摘 要 采用2，4-二硝基苯肼法測定金刺梨果實維生素C的含量，通過正交試驗優(yōu)選得到維生素C含量高的提取條件。結果表明，最適提取工藝為：采用4%濃度的草酸、溫度0℃、提取時間10 min。

關鍵詞 金刺梨；維生素C；提取工藝；正交試驗

中圖分類號：TS201.2 文獻標志碼：A DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2017.1.023

知網(wǎng)出版網(wǎng)址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/50.1186.s.20170123.1758.022.html 網(wǎng)絡出版時間：2017-1-23 17：58：00

金刺梨（Rosa kweichonensis var. sterilis）是貴州特有植物[1]，又名無籽刺梨。金刺梨具有早結果、早豐產(chǎn)的特性，具有較強的適應性，抗病蟲性強，農(nóng)業(yè)栽培技術容易掌握，是一種極有發(fā)展前途的果樹，也是一種觀花觀果花卉和較好的綠籬植物[2]。

維生素C具有預防感冒、抗氧化、促進膠原蛋白形成、減少低密度脂蛋白及甘油三酯含量、增加高密度脂蛋白含量、增加好膽固醇含量，促進膽固醇代謝、降低膽固醇合成的速率、預防脂質氧化等多種生理功能。有研究發(fā)現(xiàn)，繅絲花屬植物富含維生素C，金刺梨為繅絲花近緣種，所以金刺梨應該也含有豐富的維生素C，然而有關報道較少，僅在報紙有零星報道。筆者以貴州產(chǎn)金刺梨為原料，研究其維生素C的測定方法，為金刺梨資源的開發(fā)利用提供數(shù)據(jù)支撐。

1材料與方法

1.1材料

試材：供試金刺梨材料采自貴州省安順市西秀區(qū)羅仙村。抗壞血酸標準品購自上海生工股份有限公司；二硝基苯肼、濃硫酸、草酸、硫脲、活性炭均為分析純。

試驗儀器：UV5300PC紫外可見分光光度計，PRACTUM124-1CN電子天平，BPH-9052電熱恒溫培養(yǎng)箱。

1.2方法

1.2.1 樣品制備

將在4℃冰箱貯存的金刺梨鮮果去萼、果柄及皮刺，用水洗凈，置陰涼通風處風干30 min，再準確稱取50 g鮮果置于攪拌器內，在避光的環(huán)境下加入50 mL純凈水并快速碾磨成勻漿，備用。

1.2.2 標準曲線的制作和樣品的測定

準確吸取抗壞血酸溶液，分別置于250 mL容量瓶中，用1%硫脲溶液定容，配置成濃度分別為2， 3， 4， 5， 6， 7 μg/mL的抗壞血酸標準液，然后準確吸取抗壞血酸標準液5.0 mL，添加2% 2，4-二硝基苯肼溶液0.5 mL（空白管不加），置于37℃電熱恒溫箱中3 h后取出放入冰水浴中，最后樣品管和空白管分別緩慢滴入85%硫酸溶液5.0 mL，震蕩室溫冷卻30 min后以空白調零點測其吸光度[3]。標準曲線為y=0.0002x+0.004（R2=0.9903）。

稱取50 g鮮果置于攪拌器內，在避光的環(huán)境下加入50 mL 2%草酸溶液快速碾磨成勻漿。取勻漿30 g，用1%草酸溶液稀釋至60 mL，搖勻，并用紗布過濾。取濾液5.0 mL按照標準曲線的試劑添加順序依次加入，最后測其吸光度，然后帶入標準曲線方程計算出維生素C的濃度。

1.2.3 工藝優(yōu)化

維生素C易氧化，因此維生素C提取過程中需加草酸溶液保護，溫度和提取時間也直接影響結果的測定，所以本研究選用草酸濃度、溫度以及提取時間3個因素，每因素選3個水平，選用L9（34）正交表安排試驗[4]，方案見表1。

2結果與分析

2.1正交試驗結果

按正交試驗方案進行試驗，每組試驗重復3次，結果取平均值，試驗結果見表2。

由方差分析可知（表3），提取溫度和提取時間對金刺梨維生素C提取的影響達到極顯著水平，草酸濃度的影響不顯著。

由極差分析可知（表4），綜合考慮金刺梨維生素C提取過程中加入的草酸濃度、提取溫度和提取時間對最終提取的維生素C含量的影響，本試驗得出的最佳工藝組合為：A2B1C1，即加入的草酸濃度為4%、提取溫度為0℃、提取時間為10 min時所提取的金刺梨維生素C含量最高。

2.2驗證性試驗結果

根據(jù)正交試驗得到的最適提取工藝，當加入的草酸濃度為4%、溫度為0℃、提取時間為10 min時提取的金刺梨維生素C含量為14.83 mg/g，高于正交試驗中的各組結果，表明采用最佳工藝提取效果較好。

3討論

維生素C具有很強的還原性，金刺梨在制漿過程中很容易被氧化，而草酸有抑制抗壞血酸氧化酶的作用，在提取過程中加入草酸溶液可以起到延緩維生素C氧化的作用，但本研究結果表明，加入的草酸濃度對維生素C提取的影響不顯著，這可能的原因是維生素C在空氣中極易被氧化，尤其是在堿性條件下更快，而在酸性介質中，它受空氣氧化的速度稍慢，較為穩(wěn)定，2%的草酸溶液提供的酸性環(huán)境已經(jīng)可以起到很好的保護作用，所以再增加草酸濃度對維生素C穩(wěn)定性的增加已經(jīng)不明顯了。未來可以考察下不加草酸和加入更多量草酸對維生素C穩(wěn)定性的影響。

維生素C遇光會分解，王勁等研究指出，鮮橙汁在冷藏避光條件下儲存維生素C保存率最高[5]。為了達到最好的提取效果，本研究提取過程均采取了避光環(huán)境下進行試驗處理，保證了維生素C提取的效率與試驗結果的可靠性。郭啟慶等研究指出，藍靛果維生素C對熱不穩(wěn)定[6]，因此試驗開始之前將溫度作為其中一個因素。本研究試驗結果，溫度是影響結果的第二因素，且提取過程中溫度越高提取的維生素C含量越低，符合維生素C對熱不穩(wěn)定的規(guī)律。

參考文獻：

[1]劉松，趙德剛.無籽刺梨（Rosa kweichonensis var. sterilis）研究進展[J].山地農(nóng)業(yè)生物學報，2014（1）：76-80.

[2]鄒天才.貴州省植物園建園與發(fā)展40年[M].貴陽：貴州科技出版社，2004.

[3]孫艷麗.2，4-二硝基苯肼法測定維C銀翹片中維生素C的含量[J].廣東化工，2013（13）：200-201.

[4]李光，余霜.應用正交設計優(yōu)化甘薯葉綠原酸提取工藝研究[J].北方園藝，2014（11）：119-121.

[5]王勁，吳春香，姚凰.短期不同儲存條件橙汁中維生素C含量變化[A].//上海：上海市預防醫(yī)學會第二屆學術年會論文匯編[C].2006：45-48.

[6]郭慶啟，張娜，王碩，等.藍靛果汁維生素C熱降解動力學的研究[J].食品工業(yè)科技，2011（10）：8-11.

（責任編輯：丁志祥）