張 靜 陶志國 許保海

(1 北京積水潭醫(yī)院中藥房,北京,100035; 2 北京市藥品檢驗所,北京,102206)

金匱腎氣丸輔助治療對支氣管哮喘緩解期患者免疫功能的影響

張 靜1陶志國2許保海1

(1 北京積水潭醫(yī)院中藥房,北京,100035; 2 北京市藥品檢驗所,北京,102206)

目的:探討金匱腎氣丸輔助治療對支氣管哮喘緩解期患者免疫功能的影響。方法:選取2013年7月至2016年4月在北京積水潭醫(yī)院接受治療的支氣管哮喘緩解期患者110例,回顧治療方案并分為接受單純西醫(yī)治療的對照組58例、接受金匱腎氣丸輔助西醫(yī)治療的觀察組52例。治療前后,比較2組患者的外周血Th17/Treg細(xì)胞比例,血清中Th1/Th2細(xì)胞因子及體液免疫指標(biāo)含量的差異。結(jié)果:治療前,2組患者外周血中Th17/Treg細(xì)胞比例,血清中Th1/Th2細(xì)胞因子及體液免疫指標(biāo)含量的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療后,觀察組患者外周血中Th17細(xì)胞比例、Th17/Treg比值低于對照組患者,Treg細(xì)胞比例高于對照組患者;血清中白細(xì)胞介素-2(IL-2)、干擾素γ(IFN-γ)的含量高于對照組患者,白細(xì)胞介素-4(IL-4)、白細(xì)胞介素-5(IL-5)的含量低于對照組患者;血清中體液免疫指標(biāo)免疫球蛋白E(IgE)、補體C3的含量低于對照組患者(P<0.05)。結(jié)論:金匱腎氣丸輔助治療可優(yōu)化成人支氣管哮喘緩解期患者的細(xì)胞免疫、體液免疫功能,具有積極的臨床意義。

支氣管哮喘緩解期;金匱腎氣丸;免疫功能

支氣管哮喘是臨床最常見的呼吸系統(tǒng)疾患之一,由多種炎性反應(yīng)細(xì)胞及免疫細(xì)胞共同參與病情進展,緩解期患者臨床癥狀體征均消失,但仍存在急性發(fā)作風(fēng)險,需積極維持患者的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)[1-2]。目前西醫(yī)治療緩解期支氣管哮喘效果肯定但存在局限性,中醫(yī)學(xué)對哮喘的認(rèn)識已有數(shù)千年歷史,較多學(xué)者推薦加入中醫(yī)制劑治療以擴大療效?！拔窗l(fā)以扶正氣為主,既發(fā)以攻邪氣為急”是目前中醫(yī)治療支氣管哮喘的原則,既往研究證實補腎法可較好控制患者氣道炎性反應(yīng)[3]。金匱腎氣丸是具有溫補腎陽,化氣行水作用的中成藥,適用于臨床支氣管哮喘患者的治療[4]。本次研究在常規(guī)西醫(yī)治療基礎(chǔ)上,將金匱腎氣丸作為輔助用藥加入臨床成人支氣管哮喘緩解期患者的治療,探討聯(lián)合治療對患者細(xì)胞免疫、體液免疫等影響,現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年7月至2016年4月在北京積水潭醫(yī)院接受治療的支氣管哮喘緩解期患者110例,回顧治療過程,將患者分為:接受單純西醫(yī)治療的對照組58例;接受金匱腎氣丸輔助西醫(yī)治療的觀察組52例。對照組患者中男30例,女28例,年齡22～48歲,平均年齡(32.47±9.26)歲,哮喘病程9～23年,平均病程(15.38±5.23)年;觀察組患者中男27例,女25例,年齡19～49歲,平均年齡(31.53±9.87)歲,哮喘病程8～21年,平均病程(14.95±5.09)年。2組患者的性別、年齡、哮喘病程等方面比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。醫(yī)院倫理委員會討論、批準(zhǔn)此次研究,所有患者本人了解研究過程并簽署知情同意書。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 1)經(jīng)過治療或者未經(jīng)治療,患者的哮喘癥狀體征消失;2)肺功能檢查各項指標(biāo)恢復(fù)至急性發(fā)作前水平;3)上述病情穩(wěn)定持續(xù)時間≥3個月。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn) 1)年齡≥18周歲;2)既往未接受中醫(yī)治療;3)全程配合治療及相關(guān)檢查。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn) 1)合并急慢性鼻竇炎、慢性阻塞性肺疾病、急性肺炎等其他上下呼吸道疾患;2)合并嚴(yán)重自身免疫性疾病;3)合并全身感染性疾病;4)合并嚴(yán)重心肝腎功能不全。

1.5 治療方法 對照組患者接受成人支氣管哮喘緩解期常規(guī)抗炎、解痙治療。觀察組在常規(guī)西醫(yī)治療基礎(chǔ)上,加入金匱腎氣丸輔助治療,具體如下:熟地黃20 g、山藥15 g、黃芪15 g、山茱萸15 g、澤瀉10 g、茯苓10 g、半夏10 g,沉香8 g、肉桂8 g、五味子8 g,加水300 mL煎煮共取汁200 mL,口服100 mL/次,2次/d,持續(xù)治療3個月。

1.6 觀察指標(biāo) 對2組患者治療前、治療后免疫功能進行觀察比較,均抽取2組患者的晨起空腹肘靜脈血3.0 mL,經(jīng)枸櫞酸鈉(四川南格爾生物科技有限公司生產(chǎn),國藥準(zhǔn)字H20058912)抗凝處理。其中1.0 mL直接采用流式細(xì)胞儀(美國Merck Millipore公司,型號guava easyCyte 8)測定其中Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞比例,計算Th17/Treg比值。另2.0 mL經(jīng)2 500 r/min離心10 min取上層血清,低溫離心機購自孚光精儀(中國)有限公司,貨號為MAH66Q,血清凍存于-70 ℃深低溫環(huán)境下備用。采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清中Th1細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-2(IL-2)、干擾素γ(IFN-γ),Th2細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-4(IL-4)、白細(xì)胞介素-5(IL-5)的含量,酶聯(lián)免疫試劑盒購自美國Roche公司,貨號分別為MDJ-397、LSK-254、MSY-635、AGS-981。采用全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(美國貝克曼庫爾特公司,型號UniCel DxI800)測定血清中體液免疫指標(biāo)免疫球蛋白E(IgE)、補體C3的含量。

2 結(jié)果

2.1 Th17/Treg細(xì)胞 治療前,2組患者外周血中Th17、Treg細(xì)胞比例,Th17/Treg比值水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療后,2組患者外周血中Th17細(xì)胞比例、Th17/Treg比值低于治療前,Treg細(xì)胞比例高于治療前,且觀察組患者的上述指標(biāo)變化程度大于對照組患者,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.2 Th1/Th2細(xì)胞因子 治療前,2組患者血清中Th1細(xì)胞因子IL-2、IFN-γ,Th2細(xì)胞因子IL-4、IL-5含量的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療后,2組患者血清中IL-2、IFN-γ的含量高于治療前,IL-4、IL-5的含量低于治療前,且觀察組患者的上述指標(biāo)變化程度大于對照組患者,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

2.3 體液免疫 治療前,2組患者血清中體液免疫指標(biāo)IgE、C3含量的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療后,2組患者血清中IgE、C3的含量低于治療前,且觀察組患者的上述指標(biāo)變化程度大于對照組患者,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表1 2組治療前后外周血中Th17/Treg細(xì)胞比例

注：與組內(nèi)治療前比較,*P<0.05;與對照組治療后比較,△P<0.05。

表2 2組治療前后血清中Th1/Th2細(xì)胞因子含量的比較±s)

注：與組內(nèi)治療前比較,*P<0.05;與對照組治療后比較,△P<0.05。

表3 2組治療前后血清中體液免疫指標(biāo)含量的比較±s)

注：與組內(nèi)治療前比較,*P<0.05;與對照組治療后比較,△P<0.05。

3 討論

支氣管哮喘屬于中醫(yī)“喘病”“喘證”范疇,病機在臟腑功能失調(diào)、宿痰伏肺。遇感邪引觸致痰阻氣道、肺失肅降。根據(jù)“緩則治本”,緩解期是支氣管哮喘患者治療的最佳時期,需采取積極的治療手段調(diào)節(jié)機體內(nèi)環(huán)境平衡、抑制哮喘急性發(fā)作[5]。中西醫(yī)結(jié)合治療是目前緩解期支氣管哮喘治療的趨勢,在常規(guī)西醫(yī)治療的基礎(chǔ)上加入針對性中藥制劑以均衡臟腑功能,發(fā)揮扶正治本的作用。腎是先天之本、藏主納氣,腎精虧損則導(dǎo)致攝納無權(quán)、動則氣促,故補腎制劑是緩解期支氣管哮喘治療的可靠方式[6]。金匱腎氣丸是由地黃、山藥、茯苓、牡丹皮、山茱萸、牛膝、澤瀉等多味中藥制成的綜合制劑,諸多研究證實該藥具有溫補腎陽,化氣行水的作用,故本次研究將其作為輔助用藥用于成人支氣管哮喘緩解期的治療。

支氣管哮喘發(fā)病機制復(fù)雜,經(jīng)典理論認(rèn)為T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫失衡在其發(fā)生發(fā)展中扮演重要角色。研究證實系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾患中均存在Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞及其代表性細(xì)胞因子比例失衡,是疾病進展的重要原因之一[7-8]。Th17細(xì)胞通過分泌IL-17進而誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞在氣管局部的聚集、增加氣道高反應(yīng)性,是哮喘患者氣道慢性炎性反應(yīng)發(fā)生發(fā)展的核心機制之一。Treg細(xì)胞負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)T細(xì)胞活化,避免機體因過度免疫而造成損傷,對機體免疫功能具有負(fù)調(diào)節(jié)作用,且目前較多研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在哮喘重癥患者中存在Treg細(xì)胞數(shù)量及功能抑制[9-10]。本次研究首先檢測2組患者外周血中Th17/Treg細(xì)胞比例,發(fā)現(xiàn):2組患者治療后外周血中Th17細(xì)胞比例均下降,Treg細(xì)胞比例均上升,且Th17/Treg比值下降,說明2種治療方案均可優(yōu)化Th17/Treg細(xì)胞免疫。同時,觀察組患者治療后Th17細(xì)胞比例較對照組低,Treg細(xì)胞比例較對照組高,且Th17/Treg比值較對照組下降,證實金匱腎氣丸輔助治療有助于抑制過度的細(xì)胞免疫,且減輕由此產(chǎn)生的機體損傷。

Th1/Th2細(xì)胞免疫失衡已經(jīng)是支氣管哮喘的公認(rèn)發(fā)病機制,生理狀態(tài)下機體處于Th1細(xì)胞優(yōu)勢狀態(tài),而在動物實驗中證實:哮喘大鼠循環(huán)血中Th1細(xì)胞及其細(xì)胞因子的效應(yīng)減弱,Th2細(xì)胞及其因子的效應(yīng)增強,Th1/Th2的極化出現(xiàn)偏移,故檢測患者的Th1/Th2失衡狀態(tài)是判斷哮喘病情、評估臨床治療效果的可靠手段[11-13]。IL-2、IFN-γ是由Th1細(xì)胞分泌的因子,IL-4、IL-5則由Th2細(xì)胞分泌,本次研究比較2組患者血清中上述細(xì)胞因子含量的差異,發(fā)現(xiàn):2組患者治療后Th1細(xì)胞因子含量均較治療前增加,Th2細(xì)胞因子含量較治療前下降,且觀察組患者血清中上述細(xì)胞因子含量的改變幅度更大,說明加入金匱腎氣丸輔助治療可更為有效的逆轉(zhuǎn)支氣管哮喘緩解期患者的Th1/Th2失衡,有助于患者免疫均衡狀態(tài)的實現(xiàn)。

體液免疫失衡也參與支氣管哮喘的進展,既往研究證實哮喘患者普遍存在IgE含量增加,IgE與致敏原結(jié)合后刺激肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞釋放組胺,從而引發(fā)過敏反應(yīng)及哮喘急性發(fā)作[14-15]。補體系統(tǒng)的異常激活是支氣管哮喘氣道炎性反應(yīng)發(fā)生的另一重要原因,補體C3被裂解為過敏毒素C3a后,可發(fā)揮強效促炎作用,通過激活肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞而引起氣道平滑肌收縮[16]。本次研究比較2組患者的血清IgE、C3含量,發(fā)現(xiàn):2組患者治療后IgE、C3的含量均低于治療前,且觀察組患者IgE、C3的含量較對照組低,說明金匱腎氣丸輔助治療可進一步降低體液免疫系統(tǒng)中IgE、C3的異常激活,并減輕由此產(chǎn)生的氣道炎性反應(yīng)、緩解哮喘病情并抑制其急性發(fā)作,這也是金匱腎氣丸發(fā)揮支氣管哮喘治療的重要機制之一。

綜上所述,得出以下結(jié)論:金匱腎氣丸輔助治療可有效優(yōu)化支氣管哮喘緩解期患者的細(xì)胞免疫及體液免疫功能,有助于病情優(yōu)化及急性發(fā)作的抑制,是一種高效可行的全新治療方案,值得在日后臨床實踐中推廣應(yīng)用。

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(2017-05-22收稿 責(zé)任編輯：王明)

Influence of Jinkuishenqiwan Adjuvant Therapy on Immune Function in Adult Bronchial Asthma in Remission Stage Patients

Zhang Jing1,Tao Zhiguo2,Xu Baohai1

(1BeijingJishuitanHospitalTCMPharmacy,Beijing100035,China; 2TheDrugInspectionofBeijing,Beijing102206,China)

Objective:To study the influence of Jinkuishenqiwan adjuvant therapy on immune function in adult bronchial asthma in remission stage patients.Methods:One hundred and ten cases of adult bronchial asthma in remission stage patients in our hospital during July 2013 to April 2016 were chosen as research subject,treatment methods were reviewed and all patients were divided into control group(n=58)underwent normal western medicine treatment only,observation group(n=52)underwent Jinkuishenqiwan adjuvant therapy plus normal western medicine treatment.Before and after treatment,peripheral blood Th17/Treg cell ratio,serum Th1/Th2 cytokines and humoral immune indexes between two groups were compared.Results:Before treatment,there were no significant difference between two groups about peripheral blood Th17/Treg cell ratio,serum Th1/Th2 cytokines and humoral immune indexes(P>0.05).After treatment,Th17 cells and the ratio of Th17/Treg in observation group in peripheral blood were lower than those in control group,Treg cells was higher than that in control group; serum contents of IL-2,IFN-γ were higher than those in control group,IL-4,IL-5 were lower than those in control group;serum contents of humoral immunity indexes such as IgE、C3 were lower than that in control group(P<0.05).Conclusion:Jinkuishenqiwan adjuvant therapy can relieve the cellular immunity,humoral immune function in patients with optimization of adult bronchial asthma,has positive clinical significance.

Bronchial asthma in remission stage;Jinkuishenqiwan;Immune function

國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項目(31601078)

R256.12

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2017.07.022