何春歡 李紅 李嘉 姜平川

【摘要】目的：建立廣西壯藥華鳳仙的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。方法：對華鳳仙的顯微鑒別、薄層色譜鑒別、水分、總灰分、浸出物等項(xiàng)目進(jìn)行系統(tǒng)研究。結(jié)果：華鳳仙的薄層色譜鑒別特征明顯，專屬性強(qiáng)，制定了顯微鑒別、水分、總灰分和浸出物的控制指標(biāo)。結(jié)論：華鳳仙建立顯微鑒別與薄層色譜鑒別項(xiàng)，水分不得過150%，總灰分不得過230%，浸出物不得少于85%。這些數(shù)據(jù)為華鳳仙的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定提供參考，對于保證其質(zhì)量和臨床療效具有重要意義。

【關(guān)鍵詞】華鳳仙；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；顯微鑒別；薄層鑒別

【中圖分類號】R283【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號】1007-8517（2017）02-0032-03

Abstract：

Keywords：

華鳳仙，別名水邊指甲花、象鼻花，為鳳仙花科植物華鳳仙Impatiens chinensis Linn 的全草，其味微苦、辛，具有清熱解毒、活血化瘀、消腫拔膿的功效，用于治療發(fā)熱、咳嗽、咳痰、肺結(jié)核、跌打損傷和瘀血疼痛，外用治蛇頭指瘡、癰瘡腫毒等病癥，為廣西民間常用中草藥[1-3]。據(jù)報(bào)道華鳳仙含有揮發(fā)油和黃酮成分，其中揮發(fā)油主要成分為正二十六烷和正十六烷酸乙酯[4-5]。 藥理研究表明，華鳳仙總黃酮提取物對大鼠心肌缺血再灌注損傷有明顯的保護(hù)作用[6]。本實(shí)驗(yàn)主要對華鳳仙藥材性狀、顯微鑒別，薄層鑒別、水分、灰分等進(jìn)行研究，為系統(tǒng)評價(jià)廣西華鳳仙質(zhì)量提供科學(xué)依據(jù)。

1儀器與試藥

11儀器LY-HPCCD 萬能視頻成像裝置（成都勵(lì)揚(yáng)精密機(jī)電有限公司），DFY-500高速萬能粉碎機(jī)（溫林市林大機(jī)械有限公司），SXz-25-10馬弗爐（沈陽市節(jié)能電爐廠），XS-205分析天平（梅特勤托利多儀器有限公司）。

12試藥華鳳仙樣品采自廣西各地（見表1），經(jīng)本所黃云峰副研究員鑒定為鳳仙花科華鳳仙Impatiens chinensis Linn的全草。對照藥材（自制，編號HFX-1，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)韋松基教授和廣西中醫(yī)藥研究院賴茂祥研究員鑒定為鳳仙花科華鳳仙Impatiens chinensis Linn）。所用試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

21鑒別

211顯微鑒別根據(jù)采集到的藥材樣品，分別制成顯微組織片和粉末片后觀察擬定，顯微組織片的制備以藥材經(jīng)固定液固定后按石蠟切片法制片染色，粉末片以藥材經(jīng)粉碎過四號篩后按粉末制片法制片，每個(gè)樣品均觀察不同產(chǎn)地不同批號藥材10張片以上。組織結(jié)構(gòu)和粉末圖在顯微鏡下經(jīng)LY-HPCCD萬能視頻成像裝置拍攝成像（圖1～3）。不同批號的華鳳仙藥材性狀及顯微鑒別結(jié)果見表2。

2111莖的橫切面表皮細(xì)胞1列，長橢圓形，排列整齊。皮層由數(shù)列類圓形薄壁細(xì)胞組成，排列疏松，有的細(xì)胞含有大量針晶或針晶束。皮層最內(nèi)1～2層細(xì)胞稍小，排列緊密整齊。中柱維管束6個(gè)環(huán)狀排列，外韌型，多4大2小；韌皮部所占面積較窄，由篩管、韌皮薄壁細(xì)胞組成；木質(zhì)部由導(dǎo)管、木薄壁細(xì)胞等組成；髓射線較寬。髓部明顯。見圖1。

2112葉的橫切面上、下表皮細(xì)胞各1列，但前者細(xì)胞長圓形或類圓形，較大，偶見氣孔與非腺毛，非腺毛細(xì)胞3～8個(gè)；后者細(xì)胞類方形，較小，其上可見氣孔。柵欄組織一列，類長柱形，不通過中脈，含葉綠體。海綿組織細(xì)胞排列疏松，內(nèi)有針晶束。中脈維管束1個(gè)，木質(zhì)部位于上方，由薄壁細(xì)胞、導(dǎo)管等組成；韌皮部位于木質(zhì)部的下方，所占面積較少，細(xì)胞小而排列緊密。葉下表皮主脈顯著突起。見圖2。

2113粉末粉末黃綠色。纖維單個(gè)散在或成束，長梭形，先端鈍或平截，細(xì)胞壁多光滑，直徑18～25μm ?？梢娨恍┏书L方形、排列整齊的細(xì)胞，有的其中含有針晶束。草酸鈣針晶、柱晶多見，大小不一，散在或存在薄壁細(xì)胞內(nèi)。非腺毛多散在，稍彎曲或平直，竹節(jié)或牛角狀，由 2～8個(gè)細(xì)胞組成，直徑21～32μm，長62 ～133μm。葉上表皮細(xì)胞不規(guī)則多邊形，垂周壁稍平直。下表皮細(xì)胞多邊形，垂周壁多深波狀彎曲，氣孔較多，多為不定式 。導(dǎo)管多為梯紋、螺紋導(dǎo)管。見圖3。

212薄層層析鑒別取本品粉末1g，加95%乙醇10mL，超聲提取20min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。另取華鳳仙對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2015年版四部通則0502薄層色譜法）試驗(yàn)，吸取上述二種溶液各5～10μL，分別點(diǎn)于同一羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G板上，以環(huán)己烷-丙酮（4∶[KG-*3/5]3）為展開劑，展開，取出，晾干，在365nm熒光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點(diǎn)。見圖4。

22檢查在制定本品檢查指標(biāo)限度時(shí)，筆者根據(jù)本品的特點(diǎn)，主要考察每種方法對所測本品的適用性，重點(diǎn)考察了水分、總灰分和浸出物三項(xiàng)指標(biāo)。

221水分照水分測定法（《中國藥典》2015年版四部通則0832水分測定法 第四法（甲苯法））測定。共考察測定了7批樣品的水分含量，測定兩次取平均值。7批華鳳仙藥材水分含量試驗(yàn)結(jié)果，最高水分含量為142%，最低水分含量為93%，因此，水分含量擬定不超過150%。測定結(jié)果見表3。

222總灰分照灰分測定法（《中國藥典》2015年版四部通則2302灰分測定法）測定，共考察測定了7批華鳳仙藥材樣品的總灰分含量。7批華鳳仙樣品總灰分含量試驗(yàn)結(jié)果為：最高總灰分為218%，最低總灰分含量為145%，因此，將本品總灰分?jǐn)M定為不得超過230%。測定結(jié)果見表4。

223浸出物照醇溶性浸出物測定法（《中國藥典》2015年版四部通則2201浸出物測定法）項(xiàng)下的熱浸法，共測定了7批華鳳仙藥材樣品的浸出物含量。最高含量為173%，最低含量為91%，故擬定華鳳仙藥材醇溶性浸出物含量不得少于85%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表5。

3討論

研究表明華鳳仙在性狀和顯微方面有明顯的特征，性狀方面如葉對生，邊緣有稀疏的鈍鋸齒；花腋生，萼片向內(nèi)彎曲成鉤狀；旗瓣圓形，翼瓣半邊倒卵形，基部一側(cè)有耳。顯微鑒別方面莖橫切面中柱維管束6個(gè)環(huán)狀排列，多4大2小，髓部明顯；粉末中纖維細(xì)胞壁光滑，非腺毛竹節(jié)或牛角狀，葉下表皮細(xì)胞垂周壁多深波狀彎曲。

筆者分別用乙酸乙酯、丙酮、95%乙醇、甲醇、水等溶劑對華鳳仙藥材進(jìn)行超聲提取，過濾，濃縮后得到樣品液。點(diǎn)板后比較發(fā)現(xiàn)，95%乙醇提取物斑點(diǎn)信息較多，斑點(diǎn)清晰，故采用了乙醇作為溶劑；以不同比例的石油醚-乙酸乙酯、石油醚-丙酮、氯仿-甲醇、甲苯-丙酮、環(huán)己烷-丙酮等多種展開劑進(jìn)行展開，結(jié)果以環(huán)己烷-丙酮（4∶3）為展開劑分離效果較好；顯色方面，在365nm熒光下檢視效果較好。本文采用的TLC鑒別法色譜清晰，分離度好，可作為華鳳仙藥材質(zhì)量控制的方法。

華鳳仙中的主要化學(xué)成分有揮發(fā)油和黃酮類等化合物，多為醇溶性成分，綜合考慮后選用醇浸出物作為指標(biāo)。

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（編輯：陶希睿）