周能+周振

摘要：對(duì)皮革廠下腳料肉膜的脂肪、蛋白質(zhì)、重金屬和硫的含量進(jìn)行分析。結(jié)果表明，采用酸水解法測(cè)定肉膜中的脂肪含量為4%～5%；雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)的含量為1.5%左右；火焰原子吸收光譜法測(cè)定重金屬含量，鎘的含量為0.75 mg/kg，高于雞、豬配合飼料國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)值（0.5 mg/kg），其他重金屬含量符合配合飼料國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)值；重量法測(cè)定硫的含量約0.9%。

關(guān)鍵詞：肉膜下腳料；脂肪；蛋白質(zhì)；重金屬；硫；含量

中圖分類號(hào)：TS59 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2017）12-2337-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.12.034

Analysis of Nutrients and Heavy Metals in Meat Film Leftover from Leather Factory

ZHOU Neng，ZHOU Zhen

（Guangxi Key Laboratory for Agricultural Resources Chemistry and Efficient Utilization （Cultivation Base）/Colleges and Universities Key Laboratory for Efficient Use of Agricultural Resources in the Southeast of Guangxi/Guangxi Colleges and Universities Program of Innovative Research Team and Outstanding Talent/College of Chemistry and Food Science， Yulin Normal University， Yulin 537000， Guangxi， China）

Abstract： Fat， protein， heavy metals and sulfur content in meat film of leftover from leather factory were analyzed.The results showed the content of fat was 4%～5% by acid hydrolysis method； protein content was about 1.5% by biuret method；flame atomic absorption spectrometry was used to determine the content of heavy metal， cadmium content was 0.75 mg/kg， more than national standard （0.5 mg/kg） of compound feed for chickens and pigs， other heavy metal content in line with the national standard of compound feed； sulfur content was about 0.9% by gravimetric method.

Key words：meat film leftover； fat； protein； heavy metals； sulfur； content

肉膜是皮革加工過(guò)程產(chǎn)生的下腳料之一。規(guī)模化的皮革企業(yè)，如廣西玉林富英制革有限公司，按照年加工豬皮200萬(wàn)張算，產(chǎn)生肉膜下腳料達(dá)2 000～5 000 t。目前，下腳料被當(dāng)作垃圾丟棄，其運(yùn)輸、堆放甚是棘手，會(huì)造成較大的環(huán)境污染。傳統(tǒng)的鞣制工藝及加工過(guò)程中使用的鞣劑、染料、助劑，使皮革及其制品中含有一定量的鉛、鎘、鎳、鉻、銅等重金屬元素[1，2]。制革浸灰和脫毛是用大量的硫化鈉和硫氫化鈉[3]，可能會(huì)對(duì)下腳料造成硫的污染。肉膜中的蛋白質(zhì)和脂肪含量關(guān)系到其實(shí)際應(yīng)用。因此，本研究對(duì)皮革廠肉膜下腳料的蛋白質(zhì)、脂肪及重金屬和硫的含量進(jìn)行綜合分析研究，為皮革廠下腳料肉膜進(jìn)一步利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

TU-1901型雙光束紫外可見分光光度計(jì)、TAS-990F型原子吸收分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）；BS400S型電子天平（北京賽多利斯天平有限公司）；HTS-20型馬弗爐（上海艾測(cè)電子科技有限公司）；ZY68501、ZY52045移液槍（Thermo公司）。

改良雙縮脲試劑：4%硫酸銅溶液60 mL；8%氫氧化鉀溶液60 mL； 分別將酒石酸鉀鈉5 g和碘化鉀1 g，溶于20 mL去離子水中，加熱溶解，冷卻后再將3種溶液接液混合， 補(bǔ)去離子水定容至1 000 mL。

牛血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液（5 mg/mL）：準(zhǔn)確稱取牛血清蛋白0.125 0 g，用0.05 mol/L氫氧化鉀溶液配制，置于25 mL容量瓶中，冰箱存放備用。

重金屬儲(chǔ)備液：移取濃度為1 000 mg/L的鉛和鎳標(biāo)準(zhǔn)貯備液5.00 mL，濃度為10 mg/L的銅標(biāo)準(zhǔn)貯備液1.00 mL，濃度為100 mg/L的鉻和鎘標(biāo)準(zhǔn)貯備液1.00 mL，置于100 mL容量瓶中，1%HNO3溶液稀釋至刻度，搖勻。此時(shí)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液中5 種重金屬的濃度分別為鉛10 mg/L，鎳10 mg/L ，銅0.1 mg/L，鉻1 mg/L，鎘1 mg/L。

肉膜下腳料，取自廣西玉林富英制革有限公司；牛血清白蛋白（阿拉丁試劑）；試劑為分析純；水為去離子水。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 酸水解法測(cè)肉膜脂肪含量[4-6]

1）樣品處理。稱取肉膜2 g，置于50 mL試管，加8 mL水，混勻后再加10 mL鹽酸。

2）水解。將試管放入70～80 ℃水浴中，每5～10 min用玻璃棒攪拌1次，直至樣品脂肪游離消化完全為止，約需40～50 min。

3）提取。取出試管，加入10 mL乙醇，混合后移入100 mL具塞量筒中，用25 mL乙醚分次洗試管，一并倒入量筒中，待乙醚全部倒入量筒后，加塞振搖1 min，小心開塞放出氣體，靜置12 min，用石油醚-乙醚等量混合液沖洗塞及筒口附著的脂肪。再靜置10～20 min，待上部液體清晰，吸出上清液于已恒重的錐形瓶?jī)?nèi)，再加5 mL乙醚于具塞量筒內(nèi)，振搖，靜置后，仍將上層乙醚吸出，放入原錐形瓶?jī)?nèi)。

4）稱重。將錐形瓶于水浴上蒸干后，置100～105 ℃烘箱中干燥2 h，取出放入干燥器內(nèi)冷卻30 min后稱重，并重復(fù)以上操作至恒重。

1.2.2 雙縮脲法測(cè)蛋白質(zhì)含量[7]

1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL 5 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)蛋白液濃度為各稀釋至3 mL，加入1.5 mL堿性硫酸銅混勻，以去離子水為參比液，放置相應(yīng)時(shí)間，在550 nm處測(cè)定各溶液的吸光度。

2）肉膜樣處理。將肉膜制成肉糜，稱取肉糜2 g置于有塞試管中，加8%氫氧化鉀溶液10 mL，水浴煮沸約10 min，使肉樣水解，經(jīng)高速離心機(jī)離心沉降沉淀物后，取上清液，轉(zhuǎn)移至25 mL容量瓶中，以去離子水定容至刻度，待測(cè)。

1.2.3 硫的測(cè)定[8] 稱取樣品1.000 0～2.000 0 g于100 mL硬質(zhì)玻璃燒杯中，加入10 mL硝酸鎂溶液混勻，于電爐上（低于180 ℃）小心加熱碳化，再于馬福爐中500 ℃下灰化2 h，使樣品完全氧化后，取出冷卻。然后加去離子水潤(rùn)濕氧化產(chǎn)物，緩慢滴入10 mL濃鹽酸，煮沸，攪拌下滴入10 mL 10%氯化鋇熱溶液，繼續(xù)煮沸5 min，待BaSO4沉淀下沉后，于上層清夜中加入1～2滴0.1 mol/L BaCl2溶液，沉淀完全后，蓋上表面皿，靜置過(guò)夜。利用慢速定量濾紙，傾瀉法過(guò)濾，熱去離子水洗至無(wú)Cl-存在，用定量慢速濾紙加少許紙漿過(guò)濾，沉淀用氯化鋇-鹽酸洗滌，再用溫水洗滌沉淀至濾液無(wú)氯離子。沉淀移入已于800 ℃下恒重的瓷柑渦中，碳化后于馬福爐中800 ℃灼燒1 h，取出，在空氣中冷卻1 min，干燥中冷卻30 min。同樣條件下再灼燒30 min，冷卻、稱重，兩次稱重之差不超過(guò)0.001 g。

1.2.4 重金屬測(cè)定[9] 干法灰化。取每份肉膜100 g用剪刀剪碎，混勻，晾干。在常溫下稱取10 g放入干燥好的坩堝中，先小火在可調(diào)式電熱板上灰化至無(wú)煙，移入馬福爐500 ℃灰化7 h（若個(gè)別樣灰化不完全則加1 mL混酸在可調(diào)式電熱板上加熱，反復(fù)多次，直到完全），冷卻后用0.5 mol/L硝酸將灰分溶解。用滴定管將試樣硝化液洗入50 mL容量瓶，用水少量多次洗滌坩堝，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混勻備用，同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 肉膜的脂肪含量

3份肉膜的脂肪平均含量為4.6%，RSD為0.71%，該下腳料的脂肪含量已經(jīng)非常低，若作為脂肪來(lái)源物，其價(jià)值不大。

2.2 肉膜蛋白質(zhì)含量

以蛋白質(zhì)濃度（c）對(duì)吸光度（A）進(jìn)行線性回歸，得到蛋白質(zhì)含量測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線，A=0.073 9+0.133c，相關(guān)系數(shù)r=0.996 5。取3份肉膜樣品，按照上述方法處理并測(cè)定，蛋白質(zhì)平均含量為1.58%，RSD為2.4%。

2.3 重金屬測(cè)定

分別準(zhǔn)確移取0、1.00、2.00、3.00 mL重金屬標(biāo)準(zhǔn)混合溶液于25 mL容量瓶中，用1% HNO3溶液定容，用火焰原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定溶液吸光度，進(jìn)行線性回歸，標(biāo)準(zhǔn)曲線如表1所示。對(duì)3份肉膜樣品進(jìn)行測(cè)定，扣除空白值，肉膜重金屬含量結(jié)果見表2。

3 小結(jié)與討論

肉膜中的脂肪含量為4%～5%，蛋白質(zhì)含量為1.5%，具有一定的應(yīng)用價(jià)值。重金屬鎘的含量為0.75 mg/kg，高于雞、豬配合飼料國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（0.50 mg/kg），其他重金屬含量均符合配合飼料國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)值，如果在飼料中添加量不超過(guò)80%，飼料重金屬含量可以控制在國(guó)標(biāo)范圍之內(nèi)；硫的含量約0.9%，與正常豬肉硫含量相差不大。根據(jù)皮革廠廢料實(shí)際產(chǎn)生及堆積情況，如果在生產(chǎn)中注意避免混進(jìn)較多無(wú)機(jī)雜質(zhì)，肉膜經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單處理后送飼料加工企業(yè)可以作為普通飼料成分。也可以基于其以有機(jī)質(zhì)為主，選擇適當(dāng)微生物發(fā)酵后作為有機(jī)肥料，或者添加乳桿菌如Lactobacillus reuteri，在酵解肉膜作為飼料的同時(shí)也作為豬用益生菌，起到預(yù)防腹瀉、緩解壓力及免疫調(diào)節(jié)等作用[10]。

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