羅卿權, 路廣亮, 王 鳳, 周 坤,劉亞杰, 吳時英, 季國輝, 徐 穎*

(1. 上海市園林科學規(guī)劃研究院, 上海 200232;2. 上海申迪園林投資建設有限公司, 上海 201205; 3. 上海市浦東新區(qū)林業(yè)站, 上海 201210)

‘芽黃’紅瑞木枝干潰瘍病病原菌的鑒定及藥劑防治

羅卿權1, 路廣亮1, 王 鳳1, 周 坤2,劉亞杰2, 吳時英3, 季國輝3, 徐 穎1*

(1. 上海市園林科學規(guī)劃研究院, 上海 200232;2. 上海申迪園林投資建設有限公司, 上海 201205; 3. 上海市浦東新區(qū)林業(yè)站, 上海 201210)

‘芽黃’紅瑞木枝干潰瘍病在上海發(fā)生嚴重。本研究通過病原菌分離,致病性測定和形態(tài)學特征觀察,將引起此病害的病原菌鑒定為擬盤多毛孢屬一種Pestalotiopsissp.。通過擴增病原菌的rDNA-ITS序列,構建系統發(fā)育樹,其在系統發(fā)育樹上與擬盤多毛孢屬中分生孢子中間三個細胞異色的類群處于同一分支,此結果與形態(tài)學鑒定結果一致。5種殺菌劑室內藥劑篩選結果表明,對Pestalotiopsissp.的抑制中濃度(EC50)為0.639～1.787 μg/mL。4種殺菌劑室外藥效試驗結果表明,在發(fā)病初期,25%丙環(huán)唑乳油和25%嘧菌酯懸浮劑防治效果可達80%以上,當病害發(fā)展后,供試4種殺菌劑對病害的防治效果均小于50%。

‘芽黃’紅瑞木; 枝干潰瘍; 擬盤多毛孢屬; 藥劑篩選; 藥效試驗

‘芽黃’紅瑞木Cornusalba‘Bud’s Yellow’是山茱萸科梾木屬落葉灌木,其葉片卵圓形,花白色,莖稈終年呈黃綠色,冬季落葉后,莖稈金黃,鮮明突出[1]。因花與枝條皆具有較高的觀賞價值,逐漸成為園林造景中優(yōu)良的彩色樹種。紅瑞木在我國原分布于東北、華北和西北地區(qū)[2],因其具觀賞價值,其引種分布區(qū)域逐漸擴大,近年來在上海乃至華東地區(qū),紅瑞木也被廣泛種植。

‘芽黃’紅瑞木在上海迪士尼樂園園區(qū)被廣泛種植,近兩年在園區(qū)調查中發(fā)現, ‘芽黃’紅瑞木上一種莖稈病害發(fā)生嚴重,此病害在小枝和主枝上均可發(fā)生。上海梅雨季節(jié)后,植株莖稈上始現病斑;此后,隨著病害發(fā)展,病斑逐漸增大或增多,造成小枝枯死,發(fā)生嚴重者甚至危害基部主枝,導致整株植物枯萎死亡。此病害不僅對‘芽黃’紅瑞木危害程度較嚴重,而且其危害率也較高,夏末調查顯示,苗圃區(qū)株發(fā)病率達60%以上。

鑒于此病害對‘芽黃’紅瑞木造成的嚴重危害,本研究對其危害癥狀等進行了觀察描述,對病原菌進行了分離培養(yǎng)和致病性測定,利用傳統的形態(tài)學鑒定,結合核糖體 DNA 內部轉錄間隔區(qū)(ITS,internal transcribed spacer)序列的系統發(fā)育樹分析,對病原菌進行了鑒定;并進行了藥劑篩選和藥效防治試驗,以期科學有效地指導該病害的識別與防控。

1 材料與方法

1.1 采樣與分離

從上海迪士尼樂園西北苗圃‘芽黃’紅瑞木上采集發(fā)病枝條,對癥狀典型的病枝進行病原菌分離[3]:取發(fā)病枝條病健交界處表面積4 mm×2 mm植物組織,70%乙醇消毒2～3 s,5%次氯酸鈉消毒2 min,在無菌水中漂洗3次后晾干,置于含0.2%乳酸的PDA平板上,25℃恒溫培養(yǎng),5 d后挑取組織塊周圍的菌絲轉皿培養(yǎng)、純化,必要時用孢子稀釋法進行單孢分離。對分離物歸類、編號和轉管4℃保存。

1.2 致病性測定

將菌株于PDA平板上25℃恒溫培養(yǎng)5 d,用無菌手術刀將菌絲塊切成5 mm×3 mm大小。選取‘芽黃’紅瑞木健康植株,用無菌手術刀輕輕劃傷枝條表皮,將菌絲塊正面朝向傷口,用已浸濕無菌水的脫脂棉保濕傷口,并對接種枝條套袋保濕24 h。每個菌株設3個重復,并設置清水對照。接種后分別于7 d和14 d觀察并記錄發(fā)病情況,對發(fā)病枝條進行病原菌再分離及再次進行致病性測定。

1.3 病原菌形態(tài)特征觀察

將致病菌株轉移至PDA平板上,25℃恒溫培養(yǎng)3～7 d,觀察菌落形態(tài)特征,在光學顯微鏡下觀察病原菌的分生孢子形態(tài),并測量其大小,鑒定。

1.4 病原菌rDNA-ITS的PCR擴增與序列分析

1.4.1 基因組DNA提取

將致病菌株轉接到PDA平板上,于25℃培養(yǎng)5～7 d,在平板上倒入液氮,用滅菌的載玻片刮取菌絲至研缽研磨,采用改良的CTAB法提取基因組DNA[4]。

1.4.2 rDNA-ITS PCR擴增和純化

采用真菌核糖體rDNA ITS區(qū)域通用引物ITS1-fungl和ITS4 進行PCR擴增,引物序列如下:ITS1-fungl(5′-CTTGGTCATTTTAGAGGAAGTAA-3′),ITS4(5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′)。PCR反應體系總體積25 μL,包括:10×PCR Buffer 2.5 μL,dNTP mix(各25 mmol/L)2 μL,MgCl2(25 mmol/L)1.5 μL,真菌通用引物ITS1/ITS4(20 μmol/L)各0.5 μL,DNA模板0.5 μL(50 ng/μL),rTaq(5 U/μL)0.125 μL。反應程序為:94℃預變性5 min;94℃變性15 s,50℃退火45 s,72℃延伸45 s,35個循環(huán);72℃延伸5 min。

1%瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR產物,并用DNA凝膠回收試劑盒(Axygen)切膠純化后獲得目的基因片段。

1.4.3 目的片段的克隆測序及序列分析

通過pMD19-T Vector(TaKaRa)對純化后DNA片段進行克隆,藍白斑篩選后將陽性單克隆送上海生工生物技術有限公司測序。測序結果在NCBI GenBank(http:∥www.ncbi.nlm.gov)中Blast同源比對,向GenBank提交基因序列。參照Jeewon等[5]對Pestalotiopsis部分種構建的系統發(fā)育樹,使用Mega5.0軟件Maximum likelihood分析方法,構建系統發(fā)育樹。相關序列基本信息見表1。

表1 本研究中參與系統發(fā)育樹分析的序列1)

續(xù)表1 Table 1(Continued)

種類Species寄主Host地理來源GeographicoriginGenBankaccessionno.PestalotiopsismicrosporaAegicerascornilatum中國香港HongKong,ChinaAF409958Pestalotiopsisneglecta省藤屬Calamussp.澳大利亞AustraliaAF409975Pestalotiopsispalmarum棕櫚樹Palm澳大利亞AustraliaAF409990Pestalotiopsispauciseta荊豆Ulexeuropaeus新西蘭NewZealandAF409972Pestalotiopsisrhododendri方葉五月茶Antidesmaghaesembilla澳大利亞AustraliaAF409986Pestalotiopsissydowiana密花普羅梯亞木Proteamellifera南非SouthAfricaAF409970Pestalotiopsistheae密花普羅梯亞木Proteamellifera南非SouthAfricaAF405297Pestalotiopsisversicolor1Garciamangostana澳大利亞AustraliaAF409993Pestalotiopsisversicolor2番石榴Psidiumguajava澳大利亞AustraliaAF405298Pestalotiopsisvismiae針墊花屬Leucospermumsp.美國夏威夷Hawaii,USAAF409977Pestalotiopsissp.1Garciamangostana澳大利亞AustraliaAF409984Pestalotiopsissp.2甘蔗Saccharumofficinarum中國香港HongKong,ChinaAF409968Pestalotiopsissp.3紅千層屬Callistemonsp.澳大利亞AustraliaAF409985Pestalotiopsissp.4卡西豬籠草Nepentheskhasiana澳大利亞AustraliaAF409989Pestalotiopsissp.5/中國香港HongKong,ChinaAF409992Pestalotiopsissp.6寶特豬籠草Nepenthestruncata 菲律賓PhilippinesAF409991Pestalotiopsissp.7針墊花屬Leucospermumsp.南非SouthAfricaAF409961Pestalotiopsissp.EN8小草海桐Scaevolahainanensis中國香港HongKong,ChinaAF405294Pestalotiopsissp.8針墊花屬Leucospermumsp.南非SouthAfricaAF409980Pestalotiopsissp.EN9小草海桐Scaevolahainanensis中國香港HongKong,ChinaAF409963Pestalotiopsissp.9針墊花屬Leucospermumsp.南非SouthAfricaAF409979Pestalotiopsissp.EN12小草海桐Scaevolahainanensis中國香港HongKong,ChinaAF409994SeiridiumcardinaleCupressocyparisleylandii新西蘭NewZealandAF409995UnculturedPestalotiopsiscloneC138O9*高良姜Alpiniaofficinarum中國ChinaKF718252Pestalotiopsissp.C6b2b*檸檬Citruslimon喀麥隆CameroonJX436803Pestalotiopsissp.14JAES*Maytenusilicifolia巴西BrazilEF45179915SH-W2*‘芽黃’紅瑞木Cornusalba‘Bud’sYellow’中國ChinaKT953379

1) 未標注*的種類,均參考Jeewon等[5]。 Refer to Jeewon et al[5]for the species (genus) without the label *.

1.5 藥劑防治試驗

1.5.1 供試藥劑

25%嘧菌酯懸浮劑(SC)(先正達中國投資有限公司);10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑(WG)(先正達中國投資有限公司);80%代森錳鋅可濕性粉劑(WP)(南通德斯益農化工有限公司);50%多菌靈可濕性粉劑(WP)(上海悅聯化工有限公司);25%丙環(huán)唑乳油(EC)(先正達中國投資有限公司)。

1.5.2 室內藥劑篩選

采用菌落生長速率法測定供試藥劑對致病菌的菌絲生長抑制率。將菌株接種在PDA培養(yǎng)基上,于25℃ 培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)7 d,用直徑5 mm打孔器沿菌落邊緣打取菌碟,菌絲面向下置于含質量濃度 0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 和3.2 μg /mL的PDA平板上,每處理重復3次,并設無藥空白對照。25℃黑暗培養(yǎng),待對照平板的菌落直徑長至培養(yǎng)皿直徑約 2/3 時,用十字交叉法測量各處理菌落直徑。計算菌絲生長抑制率。

菌絲生長抑制率(%)=[1-(處理菌落直徑-菌餅直徑)/(對照菌落直徑-菌餅直徑)]×100。

將菌絲生長抑制率換算成幾率值(y),藥劑濃度換算成濃度對數(x),按濃度對數與幾率值回歸法求得線性回歸方程y=a+bx,并計算各供試藥劑對病原菌的抑制中濃度(EC50)、幾率值與濃度對數之間回歸的相關系數r值。

1.5.3 田間藥效防治試驗

于2014年在上海迪士尼西北苗圃進行田間藥效防治試驗。采用噴霧的方法,連續(xù)施藥3次,間隔期為14 d左右。每個藥劑處理100盆‘芽黃’紅瑞木,并設清水對照。第一次施藥前將所有具明顯病斑的枝條剪除。每次藥后14 d調查發(fā)病情況。并計算株發(fā)病率、病情指數及防治率。病害調查分級標準如下:0級, 無枝枯;1級, 1枝無分枝的小枝枯萎;2級, 無分枝的小枝枯萎,數目大于1枝;3級, 1枝有頂級分枝的枝條枯萎;4級, 有頂級分枝的枝條枯萎且枝條枯萎數目大于1枝;5級, 1枝或1枝以上基部大枝(至少有兩級分枝)枯萎;6級,整株枯萎。株發(fā)病率的計算公式為:株發(fā)病率(%)=發(fā)病株數×100/總株數;株發(fā)病防治效果(%)=(1-處理株發(fā)病率/對照株發(fā)病率)×100;病情指數=100×∑(各級病株數×各級代表值)/(調查總株數×最高級代表值);病情指數防治效果(%)=(1-處理病情指數/對照病情指數)×100。

2 結果與分析

2.1 病害癥狀觀察

‘芽黃’紅瑞木潰瘍病在上海始發(fā)于6月初,發(fā)病初期受害枝條表皮上出現長約3 mm的黑褐色、兩端稍尖的長橢圓形病斑,隨著病情的發(fā)展,病斑逐步擴大,長達數厘米,或擴展成片,呈不規(guī)則狀,使枝條表皮環(huán)狀壞死,導致病斑壞死部分上端枝條枯死,葉片枯萎(圖1a)。病原菌既可侵染植株頂部較小的分枝,導致分枝枯死,也可侵染植株主干基部,導致整株植物枯萎死亡。

圖1 紅瑞木枝干潰瘍病癥狀及病原菌形態(tài)Fig.1 Symptoms of infected branch of Cornus alba and morphology of the pathogen Pestalotiopsis sp. causing trunk canker

2.2 病原菌鑒定

2.2.1 病原菌分離、鑒定及致病性測定

從采集的發(fā)病‘芽黃’紅瑞木中,挑取5個癥狀典型的病斑,從每個病斑的病健交界處各切取3塊植物組織進行分離,培養(yǎng)后獲得15個單菌落。其中5個菌落顏色為白色,從中隨機挑取2個菌落進行轉移培養(yǎng),分別編號為15SH-W1, 15SH-W2。其余10個菌落形態(tài)特征一致,顏色均為灰色,從中隨機挑取4個菌落進行轉移培養(yǎng),分別編號為15SH-G1, 15SH-G2, 15SH-G3, 15SH-G4。將上述6株編號菌株進行致病性測定,結果見表2,15SH-W1和15SH-W2接種后植株均表現發(fā)病,而4株菌落顏色為灰色的菌株和對照接種后不發(fā)病。對致病的菌株15SH-W1和15SH-W2接種產生的病斑進行了再分離培養(yǎng)和觀察。

在PDA培養(yǎng)基上,菌株15SH-W1和15SH-W2氣生菌絲較濃密,呈絨毛狀,白色,至生長后期,其上產黑色的分生孢子器(圖1b)。顯微觀察,分生孢子呈紡錘形,分生孢子大小為(29.14±2.25)μm×(7.12±0.39)μm,分生孢子具有4個分隔,將分生孢子分為5個細胞,中間3個細胞顏色為深色,且為異色。兩端兩個細胞無色,近三角形。頂部細胞直接著生3根附屬絲(長度為30.77±2.81 μm),附屬絲頂端不呈匙狀,基部細胞著生一根較短的附屬絲(長度為7.78±1.96 μm)(圖1c)。從接種病斑上重新分離的病原菌與上述形態(tài)描述一致。根據菌落形態(tài)和分生孢子特征,參照真菌分類相關文獻[6-8],認為上述特征符合擬盤多毛孢屬Pestalotiopsis分類特征,將此病原菌鑒定為擬盤多毛孢Pestalotiopsissp.。

為驗證菌株致病性,選擇下列菌株再次接種:15SH-W1,菌株15SH-W1的單孢分離菌株,編號為15SH-W1(SC),菌株15SH-W1的回收分離菌株,編號為15SH-W1(E),菌株15SH-W2的回收分離菌株,編號為15SH-W2(E)。從表2結果可知,上述4株菌株接種的植株均表現為發(fā)病,而對照不發(fā)病。因此可確定分離獲得的擬盤多毛孢Pestalotiopsissp.菌株是 ‘芽黃’紅瑞木潰瘍病的致病病原菌。

表2 ‘芽黃’紅瑞木潰瘍病病原菌致病性測定

2.2.2 病原菌rDNA-ITS序列分析及系統進化樹構建

用引物 ITS1-fungl 和ITS4 對15SH-W2 菌株基因組DNA PCR擴增獲得了1條600 bp左右的清晰條帶。將目標條帶回收純化,并克隆測序后得到了長度為590 bp 的rDNA-ITS 序列。將該序列(已提交GenBank數據庫,登錄號:KT953379)在GenBank數據庫中進行Blast同源性比對,結果顯示所測的序列與多株擬盤多毛孢屬(Pestalotiopsissp.)菌株序列(登錄號:KF718252.1,KF718250.1,EF451804.1,KF718249.1,JX436803.1,EF451799.1)相似度均較高,達到99%。由于以上序列均未能鑒定到種,同時比對結果中相似度達98%以上的序列很多,且參比序列是擬盤多毛孢屬下不同種,Blast比對結果表明15SH-W2屬于擬盤多毛孢屬,但不能鑒定到屬下種級分類單元。

基于表1菌株序列,參照Jeewon等[5]運用MEGA 5.0軟件采用Maximum Likelihood分析方法,構建系統發(fā)育樹,bootstrap值為1 000。聚類分析結果顯示,所選序列構建的系統進化樹各分支自展值較高,在屬內主要分為X、Y、Z三大分支。所測菌株15SH-W2與Blast同源性比對中同源性最高的菌株序列(KF718252,JX436803,EF451799)均在X分支下(圖2),表明它們之間遺傳距離較近。擬盤多毛孢屬下分為三大類群的結果與Jeewon等[5]利用ITS和5.8S序列建立的系統進化樹所得到的結果一致。同時,Jeewon等[5]的研究結果表明,這3個基于分子系統發(fā)育信息分類的類群,與以下基于形態(tài)特征區(qū)分的類群完全吻合:X類群形態(tài)特征為中間細胞異色且頂端細胞附屬絲頂部不存在匙狀凸起,Y類群特征為中間細胞同色且頂端細胞附屬絲頂部存在匙狀凸起,Z類群特征為中間細胞同色且頂端細胞附屬絲頂部不存在匙狀凸起。本研究中引起“芽黃”紅瑞木潰瘍病的病菌在形態(tài)學特征上符合X類群特征:中間細胞異色,頂端附屬絲頂部不存在匙狀凸起。

圖2 基于GenBank數據庫的系統發(fā)育樹構建Fig.2 Phylogenetic tree based on the ITS sequences of the 15SH-W2 and other isolates from GenBank

2.3 藥劑防治試驗結果

2.3.1 室內藥劑篩選結果

表3結果表明,5種殺菌劑EC50值較接近,80%代森錳鋅可濕性粉劑的EC50值最低,為0.639 mg/L,25%嘧菌酯懸浮劑EC50值最高,為1.787 mg/L。

2.3.2 室外藥劑防治試驗結果

從表4室外防治試驗結果可知,第1次和第2次藥后調查,對照的病情指數分別為4.20和6.00,病害發(fā)生程度較輕。此時,25%丙環(huán)唑乳油和25%嘧菌酯懸浮劑均有較好的防治效果,第1次藥后防治效果分別達到95.24%和85.71%,第2次藥后分別達到90.00%和80.00%。但隨著病害的發(fā)展,第3次藥后調查,對照的病情指數達到17.40時,4種殺菌劑對病害的防治效果均小于50%。

表3 5種殺菌劑對‘芽黃’紅瑞木潰瘍病菌Pestalotiopsis sp.的室內毒力測定

表4 4種殺菌劑對‘芽黃’紅瑞木潰瘍病的田間防治效果

3 討論

擬盤多毛孢屬Pestalotiopsis由Steyaert[9]1949年建立,但多年以來Guba[10]、Sutton[7]、Nag Raj[11]等分類系統對基于形態(tài)特征進行的該屬及近似屬的分類一直存在爭議。近年來,根據Jeewon等[6]、韋繼光等[12]基于分子系統發(fā)育對該屬及近似屬的研究,表明Sutton[7]的分類方法比較接近基于分子系統發(fā)育學所得到的分類結果。目前認為穩(wěn)定的擬盤多毛孢屬Pestalotiopsis具有以下形態(tài)特征[8]:分生孢子具有多根頂端附屬絲,分生孢子 5個細胞, 頂端附屬絲不分支或非二叉分支。本研究中“芽黃”紅瑞木潰瘍病菌符合上述形態(tài)特征,因此將其鑒定為擬盤多毛孢屬Pestalotiopsissp.。

同時本研究采用rDNA-ITS序列分析并構建系統發(fā)育樹的方法對菌株15SH-W2進行了分子生物學鑒定。對rDNA-ITS片段在GenBank數據庫中的Blast同源比對結果表明菌株15SH-W2屬于擬盤多毛孢屬的一種,與形態(tài)學方法鑒定結果一致。但由于該屬內rDNA-ITS片段種間相似度較高,僅憑rDNA-ITS難以將此菌株鑒定到種一級分類單元。在系統進化樹中與菌株15SH-W2處于同一分支上有多個不同種類的擬盤多孢屬菌株,表明這些菌株間遺傳距離較近,同源性較高,相互之間難以區(qū)分。過去擬盤多毛孢屬種內鑒定多以分生孢子大小和寄主為依據,致使全世界已報道擬盤多毛孢屬內種多達241個,然而Jeewon等[6]、韋繼光等[12]結合分子系統發(fā)育的研究結果,認為寄主完全不能作為擬盤多毛孢種內分類的依據,分生孢子大小也只能作為種內分類的次要依據。因此,當前擬盤多毛孢內的分類未能建立一個比較完善的分類檢索體系, 仍然處于比較混亂的狀態(tài)[8],將擬盤多毛孢鑒定到具體的種較為困難。

擬盤多毛孢屬包含很多種植物病原真菌,同時,該屬也是木本植物上一類重要的內生真菌。本研究Blast比對結果表明,具有與15SH-W2序列相似性最高的菌株,如KF718252.1、KF718250.1、EF451804.1、KF718249.1、JX436803.1、EF451799.1等均被報道為內生真菌。韋繼光等[15]根據rDNA-ITS 序列建立的系統發(fā)育樹結果表明, 同一種擬盤多毛孢不論其為內生性或是病原性的,均可聚在系統發(fā)育樹的同一個分支下。本研究中,Blast比對結果顯示引起‘芽黃’紅瑞木潰瘍病的Pestalotiopsissp.與部分內生性菌株相似性較高。韋繼光等[15]認為某些擬盤多毛孢在不同(或相同)的植物中可以表現為內生狀態(tài)或病原狀態(tài), 內生擬盤多毛孢在一定條件下可以轉變?yōu)椴≡瓟M盤多毛孢,如茶擬盤多毛孢Pestalotiopsistheae是茶的病原真菌, 在金花茶枝葉和羅漢松枝上是內生真菌。因此,引起‘芽黃’紅瑞木潰瘍病的Pestalotiopsissp.是否在某些環(huán)境條件下,也可作為內生真菌存在于健康植株或其他植物中,也值得進一步研究。

紅瑞木潰瘍病在上海地區(qū)發(fā)生均較為普遍,造成植株部分枝條枯萎,甚至植株整株枯死。羅卿權等[16]對辰山植物園從國外引進的一種紅瑞木品種Cornusalba‘Sphaethii’上潰瘍病進行的病原菌鑒定結果表明,其由葡萄座腔菌Botryosphaeriadothidea引起。研究顯示,在美國,山茱萸屬植物Cornusspp.廣泛受到山茱萸炭疽病(dogwood anthracnose)的危害,其病原菌被鑒定為Disculadestractiva[17],除危害葉片外,其也會引起莖稈上的黑色壞死斑。本研究中,上海迪士尼樂園中的‘芽黃’紅瑞木由華北地區(qū)大量引種,引起其潰瘍病的病原菌被鑒定為Pestalotiopsissp.。因此,在上海已鑒定的引起紅瑞木潰瘍病的病原菌至少存在2種,但這2種病原菌均分離自較小的種植區(qū)域,且2個種植區(qū)域所種植的紅瑞木品種不同,引種來源地不同。因此在上海地區(qū)種植的紅瑞木上引起潰瘍病的主要病原菌是何種仍需進行大量的取樣和分離才能確定。

盡管室內藥劑篩選試驗中的幾種藥劑均對病原菌有不同程度的抑制作用,然而室外藥效試驗對該病害的防控不盡如人意。在發(fā)病初期,25%丙環(huán)唑乳油和25%嘧菌酯懸浮劑防治效果可達80%以上,但當病害發(fā)展后,供試4種殺菌劑對病害的防治效果均小于50%。本研究未能找到一種能夠有效控制該病害的殺菌劑。防治此病害應全面開展綜合治理措施,如修剪發(fā)病枝條,尤其是結合冬季修剪降低病原基數,合理配置,增加通風透光條件,結合在發(fā)病之前或發(fā)病初期進行藥劑預防或早期控制。

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(責任編輯：田 喆)

Pathogen identification and fungicide control of trunk canker ofCornusalba‘Bud’s Yellow’

Luo Qingquan1, Lu Guangliang1, Wang Feng1, Zhou Kun2, Liu Yajie2, Wu Shiying3, Ji Guohui3, Xu Ying1

(1. Shanghai Academy of Landscape Architecture Science and Planning, Shanghai 200232, China;2. Shanghai Shendi Garden Investment and Construction Co., Ltd., Shanghai 201205, China;3. Shanghai Pudong District Forest Station, Shanghai 201210, China)

Trunk canker is a severe disease ofCornusalba‘Bud’s Yellow’ in Shanghai. The causal pathogen was identified asPestalotiopsissp. through isolation, pathogenicity determination and morphological identification. Phylogenetic analysis based on the comparison of rDNA-ITS sequences showed that this pathogen belonged to the clade possessing versicolorous median cells, which was consistent with the morphological result. The half maximal effective concentrations (EC50) of five fungicides were 0.639-1.787 μg/mL. Field trials showed that the control efficacy of 25% propiconazole emulsifiable concentrate and 25% azoxystrobin suspension were above 80% in early stage of the disease, while the control efficacies of all the four fungicides were less than 50% in the following stage of disease development.

Cornusalba‘Bud’s Yellow’; trunk canker;Pestalotiopsissp.; sensitivity determination; field trial

2016-05-24

2016-07-28

上海市浦東新區(qū)環(huán)保市容局科研項目

S 763.7

A

10.3969/j.issn.0529-1542.2017.03.021

* 通信作者 E-mail: xuying20002@163.com