亓志鵬* 亓?xí)栽浦x艷英鄒于玲

（1 龍口市城市社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心檢驗(yàn)科，山東 龍口 265701；2 龍口市城市社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心公共衛(wèi)生科，山東 龍口 265701）

新型與傳統(tǒng)溶血素在血常規(guī)檢驗(yàn)中的應(yīng)用對比

亓志鵬1* 亓?xí)栽?謝艷英2鄒于玲1

（1 龍口市城市社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心檢驗(yàn)科，山東 龍口 265701；2 龍口市城市社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心公共衛(wèi)生科，山東 龍口 265701）

目的對比傳統(tǒng)溶血素（B法）和新型溶血素（A法）在臨床血常規(guī)檢驗(yàn)中的結(jié)果。方法在同等條件下，分別采用A法和B法對同一血常規(guī)質(zhì)控物的血小板、血紅蛋白、紅細(xì)胞和白細(xì)胞進(jìn)行測定，測定次數(shù)為20次，對測定結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果A法和B法測定的血紅蛋白結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05；紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板用A法和B法測定的結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05。結(jié)論溶血素不同，血常規(guī)檢測具有差異性。同一血常規(guī)質(zhì)控物用不同的溶血素進(jìn)行檢測，必須保證測定結(jié)果具有可比性和結(jié)果互認(rèn)，應(yīng)當(dāng)采用臨床可接受的方法和評價(jià)進(jìn)行比對。

臨床檢驗(yàn)；傳統(tǒng)溶血素；新型溶血素

氰溶血素是血細(xì)胞分析儀中比較常用的一種傳統(tǒng)溶血素，近年來，無氰血素越來越被廣泛使用，針對無氰血素臨床檢驗(yàn)價(jià)值還有待研究。為研究傳統(tǒng)溶血素與新型溶血素的臨床應(yīng)用價(jià)值，本文用不同方法對同一常規(guī)質(zhì)控物中的血小板、血紅蛋白、紅細(xì)胞和白細(xì)胞展開檢測，以下為具體研究報(bào)道。

1 材料與方法

1.1 一般資料：選取2015年3月至2015年6月收治的30例健康者作為研究對象，其中女13例，男17例，患者年齡最小25歲，最大70歲，平均年齡（40.3±2.5）歲，本研究所選研究對象一般資料具有均衡性和可比性，P＞0.05。

1.2 儀器與試劑：規(guī)格型號(hào)：15.0 mL×12支/盒。A法：無氰溶血素；試劑成分：16-烷基三甲溴化銨25 g/L，甲醛3%，95%乙醇20%，TritonX-1002.5%；產(chǎn)品生產(chǎn)廠家：南京普朗醫(yī)用設(shè)備有限公司。B法：有氰溶血素；硝普鈉鹽0.5 g/L與氰化鉀5.5 g/L。實(shí)驗(yàn)儀器：口日本希森美奧株F820血液分析儀2臺(tái)，A法和B法分開檢測。血常規(guī)質(zhì)控物生產(chǎn)廠家：天津市美德太平洋科技有限公司。生產(chǎn)批號(hào)：255-721。

1.3 方法：由操作熟練者從冰箱取出質(zhì)控物，保持室溫15～30 ℃，質(zhì)控物放置15 min后恢復(fù)正常室溫。質(zhì)控物放在手掌內(nèi)部，上下混合轉(zhuǎn)動(dòng)20～30 s，觀察紅細(xì)胞，完全懸浮停止動(dòng)作。檢測前進(jìn)行8～10次的上下翻轉(zhuǎn)。采用A法檢測同一血常規(guī)質(zhì)控物，嚴(yán)格遵循F820血液分析儀標(biāo)準(zhǔn)化操作步驟展開，進(jìn)行20次試驗(yàn)；按同一標(biāo)準(zhǔn)用B法進(jìn)行檢測。試驗(yàn)完畢，比較A法和B法檢測結(jié)果和目標(biāo)血液細(xì)胞分析儀測定結(jié)果。

2 結(jié) 果

紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板用A法和B法測定的結(jié)果與目標(biāo)血液細(xì)胞分析儀測定結(jié)果之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；A法和B法測定的血紅蛋白結(jié)果與目標(biāo)血液細(xì)胞分析儀測定結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05，具體見表1、2。

表1 A法和B法的紅細(xì)胞與血紅蛋白水平對比

表1 A法和B法的紅細(xì)胞與血紅蛋白水平對比

方法n紅細(xì)胞(×1012/L)血紅蛋白(g/L) A法303.79±0.42128.2±7.92 B法303.81±0.6212.2±5.35 P-＞0.05＜0.05

表2 A法和B法的白細(xì)胞與血小板水平對比

表2 A法和B法的白細(xì)胞與血小板水平對比

方法n白細(xì)胞(×109/L)血小板(×109/L) A法303.572±0.193187.4±10.102 B法303.568±0.231191.1±8.326 P-＞0.05＜0.05

3 討 論

血常規(guī)檢查是臨床最基礎(chǔ)的一種身體檢查，患者有無貧血、炎癥或者造血系統(tǒng)疾病可通過血常規(guī)檢測出來，血常規(guī)檢測還可對患者有無脾功能亢進(jìn)、消化道出血等不良狀況進(jìn)行分析。當(dāng)前，血常規(guī)檢驗(yàn)中已經(jīng)廣泛應(yīng)用血液細(xì)胞分析儀，而且逐漸凸顯出其臨床應(yīng)用價(jià)值，并進(jìn)一步完善其檢驗(yàn)試劑，臨床中主要選擇無氰溶血素試劑，由于這一試劑存在無毒、環(huán)保等優(yōu)勢，所以備受醫(yī)務(wù)工作者的青睞，然而，卻在很大程度上沖擊著有氰溶血素的臨床檢驗(yàn)。以往有氰溶血素會(huì)嚴(yán)重影響到環(huán)境與人體，所以，其應(yīng)用價(jià)值相對來說比較低。對資料進(jìn)行查閱后發(fā)現(xiàn)，兩種檢驗(yàn)方法所測得相關(guān)血紅蛋白結(jié)果呈現(xiàn)差異性的原因是測定原理不同所導(dǎo)致，以往有氰溶血素主要選擇我國國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)與衛(wèi)生部所提出的氰化高鐵血紅蛋白法，這是對血紅蛋白進(jìn)行測定的一種有效方法，而且檢驗(yàn)結(jié)果也具有安全性與可靠性[1-3]，新型溶血素對血紅蛋白進(jìn)行測定的穩(wěn)定性與以往方法相比比較差，然而，具有較高的測定結(jié)果。這一檢測是采用我國衛(wèi)生部與國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)所提出的方法展開測定，該方法能夠當(dāng)作測定血紅蛋白的重要參考，關(guān)鍵是該結(jié)果具有安全性、可靠性以及穩(wěn)定性。以往溶血素展開血常規(guī)檢驗(yàn)法對血紅蛋白進(jìn)行測定的依據(jù)主要是卡篷法，該方法的主要原理在于通過表面活性劑溶解出血紅細(xì)胞膜[4-5]，并釋放出血紅蛋白，從而氧化血紅蛋白以產(chǎn)生高鐵血紅蛋白，而氰化鉀和高鐵血紅蛋白發(fā)生反應(yīng)后，會(huì)產(chǎn)生相對比較穩(wěn)定、安全的氰化高鐵血紅蛋白，并選擇光電比色法測量血紅蛋白的濃度。新型溶血素屬于無氰型，選擇新型溶血素展開血常規(guī)檢測所得血紅蛋白與以往溶血素相比具有較差穩(wěn)定性，所得結(jié)果效果也不理想。在病患存在貧血癥狀的情況下，就會(huì)改變紅細(xì)胞中血紅蛋白的含量，從而使血紅蛋白降低程度與紅細(xì)胞降低程度存在一定差異性，所以，通過測定血紅蛋白的方式對患者貧血程度予以明確，然而，關(guān)于病患貧血類型，還應(yīng)該展開細(xì)胞形態(tài)學(xué)與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)檢查，同時(shí)還應(yīng)該檢測紅細(xì)胞其他指標(biāo)。從該研究的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，首先，有生物安全性與環(huán)境保護(hù)等因素分析，因?yàn)橐酝苎厍杌浥c亞硝基鐵氰化鈉等物質(zhì)具有較高含量，所以設(shè)備往往會(huì)出現(xiàn)毒性比較強(qiáng)烈的氰化物等廢液，所以操作人員有必要遵循規(guī)范對所產(chǎn)生的廢液進(jìn)行有效處理；其次，通過分析檢驗(yàn)項(xiàng)目重復(fù)性發(fā)現(xiàn)，以往溶血素檢驗(yàn)重復(fù)性比新型溶血素優(yōu)越的多，而且可以以最快的速度對血細(xì)胞進(jìn)行有效溶解；再次，兩類溶血素在WBC與PLT等指標(biāo)中應(yīng)用接受臨床檢驗(yàn)，結(jié)果得出二者差異性并不明顯，然而必須依照國內(nèi)衛(wèi)生部門所制定的氰化高鐵血紅蛋白技術(shù)展開檢驗(yàn)，該檢驗(yàn)技術(shù)能夠?qū)⒂行Ы梃b提供給Hb臨床檢驗(yàn)中，而且具有安全穩(wěn)定以及較高可靠性等特征。采用以上技術(shù)檢測血紅蛋白，其原理其實(shí)就是范?卡篷法的改良技術(shù)，采用以上技術(shù)檢測血紅蛋白，基本理論原理就是范?卡篷法改良后的技術(shù)，所得表面活性劑會(huì)導(dǎo)致紅細(xì)胞膜溶解現(xiàn)象的出現(xiàn)，同時(shí)將血紅蛋白釋放出來，以此增強(qiáng)其氧化作用，導(dǎo)致高鐵血紅蛋白的出現(xiàn)，高鐵血紅蛋白會(huì)和氰化鉀彼此發(fā)生反應(yīng)，進(jìn)而生成穩(wěn)定性比較強(qiáng)的氰化高鐵血紅蛋白，采用光電比色法進(jìn)一步檢測化合物濃度。

相關(guān)貧血患者在病情發(fā)作過程中，由于其體內(nèi)血紅蛋白水平存在一定差異性，所以檢測結(jié)果也會(huì)有所不同，所以與正常情況相比，病患紅細(xì)胞減少量與血紅蛋白減少量差異性非常大，通過對血紅蛋白含量進(jìn)行測定，對精準(zhǔn)判斷病患貧血程度極為有利。在選擇新型溶血素接受檢驗(yàn)期間，應(yīng)該關(guān)注以下問題：首先，應(yīng)該盡可能提升臨床檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性和可靠性；其次，臨床檢驗(yàn)期間，有必要確保檢驗(yàn)室通風(fēng)效果良好；再次，在出現(xiàn)廢液和次氯酸鹽彼此作用而產(chǎn)生堿化反應(yīng)前，有必要對混合溶液彼此接觸進(jìn)行嚴(yán)格控制[6-8]；第四，類似于各類生物毒素，相關(guān)臨床檢驗(yàn)工作者應(yīng)該對該物質(zhì)在實(shí)際操作期間所形成的廢物進(jìn)行謹(jǐn)慎處理，避免出現(xiàn)污染情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，選擇新型溶血素與傳統(tǒng)溶血素展開血常規(guī)檢測，結(jié)果顯示，白細(xì)胞計(jì)數(shù)與血小板計(jì)數(shù)水平?jīng)]有明顯差異性，差異性顯著的是血紅蛋白。A法和B法測定的血紅蛋白結(jié)果差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)價(jià)值，P＜0.05；紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板用A法和B法測定的結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05。測定原理不同可能是導(dǎo)致血紅蛋白存在差異性的因素，緩沖液和貯存液是無氰溶血?jiǎng)┑某煞?，其?shí)質(zhì)上是一種混合應(yīng)用液。碳酸氫二鈉、檸檬酸是緩沖液各組；碳酸氫二鈉、十二烷基三甲基氯化、檸檬酸是貯存液各分組。與有氰試劑相同，無氰試劑通過表面活性劑使紅細(xì)胞膜快速破裂，生成一種衍生物HCB-SFT，特定的吸收峰530 nm；白細(xì)胞不同程度收縮。有氰溶血素在獲得的血紅蛋白與傳統(tǒng)溶血素相比，具有較差的穩(wěn)定性。溶血素不同，血液細(xì)胞分析儀器也應(yīng)采用不同的應(yīng)用原理和方法。通過檢測發(fā)現(xiàn)，A法血細(xì)胞溶解速度要比B法慢。由于有氰溶血素中含有氰化鉀，因此實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的廢料含有劇毒，如果有酸性物質(zhì)與氰化物相遇，會(huì)發(fā)生堿化反應(yīng)，產(chǎn)生有毒氣體，會(huì)對人的生命健康造成嚴(yán)重危害，因此檢測過程必須小心謹(jǐn)慎，切忌與酸性物質(zhì)混合。檢測試驗(yàn)所產(chǎn)廢物，必須依照標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格處理，防止發(fā)生污染。雖然溶血素作用原理相似，但實(shí)質(zhì)上有巨大差別，同一血常規(guī)質(zhì)控物用不同的溶血素進(jìn)行檢測，必須保證測定結(jié)果具有可比性和結(jié)果互認(rèn)，應(yīng)當(dāng)采用臨床可接受的方法和評價(jià)進(jìn)行比對。

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New Application Comparison with Traditional Hemolysin in Blood Inspection

QI Zhi-peng1, QI Xiao-yun1, XIE Yan-ying2, ZOU Yu-ling1
(1 Department of Laboratory, Longkou Urban Community Health Service Center, Longkou 265701, China; 2 Department of Public Health, Longkou Urban Community Health Service Center, Longkou 265701, China)

ObjectiveTraditional hemolysin (B method), and a new hemolysin (A method) results in clinical blood test in comparison.MethodsUnder the same conditions, respectively A method and B method for quality control of blood platelet same substance, hemoglobin, red blood cells and white blood cells was measured for 20 times the number of measurement results were compared.ResultsDifference between the results measured by hemoglobin A method and B method was statistically significant, P＜0.05; difference between the results, red blood cells, white blood cells and platelets using Method A and B Determination of no statistical significance, P＞0.05.ConclusionHemolysin different blood test has a difference. The same blood quality control material with different hemolysin detected, must ensure that the measurement results are comparable and the mutual recognition of the results should be used clinically acceptable methods and evaluation for comparison.

Clinical testing; Traditional hemolysin; New hemolysin

R446.11+1

B

1671-8194（2017）09-0010-02

*通訊作者：E-mail:281149809@qq.com