(新疆維吾爾自治區(qū)水產(chǎn)科學(xué)研究所 新疆 烏魯木齊 830000)
魚類生長(zhǎng)激素研究及應(yīng)用進(jìn)展
李曉東 時(shí)春明
(新疆維吾爾自治區(qū)水產(chǎn)科學(xué)研究所 新疆 烏魯木齊 830000)
魚類的生長(zhǎng)和發(fā)育受體內(nèi)各種激素的調(diào)節(jié),其中生長(zhǎng)激素對(duì)魚類的生長(zhǎng)起主要調(diào)控作用。同哺乳動(dòng)物類似,在魚類中,生長(zhǎng)激素由腦垂體中的生長(zhǎng)激素細(xì)胞分泌并通過(guò)血液運(yùn)輸?shù)阶饔貌课弧,F(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn),魚類血液中生長(zhǎng)激素的含量與魚體生長(zhǎng)速率的季節(jié)性變化有顯著關(guān)系。因此,意味著如果人為增加魚體中的生長(zhǎng)激素含量,能夠加快魚類的生長(zhǎng),進(jìn)而產(chǎn)生經(jīng)濟(jì)效益。生長(zhǎng)激素在魚體中含量很低,從腦垂體中大量獲得生長(zhǎng)激素用于漁業(yè)生產(chǎn)面臨著生產(chǎn)效率低下、成本高等問(wèn)題。這就限制了生長(zhǎng)激素在生產(chǎn)中的大規(guī)模應(yīng)用。但隨著生命科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,使得人們利用重組的魚生長(zhǎng)激素進(jìn)行漁業(yè)生產(chǎn)就有了可能性。為此,本文就魚類生長(zhǎng)激素研究進(jìn)展及其對(duì)魚類生長(zhǎng)發(fā)育影響的研究進(jìn)行簡(jiǎn)要綜述。
1.1 魚類生長(zhǎng)激素結(jié)構(gòu)研究進(jìn)展
自上世紀(jì)70年代有研究證實(shí)魚類腦垂體中含有與哺乳類生長(zhǎng)激素類似的免疫和生物活性物質(zhì)并分離純化。有關(guān)魚類生長(zhǎng)激素的研究一直是一個(gè)熱點(diǎn)。迄今為止,有鯉魚、羅非魚等多種魚類生長(zhǎng)激素被分離鑒定。我們利用NCBI蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)常見(jiàn)魚類生長(zhǎng)激素氨基酸序列進(jìn)行比對(duì)(圖1),發(fā)現(xiàn)不同種類之間序列保守度較低,但是相關(guān)功能區(qū)完全保守。為此,我們對(duì)生長(zhǎng)激素高級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行預(yù)測(cè),發(fā)現(xiàn)其結(jié)構(gòu)富含螺旋且相似度較高(圖2)。
圖1 常見(jiàn)魚類生長(zhǎng)激素氨基酸序列比對(duì)結(jié)果
圖2 日本真鱸、鯉魚、大西洋鮭、鰻鱺生長(zhǎng)激素高級(jí)結(jié)構(gòu)
1.2 魚類生長(zhǎng)激素作用機(jī)理及功能研究
同哺乳動(dòng)物類似,生長(zhǎng)激素作為魚類生長(zhǎng)發(fā)育的調(diào)控因子。其作用必須與細(xì)胞上相應(yīng)的受體相結(jié)合才能發(fā)揮生理功能。在魚類中,生長(zhǎng)激素受體主要在肝細(xì)胞上分布,其他如性腺、腎臟、腦組織等也有少量分布。研究證實(shí)在肝臟中生長(zhǎng)激素能夠促進(jìn)肝細(xì)胞中生長(zhǎng)調(diào)節(jié)素的分泌,生長(zhǎng)調(diào)節(jié)素可以直接作用于組織細(xì)胞,從而促進(jìn)魚類的生長(zhǎng)發(fā)育?,F(xiàn)有研究證實(shí)生長(zhǎng)激素能夠促進(jìn)消化系統(tǒng)對(duì)氨基酸的吸收和增加組織細(xì)胞RNA的合成進(jìn)而促使魚體蛋白質(zhì)合成,從而提高食物的轉(zhuǎn)化率,實(shí)現(xiàn)促進(jìn)魚體生長(zhǎng)的目的。除此之外,生長(zhǎng)激素能夠降低銀大麻哈魚和海鱒幼魚鰓的鈉離子濃度,進(jìn)而調(diào)節(jié)滲透壓;通過(guò)與生殖系統(tǒng)的受體結(jié)合促進(jìn)類固醇類激素分泌并刺激精子和卵細(xì)胞發(fā)育。
魚類生長(zhǎng)激素的分泌受外界環(huán)境和體內(nèi)各種因素的共同調(diào)節(jié)?,F(xiàn)有研究表明,魚類生長(zhǎng)激素的分泌調(diào)控主要受下丘腦分泌的生長(zhǎng)激素釋放因子和釋放抑制因子的雙重調(diào)節(jié)。外界環(huán)境,如水溫、光照、飼料等環(huán)境因素,對(duì)魚體中生長(zhǎng)激素的含量有較大影響。在饑餓條件下,魚類血液中生長(zhǎng)激素含量顯著提高,但是肝細(xì)胞中生長(zhǎng)激素受體反而降低,這可能與類胰島素生長(zhǎng)因子的調(diào)控有關(guān),但需要進(jìn)一步研究。
2.1 重組魚生長(zhǎng)激素能夠促進(jìn)魚類生長(zhǎng)
目前,世界上已有多種魚類的生長(zhǎng)激素基因被克隆并重組表達(dá)。重組生長(zhǎng)激素同天然生長(zhǎng)激素具有相同的化學(xué)結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)和生物活性。人們利用重組生長(zhǎng)激素對(duì)增加魚類的生長(zhǎng)速率進(jìn)行了一系列研究,均表明重組生長(zhǎng)激素能夠顯著增加魚類的生長(zhǎng)率。Tsai等對(duì)鯔注射重組黃鰭鯛生長(zhǎng)激素四月后,實(shí)驗(yàn)組體重和體長(zhǎng)均較對(duì)照組增加20~60%。有研究利用表達(dá)重組虹鱒生長(zhǎng)激素的釀酒酵母基因工程菌投喂羅非魚,證實(shí)具有明顯的促生長(zhǎng)作用。
2.2 重組魚生長(zhǎng)激素使用方式對(duì)魚類生長(zhǎng)的影響
魚類生長(zhǎng)激素是由173~188個(gè)氨基酸殘基組成的分子量約為22KD的蛋白質(zhì)。理論上,如果通過(guò)投喂、飼料添加等方式使用會(huì)存在降解的可能性,使其效率低下。但是孫穎通過(guò)使用灌喂、注射和作為飼料添加劑對(duì)草魚使用重組生長(zhǎng)素,發(fā)現(xiàn)重組生長(zhǎng)素作為飼料添加劑能夠顯著增加魚體的體重、體長(zhǎng)、食物轉(zhuǎn)化率和肥滿度,這意味著在草魚等硬骨魚小腸上皮細(xì)胞具有吸收大分子蛋白的能力。此外,重組生長(zhǎng)激素還可以通過(guò)埋置、浸泡等使用方式用于各種魚類。
總而言之,比如灌喂、埋置等方式都存在生產(chǎn)效率低下、生產(chǎn)成本過(guò)高等問(wèn)題,導(dǎo)致不適合大規(guī)模生產(chǎn)。因此,我們主要將其作為飼料添加劑進(jìn)而促進(jìn)魚類生長(zhǎng)。但是這種方式最大的弊端就是魚體消化道對(duì)其的降解作用,在這種情況下我們只能增加劑量,以保證生產(chǎn)效率的最大化。對(duì)于生產(chǎn)成本而言,重組生長(zhǎng)素或工程菌由于能夠規(guī)?;a(chǎn)其生產(chǎn)成本較低。有人建議使用一些消化道酶的抑制劑抑制外源生長(zhǎng)素的降解作用,本人認(rèn)為這種方式不合理,因?yàn)檫@勢(shì)必影響魚類自身對(duì)營(yíng)養(yǎng)物的利用,不利于生產(chǎn)。
2.3 重組魚生長(zhǎng)激素對(duì)魚類營(yíng)養(yǎng)成分的影響
魚類作為人們動(dòng)物源性蛋白的主要來(lái)源之一,其安全性關(guān)乎人民的身體健康和家庭幸福。因此,我們?cè)陲暳现兴褂玫母鞣N添加劑不能影響魚類自身營(yíng)養(yǎng)成分。姜麗娟等將黃顙魚生長(zhǎng)激素克隆并重組表達(dá)后,用其對(duì)黃顙魚幼魚浸泡處理后測(cè)量幼魚的水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分,證實(shí)處理組與對(duì)照組無(wú)差異;停用生長(zhǎng)激素后也沒(méi)有差異。潘忠超將重組斜帶石斑魚生長(zhǎng)激素作為飼料添加劑飼喂斜帶石斑魚,證實(shí)肌肉中粗蛋白、粗脂肪、水分和灰分在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間均無(wú)顯著差異。另有研究表明外源生長(zhǎng)激素在魚體半衰期短,不會(huì)產(chǎn)生積累。這說(shuō)明以外源生長(zhǎng)素激素作為飼料添加劑不會(huì)影響食品安全。
魚類的生長(zhǎng)發(fā)育除了受生長(zhǎng)素影響之外,其他如固醇類激素、多巴胺等對(duì)魚類生長(zhǎng)也有顯著影響。各種激素之前相互作用,影響魚類的生長(zhǎng)、發(fā)育、生殖。生長(zhǎng)素作為一種大分子蛋白,現(xiàn)在由于生物技術(shù)的發(fā)展使得其生產(chǎn)成本低下,從而能夠大量使用且使用方便,并且沒(méi)有副作用,不會(huì)引起食品安全問(wèn)題。因此,將重組生長(zhǎng)素作為飼料添加劑是能夠增加漁業(yè)生產(chǎn)效率的。