張硯亮 （山東省安丘市畜牧局 262100）

簡(jiǎn)述雞大腸桿菌病的診治

張硯亮 （山東省安丘市畜牧局 262100）

為減少雞大腸桿菌病對(duì)禽類養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)造成危害，通過(guò)對(duì)雞感染大腸桿菌發(fā)生的臨床癥狀，剖檢變化的進(jìn)行分析，并采用藥敏試驗(yàn)和其他實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)，對(duì)大腸桿菌病進(jìn)行確診，并根據(jù)其發(fā)病情況及耐藥情況制定相應(yīng)的預(yù)防和治療措施，以達(dá)到減輕大腸桿菌病危害的目的。

雞大腸桿菌病，是一種由致病性大腸埃希桿菌引起的一類感染雞的急性或慢性傳染病，是一種多病型的家禽疾病的總稱，大腸桿菌屬于革蘭氏陰性菌，通常在雞群中表現(xiàn)出的癥狀有輸卵管炎，敗血病，卵黃性腹膜炎，肉芽腫等一系列的疾病，且該病易于其他疾病并發(fā)或被其他疾病繼發(fā)，易導(dǎo)致雞群發(fā)生大規(guī)模的死亡，死亡率高達(dá)70%～90%，對(duì)養(yǎng)殖行業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。該病在各個(gè)年齡段的雞群中均有易感性，其中在雛雞階段最容易感染，因此需要在各個(gè)時(shí)期做好雞群大腸桿菌病的診斷與防治，以減少大腸桿菌病對(duì)禽類生養(yǎng)殖行業(yè)造成的損失。

1 疾病的流行特點(diǎn)

該病易感于大部分禽類，一年四季都容易發(fā)生，其中春季和冬季最易感，主要原因是春冬季節(jié)寒冷，雞舍內(nèi)通風(fēng)環(huán)境不良，空氣環(huán)境污濁，糞便清理不及時(shí)等原因引起的雞群呼吸道疾病的發(fā)生，使雞群對(duì)疾病的抵抗能力下降，易繼發(fā)引起禽流感或新城疫，同時(shí)并發(fā)大腸桿菌病。同時(shí)該病通常會(huì)通過(guò)垂直傳播的方式，由上一代的發(fā)病個(gè)體傳播到下一代，在種蛋運(yùn)輸過(guò)程中污染也容易引起大腸桿菌病，加之，近年來(lái)養(yǎng)殖戶以抗生素作為防控大腸桿菌病的唯一措施，導(dǎo)致大腸桿菌對(duì)部分藥物的耐藥性不斷提高，使部分免疫程序失去作用。

2 臨床癥狀

大腸桿菌病一般分為急性大腸桿菌病和亞急性或慢性大腸桿菌病，急性大腸桿菌病一般已發(fā)生在雛雞階段，主要表現(xiàn)出來(lái)的癥狀為急性敗血癥，發(fā)病時(shí)表現(xiàn)出的癥狀為，體溫異常，在較短的時(shí)間內(nèi)升至41～43 ℃，雞群精神狀態(tài)較差，精神萎靡，食欲減退乃至廢絕，腹瀉，糞便呈黃白色，如不及時(shí)治療，將在3-5天內(nèi)死亡，有部分雞不表現(xiàn)上述癥狀，突然死亡，但死亡數(shù)量相對(duì)較少。亞急性或慢性雞大腸桿菌病一般在150日齡左右的成年雞中發(fā)生，一般表現(xiàn)出的癥狀為，雞群精神沉郁，對(duì)外界刺激反應(yīng)弱，行走不穩(wěn)，羽毛蓬亂無(wú)光澤，肛門污穢，食欲廢絕，口渴，但飲水量減少，體形消瘦，生長(zhǎng)發(fā)育遲緩，下痢等，蛋雞還表現(xiàn)為產(chǎn)蛋量下降，產(chǎn)蛋質(zhì)量差，易出現(xiàn)軟殼蛋，沙皮蛋。

3 剖檢癥狀

通過(guò)剖檢通?？砂l(fā)現(xiàn)以下癥狀，剖開(kāi)腹腔后，有強(qiáng)烈的惡臭，心包有淡黃色的液體淤積，部分雞出現(xiàn)心包膜與心外膜發(fā)生粘連；肝臟淤血，呈紫黑色，表面出現(xiàn)黃色纖維性滲出物；肺部淤血，腫大；膽囊、脾腫大，輸卵管擴(kuò)張；卵泡軟化、壞死，容易產(chǎn)生腹膜炎；腸道黏膜充血，出血，水腫[1]。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

通常可以在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)采用細(xì)菌分離培養(yǎng)和革蘭氏染色鏡檢以及細(xì)菌學(xué)鑒定的方法來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。

4.1 細(xì)菌分離培養(yǎng) 將采集樣品的病變組織分別接種于不同培養(yǎng)基中(包括LB肉湯，LB瓊脂培養(yǎng)基，SS瓊脂培養(yǎng)基，伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基，麥康凱培養(yǎng)基)，放置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)20～24h，通過(guò)觀察細(xì)菌生長(zhǎng)情況來(lái)確定是否是大腸桿菌。大腸桿菌在LB肉湯中生長(zhǎng)情況良好，均勻生長(zhǎng)，液體渾濁；在LB瓊脂培養(yǎng)基上形成圓形、表面光滑、半透明的灰白色菌落；在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上形成圓形、大小均一、光滑的粉紅色菌落；在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上呈現(xiàn)深紫黑色、光滑、濕潤(rùn)、帶有金屬光澤的圓形菌落[2]。

4.2 革蘭氏染色鏡檢 直接將不同部位的病料涂片，然后進(jìn)行革蘭氏染色，觀察顯微鏡下是否會(huì)出現(xiàn)，兩端鈍圓的桿菌，無(wú)芽孢和莢膜形成，能運(yùn)動(dòng)，周身鞭毛。

4.3 細(xì)菌學(xué)鑒定 綜合多種試驗(yàn)方法對(duì)細(xì)菌做出的詳細(xì)而準(zhǔn)確的鑒定方法，首先對(duì)菌株進(jìn)行分離純化，再進(jìn)行染色、鏡檢，觀察菌落的培養(yǎng)性狀，進(jìn)行菌落熒光性檢查以及生化鑒定，對(duì)所分離純化的細(xì)菌進(jìn)行生化鑒定。大腸桿菌能分解葡萄糖、麥芽糖、乳糖、不分解蔗糖，不產(chǎn)生硫化氫；利用枸櫞酸鹽陰性，不液化明膠，甲基紅試驗(yàn)為陽(yáng)性，V-P試驗(yàn)為陰性[3]。

5 藥敏試驗(yàn)

采用美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)推薦的微量稀釋法，分離純化大腸桿菌進(jìn)行以下幾種常規(guī)藥物敏感試驗(yàn)，測(cè)定其抑菌圈直徑[4]。例如硫酸阿米卡星，硫酸鏈霉素，氟苯尼考，鹽酸沙拉沙星，硫酸慶大霉素，硫酸粘霉素，鹽酸恩諾沙星，氨芐西林鈉，強(qiáng)力霉素，青霉素，復(fù)方甲砜霉素，多粘菌素等藥物進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，步驟：（1）菌懸液的制備：將分離的菌株三區(qū)劃線接種于腦心浸液瓊脂上，37°恒溫培養(yǎng)過(guò)夜后，使用接種環(huán)或者高壓過(guò)的牙簽挑取單個(gè)菌落接種于2ml的MH肉湯中，在37°搖床振蕩培養(yǎng)5～6h后。用空白肉湯稀釋培養(yǎng)菌液，使其比濁0.5麥?zhǔn)媳泉?dú)標(biāo)準(zhǔn)，此時(shí)菌液濃度約1～2×108 CFU/ml，再將其稀釋1000倍，作為測(cè)試菌液，終濃度為1～2×105 CFU/ml。（2）用肉湯將各種測(cè)試抗菌藥物旳儲(chǔ)備液作倍比稀釋成個(gè)梯度，分別為256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5ug/ml。用微量加樣器將稀釋好的藥物從低濃度到高濃度依次加入96孔細(xì)菌培養(yǎng)板1～10排的孔內(nèi)，每孔100ul。然后將測(cè)試菌液從低濃度到高濃度依次加入孔1～10內(nèi)，每孔100ul。第11孔加測(cè)試菌液作為陽(yáng)性對(duì)照(有菌無(wú)藥)；第12孔加200ul空白肉湯作為陰性對(duì)照(無(wú)菌無(wú)藥)。整個(gè)孔細(xì)菌培養(yǎng)板加好藥液、菌液并合上蓋后，在桌面螺旋推動(dòng)以充分混勻孔內(nèi)液體，放37℃培養(yǎng)18～24h后置黑色桌面觀察結(jié)果。細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)孔內(nèi)呈彌散狀混池或孔底有圓形或絲網(wǎng)狀沉淀。無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)孔內(nèi)所含最低抗菌藥物濃度即為測(cè)試菌株對(duì)該藥物的MIC值[5]。

6 預(yù)防和治療

6.1 預(yù)防 為提前減少疾病的發(fā)生，通常提前采取常規(guī)的預(yù)防措施。（1）做好廠區(qū)選址并設(shè)立隔離區(qū)，廠區(qū)應(yīng)當(dāng)在地勢(shì)高的下風(fēng)口、水源良好，充裕、排水方便，并遠(yuǎn)離其他禽類養(yǎng)殖場(chǎng)，屠宰場(chǎng)及禽類產(chǎn)品加工工廠。（2）保持雞舍內(nèi)環(huán)境良好，增加通風(fēng)，保證空氣質(zhì)量，減少雞舍內(nèi)有害氣體的濃度和粉塵，及時(shí)清理雞糞，定期對(duì)雞舍和周邊環(huán)境進(jìn)行消毒。（3）加強(qiáng)飼養(yǎng)員對(duì)雞舍飼養(yǎng)管理的意識(shí)，及時(shí)淘汰和處理病、殘、弱、死雞，保證雞舍內(nèi)的飼料、墊料、飲水干凈，無(wú)污染，同時(shí)可在水中加入氯制劑，保證水質(zhì)清潔，也可起到防治大腸桿菌病的作用。（4）做好日常的病毒病如新城疫、禽流感、傳染性法氏囊病、傳染性支氣管炎、馬立克氏病等的免疫工作，制定科學(xué)的免疫程序，合理免疫，同時(shí)也要控制好支原體、傳染性鼻炎、等細(xì)菌病的發(fā)生和傳播，定期進(jìn)行免疫監(jiān)測(cè)，保持良好的免疫水平[6]。（5）種蛋雞場(chǎng)和孵化場(chǎng)同時(shí)要加強(qiáng)對(duì)種蛋、孵化器、運(yùn)輸車輛的消毒，在運(yùn)送過(guò)程中注意做好種蛋的防護(hù)和清潔，保證周圍環(huán)境衛(wèi)生。同時(shí)對(duì)死亡的雛雞，廢蛋進(jìn)行無(wú)害化處理，深埋并在周圍撒石灰消毒。

6.2 治療 當(dāng)疾病發(fā)生時(shí)，要考慮使用藥物治療的方式來(lái)對(duì)發(fā)病群體進(jìn)行治療。通常來(lái)說(shuō)能夠通過(guò)大腸桿菌病的藥物很多，例如慶大霉素，氧氟沙星，氟苯尼考，土霉素，復(fù)方新斯的明，強(qiáng)力霉素等，但由于近年來(lái)抗生素的濫用和過(guò)度使用，導(dǎo)致大腸桿菌對(duì)大量的抗生素產(chǎn)生耐藥性，為了避免因細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性而導(dǎo)致的錯(cuò)誤用藥，應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)得出的結(jié)果，得出該廠治療大腸桿菌的藥物的耐藥性和敏感性的詳細(xì)報(bào)告，并根據(jù)報(bào)告內(nèi)容，對(duì)已經(jīng)產(chǎn)生耐藥的藥物停止使用，以免用到無(wú)效藥物。在實(shí)際用藥的過(guò)程中，應(yīng)盡量選擇敏感性較高的藥物，但不能連續(xù)使用同一種藥物，應(yīng)該采取交替用藥或輪換用藥的方式。在用藥時(shí)要保證藥物的劑量充足，在發(fā)病后應(yīng)進(jìn)行緊急治療。

[1] 邢清潔. 雞大腸桿菌病的診治[J]. 河北農(nóng)業(yè)科技, 2008(1): 36-37.

[2] 于學(xué)雙. 一起雛雞大腸桿菌病的原因分析[J]. 農(nóng)村實(shí)用科技信息, 2012(7): 23.

[3] 何國(guó)新. 初產(chǎn)母雞癱瘓癥的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)與討論[J]. 養(yǎng)殖技術(shù)顧問(wèn), 2013(5): 176.

[4] 李松興, 王文楓, 史明基. 蛋雞大腸桿菌病的診斷與防治[J]. 中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘, 2011(2): 111-112.

[5] 何濤. 動(dòng)物源大腸桿菌對(duì)乙酰甲喹和氟苯尼考的敏感性折點(diǎn)及分子耐藥機(jī)制研究[D]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué), 2015.

[6] 由佳, 李明舉, 任成森. 肉雞大腸桿菌病的防治措施[J]. 中國(guó)動(dòng)物保健, 2013(9): 29-30.

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1007-1733(2017)08-0062-02

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