李引弟，岳紅云，李 華

(1.延安大學(xué)附屬醫(yī)院產(chǎn)科，陜西 延安 716000；2. 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院普外科，陜西 西安 710004)

孕期葉酸攝入與MTHFR基因多態(tài)性對(duì)產(chǎn)后抑郁的影響

李引弟1，岳紅云1，李 華2

(1.延安大學(xué)附屬醫(yī)院產(chǎn)科，陜西 延安 716000；2. 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院普外科，陜西 西安 710004)

目的 探討葉酸攝入量與亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)基因多態(tài)性與產(chǎn)后抑郁的關(guān)系。方法 將2014年1月至2016年6月之間來(lái)延安大學(xué)附屬醫(yī)院產(chǎn)科進(jìn)行產(chǎn)檢的800例孕婦納入本項(xiàng)研究，采用開(kāi)放式問(wèn)卷調(diào)查的方式收集妊娠12周和28周婦女服用葉酸的信息，通過(guò)PCR-RFLP檢測(cè)MTHFR基因 C677T和A1298C多態(tài)性。于產(chǎn)后8周通過(guò)愛(ài)丁堡產(chǎn)后抑郁量表(EPDS)進(jìn)行產(chǎn)后抑郁診斷。統(tǒng)計(jì)分析葉酸攝入與MTHFR C677T和A1298C基因多態(tài)性與產(chǎn)后抑郁的關(guān)系。結(jié)果 800例受試者中產(chǎn)后抑郁癥患者218例，正常582例。產(chǎn)后抑郁婦女與正常婦女妊娠期間每天的葉酸攝入量和不同時(shí)間補(bǔ)充葉酸無(wú)明顯差異，但是產(chǎn)后抑郁婦女血清葉酸水平顯著低于正常妊娠婦女(χ2=15.76，P<0.001)。兩組受試者M(jìn)THFR C677T和A1298C多態(tài)性位點(diǎn)的基因型頻率間差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中雜合子CT(χ2=13.67，P<0.01)、AC(χ2=3.39，P=0.02)和純合子TT(χ2=8.65，P<0.01)、CC(χ2=15.18，P<0.01)是產(chǎn)后抑郁發(fā)生的高風(fēng)險(xiǎn)因子。此外，不同MTHFR C677T和A1298C基因型(CC、CT、TT和AA、AC、CC)產(chǎn)后抑郁的婦女在孕期攝入的葉酸量、不同時(shí)間補(bǔ)充葉酸和血清葉酸水平無(wú)明顯差異(χ2值為0.07～2.79，均P>0.05)。結(jié)論 低葉酸攝入量和不同時(shí)間補(bǔ)充葉酸不是產(chǎn)后抑郁發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)因素，但葉酸水平與MTHFR C677T和A1298C基因型是產(chǎn)后抑郁發(fā)病的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素。

產(chǎn)后抑郁；葉酸；亞甲基四氫葉酸還原酶；基因多態(tài)性

產(chǎn)后抑郁嚴(yán)重危害產(chǎn)婦的身心健康，隨著人們對(duì)圍產(chǎn)期婦女健康觀念的不斷改變，產(chǎn)婦常見(jiàn)的抑郁和焦慮得到了一定程度的重視與關(guān)注[1-2]。有研究表明低葉酸水平與抑郁癥有關(guān)，一些臨床試驗(yàn)也稱(chēng)葉酸單藥或者結(jié)合抗抑郁藥物治療抑郁癥有一定的療效[3-5]。但是一些研究認(rèn)為低葉酸水平與抑郁無(wú)關(guān)[6-8]。如果低葉酸水平是產(chǎn)后抑郁發(fā)生的重要因素，那么亞甲基四氫葉酸還原酶(Methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR) 的基因多態(tài)性也應(yīng)與抑郁癥的發(fā)病有關(guān)。MTHFR在葉酸代謝通路中將5,10-亞甲基四氫葉酸轉(zhuǎn)化為5-甲基四氫葉酸，5-甲基四氫葉酸可以進(jìn)一步進(jìn)入甲基傳遞通路，通過(guò)同型半胱氨酸的重新甲基化為DNA甲基化和蛋白質(zhì)甲基化提供甲基并且使血液中的同型半胱氨酸水平保持在一個(gè)較低的水平，這就可能影響機(jī)體情緒[8-9]。因此，本研究探討了葉酸攝入和亞甲基四氫葉酸還原酶MTHFR C677T和A1298C基因多態(tài)性與產(chǎn)后抑郁的關(guān)系。

1材料與方法

1.1資料來(lái)源

將2014年1月至2016年6月之間來(lái)延安大學(xué)附屬醫(yī)院產(chǎn)科進(jìn)行產(chǎn)檢的800例孕婦納入本項(xiàng)研究，且參與者均為初產(chǎn)婦，分娩后8周參與抑郁癥檢測(cè)，嬰兒存活時(shí)間>12個(gè)月。排除產(chǎn)前具有神經(jīng)、精神障礙的，且不配合調(diào)查的患者。該項(xiàng)研究通過(guò)醫(yī)院道德倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2葉酸檢測(cè)

葉酸攝入量檢測(cè)：采用開(kāi)放式問(wèn)卷調(diào)查的方式，收集妊娠8周和20周婦女服用葉酸的信息[9]。無(wú)論妊娠婦女是單獨(dú)服用葉酸還是與鐵一起服用，都納入本項(xiàng)研究。

葉酸水平檢測(cè)：各組受試婦女孕12周，取晨起空腹肘靜脈血5mL，分離血清，在Roche E170電化學(xué)發(fā)光分析儀上檢測(cè)葉酸水平，血清葉酸正常值參考范圍4.50～35.00nmol/L。

1.3MTHFR基因多態(tài)性檢測(cè)

分別采取每例受試者全血2mL，使用苯酚-氯仿法從全血中提取基因組DNA。通過(guò)PCR-RFLP檢測(cè)MTHFR基因 C677T和A1298C多態(tài)性。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction，PCR)反應(yīng)體系：1μL DNA模板，1μL上游引物和1μL下游引物，25μL Master Mix，21μL ddH2O；引物序列和擴(kuò)增條件[10]如表1所示，擴(kuò)增結(jié)束后，對(duì)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行酶切，37℃孵育2h，進(jìn)行1.5%瓊脂糖凝膠電泳，然后分析MTHFR基因多態(tài)性。

表1 2個(gè)SNPs位點(diǎn)引物序列和擴(kuò)增條件

1.4抑郁癥檢測(cè)

由于產(chǎn)后抑郁癥尚無(wú)統(tǒng)一的診斷標(biāo)準(zhǔn)，我們采用現(xiàn)階段公認(rèn)的愛(ài)丁堡產(chǎn)后抑郁量表(Edinburgh postnatal depression scale，EPDS)對(duì)產(chǎn)后8周的婦女進(jìn)行診斷。EPDS包括10項(xiàng)調(diào)查內(nèi)容，每項(xiàng)內(nèi)容分4級(jí)評(píng)分(0，1，2，3)。10個(gè)項(xiàng)目的總和為受試者的總得分，12～13分為患有不同程度的抑郁性疾病，≥13分為產(chǎn)后抑郁癥。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2結(jié)果

2.1妊娠婦女基本特征與產(chǎn)后抑郁癥的關(guān)系

在800例受試者中產(chǎn)后抑郁癥患者218例，正常582例。妊娠婦女的基本特征對(duì)產(chǎn)后EPDS得分沒(méi)有明顯影響，如年齡、文化程度、孕前身體質(zhì)量指數(shù)(body mass index，BMI)、胎兒性別和分娩方式。但是我們發(fā)現(xiàn)胎兒的性別對(duì)產(chǎn)后抑郁的影響較其他因素相對(duì)明顯(P=0.05)，見(jiàn)表2。

表2 妊娠婦女基本因素對(duì)抑郁癥得分的影響

2.2葉酸攝入量和葉酸水平與產(chǎn)后抑郁的關(guān)系

產(chǎn)后抑郁婦女與正常婦女妊娠期間每天的葉酸攝入量無(wú)明顯差異(P=0.30)。兩組受試者在妊娠12周時(shí)補(bǔ)充葉酸(P=0.68)、在妊娠28周補(bǔ)充葉酸(P=0.54)及在12和28周同時(shí)補(bǔ)充葉酸無(wú)明顯差異(P=0.63)。這就表明葉酸的攝入量與補(bǔ)充時(shí)間對(duì)產(chǎn)后抑郁的發(fā)病沒(méi)有影響。但是，產(chǎn)后抑郁婦女與正常婦女妊娠12周時(shí)體內(nèi)葉酸水平存在顯著性差異(P<0.001)，85.78%(187例)病例組婦女血清葉酸水平<4.50nmol/L，97.42%(567例)對(duì)照組婦女血清葉酸水平在4.50～35.00 nmol/L之間，見(jiàn)表3。

Table 3 Effect of different folic acid intake and folic acid levels on postpartum expression[±S,n(%)]

注:食品頻率調(diào)查問(wèn)卷(foodfrequencyquestionnaire，F(xiàn)FQ)。

2.3MTHFR基因多態(tài)性與產(chǎn)后抑郁的關(guān)系

病例組和對(duì)照組的MTHFR基因C677T和A1298C的基因型頻率如表4所示，兩組的C677T和A1298C多態(tài)性位點(diǎn)的基因型頻率間差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中雜合子CT(P<0.01)、AC(P=0.02)和純合子TT(P<0.01)、CC(P<0.01)是產(chǎn)后抑郁發(fā)生的高風(fēng)險(xiǎn)因子，C677T和A1298C基因型分布頻率均符合Hardy-Weinberg平衡定律，見(jiàn)表4。

表4 不同的MTHFR基因(C677T和A1298C)的基因型頻率對(duì)產(chǎn)后抑郁的影響[n(%)]

Table 4 Effect of genotype frequency of MTHFR gene(C677T and A1298C) on postpartum depression[n(%)]

2.4混雜因素分析

混雜因素(葉酸攝入量、不同的補(bǔ)充時(shí)間和血清葉酸水平)對(duì)不同MTHFR基因型產(chǎn)后抑郁婦女的影響分析顯示，不同MTHFRC677T和A1298C基因型(CC、CT、TT和AA、AC、CC)產(chǎn)后抑郁的婦女在孕期攝入的葉酸量、不同時(shí)間補(bǔ)充葉酸和血清葉酸水平無(wú)明顯差異(P>0.05)。這就表明不同MTHFRC677T和A1298C基因型導(dǎo)致婦女產(chǎn)后抑郁不受孕期葉酸攝入量、補(bǔ)充時(shí)間和血清葉酸水平的影響，是婦女產(chǎn)后抑郁的獨(dú)立影響因素，見(jiàn)表5。

SNP葉酸攝入量(FFQ)(μg/d)妊娠12周補(bǔ)充葉酸妊娠28周補(bǔ)充葉酸妊娠12和28周補(bǔ)充葉酸血清葉酸水平(nmol/L)MTHFRC677T CC(n=97)298.72±47.2289(91.75)17(17.53)9(9.28)3.60±0.76 CT(n=93)275.31±43.8386(92.47)15(16.13)8(9.68)3.31±0.27 TT(n=28)287.63±53.8125(89.29)4(14.29)2(7.14)2.93±0.92χ2/t0.320.740.380.540.07P0.770.100.680.292.32MTHFR1298C AA(n=86)301.62±57.3179(91.86)14(16.28)7(8.14)3.74±1.12 AC(n=75)288.92±50.2270(93.33)12(16.00)7(9.33)3.20±0.93 CC(n=57)273.50±46.9451(89.47)10(17.54)6(10.53)3.1±0.87χ2/t0.860.090.710.262.79P0.400.770.470.590.06

3討論

產(chǎn)后抑郁是一種嚴(yán)重危害產(chǎn)婦及其家庭的疾病，我國(guó)發(fā)生率為10%～40.18%[11]。雖然產(chǎn)后抑郁是一個(gè)復(fù)雜的多因素導(dǎo)致的疾病，但目前尚無(wú)統(tǒng)一的診斷標(biāo)準(zhǔn)與治療方法，一直以預(yù)防為主。為了預(yù)防產(chǎn)后抑郁癥的出現(xiàn)，本研究探討了葉酸攝入量與產(chǎn)后抑郁癥發(fā)病的關(guān)系，而且還首次深入研究了MTHFR基因多態(tài)性與產(chǎn)后抑郁的相關(guān)性。

3.1 低葉酸攝入量與產(chǎn)后抑郁發(fā)病的關(guān)系

流行病學(xué)與臨床研究表明，低葉酸水平與抑郁癥發(fā)病明顯相關(guān)，孕期補(bǔ)充葉酸可以防止產(chǎn)后抑郁癥的出現(xiàn)，因此，低葉酸水平是抑郁癥發(fā)病的高風(fēng)險(xiǎn)因素[3-5]。Lewis等[8]以6 908例妊娠婦女為研究對(duì)象發(fā)現(xiàn)低葉酸攝入量不會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)后抑郁的發(fā)生。到目前為止，葉酸與產(chǎn)后抑郁的關(guān)系一直存在爭(zhēng)議。本研究發(fā)現(xiàn)，孕期低葉酸攝入量與產(chǎn)后抑郁無(wú)關(guān)，而且不同時(shí)間補(bǔ)充葉酸對(duì)產(chǎn)后抑郁也沒(méi)有影響，但血清葉酸水平與產(chǎn)后抑郁顯著相關(guān)，這與前人研究結(jié)果相一致。通常不同的人群，飲食習(xí)慣、身處的環(huán)境、納入排除標(biāo)準(zhǔn)和抑郁癥診斷標(biāo)準(zhǔn)等因素造成結(jié)果不完全相同。

3.2 MTHFR基因多態(tài)性與產(chǎn)后抑郁發(fā)病的關(guān)系

由于MTHFR基因參與葉酸代謝途徑，間接調(diào)節(jié)血漿同型半胱氨酸含量，可能會(huì)影響產(chǎn)婦情緒[12-13]。Lewis等[8]發(fā)現(xiàn)MTHFR C677T與產(chǎn)后抑郁的發(fā)生有關(guān)；Devlin等[14]也有類(lèi)似的發(fā)現(xiàn)，MTHFR C677T與妊娠期抑郁的發(fā)生有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)MTHFR C677T和A1298C基因多態(tài)性與產(chǎn)后抑郁的發(fā)生有關(guān)，其中雜合子CT、AC和純合子TT、CC是產(chǎn)后抑郁發(fā)生的高風(fēng)險(xiǎn)因子。本研究又進(jìn)一步檢測(cè)了MTHFR C677T和A1298C基因型與產(chǎn)后抑郁的關(guān)系是否受混雜因素(葉酸攝入量、攝入時(shí)間和血清葉酸水平)的影響，研究結(jié)果表明不同MTHFR C677T和A1298C基因型導(dǎo)致婦女產(chǎn)后抑郁不受孕期葉酸攝入量、攝入時(shí)間和血清葉酸水平的影響，是產(chǎn)后抑郁發(fā)生的獨(dú)立影響因素。因此MTHFR C677T和A1298C基因多態(tài)性是產(chǎn)后抑郁的獨(dú)立影響因子。

綜上所述，低葉酸攝入量和不同時(shí)間補(bǔ)充葉酸不是產(chǎn)后抑郁發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)因素，但葉酸水平與MTHFR C677T和A1298C基因型是產(chǎn)后抑郁發(fā)病的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素。妊娠婦女的MTHFR基因篩查及葉酸水平檢測(cè)可以作為產(chǎn)后抑郁癥發(fā)生的預(yù)后因子，然后采取相應(yīng)措施預(yù)防或減少產(chǎn)后抑郁的發(fā)病。

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[專(zhuān)業(yè)責(zé)任編輯：韓 蓁]

Effect of folic acid intake during pregnancy and MTHFR polymorphism on postpartum depression

LI Yin-di1, YUE Hong-yun1, LI Hua2

(1.Department of Obstetrics, Affiliated Hospital of Yan’an University, Shaanxi Yan’an 716000, China; 2.Department of General Surgery, Second Affiliated Hospital of Medical School of Xi’an Jiaotong University, Shaanxi Xi’an 710004, China)

〗Objective To investigate the relationship between folic acid intake during pregnancy and methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) polymorphism and postpartum depression. Methods Altogether 800 pregnant women receiving check-up in obstetrics department in Affiliated Hospital of Yan’an University from January 2014 to June 2016 were included in this study. Information on use of folic acid supplements was collected from women at 12 and 28 weeks of gestation based on an open-ended questionnaire. MTHFR C677T and A1298C polymorphism was detected by PCR-RFLP. Postpartum depression was diagnosed in 8 weeks postpartum through Edinburgh postnatal depression scale (EPDS). Relationship between folic acid intake during pregnancy and MTHFR polymorphism and postpartum depression was analyzed by statistical analysis. Results There were 218 cases of postpartum depression and 582 normal cases in 800 subjects. No significant difference was found in daily folic acid intake and different folic acid supplementary time between women with postpartum depression and normal women. But serum folic acid level of women with postpartum depression was significantly lower than that of normal women (χ2=15.76,P<0.001). There were significant differences in genotype frequency at polymorphic site of MTHFR C677T and A1298C between two groups. Among them, heterozygous CT (χ2=13.67,P<0.01), AC (χ2=3.39,P=0.02) and homozygous TT (χ2=8.65,P<0.01), CC (χ2=15.18,P<0.01) were high risk factors of postpartum depression. In addition, women with postpartum depression with different MTHFR C677T and A1298C genotype (CC, CT, TT and AA, AC, CC) were not significantly different in daily folic acid intake, different folic acid supplementary time and serum folic acid level during pregnancy (χ2value ranged 0.07-2.79, allP>0.05). Conclusion Low intake of folic acid and different supplementary time of folic acid are not risk factors for postpartum depression, but serum folic acid level, MTHFR C677T and A1298C genotype are independent risk factors for postpartum depression.

postpartum depression; folic acid; methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR); polymorphism

2017-02-13

科技惠民計(jì)劃資助項(xiàng)目(編號(hào)：2015HM-01-02)

李引弟(1984-)，女，主治醫(yī)師，主要從事孕產(chǎn)婦疾病診治及基因診斷工作。

李 華，副主任醫(yī)師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.06.005

R749.4

A

1673-5293(2017)06-0632-04