周月平，朱德生，胡斌，龍琳娟，傅玨

·論著·

Guillain-Barré綜合征患者中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)源性免疫反應(yīng)與腦脊液蛋白的相關(guān)性

周月平，朱德生，胡斌，龍琳娟，傅玨

目的 探討Guillain-Barré綜合征(GBS)患者CNS內(nèi)源性免疫反應(yīng)與CSF蛋白的關(guān)系及臨床意義。方法 收集69例GBS患者的臨床資料，采用免疫散射比濁法測定CSF和血清免疫球蛋白G(IgG)、白蛋白水平，計算CSF白蛋白/血清白蛋白(QALB)、IgG指數(shù)、24 h鞘內(nèi)IgG合成率。結(jié)果 CSF蛋白正常與偏高患者性別、年齡、殘疾量表評分、上呼吸道感染、胃腸感染、肺部感染、近期疫苗接種比率差異無統(tǒng)計學(xué)意義。CSF蛋白正?；颊逤SF蛋白、QALB、IgG、24 h鞘內(nèi)IgG合成率均顯著低于CSF蛋白異?；颊?均P<0.01)，IgG指數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義。24 h鞘內(nèi)IgG合成率正常患者CSF蛋白[0.49(10.84)]g/L顯著低于偏高患者[0.98(12.97)]g/L (U=205.50，P<0.01)。24 h鞘內(nèi)IgG合成率與CSF蛋白呈正相關(guān)(r=0.599，P<0.01)。結(jié)論 GBS患者CSF蛋白水平隨CNS內(nèi)源性免疫反應(yīng)增強而增加，24 h鞘內(nèi)IgG合成率有助于GBS的病情監(jiān)測及預(yù)后評估。

神經(jīng)免疫；Guillain-Barré綜合征；內(nèi)源性免疫反應(yīng)；24 h IgG鞘內(nèi)合成率；CSF蛋白

Guillain-Barré綜合征(GBS)是一類免疫介導(dǎo)的以多發(fā)神經(jīng)根水腫及周圍神經(jīng)損害為主要病理改變的急性炎性周圍神經(jīng)病[1]。GBS患者腰穿檢測常有CSF蛋白水平升高，其機制可能與血-CSF屏障損傷、血液外源性蛋白如血清白蛋白(ALB)等進入CSF系統(tǒng)及CNS內(nèi)源性免疫反應(yīng)有關(guān)[2]。CSF蛋白是總體評估CSF系統(tǒng)免疫反應(yīng)最為常用的生化指標(biāo)，而24 h鞘內(nèi)免疫球蛋白G(IgG)合成率是監(jiān)測CNS內(nèi)源性免疫反應(yīng)的定量指標(biāo)[3]。本研究通過檢測GBS患者24 h鞘內(nèi)IgG合成率及CSF蛋白的水平來評價CNS內(nèi)源性免疫反應(yīng)對CSF蛋白的影響及其臨床意義。

1 對象與方法

1.1 對象 系2010年1月～2015年6月在附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院經(jīng)腰椎穿刺免疫學(xué)檢查與EMG檢查確診的GBS患者69例，均符合GBS診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。其中男42例，女27例；年齡12～73歲，平均(48.3±15.8)歲；病程1～8周，平均(3.7±1.9)周。腰椎穿刺與EMG檢查等均經(jīng)患者知情同意。

1.2 方法

1.2.1 臨床資料的收集 于入院后收集患者的臨床資料，包括性別、年齡、殘疾量表評分、上呼吸道感染、胃腸道感染、肺部感染、近期(<30 d)疫苗接種情況。

1.2.2 相關(guān)指標(biāo)的檢測 于入院后經(jīng)肘靜脈采取空腹血4 ml并離心采集血清2 ml，腰穿采集CSF 2 ml，均于-20℃冰箱保存。使用德國西門子公司全自動程序化分析儀(西門子BNⅡ)，采用免疫散射比濁法測定CSF IgG、白蛋白水平和ALB水平，分析儀自動計算CSF白蛋白/ALB(QALB)、IgG指數(shù)、24 h鞘內(nèi)IgG合成率。CSF蛋白>0.45 g/L為CSF蛋白偏高(正常值≤0.45 g/L)；24 h鞘內(nèi)IgG合成率正常值標(biāo)準(zhǔn)為-9.9～3.3，合成率>3.3提示CNS內(nèi)源性免疫反應(yīng)異常升高。

1.2.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。計數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗；非正態(tài)分布的計量資料以中位數(shù)和四分位間距[Md(Qu)]表示，兩組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗；24 h IgG鞘內(nèi)合成率與CSF蛋白的相關(guān)性采用Pearson相關(guān)性分析。P<0.05時差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 CSF蛋白正常與偏高患者臨床資料及生化指標(biāo)的比較 見表1、表2。本組患者CSF蛋白正常17例(24.64%)，CSF蛋白偏高52例(75.36%)。CSF蛋白正常與偏高患者性別、年齡、殘疾量表評分、上呼吸道感染、胃腸感染、肺部感染、近期疫苗接種比率差異無統(tǒng)計學(xué)意義。CSF蛋白正?；颊逤SF蛋白、QALB、IgG、24 h鞘內(nèi)IgG合成率均顯著低于CSF蛋白偏高患者(均P<0.01)，IgG指數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

表1 CSF蛋白正常與偏高患者臨床資料的比較(例,%)CSF蛋白例數(shù)男性>45歲殘疾量表評分(≥3)上呼吸道感染胃腸道感染肺部感染疫苗接種正常179(52.90)8(47.10)12(70.60)9(52.90)7(41.20)2(11.80)0(0.00)偏高5233(63.50)36(69.20)41(78.80)25(48.10)15(28.80)5(9.60)1(1.90)χ2值0.582.760.480.120.880.060.32P值0.450.100.490.730.350.800.57

表2 CSF蛋白正常與偏高患者生化指標(biāo)的比較[Md(Qu)]CSF蛋白例數(shù)蛋白(g/L)QALB(×10-3)IgG(mg/L)IgG指數(shù)24h鞘內(nèi)IgG合成率(mg/dl) 正常170.31(0.25)4.65(9.80)35.00(151)0.51(0.61)-2.98(24.31)偏高520.82(2.62)12.21(105.56)101.00(917.50)0.60(0.93)7.77(339.33)U值0.0066.0082.50311.00253.50p值0.000.000.000.070.00

2.2 24 h鞘內(nèi)IgG合成率正常及偏高患者CSF蛋白的比較 本組24 h鞘內(nèi)IgG合成率正常34例(49.27%)，偏高35例(50.73%)。正?；颊逤SF蛋白[0.49(10.84)]g/L顯著低于偏高患者[0.98(12.97)]g/L(U=205.50，P<0.01)。

2.3 24 h鞘內(nèi)IgG合成率與CSF蛋白的關(guān)系 見圖1。Pearson相關(guān)性分析顯示，24 h鞘內(nèi)IgG合成率與CSF蛋白呈正相關(guān)(r=0.599，P<0.01)。

3 討 論

CSF蛋白升高是GBS患者的一個生化特征，反映了中樞神經(jīng)及神經(jīng)根所處腦脊液循環(huán)系統(tǒng)的異常免疫炎性反應(yīng)，其機制尚不明確，可能與細胞免疫及體液免疫有關(guān)[1,5]。GBS患者CSF蛋白升高是神經(jīng)根局部內(nèi)源性免疫反應(yīng)引起？還是與血-CSF屏障通透性增加、血液源性免疫球蛋白及因子等外源性蛋白進入CSF系統(tǒng)有關(guān)？國內(nèi)外關(guān)于這個主題的研究論文不多。故本研究通過檢測GBS患者24 h鞘內(nèi)IgG合成率及CSF蛋白的水平評價CNS內(nèi)源性免疫反應(yīng)，以期獲得相關(guān)的理論支持。

圖1 24 h鞘內(nèi)合成率與CSF蛋白的關(guān)系

本研究結(jié)果顯示，GBS患者以男性多見，占60.87%，平均發(fā)病年齡48歲，其中>45歲患者占63.77%，肢體弛緩性癱瘓癥狀嚴(yán)重，其中殘疾量表評分≥3的重型GBS患者高達76.81%，發(fā)病前驅(qū)感染因素中以上呼吸道感染最為常見，其他依次為胃腸道感染及肺部感染，而近期疫苗接種史不多見。前驅(qū)病毒感染一直被認為與GBS發(fā)病有關(guān)。有研究[6]發(fā)現(xiàn)，GBS患者血液中檢測出高滴度的抗神經(jīng)節(jié)苷酯抗體，髓鞘脫失的病理改變可能與病毒感染后抗體的產(chǎn)生有關(guān)。大多數(shù)有關(guān)疫苗接種與GBS發(fā)病的研究[7]均認為近期疫苗接種是GBS發(fā)病的一個危險因素。Benedetti等[8]發(fā)現(xiàn)，疫苗接種與GBS發(fā)病存在關(guān)聯(lián)，男性與女性的年發(fā)病率分別為2.3/100 000與1.41/100 000。病毒感染、疫苗接種及臨床采用血漿置換治療的研究[9-11]均表明GBS可能是體液免疫為主，導(dǎo)致了CSF及血液中免疫球蛋白的增加，及血-CSF屏障的損傷，出現(xiàn)CSF蛋白水平的升高。GBS患者CSF蛋白水平在評估病情變化中有一定臨床意義。Kerasnoudis等[12]研究發(fā)現(xiàn)，GBS患者CSF蛋白水平升高可以預(yù)測超聲診斷的神經(jīng)病變。

ALB合成于肝臟，是人血液循環(huán)中的蛋白質(zhì)，不在CNS內(nèi)合成及代謝，當(dāng)血-CSF屏障損傷后才會從血液循環(huán)進入CSF循環(huán)；QALB為CSF白蛋白與ALB的比值，成為反映血-CSF屏障通透性最好的指標(biāo)[13]。IgG是CNS局部產(chǎn)生抗體的免疫反應(yīng)，IgG指數(shù)則是反映鞘內(nèi)IgG產(chǎn)生速度的指標(biāo)，而24 h鞘內(nèi)IgG合成率是評價中樞神經(jīng)與CSF系統(tǒng)內(nèi)源性體液免疫應(yīng)答狀態(tài)的重要指標(biāo)[14]。本組患者CSF蛋白正常17例(24.64%)，偏高52例(75.36%)。CSF蛋白正常與偏高患者性別、年齡、殘疾量表評分、上呼吸道感染、胃腸感染、肺部感染、近期疫苗接種比率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。本研究檢測GBS患者CSF蛋白、QALB、IgG、IgG指數(shù)及24 h鞘內(nèi)IgG合成率，用以評估血-CSF屏障功能及內(nèi)源性免疫反應(yīng)狀態(tài)。結(jié)果顯示，CSF蛋白正?；颊逤SF蛋白、QALB、IgG、24 h鞘內(nèi)IgG合成率均顯著低于異?；颊?均P<0.01)，IgG指數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；24 h鞘內(nèi)IgG合成率偏高患者CSF蛋白也偏高，提示內(nèi)源性免疫反應(yīng)增強患者CSF蛋白合成增多。上述結(jié)果表明GBS患者CSF蛋白升高的影響因素不是人口學(xué)及前驅(qū)感染等，而是繼發(fā)的自身免疫反應(yīng)，包括血-CSF屏障損傷、ALB等外源性蛋白進入CSF循環(huán)，以及神經(jīng)根局部內(nèi)源性免疫反應(yīng)等因素。IgG指數(shù)在兩組間無差異，提示兩組患者鞘內(nèi)IgG產(chǎn)生的速度無區(qū)別，間接表明血-CSF屏障損傷機制在CSF蛋白升高中發(fā)揮更大作用。本研究結(jié)果顯示，24 h鞘內(nèi)IgG合成率與CSF蛋白呈正相關(guān)(r=0.599，P<0.01)，表明GBS患者內(nèi)源性免疫反應(yīng)越強烈，CSF蛋白水平越高。

綜上所述，GBS患者CSF蛋白升高是自身免疫反應(yīng)引起，并且CNS內(nèi)源性免疫反應(yīng)越強烈，CSF蛋白水平越高。內(nèi)源性免疫反應(yīng)與CSF蛋白的正相關(guān)關(guān)系對于探討GBS患者的發(fā)病機制及病情預(yù)測方面具有重要的臨床意義。

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Correlation between the endogenous immune response in the central nervous system and cerebrospinal fluid protein in patients with Guillain-Barré syndrome

ZHOUYue-ping,ZHUDe-sheng,HUBin,etal.

DepartmentofLaboratwy,theFifthHospitalAffitiatedtoNanchangUniversity,Fuzhou344000,China

Objective To explore the correlation between the endogenous immune response in the CNS and CSF protein in patients with Guillain-Barré syndrome (GBS).Methods Clinical data of 69 patients with GBS were retrospectively analyzed. IgG and album level in CSF and serum were detected by the way of immune nephelometry. CSF albumin/serum albumin (QALB), IgG index, and 24 h intrathecal IgG synthesis rate were calculated.ResultsThere was no significant difference in rate variance of gender, age, disability scale score, upper respiratory tract infection, gastrointestinal infection, pulmonary infection, and recent vaccination between the normal and high level CSF protein patients. CSF protein, QALB, IgG and 24 h intrathecal IgG synthesis rate of normal level CSF protein patients were significantly lower than that of high level CSF protein patients (allP<0.01). There was no significant difference in IgG index between the two groups. CSF protein of normal 24 h intrathecal IgG synthesis rate patients [0.49(10.84)]g/L was significantly lower than that of high 24 h intrathecal IgG synthesis rate patients [0.98(12.97)]g/L (U=205.50，P<0.01). The 24 h intrathecal IgG synthesis rate was positively correlated with CSF protein (r=0.599,P<0.01). Conclusion The CSF protein increased accompany with the endogenous immune response, and the 24 h intrathecal IgG synthesis rate may be helpful in monitoring and prognosis of GBS.

neural immune；Guillain-Barré syndrome；endogenous immune response；24 h intrathecal IgG synthesis rate；CSF protein

中國博士后基金面上項目資助課題(2014M560297)；醫(yī)學(xué)院科技重點項目資助課題(CDFY-KJ1504)

344000撫州，南昌大學(xué)第五附屬醫(yī)院檢驗科(周月平，胡斌，龍琳娟)；南昌大學(xué)撫州醫(yī)學(xué)院病理教研室(傅玨)；復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科(朱德生)

傅玨

R745.4

A

1004-1648(2017)01-0013-03

2015-11-16

2016-02-25)