吳久宏
一、近三年高考回眸
二、考綱解讀
(一)2017年考試大綱對本部分內(nèi)容的考試范圍和要求
(二)2017年考試大綱對選修3模塊內(nèi)容的調(diào)整
對能力要求的一些表述進(jìn)行調(diào)整:將“關(guān)注對科學(xué)、技術(shù)和社會發(fā)展有重大影響和意義的生物學(xué)新進(jìn)展以及生物科學(xué)發(fā)展史上的重要事件”調(diào)整為“關(guān)注對科學(xué)、技術(shù)和社會發(fā)展有重大影響的、與生命科學(xué)相關(guān)的突出成就及熱點(diǎn)問題”。
特別提醒:選修3中“基因工程的原理及技術(shù)”調(diào)整成“基因工程的原理及技術(shù)(含PCR技術(shù))”。
三、構(gòu)建知識網(wǎng)絡(luò)圖
四、高頻考點(diǎn)精析
(一)基因工程及其安全性
1.提取目的基因的常用方法
2.目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的常用方法
3.目的基因的檢測與鑒定方法
【例1】(2016·全國Ⅰ卷·40)某一質(zhì)粒載體如圖所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中會導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活(Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質(zhì)粒載體用BamHⅠ酶切后,與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌。結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化,有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種,分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?;卮鹣铝袉栴}:
(1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具,應(yīng)具備的基本條件有______________ (答出兩點(diǎn)即可),而作為基因表達(dá)載體,除滿足上述基本條件外,還需具有啟動(dòng)子和終止子。
(2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中,未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的,其原因是 ______________ ;并且 ______________ 和______________ 的細(xì)胞也是不能區(qū)分的,其原因是 ______________ 。在上述篩選的基礎(chǔ)上,若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落,還需使用含有______________ 的固體培養(yǎng)基。
(3)基因工程中,某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體,其DNA復(fù)制所需的原料來自 ______________ 。
【解析】(2)在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上,只有具有Ampr的大腸桿菌才能夠生長。而Ampr位于質(zhì)粒上,故未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的大腸桿菌細(xì)胞中均無Ampr,僅含有質(zhì)粒載體的和含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌中均具有Ampr。目的基因的插入破壞了質(zhì)粒載體的Tetr,故含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能在含有四環(huán)素的平板上生長,從而能與僅含有質(zhì)粒載體的大腸桿菌區(qū)分開來。 (3)噬菌體是病毒,無細(xì)胞結(jié)構(gòu),無法自主合成DNA,需借助受體細(xì)胞完成DNA的復(fù)制。
【答案】(1)能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因(答出兩點(diǎn)即可) (2)二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均不生長 含有質(zhì)粒載體 含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒 二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長 四環(huán)素 (3)受體細(xì)胞
【易錯(cuò)提醒】(1)基因工程中有3種工具,但工具酶只有2種。其中,限制酶指一類酶,而不是一種酶。限制酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì),其作用的發(fā)揮需要適宜的理化條件,高溫、強(qiáng)酸或強(qiáng)堿均易使之變性失活。
(2)在切割含目的基因的DNA分子時(shí),需用限制酶切割兩次此DNA分子,產(chǎn)生4個(gè)末端。
(3)限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的作用部位都是脫氧核苷酸之間形成的磷酸二酯鍵(不是氫鍵),只是一個(gè)切開,一個(gè)連接。限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在該酶的識別序列或識別序列已經(jīng)被修飾。
(4)限制酶切割位點(diǎn)所處的位置必須是在所需的標(biāo)記基因之外,這樣才能保證標(biāo)記基因的完整性,有利于對目的基因的檢測。
(5)為使目的基因與載體形成相同的DNA片段末端以方便連接,通常使用同一種限制酶將二者切割,但如果不同的限制酶切割DNA分子所產(chǎn)生的末端存在互補(bǔ)關(guān)系時(shí),兩末端也可連接。
4.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因
(1)原理:利用DNA雙鏈復(fù)制的原理,在體外將基因的核苷酸序列不斷地加以復(fù)制,使其數(shù)量呈指數(shù)形式增加。
(2)條件:
(3)解題規(guī)律總結(jié)
【例2】RT-PCR是將RNA逆轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增反應(yīng)相結(jié)合的技術(shù),具體過程如下圖所示。請分析回答:
(1)過程Ⅰ需要加入緩沖液、原料、______________ 、______________ 和引物A等。
(2)過程Ⅱ首先要將反應(yīng)體系的溫度升高到95 ℃,其目的是______________ ,該反應(yīng)體系中所用的Taq酶至少應(yīng)能耐受 ______________ ℃。
(3)過程Ⅱ擬對單鏈cDNA進(jìn)行n次循環(huán)的擴(kuò)增,理論上至少需要 ______________ 個(gè)引物B。
(4)利用RT-PCR技術(shù)獲取的目的基因 ______________(填“能”或“不能”)在物種之間交流;該技術(shù)還可用于對某些微量RNA病毒的檢測,可提高檢測的靈敏度,原因是______________ 。
(5)RT-PCR過程中主要借助對______________的控制,影響酶的活性,從而使得化學(xué)反應(yīng)有序高效地進(jìn)行。
【解析】(1)過程Ⅰ表示逆轉(zhuǎn)錄,除了需要緩沖液、原料和引物A之外,還需要RNA作為模板,逆轉(zhuǎn)錄酶進(jìn)行催化。(2)過程Ⅱ先將反應(yīng)體系的溫度升高到95 ℃,使逆轉(zhuǎn)錄酶變性失活,mRNA-cDNA雜合雙鏈解開,再在Taq酶的作用下合成雙鏈DNA,由于該反應(yīng)體系中溫度升高到95 ℃,所以所用的Taq酶至少應(yīng)能耐受95 ℃。(3)DNA復(fù)制時(shí),子鏈的延伸需要引物,單鏈cDNA進(jìn)行1次擴(kuò)增得到雙鏈DNA,需要0個(gè)引物A和1個(gè)引物B。若單鏈cDNA進(jìn)行n次循環(huán)的擴(kuò)增,雙鏈DNA進(jìn)行了(n-1)次擴(kuò)增,則理論上至少需要(2n-1-1)個(gè)引物A和2n-1個(gè)引物B。(4)利用RT-PCR技術(shù)獲取的目的基因能通過基因工程在物種之間交流;該技術(shù)增加了待測RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量(或濃度),便于對某些微量RNA病毒進(jìn)行檢測,并可提高檢測的靈敏度。(5)RT-PCR過程中主要借助對溫度的控制,影響酶的活性,即高溫變性→低溫復(fù)性→中溫延伸,從而使得化學(xué)反應(yīng)有序高效地進(jìn)行。
【答案】(1)RNA提取物 逆轉(zhuǎn)錄酶 (2)讓逆轉(zhuǎn)錄酶變性失活、使mRNA-cDNA雜合雙鏈解開(答對一點(diǎn)即可) 95 (3)2n-1
(4)能 增加了待測RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量(或濃度),便于檢測 (5)溫度
(二)細(xì)胞工程
1.植物組織培養(yǎng)與植物體細(xì)胞雜交的區(qū)別與聯(lián)系
2.動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的制備
(1)制備單克隆抗體時(shí),選用一種抗原處理的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合,產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞兼有兩個(gè)親本細(xì)胞的特性——在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖,同時(shí)能產(chǎn)生出某種特異性的抗體。
(2)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞的誘導(dǎo)融合時(shí),形成的雜種細(xì)胞有三種,即AA型、BB型、AB型。只有AB型才是我們所需要的雜種細(xì)胞,所以需要用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。
(3)單克隆抗體制備過程中的兩次篩選:
第一次篩選:用特定的選擇培養(yǎng)基篩選,獲得雜交瘤細(xì)胞,即AB型細(xì)胞(A為漿細(xì)胞,B為骨髓瘤細(xì)胞),篩選掉A、B、AA、BB型細(xì)胞。
第二次篩選:用多孔板法和抗原—抗體雜交法篩選,獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。
【例3】(2016·江蘇卷·9) 下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述,正確的是( )
A.PEG是促細(xì)胞融合劑,可直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合
B.用原生質(zhì)體制備人工種子,要防止細(xì)胞破裂
C.骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理,可直接獲得單克隆抗體
D.核移植克隆的動(dòng)物,其線粒體DNA來自供卵母體
【解析】PEG是促細(xì)胞融合劑,但植物細(xì)胞不能直接融合,需先去壁形成原生質(zhì)體才能融合,A項(xiàng)錯(cuò)誤;制備人工種子應(yīng)用完整的植物細(xì)胞,而不應(yīng)用原生質(zhì)體,B項(xiàng)錯(cuò)誤;骨髓瘤細(xì)胞不能產(chǎn)生抗體,C項(xiàng)錯(cuò)誤;核移植克隆的動(dòng)物,其線粒體DNA來自供卵母體,D項(xiàng)正確。
【答案】D
(三)胚胎工程與生物技術(shù)的安全性和倫理問題
1.受精過程中的“三大反應(yīng)”與防止多精入卵的“兩道屏障”
(1)頂體反應(yīng):精子膜和頂體外膜發(fā)生一系列改變,并釋放頂體酶的過程即為頂體反應(yīng)。頂體反應(yīng)的主要作用是形成精子穿越放射冠的通道,是精子和卵子結(jié)合必不可少的條件。
(2)透明帶反應(yīng):精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間,會產(chǎn)生阻止后來的精子進(jìn)入透明帶的生理反應(yīng),稱為透明帶反應(yīng),這是防止多精入卵的第一道屏障。
(3)卵黃膜封閉作用:精子入卵后,卵黃膜會立即發(fā)生一種生理反應(yīng),拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi),稱為卵黃膜封閉作用,這是防止多精入卵的第二道屏障。
2.胚胎分割
(1)材料:發(fā)育良好,形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。
(2)實(shí)質(zhì):胚胎分割可增加動(dòng)物后代,其實(shí)質(zhì)是動(dòng)物的無性生殖或克隆。
(3)分割要求:對囊胚分割時(shí),注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割,否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。
3.胚胎干細(xì)胞
(1)來源:早期胚胎或原始性腺。
(2)特點(diǎn):[①形態(tài):體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯。][②功能:具有發(fā)育的全能性。][③體外培養(yǎng):可增殖而不分化。] [④可以冷凍保存,也可以進(jìn)行遺傳改造。]
【例4】(2016·全國Ⅱ卷·40)下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物(二倍體)的流程。
回答下列問題:
(1)圖中A表示正常細(xì)胞核,染色體數(shù)為2n,則其性染色體的組成可為 ______________ 。過程①表示去除細(xì)胞核,該過程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行,去核時(shí)常采用______________ 的方法。②代表的過程是______________ 。
(2)經(jīng)過多次傳代后,供體細(xì)胞中 ______________ 的穩(wěn)定性會降低。因此,選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。
(3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同,從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是 ______________ 。
(4)與克隆羊“多莉(利)”培養(yǎng)成功一樣,其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了______________。
【解析】(1)提供體細(xì)胞的供體可能為雌性,也可能為雄性,因此圖中A(正常細(xì)胞核)的性染色體組成為XX或XY。常采用顯微操作去核法來去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核。②過程表示將早期胚胎移入受體,該過程稱為胚胎移植。(2)取供體動(dòng)物的體細(xì)胞培養(yǎng),一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞,因?yàn)?0代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型,保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。若超過10代繼續(xù)培養(yǎng),則其遺傳物質(zhì)(或核型)的穩(wěn)定性會降低。(3)克隆動(dòng)物的細(xì)胞核基因來自供體,因此大部分性狀與供體相同,但細(xì)胞質(zhì)基因來源于受體(或提供卵母細(xì)胞的個(gè)體),即卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會對克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響,所以克隆動(dòng)物的性狀與供體不完全相同。(4)克隆動(dòng)物的培育采用的是核移植技術(shù),核移植技術(shù)的原理是已經(jīng)分化的動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性。
【答案】(1)XX或XY 顯微操作 胚胎移植 (2)遺傳物質(zhì) (3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會對克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響 (4)已經(jīng)分化的動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性
(四)生態(tài)工程的基本原理
1.物質(zhì)循環(huán)再生原理:物質(zhì)在生態(tài)系統(tǒng)中循環(huán)往復(fù)、分層分級利用。
2.物種多樣性原理:物種繁多而復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)具有較高的抵抗力穩(wěn)定性。
3.協(xié)調(diào)與平衡原理:處理好生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡,需要考慮環(huán)境承載力。
4.整體性原理:進(jìn)行生態(tài)工程建設(shè)時(shí),不僅要考慮自然生態(tài)系統(tǒng)的規(guī)律,更重要的是,還要考慮經(jīng)濟(jì)和社會等系統(tǒng)的影響力。
5.系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理:包括系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理和系統(tǒng)整體性原理。
【歸納總結(jié)】幾種典型生態(tài)工程的原理歸納:
(1)單一人工林比天然混交林穩(wěn)定性低,易爆發(fā)蟲害——物種多樣性原理。
(2)草原確定合理載畜量,不能過度放牧——協(xié)調(diào)與平衡原理。
(3)引種考慮適應(yīng)環(huán)境——協(xié)調(diào)與平衡原理。
(4)林業(yè)生態(tài)工程建設(shè),既要考慮種樹問題又要考慮生活問題——整體性原理。
五、找準(zhǔn)角度、突破難點(diǎn)
(一)與DNA有關(guān)的酶的比較歸納
(二)“工程?!敝R大盤點(diǎn)
1.不同“工程?!钡膮^(qū)別
2.不同“工程牛”的共同點(diǎn):都需將發(fā)育后的早期胚胎移入受體子宮內(nèi)發(fā)育成后代。
(三)克隆動(dòng)物、試管動(dòng)物與轉(zhuǎn)基因動(dòng)物遺傳特性的比較
(四)胚胎工程中八個(gè)有關(guān)“兩”的問題
1.受精過程中防止多精入卵的兩道屏障——第一道屏障為精子穿越透明帶后的“透明帶反應(yīng)”,第二道屏障為精子入卵后的“卵細(xì)胞膜反應(yīng)”。
2.體外受精時(shí)精子獲能的兩種常用方法——培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法。
3.胚胎工程中兩次使用促性腺激素——對供體使用促性腺激素,以促其“多排卵”;對供、受體使用促性腺激素以作“同期發(fā)情處理”。
4.胚胎移植時(shí)把握兩個(gè)發(fā)育期——桑椹胚期和囊胚期。
5.胚胎移植過程中的兩次檢查——對胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查(此時(shí)應(yīng)發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段);對受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查。
6.胚胎早期培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)液中的三個(gè)“兩”——兩鹽(無機(jī)鹽、有機(jī)鹽);兩素(激素、維生素);兩酸(氨基酸、核苷酸)。
7.胚胎分割中需關(guān)注的兩個(gè)部位——滋養(yǎng)層(可用于取樣用作DNA分析以鑒定性別)、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(需將其均等分割,否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育)。
8.引發(fā)倫理爭論的兩大技術(shù)——生殖性克隆技術(shù)、設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)。
六、強(qiáng)化訓(xùn)練
1.(2014·江蘇卷·23)下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述,錯(cuò)誤的是( )
A.切割質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶均特異性地識別6個(gè)核苷酸序列
B.PCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng)
C.載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標(biāo)記基因
D.抗蟲基因即使成功地插入到植物細(xì)胞染色體上也未必能正常表達(dá)
2.下列關(guān)于胚胎工程的敘述,錯(cuò)誤的 是( )
A.胚胎移植的供體和受體必須是同種生物
B.對收集的胚胎、移植后是否妊娠都要進(jìn)行檢查
C.胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)能增殖但不能被誘導(dǎo)分化
D.為了提高已有胚胎的利用率,可采用胚胎分割技術(shù)
3.下列關(guān)于生態(tài)工程的相關(guān)敘述,錯(cuò)誤的是( )
A.生態(tài)工程是實(shí)現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟(jì)的最重要手段之一
B.農(nóng)村綜合發(fā)展型生態(tài)工程實(shí)現(xiàn)了物質(zhì)和能量的循環(huán)利用
C.“平堤行洪、退田還湖、移民建鎮(zhèn)”是濕地恢復(fù)工程的重要方針
D.城市環(huán)境生態(tài)工程建設(shè)的主要原理:協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性原理
4.現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用廣泛,下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )
A.由于生殖隔離,轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物不會將目的基因傳給雜草
B.反對設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒
C.若轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界,則也可能存在安全性問題
D.當(dāng)今社會的普遍觀點(diǎn)是禁止克隆人的實(shí)驗(yàn),但不反對治療性克隆
5.下圖為植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖,其中甲和乙分別表示兩種二倍體植物細(xì)胞,所含有的染色體組分別是AA和BB。據(jù)圖分析不正確的是( )
A.圖中①過程發(fā)生的化學(xué)變化是纖維素和果膠的水解
B.經(jīng)過②和③過程形成的c細(xì)胞只有AABB這一種類型
C.過程②一般使用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑
D.過程④和⑤分別是脫分化和再分化
6.下圖為人體抗胃癌單克隆抗體的制備過程。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )
A.甲是能與人體抗胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原
B.細(xì)胞融合獲得乙的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同
C.用特定選擇培養(yǎng)基對乙進(jìn)行篩選,融合細(xì)胞均能生長,未融合細(xì)胞均不能生長
D.丙需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,多次篩選后可獲得能分泌所需抗體的丁
7.內(nèi)皮素(ET)是一種含21個(gè)氨基酸的多肽,它有強(qiáng)烈的血管收縮和促進(jìn)平滑肌細(xì)胞增殖等作用。研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮素功能異常與高血壓、糖尿病、癌癥等有著密切聯(lián)系。內(nèi)皮素主要通過與靶細(xì)胞膜上的內(nèi)皮素受體結(jié)合而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。ETA是內(nèi)皮素的主要受體,科研人員試圖通過構(gòu)建基因表達(dá)載體,實(shí)現(xiàn)ETA基因在細(xì)胞中的高效表達(dá),為后期ETA的體外研究以及拮抗劑的篩選、活性評價(jià)等奠定基礎(chǔ),其過程如下圖所示(圖中SNAP基因是一種熒光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的識別序列為C↓CCGGG,限制酶XhoⅠ的識別序列為C↓TCGAG)。請分析回答:
(1)完成過程①需要的酶是 ______________;與過程②相比,過程①特有的堿基配對方式是______________。
(2)過程③中,限制酶XhoⅠ切割DNA,使 ______________ 鍵斷開,形成目的基因的黏性末端是______________ 。用兩種限制酶切割,獲得不同的黏性末端,其主要目的是 ______________。
(3)過程⑥中,要用______________ 預(yù)先處理大腸桿菌,使其處于容易吸收外界DNA的感受態(tài)。
(4)利用SNAP基因與ETA基因結(jié)合構(gòu)成融合基因,目的是 ______________ 。
(5)人皮膚黑色素細(xì)胞上有內(nèi)皮素的特異受體,內(nèi)皮素與黑色素細(xì)胞膜上的受體結(jié)合后,會刺激黑色素細(xì)胞的分化、增殖并激活酪氨酸酶的活性,從而使黑色素急劇增加。美容時(shí)可以利用注射ETA達(dá)到美白祛斑效果,這是因?yàn)镋TA能與內(nèi)皮素結(jié)合,減少了內(nèi)皮素與 ______________的結(jié)合,抑制了內(nèi)皮素對黑色素細(xì)胞的增殖和黑色素的形成。
(參考答案見第86頁)