唐永梅??余烈中

[摘要] 目的 分析三水區(qū)3244例新生兒α-地中海貧血的臍血篩查結果，了解本地區(qū)新生兒α-地中海貧血的罹患情況和類型分別。 方法 采用簡單隨機抽樣方法抽取三水區(qū)2015年9月～2016年10月這一時間段內出生嬰兒中的3244例，待胎兒娩出，在切斷臍帶時對胎盤端臍帶血液樣本進行收集，采用電泳方式對HB Barts進行檢測。 結果 在三水區(qū)3244例新生兒中，共檢測出α-地中海貧血患者284例，占比8.7%。在分型方面，靜止型為111例，占比39.2%、標準型為142例，占比50.2%、中間型為23例，占比8.1%、重癥型為7例，占比2.5%，基因檢測結果共檢測出α-地中海貧血患者294例，占比9.06%。在分型方面，靜止型為111例，占比39.2%、標準型為142例，占比50.2%、中間型為23例，占比8.1%、重癥型為7例，占比2.5%，在各型患兒的性別、發(fā)病例數(shù)等信息方面，對比差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。 結論 在臨床篩查新生兒α-地中海貧血中，HB Barts作為一項關鍵指標能夠較好提高篩查成功率，測定其含量可作為臨床初步分型的參考，但作為優(yōu)生的最終依據還需通過基因的診斷，且血紅蛋白電泳檢測存在著一定的不足之處。對于α-地中海貧血的診療要進行血常規(guī)、血紅蛋白電泳篩查結合基因檢測聯(lián)合運用。

[關鍵詞] 三水區(qū)；α-地中海貧血；臍血

[中圖分類號] R722.8 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2017）12-147-03

Analysis on Cord Blood Screening Result of α-thalassemia of 3244 Beonates in Sanshui District

TANG Yongmei1 YU Liezhong2

1.Department of Laboratory，Sanshui District People's Hospital，F(xiàn)oshan 528100，China；2.Department of Laboratory，Sanshui District Maternal and Child Health Hospital，F(xiàn)oshan 528100，China

[Abstract] Objective To analyze cord blood screening results of α-thalassemia of 3244 neonates in Sanshui district to know the incidence and type of neonatal α-thalassemia in this district. Methods 3244 neonates who were born in Sanshui district from September 2015 to October 2016 were selected according to the simple random sampling method.After delivery， cord blood samples of placenta were collected when umbilical cord was cut.HB Barts was detected by electrophoresis method. Results Of 3244 neonates in Sanshui district，283 patients were detected with α-thalassemia accounting for 8.7%.In typing， there were 111 cases of the static type accounting for 39.2%，142 cases of the standard type accounting for 50.2%，23 cases of the intermediate type accounting for 8.1% and 7 cases of the severe type accounting for 2.5%. Comparative differences in gender，number of cases and other information of neonates with different types had no statistical significance （P>0.05）. Conclusion In the clinical screening of neonatalα-thalassemia， HB Barts as a key index can improve the success rate of screening.And determination of its content can be used as the reference of primary clinical type.But as the final basis of eugenics，gene diagnosis is also needed.And there are some disadvantages of electrophoresis analysis of hemoglobin.Diagnosis and treatment of α-thalassemia needs combination of blood routine， electrophoresis analysis of hemoglobin and gene diagnosis.

[Key words] Sanshui district；Alpha thalassemia；Cord blood

地中海貧血屬于一種遺傳性溶血性貧血疾病，常由珠蛋白基因缺失、肽鏈合成障礙引起，臨床主要表現(xiàn)為黃疸、肝脾腫大、貧血等癥狀，若為輕型，則一般不需進行治療，若病情較重，則需盡早進行治療，所以做好早期的篩查工作至關重要[1]。α-地中海貧血主要由α珠蛋白基因缺損引起，屬于地中海貧血類型中常見的一種，不僅給患者帶來較大困擾，而且也給家庭、社會帶來較大的經濟負擔[2]。隨著臨床對α-地中海貧血治療的重視度不斷加強，相應的篩查工作也有了較大進展，以期盡早預防，維護新生兒的健康[3]。本研究以3244例新生兒為研究對象，對臍血的篩查結果進行分析，取得了較好效果，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用簡單隨機抽樣方法抽取三水區(qū)2015年9月～2016年10月這一時間段內出生嬰兒中的3244例，待所有新生兒家屬簽署了相應的同意書后，收集、篩查新生兒的臍血樣本。男1630例，女1614例。

1.2 儀器及試劑

意大利Interlab G26全自動瓊脂糖凝膠電泳儀及其配套試劑。美國icyclei-iQ全自動基因擴增儀、HEMA核酸蛋白凝膠圖像分析管理系統(tǒng)及配套試劑、Combi-SV120韓國FINEPCR 分子雜交箱、GSG-2000核酸/蛋白凝膠圖像分析管理系統(tǒng)。

1.3 樣本采集

待胎兒娩出，將臍帶切斷，對胎盤端臍帶血液樣本進行收集，為3mL，之后采用EDTA—K2進行抗凝處理。標本采集后及時送檢，如當天不能檢測，置2～8℃冰箱保存，次日檢測。

1.4 方法

1.4.1 電泳檢測方法 將臍血用生理鹽水反復洗滌3次，直至上層液無色透明，最后一次吸去上層生理鹽水，盡量吸去紅細胞表面殘留的生理鹽水，余下壓積紅細胞。取150μL裂解液于一試管中，加40μL壓積紅細胞，充分混勻，裂解20分鐘。按儀器操作進行點樣、電泳、變性、染色、脫色、干燥、膠片掃描，最后進行結果分析。

1.4.2 基因檢測方法 采用Gap-PCR方法，嚴格按操作說明書檢測3.7，4.2，SEA 3 個缺失點，

1.5 觀察指標

若監(jiān)檢測結果中存在HB Barts，則將新生兒視作α-地中海貧血患兒。對α-地中海貧血進行分型處理，分型標準[5]見表1。

1.6 統(tǒng)計學處理

數(shù)據處理采用統(tǒng)計學軟件SPSS19.0，計數(shù)資料采取百分比（%）表示，采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 電泳檢測結果

電泳檢測結果共檢測出α-地中海貧血患者284例，占比8.7%。在分型方面，靜止型為111例，占比39.2%、標準型為142例，占比50.2%、中間型為23例，占比8.1%、重癥型為7例，占比2.5%，在各型患兒的性別、發(fā)病例數(shù)等信息方面，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）

2.2 基因檢測結果

基因檢測結果共檢測出α-地中海貧血患者294例，占比9.06%。在分型方面，靜止型為111例，占比39.2%、標準型為142例，占比50.2%、中間型為23例，占比8.1%、重癥型為7例，占比2.5%，在各型患兒的性別、發(fā)病例數(shù)等信息方面，比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

3 討論

本研究主要對三水區(qū)3244例新生兒α-地中海貧血的臍血篩查結果進行分析，從相關結果可知，在3244例新生兒中，電泳結果檢出α-地中海貧血患者283例；在分型方面，靜止型為111例，占比39.2%、標準型為142例，占比50.2%、中間型為23例，占比8.1%、重癥型為7例，占比2.5%?；驒z測結果共檢測出α-地中海貧血患者294例，占比9.06%。在分型方面，靜止型為111例，占比39.2%、標準型為142例，占比50.2%、中間型為23例，占比8.1%、重癥型為7例，占比2.5%，由此可見，通過臍血篩查能夠較好篩查出α-地中海貧血患者，為臨床早期治療提供依據。

α-地中海貧血是一種染色體遺傳性疾病，以HB Barts含量不同為依據，可分型為靜止型、標準型、中間型、重型[6]。靜止型患者無明顯的臨床癥狀，只存在一些輕度的紅細胞形態(tài)變化；標準型患者存在血色素值異常、輕度貧血情況；中間型患者存在溶血性黃疸，3個月后患者會出現(xiàn)肝脾腫大、面色蒼黃等現(xiàn)象[7]。重型患者大都胎死腹中，或者出生后短時間內死亡[8]。由于新生兒的黃疸可由多種因素引發(fā)，所以中間型患者在出生時的溶血性黃疸常被忽視，患兒的血色素為80-100g/L，若未及時發(fā)現(xiàn)并治療，將會嚴重危害患兒的健康。HB Barts屬于一種特殊的血紅蛋白，存在于新生兒的臍血中，屬于α-地中海貧血的關鍵檢測指標。一般患兒出生4 ～ 11個月后HB Barts消失，靜止型、輕型患者在半歲后則趨近于健康人[9]。在對α-地中海貧血進行檢測時，受檢測技術等因素的影響，難以檢出全部的α-地中海貧血患者，存在較多的缺陷[10]。從相關結果可知[11]，采用臍血的HB Barts進行檢測則能較好篩查出大多數(shù)類型的α-地中海貧血患者，檢出率較高，能夠為α-地中海貧血盡早治療提供依據，臨床應用價值較高。

電泳的靈敏度約為85% ～ 95%[12]。電泳篩查有其諸多不足之處：Hb電泳對輕型α-地貧無診斷意義。樣品處理對檢驗人員的依賴性大，對于血紅蛋白條帶的判讀主觀性強，重復性差，精確性差，質量難以控制，存在一定的假陽性和假陰性率，且涉及一些有害物質的處理。臍血血紅蛋白電泳檢測技術是國際公認的檢測α-地中海貧血的金指標，可檢出目前基因診斷不能檢出的罕見型α-地中海貧血。很多認為地中海貧血的基因診斷可以代替篩查，其實這是一種錯誤的認識[13]。地貧基因分析前需先進行常規(guī)的篩查，如血常規(guī)、血紅蛋白電泳，尤其是血紅蛋白電泳檢查，如果漏診了容易遺傳給下一代。HB Barts 含量的測定為臨床初步分型提供參考，但作為優(yōu)生的最終依據還需通過基因的診斷，因為可能合并有β地中海貧血，也受實驗人員和試劑的影響較大[14]。當血常規(guī)檢查Hb正?；蜉p度下降，MCV下降和（或）MCH下降，但電泳沒有陽性發(fā)現(xiàn)，這時候可能存在HbA2檢測誤差，這種情況要行地貧基因檢測；如果夫婦雙方有一方確定為α（或β）地中海貧血，另一方則需要進行地貧基因檢測。但地貧基因分析也有一定局限性[15]，比如存在2%的誤診及漏診率，不能檢出非缺失α地中海貧血，只能檢測17種國內常見的β地中海貧血基因，標本有母體細胞污染時會影響結果的準確性。

綜上所述，在臨床篩查新生兒α-地中海貧血中，HB Barts作為一項關鍵指標能夠較好提高篩查成功率，測定其含量可作為臨床初步分型的參考，但作為優(yōu)生的最終依據還需通過基因的診斷，且血紅蛋白電泳檢測存在著一定的不足之處。對于α-地中海貧血的診療要進行血常規(guī)、血紅蛋白電泳篩查結合基因檢測聯(lián)合運用。

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（收稿日期：2017-05-08）