陳星，丁永利，李現(xiàn)林，趙明明

（河南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，河南 鄭州 450000）

川芎嗪對(duì)急性脊髓損傷大鼠模型GFAP、cPLA2表達(dá)的影響

陳星，丁永利，李現(xiàn)林，趙明明

（河南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，河南 鄭州 450000）

目的 研究川芎嗪對(duì)SD大鼠急性脊髓損傷模型的保護(hù)作用及其對(duì)損傷段脊髓膠質(zhì)纖維酸蛋白（GFAP）及胞漿型磷脂酶A2（cPLA2）表達(dá)的影響。方法SD大鼠87只，隨機(jī)分成假手術(shù)組（n=9）、生理鹽水組（n=39）、川芎嗪組（n=39）。其中，假手術(shù)組行椎板切除術(shù)，生理鹽水組及川芎嗪組采用改良Allen打擊法復(fù)制大鼠急性脊髓損傷模型，以BBB（Basso，Beattie，Bresnahan）評(píng)分評(píng)價(jià)各組大鼠脊髓功能；術(shù)后川芎嗪組按200mg/kg注射川芎嗪，假手術(shù)組、生理鹽水組注射等量生理鹽水，并于術(shù)后1、3、7、14和21 d處死部分大鼠獲取脊髓損傷標(biāo)本，采用免疫組織化學(xué)比較GFAP、cPLA2表達(dá)情況，采用蘇木精-伊紅染色法（HE）染色觀察組織受損情況，并對(duì)GFAP、cPLA2進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果術(shù)后第7天起，川芎嗪組BBB評(píng)分均高于生理鹽水組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；術(shù)后各時(shí)間段川芎嗪組GFAP及cPLA2表達(dá)陽性面積均低于生理鹽水組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且GFAP與cPLA2表達(dá)陽性面積呈正相關(guān)（r=0.826，P=0.043），而從HE染色可知，脊髓損傷21 d，生理鹽水組已經(jīng)出現(xiàn)膠質(zhì)瘢痕，川芎嗪組僅為缺血性改變。結(jié)論川芎嗪可通過下調(diào)GFAP、cPLA2表達(dá)，并對(duì)急性脊髓損傷起到一定保護(hù)作用。

川芎嗪；急性脊髓損傷；膠質(zhì)纖維酸蛋白；組織胞漿型磷脂酶A2

長(zhǎng)久以來，促進(jìn)中樞神經(jīng)損傷后的神經(jīng)再生一直是治療脊髓繼發(fā)性損傷的主要方向，膠質(zhì)瘢痕的形成作為阻礙神經(jīng)再生的重要因素，對(duì)于其發(fā)生機(jī)制的研究也獲得了一定成果[1]。如星形膠質(zhì)細(xì)胞（Astrocyte，AS）的增殖及肥大即是引起膠質(zhì)瘢痕形成的因素之一[2]。川芎嗪（Tetramethylpyrazine，TMP）是中藥川芎中提取有活性單體，有研究指出川芎嗪具有抗缺血、改善微循環(huán)等作用，可應(yīng)用于脊髓損傷治療[3]，但人們對(duì)于其具體作用機(jī)制尚不清楚。而膠質(zhì)纖維酸蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）作為AS骨架蛋白，研究其表達(dá)量變化，有助于更好地了解川芎嗪的作用機(jī)制。此外，有研究指出[4]，炎癥反應(yīng)中關(guān)鍵酶胞漿型磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A2，cPLA2)可通過水解包膜磷脂酸來釋放花生四烯酸，進(jìn)而促進(jìn)炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)的發(fā)生，而炎癥反應(yīng)、缺血、缺氧等因素本身即可促進(jìn)脊髓損傷的加劇發(fā)生。因此，本文通過復(fù)制大鼠急性脊髓損傷模型，通過監(jiān)測(cè)給藥后不同時(shí)間點(diǎn)各組GFAP及cPLA2表達(dá)水平差異，從而更好地了解川芎嗪在治療脊髓損傷中的臨床機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑

鹽酸川芎嗪氯化鈉注射液購自珠海聯(lián)邦制藥股份有限公司中山分公司，GFAP、cPLA2兔抗鼠多克隆抗體、生物素標(biāo)記羊抗兔二抗購自英國(guó)Abcam公司，鏈霉親和素-生物素復(fù)合物試劑盒購自武漢博士德公司，其余所用常規(guī)試劑均購自廣州鼎國(guó)生物技術(shù)有限公司。

1.2 模型復(fù)制及分組

將87只SD大鼠隨機(jī)分成假手術(shù)組（n=9）、生理鹽水組（n=39）和川芎嗪組（n=39）。其中，生理鹽水組及川芎嗪組模型依照改良Allen重物打擊法[5]復(fù)制大鼠脊髓損傷模型，方法如下：按30mg/kg劑量腹腔注射3%戊巴比妥鈉，待大鼠麻痹后，固定于手術(shù)操作臺(tái)，提起背部毛發(fā)消毒后，從T10棘突處切出約2～3 cm切口，剝離椎盤肌肉，暴露棘突及椎板，將長(zhǎng)×寬×厚為3mm×2mm×1mm塑料墊片彎曲至符合大鼠背側(cè)脊髓屈曲度，并將此放置在T10處，以自制打擊裝置，采用7 g打擊棒從4 cm處以自由落體的方式撞擊墊片，并對(duì)脊髓造成損傷，以大鼠出現(xiàn)尾部痙攣擺動(dòng)、下肢及軀體回縮為復(fù)制模型成功，隨后按順序逐層縫合、消毒。假手術(shù)組僅進(jìn)行椎板切除術(shù)且不對(duì)脊髓造成損傷，隨后縫合傷口。為預(yù)防大鼠感染，術(shù)后常規(guī)大腿內(nèi)側(cè)肌注4萬u青霉素，連續(xù)給藥3 d。

按照以上分組，川芎嗪組術(shù)后30 min即按200mg/kg注射川芎嗪，假手術(shù)組及生理鹽水組則注射等量生理鹽水，隨后每天給藥1次，持續(xù)5 d。

1.3 評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 行為學(xué)評(píng)分 按照BBB（Basso-Beattie-Bresnahan）行為學(xué)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，即從后肢關(guān)節(jié)活動(dòng)情況、運(yùn)動(dòng)協(xié)同情況及承重情況等，對(duì)術(shù)后1、3、7、14和21 d處死大鼠進(jìn)行評(píng)分[6]?？偡?1分，分值越高，提示大鼠行為能力越正常。本評(píng)分由2名非本實(shí)驗(yàn)參與人員進(jìn)行獨(dú)立評(píng)分后，所得平均值為大鼠最終BBB評(píng)分結(jié)果。

1.3.2 GFAP、cPLA2免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn) 分別于術(shù)后1、3、7、14和21 d取處死后大鼠的脊髓損傷中心組織，經(jīng)切片脫蠟水化處理后，以3%過氧化氫H2O2孵育10min，羊血清封閉20min后，加入1∶100兔抗鼠GFAP多抗或1∶200兔抗鼠cPLA2，4℃過夜。磷酸緩沖鹽溶液（phosphate buffer saline，PBS）洗滌3次，加入生物素二抗，室溫孵育20min，PBS洗滌，二氨基聯(lián)苯胺顯色，PBS沖洗終止顯色反應(yīng)、蘇木素復(fù)染、二甲苯透明、中性樹膠封片。隨機(jī)采用Motic image Advanced軟件對(duì)以上切片進(jìn)行分析，其方法為選取5個(gè)在×200下不重疊區(qū)域，將呈棕黃色細(xì)胞作為陽性細(xì)胞，計(jì)算總的陽性染色面積。

1.3.3 蘇木精 -伊紅染色法（hematoxylin-eosin staining，HE）染色 采取標(biāo)本，脫水、透明、包埋，切成厚度為5μm石蠟切片，隨后按照HE染色步驟，依次放入二甲苯及不同濃度乙醇中，并經(jīng)PBS漂洗，加入蘇木精染色，自來水清洗、鹽酸乙醇分化、再次清洗后使用伊紅染色，清洗，經(jīng)不同濃度乙醇處理至無水乙醇中，二甲苯透明，樹脂封片，并在尼康顯微鏡下觀察，采集圖片。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，進(jìn)行成組t檢驗(yàn)、重復(fù)測(cè)量方差分析或LSD-t檢驗(yàn)，并采用Pearson相關(guān)性分析GFAP、cPLA2的相關(guān)性。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 BBB評(píng)分結(jié)果

術(shù)后，生理鹽水組及川芎嗪組大鼠均出現(xiàn)脊髓休克現(xiàn)象，表現(xiàn)為雙后肢功能喪失，無肌力，并以俯臥行走、尿潴留。但隨著術(shù)后恢復(fù)時(shí)間增加，脊髓休克現(xiàn)象有所緩解。以BBB評(píng)分可知，川芎嗪組大鼠恢復(fù)速度快于生理鹽水組，從術(shù)后7 d起，兩組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

2.2 cPLA2表達(dá)情況

術(shù)后1 d，生理鹽水組及川芎嗪組的cPLA2陽性面積同樣均高于假手術(shù)組（185.4±14.3）μm2，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t生理鹽水組vs假手術(shù)組=4.353，P＜0.05；t川芎嗪組vs假手術(shù)組=3.952，P＜0.05），且隨著治療時(shí)間的延長(zhǎng)，生理鹽水組cPLA2陽性面積逐漸增大，而川芎嗪組cPLA2陽性面積則逐漸減?。‵組別=5.535，P＜0.05；F時(shí)間點(diǎn)=4.453，P＜0.05；F組別*時(shí)間點(diǎn)=3.745，P＜0.05），且在同一檢測(cè)時(shí)點(diǎn)，兩組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見圖1、表2。

2.3 GFAP表達(dá)情況

術(shù)后第1天，生理鹽水組及川芎嗪組的GFAP陽性面積均高于假手術(shù)組（249.8±9.8）μm2，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t生理鹽水組vs假手術(shù)組=3.743，P＜0.05；t川芎嗪組vs假手術(shù)組=3.321，P＜0.05），而隨著治療時(shí)間的延長(zhǎng)，生理鹽水組GFAP陽性面積逐漸增大，而川芎嗪組GFAP陽性面積則逐漸減?。‵組別=4.976，P＜0.05；F時(shí)間點(diǎn)=4.134，P＜0.05；F組別*時(shí)間點(diǎn)=3.663，P＜0.05），且在同一檢測(cè)時(shí)點(diǎn)，兩組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見圖2、表3。

表1 兩組術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)BBB評(píng)分比較 （n=39，分，±s）

表1 兩組術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)BBB評(píng)分比較 （n=39，分，±s）

21 d生理鹽水組 1.7±0.7 3.1±0.8 5.9±1.0 8.7±0.9 9.9±1.5川芎嗪組 2.0±0.6 4.7±0.5 8.9±0.4 13.7±0.4 16.4±0.5t值 3.242 4.342 6.464 8.542 10.443P值 0.894 0.435 0.046 0.025 0.008組別1 d 3 d 7 d 14 d

圖1 兩組不同時(shí)間點(diǎn)cPLA2表達(dá) （×400）

表2 兩組不同時(shí)間點(diǎn)cPLA2表達(dá)陽性面積比較 （n=39，μm2，±s）

表2 兩組不同時(shí)間點(diǎn)cPLA2表達(dá)陽性面積比較 （n=39，μm2，±s）

21 d生理鹽水組 210.4±20.3 233.7±19.8 259.8±19.8 389.7±20.6 364.1±18.9川芎嗪組 194.8±19.4 214.7±20.5 236.7±19.3 240.9±18.6 246.5±19.5t值 3.053 4.531 4.684 8.244 10.443P值 0.093 0.049 0.046 0.033 0.009組別1 d 3 d 7 d 14 d

圖2 兩組不同時(shí)間點(diǎn)GFAP表達(dá) （×400）

表3 兩組不同時(shí)間點(diǎn)GFAP表達(dá)陽性面積比較 （n=39，μm2，±s）

表3 兩組不同時(shí)間點(diǎn)GFAP表達(dá)陽性面積比較 （n=39，μm2，±s）

21 d生理鹽水組 362.8±13.8 375.2±15.9 384.2±18.4 496.2±23.8 464.2±27.5川芎嗪組 345.7±11.3 323.4±11.1 302.8±10.7 344.8±10.4 359.7±9.5t值 3.645 4.642 5.332 6.564 9.963P值 0.062 0.045 0.044 0.042 0.014組別1 d 3 d 7 d 14 d

2.4 GFAP、cPLA2相關(guān)性分析

對(duì)川芎嗪組及生理鹽水組GFAP及cPLA2表達(dá)陽性面積進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，GFAP及cPLA2在整個(gè)治療周期中呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=0.826，P=0.043。見圖3。

2.5 HE染色結(jié)果

對(duì)術(shù)后21 d假手術(shù)組、生理鹽水組、川芎嗪組進(jìn)行HE染色。其中圖4A為假手術(shù)組，其脊髓組織可見清晰灰白質(zhì)界限，灰質(zhì)內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞體大，核仁豐富，可見尼氏小體；圖4B為生理鹽水組，可見損傷區(qū)域已經(jīng)塌陷且重建基本完成，可見片膠質(zhì)瘢痕；圖4C為川芎嗪組，其灰質(zhì)內(nèi)可見部分出血，紅細(xì)胞堆積現(xiàn)象，但未見明顯膠質(zhì)瘢痕生成。

圖3 GFAP、cPLA2相關(guān)性分析

圖4 3組損傷區(qū)脊髓組織染色結(jié)果 （HE染色×400）

3 討論

臨床上，大致可將急性脊髓損傷分為急性創(chuàng)傷期、繼發(fā)損傷期和慢性損傷期3個(gè)時(shí)期[5]。而當(dāng)脊髓損傷患者送至醫(yī)院時(shí)，多數(shù)原創(chuàng)損傷已不可逆轉(zhuǎn)，因此，治療上也以繼發(fā)損傷期及慢性損傷期為主。而研究表明[7]，多數(shù)因脊髓損傷致殘的主要原因在于繼發(fā)損傷期未得到及時(shí)、有效地治療，以至于損傷擴(kuò)大，加重脊髓神經(jīng)功能受損。此外，繼發(fā)性損傷期牽涉因素較多，致?lián)p機(jī)制繁多且相互影響，也給目前治療方案增大了難度。而當(dāng)病程進(jìn)入慢性損傷期，此時(shí)，神經(jīng)系統(tǒng)的再生則對(duì)于扭轉(zhuǎn)脊髓損傷，改善脊髓功能具有重要意義。然而，由于神經(jīng)組織損傷不可逆行，使得目前對(duì)于誘發(fā)神經(jīng)再生未能取得實(shí)時(shí)性成果，但是，有一點(diǎn)筆者可以確認(rèn)，即脊髓組織的修復(fù)及功能恢復(fù)必須依賴良好的血液微環(huán)境為受損血管及組織提供營(yíng)養(yǎng)[8]。TMP正好具有此類功能，TMP是川芎根莖提取的一種生物活性單體，因其具有擴(kuò)張血管、抑制血小板聚集、拮抗Ca2+內(nèi)流、消除氧氣自由基等作用已被廣泛應(yīng)用于心血管及神經(jīng)內(nèi)科治療。但是，對(duì)于其在急性脊髓損傷中的保護(hù)作用機(jī)制仍不明確，因此，仍有必要從分子水平分析TMP在脊髓損傷中的保護(hù)機(jī)制。

本研究通過改良Allen重物打擊法復(fù)制大鼠急性脊髓損傷模型，以假手術(shù)組作為模型復(fù)制對(duì)照組，并以BBB評(píng)價(jià)模型復(fù)制情況，從而保證了后期實(shí)驗(yàn)的真實(shí)性。而通過免疫組織化學(xué)結(jié)果可知，隨著術(shù)后時(shí)間的延遲，生理鹽水組及川芎嗪組cPLA2陽性產(chǎn)物均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，但后者上升趨勢(shì)較為緩慢。由于cPLA2主要介導(dǎo)炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激反應(yīng)，屬于急性期反應(yīng)蛋白，兩組在術(shù)后第1天，表達(dá)cPLA2陽性產(chǎn)物均高于假手術(shù)組。隨后兩組cPLA2表達(dá)陽性率差異逐漸明顯。由于炎癥因子釋放多為旁分泌或自分泌，即大量炎癥因子可導(dǎo)致炎癥細(xì)胞進(jìn)一步釋放炎癥因子[9]。生理鹽水組因自身短期內(nèi)炎癥因子釋放增加而得不到有效抑制，以至于cPLA2表達(dá)陽性細(xì)胞在術(shù)后14 d增加迅猛；而川芎嗪組，由于TMP可降低前列腺素合成，并抑制淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等釋放腫瘤壞死因子-α及白細(xì)胞介素-1β等炎癥因子，從而減輕了炎癥反應(yīng)；此外cPLA2具有明顯Ca2+依賴性，而TMP其作用之一即是拮抗Ca2+內(nèi)流[10]。另外，TMP還具有改善缺血部位血流速度，減少血管外周阻力，從而改善局部血液微循環(huán)，而這也有利于減少白細(xì)胞浸潤(rùn)，避免組織受到反復(fù)刺激產(chǎn)生炎癥因子[11]。

對(duì)GFAP，其與cPLA2呈正相關(guān)。在AS增殖早期，其能分泌如bFGF等促神經(jīng)生長(zhǎng)因子來減少脊髓損傷，因此，早期cPLA2高表達(dá)時(shí)，往往也可出現(xiàn)GFAP表達(dá)增高，但是當(dāng)AS細(xì)胞過度增殖乃至形變后，其將形成膠質(zhì)瘢痕，從而成為阻礙脊髓修復(fù)的物理及化學(xué)屏障，以至于一旦膠質(zhì)瘢痕形成，脊髓功能修復(fù)往往效果較差[12]。而從本研究看，生理鹽水組隨著術(shù)后時(shí)間延長(zhǎng)，GFAP表達(dá)增加，但在術(shù)后21 d，其表達(dá)陽性面積反而有所下降；川芎嗪組則GFAP表達(dá)則一直緩慢增加，并在SCI后14 d及21 d無明顯差別。由于GFAP是AS細(xì)胞骨架中起支承功能的結(jié)構(gòu)蛋白，其大量表達(dá)，可以說明AS細(xì)胞不僅增殖還可能出現(xiàn)了腫脹和形變。而生理鹽水組在術(shù)后21 d出現(xiàn)了GFAP表達(dá)陽性面積下調(diào)，其很有可能是部分AS細(xì)胞已經(jīng)出現(xiàn)凋亡，并形成膠質(zhì)瘢痕。而川芎嗪組GFAP表達(dá)量則維持較小增幅，并未出現(xiàn)表達(dá)陽性面積突增或下調(diào)。因此筆者認(rèn)為AS大多是出現(xiàn)增殖現(xiàn)象。而通過HE染色更直觀的證實(shí)了以上觀點(diǎn)。生理鹽水組細(xì)胞呈現(xiàn)增多，密集且形態(tài)不規(guī)則，而川芎嗪組雖然AS細(xì)胞也有所增加，但仍可見清晰完整的膠質(zhì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)。

綜上所述，cPLA2與GFAP在表達(dá)量具有一定的相關(guān)性，而川芎嗪又可以作用cPLA2，從而對(duì)急性脊髓損傷起到一定治療效果。

[1]KABU S,GAO Y,KWON B K,et al.Drug delivery,cell-based therapies,and tissue engineering approaches for spinal cord injury[J].Journal of Controlled Release,2015,219:141-154.

[2]李在望,張劍平,王蘭,等.脊髓損傷后星形膠質(zhì)細(xì)胞增生動(dòng)態(tài)變化分析[J].神經(jīng)損傷與功能重建,2013,8(3):165-170.

[3]侯建雄,馬海燕,李莉.手術(shù)配合丹參川芎嗪,甲基潑尼松龍治療頸椎骨折伴脊髓損傷的臨床觀察[J].河北醫(yī)藥,2013,35(14):2110-2112.

[4]許光.急性腦梗死患者血清脂蛋白相關(guān)性磷脂酶A2水平的變化及意義[J].中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志,2013,16(21):20-21.

[5]顧一飛,楊立利,袁文.急性脊髓損傷并發(fā)肺損傷機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國(guó)脊柱脊髓雜志,2013,22(12):1121-1124.

[6]BASSO D M,BEATTIE M S,BRESNAHAN J C.A sensitive and reliable locomotor rating scale for open field testing in rats[J].Journal of Neurotrauma,1995,12(1):1-21.

[7]何霏,張?chǎng)?楊蓉,等.脊髓損傷患者肺康復(fù)治療的現(xiàn)狀和進(jìn)展[J].中國(guó)康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志,2014,29(2):176-179.

[8]SABELSTR?M H,STENUDD M,RéU P,et al.Resident neural stem cells restrict tissue damage and neuronal loss after spinal cord injury in mice[J].Science,2013,342(6158):637-640.

[9]王濤麗,顧兵,李華南,等.急性脊髓損傷后的炎癥反應(yīng)及其抗炎治療[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào),2015,31(4):452-457.

[10]鐘建,陽明明,蔣電明.含川芎嗪UW液保存不同時(shí)間對(duì)異體神經(jīng)再生的影響[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2013,35(19):2065-2068.

[11]MOTHE A J,TATOR C H.Review of transplantation of neural stem/progenitor cells for spinal cord injury[J].International Journal of Developmental Neuroscience,2013,31(7):701-713.

[12]WILEMS T S,SAKIYAMA-ELBERT S E.Sustained dual drug delivery of anti-inhibitory molecules for treatment of spinal cord injury[J].Journal of Controlled Release,2015,213:103-111.

（張蕾 編輯）

Effect of Ligustrazine on GFAP and cPLA2 expressions in ratmodel of acute spinal cord injury

Xing Chen，Yong-liDing,Xian-lin Li,Ming-ming Zhao
(The First Affiliated Hospital,Henan University of Traditional Chinese Medicine, Zhengzhou,Henan 450000,China)

ObjectiveTo investigate the effects of Ligustrazine(Tetramethylpyrazine,TMP)on acute spinal cord injury in SD ratmodel and the expressions of glial fibrillary acidic protein(GAFP)and cytosolic phospholipase A2 (cPLA2)in the injuried spinal cord.MethodsEighty-seven SD ratswere randomly divided into sham group(n=9), saline group(n=39)and TMP group (n=39).The sham group underwent laminectomy,while in the saline group and the TMP group modified Allen's combat was used to make ratmodel of acute spinal cord injury.BBB(Basso, Beattie,Bresnahan)scores were applied to evaluate the spinal cord function of the rats.After operation,the TMP group was treated with TMP injection by 200 mg/kg,and the sham group and the saline group were injected with equal amount of saline.Part of the rats were sacrificed on postoperative day 1,3,7,14 or 21 to obtain the specimens of injuried spinal cord.By immunohistochemistry GFAP and cPLA2 expressions were compared.Tissue damage was observed in each group by HE staining.The correlation of GFAP and cPLA2 was analyzed.ResultsFrom the 7th postoperative day,BBB scores of the TMP group were higher than those of the saline group,the differencewas statistically significant(P＜0.05).In addition,the expressions of cPLA2 and GFAP in the TMP group were significantly lower than those in the normal saline group at each time period.The expressions of GFAP andcPLA2 are positively correlated(r=0.826,P=0.043).On the 21st day of spinal cord injury,HE staining revealed glial scar in the saline group and only ischemic changes in the TMP group.ConclusionsTMP can down-regulate the expressions of GFAP and cPLA2,and play a protective role in acute spinal cord injury.

Tetramethylpyrazine;acute spinal cord injury;glial fibrillary acidic protein;cytosolic phospholipase A2

R-332

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.07.003

1005-8982（2017）07-0009-06

2016-09-30