周露　馬蓉

摘 要：目的：對藕粉中菌落總數(shù)檢驗結(jié)果進行不確定度評定。方法：根據(jù)GB 4789.2-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數(shù)測定》和JJF 1059.1-2012《測量不確定度評定與表示》，對藕粉樣品中菌落總數(shù)進行了測定和對測定過程中引入的不確定度分量進行評定。結(jié)果：合成不確定度為0.0475，擴展不確定度為0.095。結(jié)論：研究建立的方法適合于類似檢測條件下菌落總數(shù)不確定度的評定。

關(guān)鍵詞：藕粉；菌落總數(shù)；不確定度評定

中圖分類號 TS207.4 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2017）15-0132-3

Abstract：[Objective]Evaluate the uncertainty of the aerobic plate count in lotus root starch.[Method]According to the method of GB 4789.2-2016 national food safety standard microbiological examination in food，aerobic plate count and the method of JJF 1059.1-2012 evaluation and expression of uncertainty in measurements to measure the aerobic plate count in lotus root starch and determine the uncertainty components introduced in the experiment. [Result]The combined uncertainty was 0.0475，the expanded uncertainty was 0.095.[Conclusion]This method established in this study can be used in the uncertainty evaluation of aerobic plate count under similar circumstances.

Key words：Lotus root starch；Aerobic plate count；Uncertainty evaluation

1 引言

GB 4789.2-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數(shù)測定》中規(guī)定菌落總數(shù)是指食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下（如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間）培養(yǎng)后，所得每g（mL）檢樣中形成的微生物菌落總數(shù)[1]。菌落總數(shù)測定是用來判定食品被細菌污染的程度及衛(wèi)生質(zhì)量，它反映食品在生產(chǎn)過程中是否符合衛(wèi)生要求，以便對被檢樣品做出適當?shù)男l(wèi)生學評價。菌落總數(shù)的多少在一定程度上標志著食品衛(wèi)生質(zhì)量的優(yōu)劣。

測量不確定度是與測量結(jié)果關(guān)聯(lián)的一個參數(shù)，用于表征合理賦予被測量的值的分散性。國認實〔2016〕33號文最新發(fā)布的《檢驗檢測機構(gòu)資質(zhì)認定評審準則》中4.5.21當不確定度與檢測結(jié)果的有效性或應用有關(guān)，或客戶的指令中有要求，或當對測量結(jié)果依據(jù)規(guī)范的限制進行符合性判定時，需要提供有關(guān)不確定度的信息[2]。本文依據(jù)GB 4789.2-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數(shù)測定》和JJF 1059.1-2012《測量不確定度評定與表示》對藕粉樣品中菌落總數(shù)進行了測定和對測定過程中引入的不確定度分量進行評定。

1 實驗部分

1.1 檢驗依據(jù) GB 4789-2-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數(shù)測定》。

1.2 儀器和試劑 儀器：電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海精宏實驗設(shè)備有限公司）；高壓滅菌鍋（日本RAYAMAHI）；電子天平（上海舜宇恒平科學儀器有限公司）；均質(zhì)器（天津市恒奧科技發(fā)展有限公司）；超純水機（美國Millipore）；數(shù)顯恒溫水浴鍋（金壇市榮華儀器制造有限公司）；1mL移液管；10mL移液管。試劑：平板計數(shù)瓊脂（廣州環(huán)凱微生物科技有限公司）；氯化鈉（國藥集團化學試劑有限公司）。

1.3 樣品 藕粉樣品：在江蘇省寶應縣內(nèi)藕粉生產(chǎn)企業(yè)的藕粉樣品。

1.4 檢測過程 準確稱取25g藕粉樣品于225mL生理鹽水中勻質(zhì)制成成1[∶]10樣品勻液，用1mL無菌吸管吸取1[∶]10樣品勻液1mL，沿管壁緩慢注入盛有9mL生理鹽水的無菌試管中，混勻，制成1[∶]100的樣品勻液。根據(jù)對樣品污染情況，選擇2個適宜稀釋度的樣品勻液，在進行10倍遞增稀釋時，吸取1mL樣品勻液于2個無菌平皿內(nèi)。同時做空白試驗。及時將冷卻至46℃的平板計數(shù)瓊脂傾注平皿，搖勻，翻轉(zhuǎn)，36℃培養(yǎng)48h。選取30～300CFU之間的平板菌落數(shù)計數(shù)。

1.5 檢測結(jié)果 詳見表1。

2 不確定度

2.1 不確定度來源 菌落總數(shù)測定實驗過程中結(jié)果的不確定度主要來源：（1）由隨機誤差導入的不確定度：包括樣品重復性測定，涉及取樣、樣品稀釋、菌落分布和人員操作引入的不確定度；（2）由系統(tǒng)誤差導入的不確定度：包括培養(yǎng)基、培養(yǎng)時間、培養(yǎng)溫度等引入的不確定度和計量器具（吸管、天平、量筒）等引入的不確定度[3]。本方法研究稀釋過程中引入的不確定度、加樣體積引入的不確定度和測量重復性引起的不確定度。

2.2 數(shù)學模型 計算公式如下：

3 結(jié)果

通過以上分析得到藕粉的結(jié)果取值區(qū)間為（3.7063±0.095），取反對數(shù)取值區(qū)間為（4086，6328）。

4 討論

本方法研究的是稀釋過程中引入的不確定度、加樣體積引入的不確定度和測量重復性引起的不確定度。因為微生物檢測過程是一個動態(tài)的過程，樣品中菌落總數(shù)檢測結(jié)果存在較大的分散性，如果直接用標準偏差公式進行計算，所得到的不確定度結(jié)果并不是適合每個項目的不確定度評定，因此采用取對數(shù)的方法進行不確定度評定更適合菌落總數(shù)檢測不確定度的評定[5]。

在計算不確定度時，應該根據(jù)需要改進數(shù)學模型的建立方式，數(shù)學計算模型應能反映出不同變量之間的邏輯關(guān)系，如果數(shù)學模型過于簡單，就不能很好的反映出各種影響不確定度的因素之間的關(guān)系，如果沒有充分認識到稀釋倍數(shù)和加樣體積的重要作用，就會影響到不確定度計算的可靠性[6]。

此方法能夠有效的分析不確定度，提升實際檢測結(jié)果的可靠性，同時適用類似檢測條件下的不確定度評定，為食品中菌落總數(shù)的檢測保駕護航。

參考文獻

[1]GB 4789.2-2016食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數(shù)測定[S].

[2]檢驗檢測機構(gòu)資質(zhì)認定評審準則[S].中國國家認證認可監(jiān)督管理委員會，2016.

[3]袁平，吳春敏，林仲，等.牛食品中菌落總數(shù)測定不確定度評定數(shù)學模型的建立[J].預防醫(yī)學論壇，2016，22（7）：540-545.

[4]JJG 196-2006常用玻璃量器檢定規(guī)程[S].

[5]張秀豐，翟碩莉，王雪蓮，等.速凍草莓菌落總數(shù)檢驗中不確定度的評定[J].食品安全質(zhì)量檢測學報，2014，5（6）：1831-1833.

[6]彭永艷.食品檢驗中菌落總數(shù)的不確定度評定[J].現(xiàn)代食品，2017，28（8）：81-83.

（責編：張宏民）