趙國玉 李夢媛 崔 川 耿學斌

(唐山工人醫(yī)院心血管內(nèi)科，河北 唐山 063000)

老年高血壓患者血清鈣結合蛋白復合物的影響因素及其與頸動脈內(nèi)膜中層厚度的關系

趙國玉 李夢媛 崔 川 耿學斌

(唐山工人醫(yī)院心血管內(nèi)科，河北 唐山 063000)

目的 探討老年高血壓患者血清鈣結合蛋白復合物S100A8/A9的表達水平及其影響因素，分析其與頸動脈粥樣硬化之間的關系。方法 選取90例老年高血壓患者為高血壓組，同時期50名健康體檢者為對照組，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清S100A8/A9水平，同時所有受試者清晨空腹檢測白細胞(WBC)計數(shù)、高敏C反應蛋白(hs-CRP)、血糖(FBG)、尿酸(UA)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、糖化血紅蛋白(HbA1c)，應用彩色多普勒超聲檢查儀測定頸動脈內(nèi)膜中層厚度(IMT)，分析不同分組中S100A8/A9水平與其他臨床指標的相關性，采用Logistic 回歸分析S100A8/A9水平和IMT的影響因素。結果 高血壓組hs-CRP、UA、IMT、S100A8/A9顯著高于對照組(P<0.05或0.01)；相關分析表明，S100A8/A9表達水平分別與WBC(r=0.236，P=0.047)、hs-CRP(r=0.325，P=0.001)、UA(r=0.182，P=0.035)、IMT(r=0.984，P=0.000)呈正相關。隨著血壓水平的增高，IMT逐步增加，S100A8/A9水平明顯升高(P<0.05或0.01)。IMT增厚組血清S100A8/A9水平較正常組明顯增高(P<0.05)，IMT斑塊組血清S100A8/A9水平明顯高于IMT正常組和IMT增厚組(P<0.05)；Logistic 回歸分析顯示hs-CRP、UA、IMT是血清S100A8/A9水平的影響因素。IMT的影響因素有年齡、hs-CRP、TC、UA、S100A8/A9。結論 血清鈣結合蛋白復合物S100A8/A9水平與高血壓患者頸動脈粥樣硬化密切相關。

S100A8/A9；頸動脈內(nèi)膜中層厚度；動脈粥樣硬化；高血壓

高血壓是動脈粥樣硬化(AS)形成的重要危險因素，AS主要累及大中型動脈，頸動脈內(nèi)膜中層厚度(IMT)增加是AS早期改變的標志。其中炎癥因子及炎癥反應參與了AS的進展。近來研究表明，血清鈣結合蛋白復合物S100A8/A9作為炎癥因子參與了AS的病理過程〔1〕。本研究通過分析老年高血壓患者血清鈣結合蛋白復合物S100A8/A9的表達水平及其影響因素，以及S100A8/A9與頸動脈IMT之間的關系，為S100A8/A9在老年高血壓患者AS形成中的作用提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 選取2013年4月至2015年1月在我院心血管內(nèi)科住院治療的高血壓患者90例，均符合高血壓的診斷標準〔2〕。男48例，女42例，年齡61～84歲，平均(65.4±6.3)歲；高血壓病1級18例，2級30例，3級42例。排除急性冠脈綜合征、繼發(fā)性高血壓、痛風、糖尿病和各種急慢性炎癥、免疫系統(tǒng)疾病、腫瘤及多臟器功能不全等疾病的患者。選取同時期健康體檢者50例為正常對照組，男30名，女20名，年齡60～75歲，平均(63.2±4.8)歲，無肝腎疾病、高血壓、心腦血管疾病、惡性腫瘤、近期無感染病史的患者。研究方案獲得醫(yī)院倫理委員會批準并取得患者知情同意書。兩組對象之間性別、年齡構成均無明顯差異(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 頸動脈超聲檢查 采用美國GE公司LOGIQ9彩色多普勒超聲診斷儀，周圍血管探頭頻率為7.5 MHz。所有觀察對象均由固定專職超聲科醫(yī)師操作。觀察雙側頸動脈內(nèi)膜中層的形態(tài)、結構及回聲變化。在頸動脈分叉處近端后壁1.5 cm處測量頸動脈IMT值，測3次取其平均值。頸動脈硬化判斷標準〔3〕：年齡>60歲、動脈內(nèi)膜光滑且IMT<0.85 mm為正常頸動脈，高于該年齡段正常值被判定為頸動脈內(nèi)膜中層增厚，動脈內(nèi)膜局限性隆起且IMT≥1.3 mm為AS斑塊形成。

1.2.2 標本采集與檢測 早晨空腹采集受試者靜脈血6 ml，3 000 r/min，離心10 min，分離血清，-70℃冰箱保存待測。常規(guī)檢測白細胞(WBC)計數(shù)、高敏C反應蛋白(hs-CRP)、血糖(FPG)、尿酸(UA)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、糖化血紅蛋白(HbA1c)，上述檢測項目均由我院檢驗科專業(yè)人員完成。鈣結合蛋白S100A8/A9復合物ELISA檢測試劑盒(美國R&D公司)，嚴格按照試劑盒操作說明書進行。

1.3 統(tǒng)計學分析 采用SPSS18.0軟件，計數(shù)資料采用χ2檢驗，計量資料組間比較采用非配對t檢驗，各指標之間的相關分析采用Spearman相關分析。在各指標基礎上選擇S100A8/A9和IMT進行多因素Logistic 回歸分析。

2 結 果

2.1 臨床資料比較 高血壓組年齡、性別、體重指數(shù)(BMI)、吸煙、WBC、FPG、血脂、UA、HbA1c等指標與對照組比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，高血壓組hs-CRP、UA、IMT、S100A8/A9顯著高于對照組(P<0.05或0.01)，見表1。

2.2 S100A8/A9水平與其他指標的相關性分析 S100A8/A9水平分別與WBC(r=0.236，P=0.047)、hs-CRP(r=0.325，P=0.001)、UA(r=0.182，P=0.035)、IMT(r=0.984，P=0.000)呈正相關，與其他指標無明顯相關(P>0.05)。

2.3 不同分級高血壓患者S100A8/A9水平及IMT的變化 隨著血壓水平增高，IMT逐步增加，S100A8/A9水平明顯升高(P<0.05或0.01)，見表2。

表1 兩組受試者臨床資料比較±s)

表2 不同分級高血壓患者S100A8/A9水平及IMT比較

2.4 不同IMT與血清S100A8/A9水平的比較 在高血壓患者不同IMT分組中，IMT增厚組血清S100A8/A9水平〔(7.83±2.12)μg/ml〕較IMT正常組〔(5.32±1.63)μg/ml〕明顯增高(P<0.05)，IMT斑塊組血清S100A8/A9水平〔(9.44±2.56)μg/ml〕明顯高于IMT正常組和IMT增厚組(P<0.05)。

2.5 IMT與相關影響因素的Logistic回歸分析 以IMT為因變量，對年齡、WBC、hs-CRP、FPG、UA、TC、TG、HDL-C、LDL-C、HbA1c、S100A8/A9進行多因素Logistic回歸分析。結果顯示，影響IMT的因素有年齡、hs-CRP、TC、UA、S100A8/A9(P<0.05)，見表3。

2.6 S100A8/A9與相關影響因素的Logistic回歸分析 以S100A8/A9為因變量，以WBC、hs-CRP、UA、IMT為自變量，進行Logistic多元回歸分析。結果顯示，影響S100A8/A9的因素有hs-CRP、UA、IMT(P<0.05)，見表4。

表3 高血壓患者IMT的Logistic回歸分析結果

表4 高血壓患者S100A8/A9的Logistic回歸分析結果

3 討 論

AS是一個慢性炎癥過程。研究發(fā)現(xiàn)，晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE)作為細胞表面分子免疫球蛋白超家族跨膜受體的成員之一，通過與多種配體結合，激活Ras、NF-κB等基因，影響細胞信號轉導途徑，參與炎癥、AS、冠心病等疾病的進展〔4，5〕。由此推測，阻斷RAGE與配體的結合，對于上述疾病的防治具有重要意義。

S100鈣結合蛋白是RAGE的配體之一，S100A8和S100A9作為S100鈣結合蛋白家族的重要成員，參與細胞遷移、花生四烯酸代謝等生物學過程。S100A8/A9是在缺少Ca2+的情況下，S100A8與S100A9結合形成的異源二聚體。研究發(fā)現(xiàn)，S100A8/A9參與RAGE信號轉導，激活NK細胞，有可能是體內(nèi)炎癥與先天免疫之間相互作用的一個新思路〔6〕。S100A8/A9在多種炎癥性、自身免疫性疾病及腫瘤，如骨關節(jié)炎、腎小球腎炎、肝細胞癌等疾病異常增高，是潛在的臨床炎癥標志物〔7，8〕。臨床研究發(fā)現(xiàn)，2型糖尿病患者S100A8/A9表達升高，與慢性炎癥有關，在AS形成過程中起到重要的作用〔9〕。S100A8/A9、MMP-2在急性冠脈綜合征患者中呈高表達，可能與AS斑塊形成有關。聯(lián)合檢測血清S100A8/A9、MMP-2可能成為一種有效的預測急性心血管事件發(fā)生的臨床指標〔10〕。S100A8/A9通過與RAGE結合，激活炎癥轉錄因子NF-κB，上調ICAM-1、IL-6、IL-10、IFN-γ等基因轉錄，促進炎性細胞吸附聚集，破壞內(nèi)皮細胞功能，從而促進AS〔11，12〕。

本研究結果顯示，在高血壓患者中S100A8/A9較正常人群明顯增高，S100A8/A9表達水平與WBC、hs-CRP、UA呈正相關。分析其原因，可能與S100A8/A9作為促炎癥因子，主要是由巨噬細胞和中性粒細胞分泌，炎癥反應越強，hs-CRP越高，而UA升高會導致內(nèi)皮細胞炎癥反應，線粒體Ca2+穩(wěn)態(tài)失衡在內(nèi)皮細胞炎癥反應中起到一定的作用。進一步行Logistic回歸分析結果說明S100A8/A9水平與炎癥反應及AS有著密切的關系。

高血壓是AS的獨立危險因素。早期的研究發(fā)現(xiàn)，在冠狀動脈粥樣硬化部位有大量的S100A8/A9表達，從而證實S100A8/A9積極參與了AS的進程〔13〕。此外，本研究進一步發(fā)現(xiàn)，隨著血壓水平的增高，IMT逐步增加，S100A8/A9水平明顯升高。AS是高血壓、炎癥、血脂異常、高尿酸血癥等多種危險因素造成的，并且隨著年齡的增加而加重。TC和LDL-C是AS的危險因素，但本研究結果未顯示頸動脈IMT與LDL-C之間的相關性，可能與樣本量較少有關，需要進行大樣本的研究。

1 Engelberger RP，Limacher A，Kucher N，etal.Biological variation of established and novel biomarkers for atherosclerosis：results from a prospective，parallel-group cohort study〔J〕.Clin Chim Acta，2015；447(1)：16-22.

2 陸再英，鐘南山.內(nèi)科學〔M〕.第7版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：251-7.

3 中國社工協(xié)會康復醫(yī)學工作委員會血管專業(yè)委員會，國際血管健康學會中國分會，北京大學首鋼醫(yī)院血管醫(yī)學中心，等.中國血管病變早期檢測技術應用指南(2011第二次報告)〔J〕.心血管病學進展，2011；32(3)：318-23.

4 曾一梅，劉宏眉.RAGE、sRAGE與冠心病的關系〔J〕.醫(yī)學綜述，2013；19(3)：403-6.

5 權 萍，肖成華，牟英峰.配體-RAGE_sRAGE與動脈粥樣硬化的關系〔J〕.中國實用神經(jīng)疾病雜志，2013；16(9)：89-91.

6 Narumi K，Miyakawa R，Ueda R，etal.Proinflammatory proteins S100A8/S100A9 activate NK cells via interaction with RAGE〔J〕.J Immunol，2015；194(11)：5539-48.

7 Pepper RJ，Wang HH，Rajakaruna GK，etal.S100A8/A9 (calprotectin) is critical for development of glomerulonephritis and promotes inflammatory leukocyte-renal cell interactions〔J〕.Am J Pathol，2015；185(5)：1264-74.

8 Mahler EA，Zweers MC，van Lent PL，etal.Association between serum levels of the proinflammatory protein S100A8/A9 and clinical and structural characteristics of patients with established knee，hip，and hand osteoarthritis〔J〕.Scand J Rheumatol，2015；44(1)：56-60.

9 桑 瑜，成興波.2型糖尿病患者血清鈣結合蛋白復合物與頸動脈粥樣硬化的相關性〔J〕.江蘇醫(yī)藥，2010；36(9)：1003-5.

10 戴貴軍，孫建輝，白江濤.血清S100A8/A9、MMP-2水平變化與急性冠狀動脈綜合征的關系〔J〕.實用醫(yī)學雜志，2010；26(24)：4528-31.

11 Hirata A，Kishida K，Nakatsuji H，etal.High serum S100A8/A9 levels and high cardiovascular complication rate in type 2 diabetics with ultrasonographic low carotid plaque density〔J〕.Diabetes Res Clin Pract，2012；97(1)：82-90.

12 Fontaine M，Planel S，Peronnet E，etal.S100A8/A9 mRNA induction in an ex vivo model of endotoxin tolerance：roles of IL-10 and IFNγ〔J〕.PLoS One，2014；9(6)：e100909.

13 Altwegg LA，Neidhart M，Hersberger M，etal.Myeloid-related protein 8/14 complex is released by monocytes and granulocytes at the site fo coronary occlusion：a novel，early，and sensitive marker of acute coronary syndromes〔J〕.Eur Heart J，2007;28(8)：941-8.

〔2015-12-17修回〕

(編輯 徐 杰)

李夢媛(1987-)，女，主治醫(yī)師，主要從事心血管內(nèi)科及冠心病研究。

趙國玉(1973-)，女，主治醫(yī)師，主要從事心血管內(nèi)科及冠心病研究。

R54

A

1005-9202(2017)04-0858-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.04.033