blood group System，4 cases for Kidd blood group system，1 case for Diego blood group system. In the irregular antibodies of Rh blood group system，2 cases of anti-D，7.1% （2/28）; 8 cases for anti-e，accounting for 28.6% （8/28）; 11 cases anti -cE accounted for 39.3% （11/28）; 2 cases anti-C，accounting for 7.1% （2/28）; 5 cases anti CE，accounting for 17.9% （5/28）; 36 cases of hemolytic disease of the newborn cases，26 cases of exchange transfusion in the treatment of. Conclusion the irregular antibody prone to cause severe hemolytic disease of the newborn and in detection should be the sensitive method，avoid To avoid missed and misdiagnosis.

Hemolytic disease of the newborn Irregular antibody Transfusion therapy

R556.6+3 R457.1+1

A

1671-2587（2017）02-0176-03

2016-09-15）

（本文編輯：王敏）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.02.024

710075 陜西省西安高新醫(yī)院輸血科

洪毅（1975–），男，主管技師，學(xué)士，主要從事輸血管理及研究工作，（E-mail）1967113703@qq.com。