趙妍　周芳

摘要：以安鑫寶WT-51農殘速測儀為例闡述了農藥殘留快速檢測儀器的原理、特點、分類、方法，分析步驟及應用等。探討了農藥殘留快速檢測儀器的各通道的一致性和結果的準確性，以及環(huán)境溫度對檢測的影響。

關鍵詞：農藥殘留快速檢測儀器；酶抑制法； 重復性；溫度

中圖分類號：S48

文獻標識碼：A 文章編號：16749944（2017）10008603

1 引言

近年來，食品安全問題不斷出現(xiàn)，已成為人們日常生活中最關注的話題之一[1]。而農產品中水果、蔬菜中農藥殘留超標問題是影響食品安全的重要因素之一，引起了政府、公眾和新聞媒介的高度關注。目前，國家推薦的農殘檢測方法為氣相色譜法、液相色譜法、氣相色譜一質譜法、液相色譜一質譜法等[2]。但由于上述檢測方法對檢驗地點、檢測人員技術有較高的要求因此還不能夠在基層全面推廣[3]。而便攜式新型農藥殘留快速檢測儀是利用酶抑制法對蔬菜、水果等農藥殘留快速檢測的一種檢測儀器。它即不需要在實驗室操作，不需要專業(yè)的檢測技術人員，操作時間短（只需30 min左右），成本低[4]，因此，農藥殘留快速檢測儀在檢測水果、蔬菜農藥殘留方面得到廣泛應用，是保障農產品質量安全的有力武器。

2 農藥殘留快速檢測儀的及分類、原理及特點

2.1 農藥殘留快速檢測儀的分類

根據(jù)檢測用試劑的不同，市場上銷售和使用的農藥殘留快速檢測儀器可以分為兩大類[5]：速測法目測法（紙片法）儀器； 酶抑制率測定法（分光光度法）儀器。

2.2 農藥殘留快速檢測方法—— 酶抑制率法

酶抑制法速測原理（GB/T5009.199-2003）：在一定條件下， 有機磷和氨基甲酸酯類農藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用， 其抑制率與農藥的濃度呈正相關[6]。正常情況下， 酶催化神經傳導代謝產物（乙酰膽堿）水解， 其水解產物與顯色劑反應， 產生黃色物質， 用分光光度計在412 nm處測定吸光度瞬時間的變化值，計算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農藥的存在[7]。向農藥提取物中加入乙酰膽堿酯酶（AchE）、底物（硫代乙酰膽堿，ATCh）和顯色液（二硫代二硝基苯甲酸，DTNB），根據(jù)反應曲線即可判斷樣品中有機磷和氨基甲酸酯類農藥的殘留量。其反應式為：

ATCh AchE→膽堿+乙酸

膽堿十DTNB→黃色化合物

從反應式可以看出，農藥殘留越多，乙酰膽堿酯酶被抑制程度越大（抑制率大），最終顯色反應的化合物越少，顏色淺。反之，生成的黃色化合物越多，顏色深。酶在整個反應中起到關鍵作用。動物乙酰膽堿酯酶與有機磷和氨基甲酸酯類農藥的特異性反應最強，靈敏度高，干擾小，動物的丁酰膽堿酯酶與植物來源的植物酯酶來源廣、價格便宜，但靈敏度低、易受干擾[8]。

2.3 農藥殘留快速檢測儀特點

農藥殘留快速檢測儀旨在快速、準確、便捷地檢測出水果蔬菜中的殘留農藥，在實際操作中它有如下特點：

①該方法具有快速方便、前處理簡單、成本較低等優(yōu)點；

②不受測量地點、環(huán)境的影響；對有農藥殘留的蔬菜進行粗篩，避免因農藥殘留發(fā)生中毒事件；

③不局限于實驗室內，應適用于戶外工作，適用于現(xiàn)場定性測定，特別適合在蔬菜生產基地、批發(fā)市場及農產品檢測部門開展快速檢測工作；

④儀器結構模塊化、操作簡單，非專業(yè)人員也可操作[9]；

⑤存在檢測盲區(qū)，只能檢測有機磷和氨基甲酸酯兩類農藥，不能檢測有機氯類、菊酯和其他類別的農藥（在我國農藥中，70%為有機磷農藥）。

⑥不適合檢測蔥蒜類、香菜、韭菜、番茄、胡蘿卜、茭白、蘑菇、花椒等 14 種容易出現(xiàn)假陽性的農產品。

3 檢測儀的分析步驟

3.1 儀器

安鑫寶WT-51農殘速測儀。

3.2 試劑

（1）提取液。將提取液固體試劑全部倒入510 mL塑料瓶中，然后加入510 mL蒸餾水（或純凈水）使之溶解并搖勻即可使用。

（2）酶。將裝有酶的試劑瓶中加入3.1 mL的提取液，蓋緊瓶蓋，搖動使之充分溶解混勻即可使用（不可劇烈搖動）。

（3）顯色劑。將裝有底物的試劑瓶中加入31 mL的提取液，蓋緊瓶蓋，搖動使之充分溶解混勻即可使用。

（4）底物。將裝有底物的試劑瓶中加入3.1 mL的蒸餾水（純凈水），蓋緊瓶蓋，搖動使之充分溶解混勻即可使用。

3.3 操作流程

以安鑫寶WT-51農殘速測儀為例分析。農藥殘留檢測儀的分析步驟見圖1。

圖1 農藥殘留檢測儀的分析步驟

3.4 農藥殘留快速檢測技術關鍵點

3.4.1 采樣要求

采樣是指在大量產品分析對象中抽取有一定代表性的樣品，供分析化驗用新鮮水果和蔬菜等樣品的采集，無論進行現(xiàn)場常規(guī)鑒定還是送實驗室做品質鑒定，一般要求 隨機）取樣[10]。

3.4.2 采樣原則

代表性 、真實性、準確性、及時性。

3.4.3 采樣方法

對角線法、棋盤式法、梅花點法（5點抽樣法）、蛇形（S型）采樣法等。一般按對角線和5點抽樣法取樣。

3.4.4 取樣數(shù)量

樣本做定性分析時至少取樣0.5～1 kg；做定量分析時取樣至少2 kg左右。

3.4.5 采集對象

基地：上市前的蔬菜（待售的蔬菜）；

市場：準備上市售賣的蔬菜

3.4.6 采樣注意事項

（1）一切采樣工具、容器、塑料袋、包裝紙等，都應保持清潔、干燥、無異味、無污染。

（2）采樣后，對每件樣品都要做好詳細記錄，貼上標簽。

（3）新鮮樣品采集后，應立即裝入聚乙烯塑料袋，扎緊袋口，以防止水份蒸發(fā)。

（4）生鮮、易腐的樣品在采集后4h內迅速送到實驗室及時進行分析或處理，應盡量避免樣品在分析前發(fā)生變化[10]。

3.4.7 酶的要求

（1）膽堿酯酶溶解后可短期冷藏保存，保質期7 d；也可冷凍保存保質期1個月，但反復凍融不可超過3次。

（2）以3 min后與3 min 前空白吸光值的差值即△Ac在0.4～0.8之間為佳（國標為0.3以上）[11]。

（3）如果空白△Ac低線以下，可適當加大酶的加入量，或增加反應時間（注意：對照與樣品測量時間保持一致）。

3.4.8 其他試劑

（1）儲存于冷藏室中。底物、顯色劑溶解后需冷藏保存，保質期1個月；也可冷凍長時間保存，保質期1年。

（2）操作過程中避免交叉污染，觀察試劑是否變色，是否有絮狀物。

（3）試劑從冰箱取出，先恢復至室溫，搖勻后再使用[12]。

3.5 試驗結果

結果計算其公式為：

抑制率（%）=（△Ac-△AS）/△Ac（1）

式（1）中△Ac為參照檢測液吸光度值隨時間的變化曲線的斜率；

△AS為樣品檢測液吸光度值隨時間的變化曲線的斜率、結果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。

抑制率≥50 %時，至少2次以上重復檢測，蔬菜中肯定存在有機磷或氨基甲酸酯類藥殘留，樣品為陽性，用其他方法確認含量[13]。

3.5.1 結果一致性

農藥殘留快速檢測儀通道一致性，考察了安鑫寶WT-51農殘速測儀為例對2樣品在各通道的一致性，結果如表1所示。

3.5.2 溫度影響

考察溫度對安鑫寶WT-51農殘速測儀的影響，用同一樣品在不同溫度下進行檢測結果如表2所示。由表2可知，最佳檢測溫度為20～25℃。冬季室外檢測溫度過低時，應提前打開機器進行預熱，或者適當增加反應時間，可延長至15 min（注意對照檢測與樣品檢測保持一致）。夏季操作時應打開空調，溫度過高易出現(xiàn)假陽性。

4 農藥殘留檢測儀的應用

農藥殘留快速檢測儀由于操作簡單、檢測速度快、適用于現(xiàn)場等特點，廣泛地應用于田間地頭、基地、農貿市場、超市、農產品質量安全監(jiān)測檢驗中心及食品藥品監(jiān)督局等執(zhí)法部門[14]。農藥殘留快速檢測儀可以配置于農產品安全檢測車，將實驗室轉移到現(xiàn)場實現(xiàn)流動檢測，達到農藥殘留的動態(tài)監(jiān)管的目的[15]。

5 結語

通過實際研究發(fā)現(xiàn)安鑫寶WT-51農殘速測儀為例的農藥殘留快速檢測儀器其檢測靈敏度、重復性。準確度符合酶抑制法速測原理（GB/T5009.199-2003）中所規(guī)定的技術指標。在實際操作中要注意溫度對其的影響因素，以便提高檢測的準確度。鑒于該儀器操作簡單，準確度較高、成本低等特點特別適合在基層監(jiān)管體系中推廣。

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