王蕊 周聯(lián)東 劉經(jīng)緯 孫佩 李進(jìn)生 王文濤

摘要 [目的]研究黃淮海區(qū)玉米青枯病的田間自然篩選及接種鑒定。[方法]采用試驗(yàn)室接種鑒定及大田自然鑒定的方法，研究25份玉米自交系和61份群體材料對(duì)玉米青枯病的抗病表現(xiàn)。[結(jié)果]篩選出9份自交系及26份群體材料的抗病等級(jí)都在R（抗?。┮陨?。多數(shù)種質(zhì)資源的抗病性集中在3級(jí)和5級(jí)，為R（抗?。┖蚆R（中抗）材料；未發(fā)現(xiàn)有9級(jí)（高感）材料。[結(jié)論]該研究為玉米青枯病在黃淮海區(qū)的防治提供技術(shù)參考。

關(guān)鍵詞 玉米；青枯病；試驗(yàn)室接種鑒定；大田自然鑒定

中圖分類號(hào) S503 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2017）07-0033-02

Field Natural Selection and Inoculation Identification of Corn Bacterial Wilt in Huanghuaihai Region

WANG Rui，ZHOU Lian-dong，LIU Jing-wei et al

（Xinxiang Academy of Agricultural Sciences of Henan Province，Xinxiang，Henan 453000）

Abstract [Objective] To research the field natural selection and inoculation identification of corn bacterial wilt in Huanghuaihai Region.[Method] Laboratory inoculation identification and field natural identification methods were adopted to research the performance of 25 corn inbred lines and 61 populations to corn bacterial wilt.[Result] A total of 9 corn inbred lines and 26 populations were screened with the resistance level above R.Disease resistance level of most germplasm resources were concentrated at levels 3 and 5，which were R （resistance） and MR （middle resistance）.There were no germplasm resources above level 9.[Conclusion] This research provides technical references for the control of corn bacterial wilt in Huanghuaihai Region.

Key words Corn；Bacterial wilt；Laboratory inoculation identification；Field natural identification

青枯病是在我國黃淮海玉米產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生的一種主要病害，遇到大流行年份，發(fā)病來勢猛，災(zāi)害嚴(yán)重。從開始發(fā)病到全株枯萎，一般只需5～7 d，感病快的僅1～3 d。引起玉米青枯病的病原，國內(nèi)大致有3種觀點(diǎn)：一是由腐霉菌侵染引起；二是由鐮刀菌侵染引起；三是由腐霉菌和鐮刀菌復(fù)合侵染引起。鑒于此，該研究于2013—2014年收集部分種質(zhì)資源，對(duì)玉米青枯病抗性進(jìn)行鑒定與評(píng)價(jià)分析，旨在篩選出優(yōu)異的抗病核心種質(zhì)，為生產(chǎn)上采取有效的防病措施提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試材料共86份，包括25份玉米自交系和61份群體材料，均由新鄉(xiāng)市農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所提供。致病菌菌株為禾谷鐮刀菌，于2014年5月由新鄉(xiāng)市農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所繁殖。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 大田自然鑒定方法。

鑒定材料于田間隨機(jī)排列，鑒定小區(qū)行長5.0 m，行距0.6 m，每份試驗(yàn)材料種6行區(qū)，每穴留雙株，穴距25 cm。前茬作物為小麥，玉米于6月中下旬播種，7月上旬定苗，7月中旬施玉米高氮復(fù)合肥376 kg/hm2。

定苗時(shí)每處隨機(jī)取樣30株，調(diào)查記錄玉米生長情況，包括株高、穗位高、植株顏色、葉片顏色、根系是否感??；玉米蠟熟后期逐株調(diào)查鑒定材料的發(fā)病情況，調(diào)查的重點(diǎn)部位為莖基部節(jié)位，莖基部節(jié)位明顯變褐或用手指捏近地表莖節(jié)感到變軟的植株，即為發(fā)病株[1]。記載調(diào)查總株數(shù)、發(fā)病株數(shù)，計(jì)算發(fā)病株率。

根據(jù)王曉鳴老師等編著的《玉米病蟲害手冊(cè)》[2]鑒定標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)玉米青枯病病害進(jìn)行田間調(diào)查。依據(jù)植株表現(xiàn)的癥狀劃分單株的病級(jí)數(shù)，再根據(jù)所劃分的單株病級(jí)數(shù)計(jì)算發(fā)病株率，其公式為發(fā)病株率（%）=發(fā)病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)×100。最后評(píng)價(jià)其病情指數(shù)；抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)采用國家玉米品種抗病鑒定標(biāo)準(zhǔn)[3-4]；病級(jí)分級(jí)采用5級(jí)制（表1）。

1.2.2 試驗(yàn)室接種鑒定方法[5]。青枯病菌（禾谷鐮刀菌）在PDA培養(yǎng)基上擴(kuò)繁。

PDA培養(yǎng)基配方為馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL，120 ℃滅菌30 min。

青枯病圃于6月10日播種，每個(gè)品種種植2行，行長5.0 m，行距0.6 m。參試品種及對(duì)照品種隨機(jī)排列，試驗(yàn)周圍種成保護(hù)行。

青枯病菌擴(kuò)繁后，散粉期（8月6日）用灌根法接種，每株在植株的根側(cè)接種孢子液100 mL（將各小種混合接種）。適當(dāng)澆水，以保證足夠的土壤含水量和病菌量，滿足禾谷鐮刀菌發(fā)病條件和發(fā)病環(huán)境。

玉米進(jìn)入乳熟期后開始進(jìn)行調(diào)查，抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)同“1.2.1”。

2 結(jié)果與分析

由表2的田間調(diào)查結(jié)果可知，在相同的栽培條件下，不同的玉米品種對(duì)青枯病的抗病能力有明顯差異[6]。

在供試的材料中隨機(jī)選出8份自交系和26份群體材料，分析其對(duì)青枯病抗性的接種鑒定結(jié)果（表3）。

綜合大田自然鑒定、接種鑒定的方法在所供試的25份玉米自交系和61份群體材料中，篩選出9份表現(xiàn)抗?。≧）以上的自交系及26份表現(xiàn)3級(jí)抗病（R）以上的群體材料。3級(jí)抗病以上的種質(zhì)數(shù)量占43.75%。鑒定結(jié)果表明，不同玉米種質(zhì)資源對(duì)青枯病的抗性存在明顯差異，只有極少數(shù)的群體材料表現(xiàn)高度抗病，大多數(shù)玉米種質(zhì)資源對(duì)青枯病病菌表現(xiàn)為抗病或中度抗病[4]。

3 結(jié)論與討論

（1）2013—2014年，新鄉(xiāng)市農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所利用大田自然鑒定和禾谷鐮刀菌接種鑒定方法，對(duì)86份玉米種質(zhì)資源在黃淮海區(qū)進(jìn)行青枯病抗性鑒定與評(píng)價(jià)，抗病種質(zhì)可作為玉米抗青枯病育種的核心抗源，具有重要的利用價(jià)值。多數(shù)種質(zhì)資源的抗病性集中在3級(jí)和5級(jí)，為抗病和中度抗病材料，未發(fā)現(xiàn)有9級(jí)（高感）的材料。

（2）玉米青枯病在我國玉米主產(chǎn)區(qū)危害性較大，已成為玉米生產(chǎn)中主要的產(chǎn)量限制因素之一。玉米主產(chǎn)區(qū)每年的發(fā)病率在10%～20%，有些年份甚至達(dá)60%，玉米產(chǎn)量損失達(dá)25%。除產(chǎn)量下降外，玉米莖腐病的發(fā)生還給許多其他導(dǎo)致寄主產(chǎn)量下降的細(xì)菌提供了滋生的環(huán)境，在降低玉米品質(zhì)的同時(shí)對(duì)玉米生產(chǎn)也構(gòu)成了極大的威脅。因此，對(duì)于該病的防治應(yīng)予以高度重視[7]。

（3）應(yīng)用抗病品種是控制玉米青枯病發(fā)生經(jīng)濟(jì)、有效的途徑之一，而鑒定、篩選抗病種質(zhì)資源是成功選育抗病品種的關(guān)鍵措施。因此，應(yīng)廣泛收集國內(nèi)外遺傳上異質(zhì)、抗病、高配合力的種質(zhì)資源，發(fā)掘具有抗玉米青枯病基因的種質(zhì)資源加以綜合利用，豐富玉米資源的基因庫。此外，應(yīng)加強(qiáng)栽培管理，合理灌溉分期培土，及時(shí)中耕松土，避免各種機(jī)械、人工損傷。收獲后，及時(shí)徹底的清除田間病殘植株，減少病源。注意雨季，遇大雨時(shí)要及時(shí)排水，防止雨水浸泡根莖時(shí)間過長造成病菌的快速發(fā)生。

參考文獻(xiàn)

[1] 商鴻生，王鳳葵.玉米高梁谷子病蟲害診斷與防治原色圖譜[M].北京：金盾出版社，2005.

[2] 王曉鳴，石潔，晉齊鳴，等.玉米病蟲害田間手冊(cè)：病蟲害鑒別與抗性鑒定[M].北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社，2010.

[3] 崔俊明，胡素蘭，謝榮芝，等.玉米青枯病發(fā)病影響因素分析[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，1993（5）：16-19.

[4] 李春霞，蘇俊，龔士琛，等.玉米莖腐病接種方法的研究[J].玉米科學(xué)，2001，9（2）：72-74.

[5] 王波，馬曉靜.玉米新組合莖腐病抗性鑒定的分析[J].安徽科技學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，25（2）：18-23.

[6] 王曉鳴.玉米抗病蟲性鑒定與調(diào)查技術(shù)[J].作物雜志，2005（6）：53-55.

[7] 劉愛國，張成和，石潔.玉米雜交種對(duì)多種病害抗性鑒定結(jié)果初報(bào)[J].華北農(nóng)學(xué)報(bào)，2000，15（S1）：85-89.