程少龍+王剛+益西措姆+羅潤波+周洪波+貢嘎+李家奎+索朗斯珠

摘要：為了解牛病毒性腹瀉在西藏牦牛群中的血清抗體分布情況， 2014-2016年期間先后從西藏不同地區(qū)采集牦牛血清920份，采用ELISA法進行血清抗體檢測。結(jié)果表明，西藏牦牛病毒性腹瀉血清抗體陽性率平均達到48.70%，其中林芝市為84.24%，那曲地區(qū)61.41%，山南地區(qū)48.91%，拉薩市44.02%，阿里地區(qū)23.91%，日喀則市21.74%，昌都地區(qū)13.04%，說明西藏各地區(qū)牦牛群中牛病毒性腹瀉病的血清抗體陽性現(xiàn)象均有分布，應(yīng)引起重視。

關(guān)鍵詞：牦牛；病毒性腹瀉；血清抗體

中圖分類號：S858.23 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：1007-273X（2017）05-0005-02

牛病毒性腹瀉?。˙VD）是由牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）引起的牛的一種傳染病，主要表現(xiàn)為急性黏膜病、腹瀉、免疫抑制、持續(xù)性感染與免疫耐受等，BVDV與羊邊界病病毒、豬瘟病毒同屬于黃病毒科瘟病毒屬[1，2]。該病毒在世界范圍內(nèi)廣泛傳播，主要危害牛、羊等反芻動物[3，4]。病牛和帶毒牛是該病主要的傳染源，病毒隨糞便排出后，可以經(jīng)過消化道和呼吸道傳染給健康牛。該病主要癥狀是消化道黏膜糜爛、潰瘍、脫落，病畜出現(xiàn)腹瀉，母畜出現(xiàn)流產(chǎn)、死胎等癥狀[5]，給養(yǎng)牛業(yè)帶來很大的危害。

牛病毒性腹瀉的流行給世界各國的畜牧業(yè)造成了嚴重的經(jīng)濟損失，每年死于該病的牛不少于500萬頭，由其持續(xù)感染造成的經(jīng)濟損失也嚴重阻礙了畜牧業(yè)的發(fā)展。隨著中國牦牛、肉牛和奶牛養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，牛病毒性腹瀉作為一個對全球養(yǎng)牛業(yè)危害較大的傳染病應(yīng)引起重視。牦牛作為西藏畜牧業(yè)主打產(chǎn)業(yè)，是西藏農(nóng)牧民衣食住行的主要來源，了解與掌握牛病毒性腹瀉在牦牛群中的感染情況和動態(tài)監(jiān)測十分必要。本研究團隊在2014-2016年對先后從拉薩、林芝、日喀則、山南、那曲、昌都、阿里等地區(qū)采集的牦牛血清920份，采用ELISA法檢測牛病毒性腹瀉在牦牛血清中的抗體情況，以期了解牛病毒性腹瀉在西藏牦牛群中的感染情況，為該病的防控提供參考[6，7]。

1 材料和方法

1.1 血清

牦牛血清920份，2014-2016年期間先后從西藏拉薩、林芝、日喀則、山南、那曲、昌都、阿里等地采集。

1.2 檢測試劑

牛病毒性腹瀉抗體酶聯(lián)免疫分析試劑盒（江蘇菲亞生物科技有限公司，批號：201609）。

1.3 實驗儀器

恒溫培養(yǎng)箱（上海三發(fā)科學(xué)儀器有限公司，型號為GNP-9050）、離心機、自動酶標(biāo)儀（深圳雷杜生命科技有限公司，型號為Rayto RT-6100）、超純水（Millpore公司，型號為ELIX10）、振蕩機等。

1.4 試驗方法

按照試劑盒說明書進行。

2 結(jié)果與分析

由表1可見，西藏各地區(qū)牦牛病毒性腹瀉血清抗體陽性率平均達到48.70%，其中林芝市陽性率為84.24%、那曲地區(qū)61.41%、山南地區(qū)48.91%、拉薩市44.02%、阿里地區(qū)23.91%、日喀則市21.74%、昌都地區(qū)13.04%。

3 討論

（1）根據(jù)血清抗體檢測結(jié)果顯示，西藏牦牛病毒性腹瀉血清抗體陽性率平均達到48.70%，其中林芝市陽性率為84.24%、那曲地區(qū)61.41%、山南地區(qū)48.91%、拉薩市44.02%、阿里地區(qū)23.91%、日喀則市21.74%、昌都地區(qū)13.04%，從全區(qū)檢測情況看，不同地區(qū)存在一定的差異，在養(yǎng)殖密度大的林芝市陽性率較高，而在養(yǎng)殖密度低的昌都、日喀則、阿里等地區(qū)陽性率普遍偏低。

（2）鄭志剛等[8]1980-1990年10年間進行牛的血清學(xué)調(diào)查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)全國牛病毒性腹瀉黏膜病的平均感染率為19.15%，其中牦牛平均感染率為27%。我國高原牛群中牛病毒性腹瀉黏膜病流行情況如下：2010-2012年，有學(xué)者對青海省散養(yǎng)牛和規(guī)模化養(yǎng)殖牛進行了BVDV的抗體檢測，共檢測了842份血清，結(jié)果顯示平均陽性率為21.14%[9]。另有學(xué)者對青海省5個縣進行了BVDV抗體檢測，共檢測了492份血清，平均陽性率為49.59%，數(shù)據(jù)同時顯示了牦牛的陽性率較黃牛高[10]。本次檢測西藏牦牛病毒性腹瀉血清抗體陽性率平均達到48.70%，且西藏各地區(qū)牦牛群中均有病毒性腹瀉黏膜病的血清抗體陽性情況，應(yīng)引起重視。

（3）牛病毒性腹瀉黏膜病感染率高的原因分析。首先，牛病毒性腹瀉黏膜病病毒基因分為BVDV-1和BVDV-2兩個基因型，其亞型眾多，到2014年，BVDV-1可分為18個基因亞型[11]；而根據(jù)2016年最新報道，BVDV-1型可分為21個亞型[12-14]。由此可見病毒的突變和進化速度較快[15]。各亞型之間獨立差異較大，并且存在著遺傳和抗原性的異質(zhì)性。其次PI牛是BVDV在流行病學(xué)上一個重要的流行特點，PI牛的體液、精液以及分泌物中都帶有BVDV，并且不斷地向外界環(huán)境排毒。第三，BVDV易感動物較多，例如牛、鹿、綿羊、豬、雙峰駱駝等均能夠感染BVDV，這些感染動物成為BVDV的儲存宿主或者新的傳染源。另外，牛病毒性腹瀉血清抗體陽性率高的原因是因為牛被野毒感染還是因為使用了其他具有交叉免疫的疫苗而產(chǎn)生了相應(yīng)的抗體，有待于進一步調(diào)查與研究。

（4）牛病毒性腹瀉黏膜病是危害養(yǎng)牛業(yè)重要的疫病，目前牛發(fā)生牛病毒性腹瀉黏膜病無特效藥，該病因地理、生態(tài)環(huán)境、機體內(nèi)環(huán)境（如易感性、免疫力等）、氣候和季節(jié)因素的變化而產(chǎn)生變異，引起疾病的臨床癥狀和致病機理較為復(fù)雜[16，17]。目前控制該病的方法主要是加強飼養(yǎng)管理和疫苗免疫，一旦發(fā)現(xiàn)牛感染該病應(yīng)該立即隔離，對病死牛應(yīng)做好消毒處理，防止病原擴散。

參考文獻：

[1] 殷 震，劉景華.動物病毒學(xué)[M].北京：科學(xué)出版社，1997.645-652.

[2] 張麗穎，劉 暢，鮑勇華，等.牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）抗原捕獲ELISA檢測方法的建立[J].畜牧與獸醫(yī)，2009，41（8）：13-19.

[3] DUFF SJ，HARKENESS J W.Bovine virus diarrhea-mucosal disease infection in cattle[J].Vel Rec，1985，117：240-245.

[4] 黃 新，鐘發(fā)剛，王新華.牛病毒性腹瀉-粘膜病流行現(xiàn)狀及防制研究進展[J].草食家畜，2009（4）：15-17.

[5] 劉亞剛，劉娣琴，楊曉農(nóng)，等.四川省部分牛病毒性腹瀉粘膜病血清中和抗體檢測[J].四川動物，2009，23（8）：435-436.

[6] 張艷麗.犢牛流行性腹瀉的調(diào)查及防制措施[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘，2013（29）：83-84.

[7] 傅小平，呂潤全.牛病毒性腹瀉病的流行性研究和防控性初探[J].中國奶牛，2011（8）：39-42.

[8] 鄭志剛，劉佩蘭，鄭蹭忍，等.關(guān)于牛病毒性腹瀉粘膜病血清中和抗體的調(diào)查報告[J].動物檢疫，1991（5）：40-42.

[9] 沙金明，卡卓措，汪正順.青海省黃南州牛群3種病毒性腹瀉疾病的血清學(xué)調(diào)查[J].畜牧與醫(yī)，2014，46（10）：94-96.

[10] 董永森，劉秀清，李煥榮，等.青海省牛病毒性腹瀉黏膜病血清學(xué)調(diào)查[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2014（4）：66-67.

[11] YESILBAG K，F(xiàn)ORSTER C，OZYIGIT M O，et al.Characterisation of bovine viral diarrhoea virus（BVDV） isolates from an outbreak with haemorrha gic enteritis and severe pneumonia[J].Veterinary microbiology，2014，169（1-2）：42-49.

[12] DENG M，JI S，F(xiàn)EI W，et al.Prevalence study and genetic typing of bovine viral diarrhea virus（BVDV） in four bovine species in China[J].Plos one，2015，10（4）：1-16.

[13] XUE F，ZHU YM，LI J，et al.Genotyping of bovine viral diarrhea viruses from cattle in China between 2005 and 2008[J].Veterinary microbiology，2010，143（2-4）：379-383.

[14] CAI D J，SONG Q J，WANG J F，et al.Genomic characterization of three bovine viral diarrhea virus isolates from cattle[J].Archives of virology，2016，161（12）：3589-3592.

[15] FLORES E F，RIDPATH J F，WEIBLEN R，et al.Phylogenetic analysis of Brazilian bovine viral diarrhea virus type 2 （BVDV-2） isolates：evidence for a subgenotype within BVDV-2[J].Virus Res，2002，87：51-60

[16] 趙月蘭，左玉柱，范京惠，等.牛病毒性腹瀉/粘膜病病毒河北分離株的生物學(xué)特性[J].中國農(nóng)學(xué)通報，2006，22（12）：1-5.

[17] 韓 鵬，劉亞剛，華 莎，等.我國牛病毒性腹瀉—粘膜病的流行及防制狀況[J].畜禽業(yè)2003（11）：8-10.