苗雨丹 張 浩 許妍妍
(白城醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校,吉林 白城 137000)
黃芪多糖對致衰老模型小鼠氧自由基水平的影響
苗雨丹 張 浩1許妍妍1
(白城醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校,吉林 白城 137000)
目的探討黃芪多糖對D-半乳糖(D-gal)致衰老模型小鼠抗氧自由基的作用。方法用D-gal誘導(dǎo)致衰老模型小鼠,以黃芪多糖灌胃,6 w后分別檢測谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽還原酶(GR)、過氧化物酶(POD)、脂褐素(LPF)含量變化。結(jié)果黃芪多糖能夠明顯提高D-gal致衰老小鼠心、腎組織GSH-Px、GR、POD活性,而降低LPF含量。結(jié)論黃芪多糖能提高衰老小鼠機(jī)體抗氧化能力和清除氧自由基,起到延緩衰老作用。
黃芪多糖;抗氧化能力;谷胱甘肽還原酶;過氧化物酶;脂褐素
黃芪多糖具有抗衰老、抗氧化、抗輻射、提高機(jī)體免疫功能等作用〔1〕。本實驗旨在探討D-半乳糖(D-gal)致衰老模型小鼠谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽還原酶(GR)、過氧化物酶(POD)、脂褐素(LPF)受黃芪多糖的影響。
1.1實驗動物 選擇昆明種雄性2月齡小鼠30只(20±2)g,吉林大學(xué)實驗動物中心提供。將30只小鼠隨機(jī)分為正常對照組、D-gal誘導(dǎo)衰老組(模型組)、黃芪多糖組,每組10只。正常對照組頸后皮下注射生理鹽水(120 mg·kg-1·d-1),模型組、黃芪多糖組均頸后皮下注射D-gal(120 mg·kg-1·d-1),連續(xù)6 w,制作衰老模型〔2〕。造模同時正常對照組及模型組按40 mg·kg-1·d-1劑量灌服生理鹽水,黃芪多糖組按40 mg·kg-1·d-1劑量灌胃灌服黃芪多糖,連續(xù)6 w。
1.2試劑與儀器 黃芪多糖由吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)系提供;GSH-Px、GR、POD、LPF試劑盒購于南京建成生物工程公司;D-gal、愈創(chuàng)木酚(上海試劑二廠);722型分光光度計(上海分析儀器廠);高速冷凍離心機(jī)(德國)。
1.3檢測方法 各組實驗動物給藥6 w后處死,分別取心、腎組織,制成10%的組織勻漿,3 000 r/min離心15 min,分別取上清液測定GSH-Px、GR、LPF活力及含量,操作方法同試劑盒說明書;POD測試采用愈創(chuàng)木酚比色法(Ⅰ法)〔3〕。
1.4統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件,組間比較進(jìn)行t檢驗。
2.1各組GSH-Px、GR活性及POD含量比較 與正常對照組比較,模型組、黃芪多糖組小鼠心、腎GSH-Px、GR、POD活性明顯降低(P<0.05,P<0.01);與模型組比較,黃芪多糖組明顯升高(P<0.05)。見表1。
表1 各組小鼠心、腎GSH-Px、GR、POD活性變化
與對照組比較:1)P<0.05,2)P<0.01;與模型組比較:3)P<0.05
2.2各組LPF含量比較 與正常對照組〔(0.188±0.018)μg/g、(0.271±0.099)μg/g〕比較,模型組〔(0.224±0.017)μg/g、(0.420±0.068)μg/g〕、黃芪多糖組小鼠心、腎LPF含量〔(0.206±0.018)μg/g、(0.361±0.053)μg/g〕明顯升高(P<0.05,P<0.01);與模型組比較,黃芪多糖組明顯降低(P<0.05)。
機(jī)體衰老是一種自然規(guī)律,實質(zhì)是器官系統(tǒng)功能逐漸衰退的過程。老年人隨著年齡的增加,神經(jīng)元數(shù)量減少,腦重量減輕,體內(nèi)抗氧化酶活力下降,氧自由基不能及時清除致使機(jī)體免疫功能下降,LPF堆積,出現(xiàn)老年斑,加速衰老和老年性疾病發(fā)生〔4〕。黃芪多糖是中藥黃芪的重要活性成分之一,主要組成為葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖等〔5,6〕。研究表明,黃芪多糖通過促進(jìn)DNA和蛋白質(zhì)合成,增強調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能使細(xì)胞生長旺盛、延長壽命,以防止和減輕疾病過程〔7〕。氧自由基是有強氧化反應(yīng)的化學(xué)物質(zhì),對機(jī)體損害是一種氧化過程,主要對機(jī)體中抗氧化酶有破壞作用,進(jìn)而損傷細(xì)胞功能,加速機(jī)體衰老。氧自由基包括超氧陰離子(O2-·)、羥自由基(OH·)和過氧化氫(H2O2),機(jī)體自身的酶有抗氧化能力,能迅速清除氧自由基,黃芪多糖具有提高抗氧化酶活性的作用,本實驗結(jié)果證明,黃芪多糖使抗氧化酶發(fā)揮對氧自由基的清除能力,把機(jī)體內(nèi)的氧自由基變?yōu)榛钚暂^低的物質(zhì),以減輕對機(jī)體的攻擊力。黃芪多糖能顯著提高衰老小鼠抗氧化能力,增強GSH-Px、GR、POD活性,降低LPF含量,具有延緩組織細(xì)胞衰老作用,其作用機(jī)制與提高機(jī)體免疫功能,清除氧自由基有關(guān)。
1劉曉睿,李 健.黃芪有效成分的降壓、降脂作用〔J〕.中國老年學(xué)雜志,2015;35(17):4800-1.
2丁秀云,劉漠焓,王 琳,等.D-半乳糖對幼鼠心臟成纖維細(xì)胞擬衰老作用的實驗研究〔J〕.中國病理生理雜志,2004;20(8):1505-26.
3陳 勤.抗衰老研究實驗方法〔M〕.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,1996:462-3.
4高 旭,李麗芬,劉斌鈺.黃芪多糖對小鼠免疫功能影響的實驗研究〔J〕.山西大同大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2010;26(4):42-4.
5鐘 靈,王振富,文德鑒.黃芪多糖抗衰老作用的實驗研究〔J〕.中國應(yīng)用生理學(xué)雜志,2013;29(4):350-2.
6李珍一,楊關(guān)林,閆承慧,等.黃芪多糖應(yīng)用的相關(guān)研究進(jìn)展〔J〕.遼寧中醫(yī)雜志,2016;43(7):1553-5.
7杜晉平,肖立新,羅靜波.黃芪多糖作用研究進(jìn)展〔J〕.畜牧與飼料科學(xué),2013;34(4):39-41.
〔2017-01-05修回〕
(編輯 袁左鳴/滕欣航)
吉林省衛(wèi)生廳資助項目(2013Z032)
許妍妍(1982-),女,講師,主要從事血液腫瘤研究。
苗雨丹(1978-),女,副教授,主要從事老年護(hù)理研究。
R28
A
1005-9202(2017)17-4193-02;doi:10.3969/j.issn.1005-9202.2017.17.010
1 吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院人體解剖學(xué)系